高血压大鼠红细胞膜钙泵功能障碍机理的初步分析

本工作比较自发性高血压大鼠(SHR)和肾性高血压大鼠(RHR)及对照大鼠红细胞膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶(钙泵)活性及其对CaM、TFP、川芎嗪和硝苯吡啶(Nifedipine、Nif)等的反应,目的是分析高血压时钙泵功能障碍的机理,并寻找能有效提高钙泵活性的药物,为高血压防治提供有效措施。 结果表明SHR及RHR基础钙泵活性明显低于相应对照大鼠钙泵活性;原因之一可能与高血压动物质膜钙泵对钙泵抑制剂TFP的敏感性增加有关,对RHR,川芎嗪作用很类似TFP。提示此药有CaM拮抗作用。Nif除了公认为钙通道阻断剂外,本实验表明对RHR它还有激活钙泵的作用。     

哌唑嗪对原发性高血压病人红细胞Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶和钙调素的影响

本实验观察了原发性高血压(EH)病人红细胞Ca~(2+)Mg~(2+)-ATP酶活性,红细胞和血浆钙调素(CaM)的变化及哌唑嗪对其影响。结果表明:EH病人红细胞基础和最大Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性显著下降,并与血压呈显著负相关;红细胞CaM活性也显著降低并与最大Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性呈显著正相关;经哌唑嗪治疗后,EH病人红细胞Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性和CaM变化不显著,但血浆CaM有所降低。提示EH病人红细胞钙代谢异常与外周阻力增高有密切关系,哌唑嗪对细胞和体液CaM有不同影响。     

川芎嗪对自发性高血压大鼠红细胞膜外翻囊泡钙摄取的影响

细胞膜Ca~(2+)转运功能异常在自发性高血压大鼠(SHR)发病过程中有重要作用。川芎嗪作为临床上广泛使用的活血化瘀药,其扩血管效应是否通过影响细胞膜Ca~(2+)转运机制,目前所知甚少。本文观察了川芎嗪对SHR和WKY大鼠红细胞膜外翻囊泡(IOV)Ca~(2+)摄取的影响,拟探讨在正常血压和高血压状态下其作用的差异和意义。     

舒张功能障碍性心力衰竭发病机制的研究——血小板Ca~(2+),红细胞Ca~(2+)及其膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶的变化

作者测定了42例收缩功能正常或大致正常,舒张功能障碍性轻、中度(Ⅰ°与Ⅱ°)心衰患者血小板Ca~(2+)、红细胞Ca~(2+)及其膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性。结果表明:心衰组血小板Ca~(2+)与红细胞Ca~(2+)含量升高,Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性下降,与对照组比较,P<0.001,其巾Ⅰ°与Ⅱ°间P<0.05或<0.001;不同心脏病间,上述改变以高血压性心脏病最明显,其次为肥厚型心肌病与冠心病。提示:细胞内Ca~(2+)超负荷可能是舒张功能障碍的原因之一。     

抗高血压因子对大鼠血管平滑肌钙内流的影响

实验观察了从原发性高血压病患者红细胞中提取的抗高血压因子(AHF)对自发性高血压大鼠(SHR)、肾性高血压大鼠(RHR)和正常血压的WKY大鼠和Wistar大鼠主动脉和肠系膜动咏平滑肌Ca~(2+)内流的影响。结果表明,SHR和RHR的肠系膜动脉Ca~(2+)内流显著高于主动脉;AHF可显著抑制SHR和RHR主动脉和肠系膜动脉Ca~(2+)内流,抑制作用呈剂量依赖性,且对肠系腆动脉Ca~(2+)内流抑制作用更明显;AHF也可抑制正常动物血管平滑肌Ca~(2+)内流。本工作提示,AHF的降压机制可能与其抑制血管平滑肌特别是小动脉血管平滑肌Ca~(2+)内流有关。     

褪黑激素对中老年大鼠大脑皮质MDA含量和GSH-px、Ca~(2+)-ATPase活性的影响

目的 观察褪黑激素对中老年大鼠大脑皮质脂质过氧化产物含量和氧自由基、游离钙离子清除剂活性的影响,探讨其抗氧化、抗衰老作用机理.方法 连续30天给中、老年大鼠补充褪黑激素,用生化比色法,测定大脑皮质丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、钙离子-三磷酸腺苷酶(Ca~(2+)-ATPase)活性.结果 与对照组比较,实验组大鼠大脑皮质MDA含量下降了26.8%,GSH-px和Ca~(2+)-ATPase活性增加了27.5%和12.5%.结论 褪黑激素能增强大脑皮质对氧自由基和细胞内钙离子的清除能力,对抗神经细胞过氧化和延缓神经组织衰老具有一定的作用.     

