施万细胞对共培养的神经干细胞增殖与分化的影响

目的：探讨施万细胞诱导神经干细胞增殖与分化的影响因素。方法：大鼠胚胎神经干细胞单独培养及与新生SD大鼠施万细胞共培养，观察神经干细胞的形态变化，并分别检测特异性标志蛋白S-100、NF和GFAP的表达。结果：相差显微镜下可见共培养组大部分神经干细胞伸出多个细长突起；与单独培养组相比，免疫荧光染色显示共培养组NF表达阳性细胞数多；GFAP表达阳性细胞数少。结论：施万细胞可促进共培养的神经干细胞增殖，并可诱导神经干细胞向神经元方向分化。     

大气污染物对神经干细胞增殖与分化的影响

神经干细胞因具有自我更新和定向分化的特性而广泛应用于研究神经系统发育领域.研究表明,大气污染物具有神经发育毒性,通过分析神经干细胞发育过程(增殖、分化等)中的相关分子,可用来进行该污染物对神经干细胞的毒性效应评估,评估对神经系统发育的影响.本文依据现有研究,对大气污染物中的细颗粒物、铅、汞、多溴联苯醚、一氧化碳影响神经...     

Tmem72对小鼠神经干细胞体外增殖和分化的影响

目的 探究跨膜蛋白72(transmembrane protein 72,Tmem72)对小鼠神经干细胞体外增殖和分化的影响。方法 Western blot检测野生小鼠中Tmem72在不同年龄、不同脑区中的蛋白表达情况;在N2a细胞中瞬时转染Tmem72敲降质粒,利用CCK8、RT-qPCR、Western blot检测基因敲降后的增殖变化,流式细胞术检测细胞周期及凋亡变化;在小鼠神经干细胞中用慢病毒感染细胞,RT-qPCR、Western blot检测敲降效率,并检测增殖和分化标记物的表达变化;转录组测序分析差异表达基因及基因富集的信号通路。结果 Tmem72在不同年龄段及脑区中表达;与对照组相比,Tmem72敲降组在N2a细胞与神经干细胞中Tmem72的表达均显著下调(P<0.05);Tmem72敲降后N2a细胞的增殖能力及活力显著上调(P<0.05),而凋亡能力显著下降(P<0.01);Tmem72敲降后神经干细胞的增殖能力无显著变化,但促进向星形胶质细胞和未成熟神经元的方向分化(P<0.05);转录组测序分析发现差异基因富集到跨突触信号条件、胶质细胞分化...     

条件培养基对神经干细胞增殖与分化作用的影响

目的：观察大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）条件培养基对体外培养神经干细胞（NSCs）增殖与分化作用的影响。方法用 BMSCs 条件培养基分别在增殖与分化条件下培养 NSCs,观察 NSCs 形态变化。用 MTT 法及 NSCs 球数目和直径的统计分析了解 NSCs 增殖情况,同时行免疫荧光及 Western blot 法鉴定其分化情况。结果原代培养获得大量未分化且悬浮生长的 NSCs 球,并能分化为神经元细胞、星形胶质细胞及少突胶质细胞。BMSCs 条件培养基组能够促进 NSCs 球的吸附贴壁,但与对照组相比光密度（OD）值差异无统计学意义,NSCs 球数目和直径差异亦无统计学意义。另外,BMSCs 条件培养基组少突胶质细胞特异性蛋白MBP 表达量高于对照组（P <0.05）,星形胶质细胞特异性蛋白 GFAP 表达量低于对照组（P <0.05）,而神经元特异性蛋白 MAP-2表达量未见明显异常。结论大鼠 BMSCs 条件培养基促进 NSCs 向少突胶质细胞方向分化,但不抑制其增殖作用。     

神经胶质细胞对神经干细胞增殖和分化影响的研究进展

神经干细胞具有自我更新和多项分化的潜能,在体内外不同的微环境下分化为神经元的比例和种类不同.神经胶质细胞广泛分布于中枢神经系统,为决定神经干细胞增殖、分化和存活的微环境起着至关重要的作用.近年来,研究发现嗅鞘细胞、雪旺细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞等神经胶质细胞能促进神经干细胞的增殖和分化,并取得了一定的进展.     

Wnt信号转导途径与神经干细胞的增殖与分化

神经干细胞是神经元和神经胶质细胞的共同前体细胞。神经干细胞增殖及分化机制的研究为神经系统疾病治疗提供了新的途径。具有巨大的潜在应用价值和理论研究意义。Wnt信号转导途径是传递生长刺激信号的通路,对多种生物的胚胎和体轴发育,特别是在胚胎神经系统发育过程中起着重要作用。新近研究表明,Wnt信号途径能够明显促进神经干细胞向神经元分化,其机制可能与神经干细胞的内在特性、内环境及靶基因的不同有关。     

己烯雌酚对胎鼠海马神经干细胞增殖与分化的影响

目的:探讨己烯雌酚对胎鼠海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的促增殖、分化作用及其机制。方法:取孕16天SD胎鼠海马NSCs培养,分别设空白对照组,己烯雌酚1×10-7 mol/L组、1×10-8 mol/L组、1×10-9 mol/L组,以及脑源性神经营养因子(BDNF)5×10-2 mg/L组;免疫荧光化学方法检测Nestin、神经元特异烯醇化酶及神经胶质酸性蛋白的表达,RT-PCR检测BDNF mRNA的含量。结果:不同剂量己烯雌酚处理各组神经球面积、积分光密度值、平均突起长度与平均突起数均增加,其中10-8 mol/L组海马NSC增殖与分化最明显,BDNF mRNA表达量亦最高(P<0.01)。结论:己烯雌酚对海马NSCs的增殖分化具有促进作用,且可能与上调BDNF的表达有关。     