细胞钠／钙交换可能参与高血压的发病机制

当前不论从组织水平,细胞水平还是亚细胞水平均证实血管平滑肌(VSM)细胞膜上存在着Na/Ca交换这一胞内Ca~(2+)调节机制。它可以利用Na~+的跨膜电化学梯度(g_(Na~+)来逆向转运Ca~(2+)。视Na~(2+)与Ca~(2+)电化学梯度的不同,它既可以介导Ca~(2+)进入细胞也可以将Ca~(2+)转运出细胞。 VSM细胞Ca~(2+)代谢的异常是高血压发病的一个重要原因。那么这一异常是否与Na/Ca交换有关呢?答案似乎是肯定的。在高血压病人的红细胞,自发性高血压大鼠(SHR)的红细胞或VSM细胞中Na~+与Ca~(2+)的含量均比正常对照明显增高。后者看来与Na~+,K~+-ATPase的抑制有关,因为不少证据显示高血压病人或动物血液中一种可以抑制Na~+,K~+-ATPase的内源性洋地黄类物质(endogenous digitalis)的水平升高。用高血压患者去蛋白     

钙离子对红细胞流变特性的影响及其微观机制分析

在人体的各种组织细胞中,钙离子都发挥着重要的作用.在正常情况下,人的红细胞通过钙泵(Ca2+-Mg2+)ATP酶使细胞内的Ca2+保持在0.1～1μM的低浓度[1].     

模拟微重力效应对骨细胞SOC通道功能的影响

目的探究模拟微重力效应下骨细胞钙池操纵Ca~(2+)通道(store-operated calcium channels,SOC)的活性变化以及其可能机制,阐明失重性骨丢失的发生机制。方法以小鼠骨细胞(MLO-Y4)为对象,分为回转模拟微重力效应组(simulated microgravity, SM)和正常重力组(control, CON)。分别旋转培养24、48 h后,激光共聚焦显微镜检测毒胡萝卜素引发细胞内质网钙库耗竭后胞内Ca~(2+)浓度水平,以反映SOC通道的活性;免疫荧光染色法观察膜骨架spectrin和内质网膜蛋白IP_3R的分布情况,研究SOC通道功能变化的可能机制。结果在内质网钙库释放Ca~(2+)时期,24、48 h SM组的胞内Ca~(2+)浓度水平与CON组相比均无显著差异,而在胞外Ca~(2+)经SOC通道内流时期,24 h SM组只在前4 min比CON组有显著性下降,48 h SM组在整个时期均比CON组有显著性下降。与CON组相比,SM组膜骨架spectrin向细胞边缘聚集,而ER膜蛋白IP_3R则向ER核被膜区域聚集,且48 h组更为显著。结论模拟微重力效应可抑制骨细胞SOC通道活性。骨细胞膜骨架spectrin以及内质网膜上蛋白IP_3R位置分布变化,可能影响SOC通道激活过程中蛋白间的构象耦合,进而降低骨细胞SOC通道的活性。     

红细胞抗高血压因子对大鼠红细胞膜Ca~(2+)·Mg~(2+)-ATP酶活性的影响

近年来本实验室从大鼠和人的红细胞中提取并基本上纯化了一种降压物质—抗高血压因子(Antihypertensive factor,AHF),对其理化特性、生理功能和作用机制进行了较深入和系统的研究。结果表明AHF的降压机制与抑制血管平滑肌(VSM)Ca~(2+)内流、降低胞内Ca~(2+)浓度和呈内皮依赖性的舒张VSM有密切关系。本文观察AHF对自发性高血压     

胎盘RAS和红细胞膜ATP酶活性变化与妊娠高血压的关系

实验比较了正常及妊高征患者胎盘ＡｎｇⅡ，肾素活性及母体和胎儿红细胞膜钙泵活性的变化及后者对某些活性物质包括钙调素和人红细胞抗高血压因子刺激的反应性。结果表明；１．与正常孕妇比较，妊高征患者胎盘ＡｎｇⅡ水平明显升高，肾素活性无显著改变；ＡＨＦ对正常孕妇及妊高征患者胎盘肾素活性未见明显影响；２．妊高征母体及胎儿红细胞膜Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性均显著降低，加ＨＦ后，钙泵活性在妊高征母体及胎儿明显低行正常     

缺血等因素对大鼠心肌线粒体Ca^2＋转运的影响

本研究检测了体外缺血等因素对心肌线粒体Ca~(2+)转运的影响。结果表明,缺血明显抑制线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性及~(45)Ca摄取率。缺血10分钟时,线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性开始下降,40分钟时显著降低,~(45)Ca摄取率的变化也呈类似趋势。去甲肾上腺素及cAMP对线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性,~(45)Ca摄取率无任何影响。无机磷对线粒体Ca~(2+)-ATP酶有轻微的抑制作用,二磷酸腺苷对谚酶活性有明显抑制作用,其IC_(50)值为2.5mmol/L。     

钙离子的生理、病理与药理概述

钙是组成人体的重要元素。体内的钙一般以Ca~(2+)的形式存在,99％的钙存在于骨骼里,其余分布于细胞内、外液中。生理情况下,细胞内、外液Ca~(2+)浓度相差1000倍以上。钙的主动转运通过“钙泵”完成;被动内流则依赖于钙通道被激活。胞浆内Ca~(2+)增多,可作为第二信使参与多项生理活动。但某些病理情况下形成的钙超载,将产生严重后果。有关Ca~(2+)生理、病理与药理的研究,正在成为医药学中一个新的领域。专家们预言,人类正面临钙的挑战。     

山莨菪碱、异搏定、内毒素对重组脂质体上心肌肌膜Na~+-Ca~(2+)交换活性的影响

山莨菪碱对心肌肌膜Na~+-Ca~(2+)交换蛋白活性呈剂量依赖性的抑制作用,而异搏定不抑制Na~+-Ca~(2+)交换,高浓度反而呈轻度促进作用,内毒素则与山莨菪碱的作用相反。提示抑制Na~+-Ca~(2+)交换可能是山莨菪碱发挥其细胞保护作用的机制之一,     

巴豆醛抑制小鼠心肌收缩功能

目的研究香烟烟雾中α,β-不饱和醛-巴豆醛对小鼠心肌细胞收缩功能和心肌细胞内Ca~(2+)功能的影响。方法经Langendorff装置灌注消化分离出C57BL/6小鼠心肌细胞,与不同浓度(1、10、25和50μmol/L)巴豆醛孵育6 h,对照组不经巴豆醛处理,然后分别检测心肌细胞收缩峰值(PS)、最大收缩和舒张速率(±dL/dt)、心肌细胞收缩峰值时间(TPS)、心肌细胞舒张90%时间(TR_(90))、fura-2荧光强度(FFI)、细胞内Ca~(2+)衰退和SERCA~(45)Ca~(2+)摄取,Western blot分析Na~+-Ca~(2+)交换体的表达。结果与对照组相比,较高浓度(25和50μmol/L)的巴豆醛组能明显降低心肌细胞PS、±dL/dt、ΔFFI、SERCA活性及Ca~(2+)衰退速度(P0.05),并能延长TR_(90)(P0.05);而不同浓度巴豆醛对小鼠心肌细胞Na~+-Ca~(2+)交换体的表达无明显影响。结论巴豆醛可能是通过抑制小鼠心肌细胞内SERCA活性来影响心肌细胞内Ca~(2+)功能,从而抑制心肌细胞的收缩功能。     

藏红花素对人脐静脉内皮细胞增殖及细胞外调节蛋白激酶信号通路的影响

目的观察藏红花素(crocin)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)体外增殖、细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2表达及活性的影响。方法用藏红花素及MAPK/ERK激酶(MEK)抑制剂PD98059分别处理HUVECs,Ed U细胞增殖法检测细胞体外增殖活力,Western blotting法检测crocin对磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和总ERK1/2表达的影响,激光扫描共焦显微镜检测细胞内Ca~(2+)浓度。结果在1μmol/L和10μmol/L浓度水平,藏红花素可明显促进细胞的增殖能力,提高磷酸化ERK1/2和总ERK1/2蛋白的表达水平,并增加细胞内Ca~(2+)浓度;给予MEK抑制剂PD98059后,细胞的增殖能力下降,磷酸化ERK1/2和总ERK1/2的表达减弱,细胞内Ca~(2+)浓度降低。结论藏红花素通过活化ERK1/2信号途径,提高细胞内Ca~(2+)浓度,促进人脐静脉内皮细胞的体外增殖能力。     

心房肽对高血压模型鼠（SHR）免疫细胞内钙离子浓度的影响

本文探讨了心房肽对自发性高血压大鼠免疫细胞内钙离子浓度的影响,结果表明,心房肽可直接促进大鼠胸腺、脾及淋巴结细胞内的钙离子浓度,亦能协同ConA促进大鼠脾细胞及T细胞内Ca~(2+)浓度的增加,但却不能影响B细胞的Ca~(2+)含量.心房肽还能协同IL-2促进经ConA诱导的大鼠淋巴母细胞内Ca~(2+)浓度的增加。同时发现自发性高血压大鼠免疫细胞心房肽所增加的Ca~(2+)浓度较正常血压对照鼠为低.     

烧伤血浆毒性物质对豚鼠心肌线粒体功能的影响

本文采用豚鼠背部皮肤烧伤(35％TBSAⅢ度)模型,观察了豚鼠烧伤后8小时血浆毒性物质(BPS)对正常心肌线粒体的呼吸控制率、Ca~(2+)—ATP酶、Na~+/K~+—ATP酶活性及Mg~(2+)—ATP酶活性,脂质过氧化物(LPO)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性及维生素E(Vit.E)含量的影响,并与豚鼠烧伤后8小时心肌线粒体上述功能指标的变化相比较。结果发现,烧伤血浆毒性物质使心肌线粒体(1)呼吸控制率下降。且与BPS的作用浓度有明显依赖性;(2)Na~+/K~+—ATP酶及Ca~(2+)—ATP酶活性降低;(3)LPO含量升高、SOD活性降低及Vit,E含量降低,上述变化与烧伤后8小时心肌线粒体的变化一致。 上述结果提示:烧伤血浆毒性物质的作用可能是严重烧伤早期心脏功能抑制的重要原因之一,其作用可能与其抑制线粒体的呼吸功能有关,ATP酶活性降低又进一步影响线粒体的物质转运、膜内外的离子平衡、能量代谢及心肌细胞的电活动。同时,烧伤血浆毒性物质对心功能的抑制过程中有氧自由基反应参与。     

阿霉素对兔心肾损伤与一氧化氮合酶表达

目的:探讨阿霉素(Adr)对心和肾损伤与一氧化氮合酶(NOS)表达。方法:用治疗剂量阿霉素静脉注射法建立兔心、肾损伤模型组,测定兔心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP):取心和肾组织进行HE染色及超薄切片染色;NADPH组化染色并进行图像分析,观察动物心和肾组织中ALP、Ca~(2+)-ATP酶和 NOS的变化。结果:实验组CO、LVSP均明显低于对照组,LVEDP明显高于对照组;实验组心和肾组织的超微结构受损伤,Ca~(2+)-ATP酶活性明显下降,而NOS表达明显上调。结论:治疗剂量阿霉素能够降低心和肾组织中Ca~(2+)-ATP酶的活性和上调NOS的表达,是导致心和肾组织损伤的重要原因。     

沙苑子总黄酮对自发性高血压大鼠血脂及内皮素活性的影响

目的研究沙苑子总黄酮对高血压大鼠血脂及对一氧化氮合酶、内皮素活性的影响。方法应用二肾一夹法制备RHR模型 ,尾袖法测量清醒大鼠尾动脉收缩压(SBP) ,沙苑子总黄酮(200mg.kg-1)采用灌胃给药。沙苑子总黄酮(200mg.kg-1)每天一次灌胃给药。结果给药一周后 ,清醒高血压大鼠血压明显下降 ,SHR大鼠血清总甘油三脂(TG)显著下降 ,从给药前(0.62±0.18)mmol/L降至(0.40±0.10)mmol/L,HDL-C显著升高。沙苑子总黄酮200mg/kg单次灌胃给药后60min ,SHR大鼠血清ET-1显著下降 ,从给药前(332±66)ng/L下降至(268±28)ng/L ,NOS略有升高 ,2h后恢复至正常水平。结论沙苑子总黄酮具有明显降压降脂作用 ,其降压可能与降低血清ET-1活性有关。