不同方法诱导脂肪干细胞分化为类施万细胞

目的寻求一种有效的方法将脂肪干细胞在体外诱导分化为类施万细胞。方法采用2种不同的诱导剂使用方法诱导大鼠脂肪干细胞,从形态学、抗S-100、抗GFAP免疫细胞化学染色阳性率、染色灰度值,MTT法细胞活性测定来比较其效果的不同。结果2种方法均可有效地诱导大鼠脂肪干细胞分化为类施万细胞,改良法诱导的细胞在形态上更接近施万细胞,抗S-100、抗GFAP阳性率、染色灰度值均优于传统法;MTT细胞活性测定显示改良法对细胞活性影响较小。结论改良法体外诱导大鼠脂肪干细胞的效果优于传统法。     

胚胎神经上皮干细胞体外克隆增殖与分化的实验研究

目的观察胚胎神经上皮干细胞在体外克隆增殖和诱导分化的情况。方法取孕11 d大鼠的胚胎,经分离获得神经管上皮细胞,在无血清培养基内克隆、增殖、传代。取不同时期的神经球进行神经干细胞的鉴定和诱导分化,并通过免疫组织化学染色鉴定分化的结果。结果胚胎神经上皮干细胞在体外能够克隆、增殖,形成的神经球呈nestin阳性,在分化培养基内可分化为星型胶质细胞和神经元。结论胚胎神经上皮干细胞可在体外进行单细胞克隆和诱导分化。     

精原干细胞的增殖与分化

精原干细胞（As精原细胞）是一些独立的细胞。它们既可以自我更新，又可以产生成对的Apr细胞，后者可按照预定的方向继续分化，Apr细胞随后分裂成一系列可再次分裂的Aal细胞。干细胞自我更新与分化的比例受支持细胞产生的胶质细胞系源性神经营养因子的调控，而其受体也在干细胞中表达，在上皮循环形成Aal的过程中，As,Apr和Aal增殖，从上皮循环的第Ⅷ殖起，几乎所有的Aal细胞，少数Apr和极少As细胞分化成A1细胞，这一分化步骤涉及了许多分子，其中包括SCF/c-Kit,DazlRNA结合蛋白，细胞周期蛋白D2和维甲酸，但是精原干细胞的密度缺乏精确的调节，以致一些区域A1形成较多，而另一些区域A1形成较少，通过A2，A3和A4细胞的凋亡可去除过剩的细胞而使精原细胞的密度达到相对平衡，Bcl-2家族的成员Bax和Bcl-XL也在密度调节中起一定作用，一些机制也可以解决干细胞生成过程中不同程度的不足，在细胞严重损失的情况下，干细胞的自我更新优于其分化，并且As,Apr和Aal细胞的增殖期也有所延长，较轻微的缺陷可通过减少A2-A4精原细胞的凋亡来弥补。     

体内外环境对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响

目的:探讨体内外环境对骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化的影响.方法:①DAPI体外标记MSCs后,直接注入大鼠大脑中动脉梗塞(MACO)模型(n=6)的脑内,2周后取脑组织,用免疫荧光检测MSCs来源细胞的巢蛋白(nestin)、微管相关蛋白-2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.②体外用全反式视黄酸(ATRA)预诱导24h后,换用改良的神经细胞培养基(MNM)培养18h,免疫组化检测nestin、MAP-2、GFAP的表达.结果:①植入2周后,MSCs在注射部位及其周围广泛分布,仅有少许细胞表达nestin、MAP-2和GFAP.②MSCs在体外诱导后,nestin、MAP-2的阳性率分别为(92.3±3.4)%和(89.6 3.3)%,但不表达GFAP.结论:MSCs在脑内向神经细胞转化的转化率较低,而在体外转化为神经元的转化率相当高,体内外环境对MSCs向神经细胞的分化的过程及机理存在较大差异.     

神经干细胞分化及诱导的研究进展

神经干细胞(NSC)的分化及诱导是目前神经科学研究的热点。因其有着巨大的潜在应用价值和重大的理论研究意义，越来越引起学者们的关注。为此，作者从NSC的体内发育、分化开始，到体外培养分化诱导的研究，从内因(基因)和外因(细胞因子、微环境)两个方面对近年来NSC诱导分化研究的一些进展作一综述。     

激活态雪旺细胞对神经干细胞分化作用的研究

目的探讨激活态雪旺细胞(SCs)对神经干细胞(NSCs)的分化作用。方法取出生24 h内的SD乳鼠脊髓NSCs,分离培养并传至4代。取体重(100±5)g的SD大鼠,结扎右侧坐骨神经,1周后取双侧坐骨神经,左侧提取正常坐骨神经分离培养SCs(普通SCs),右侧提取结扎变性的坐骨神经分离培养SCs(激活态SCs),均采用双酶消化加差速贴壁法。将SCs与NSCs应用Transwell培养皿联合培养,分为三组:A组为激活态SCs与NSCs;B组为普通SCs与NSCs;C组仅为NSCs。于培养的第2、4、6天检测各组NSCs活性。1周后,Western blot检测各组SCs表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平,免疫荧光检测各组NSCs分化比例。结果传至4代的NSCs生长稳定,分离的SCs 7 d后大量增殖呈旋涡状。联合培养后MTT法检测细胞活性,第2、4天三组细胞的活性差异无统计学意义(P>0.05),第6天C组活细胞比例开始降低,A、B组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05),A组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测A组细胞表皮生长因子(EGF)表达水平(0.486±0.028)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平(0.385±0.023)均高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。MAP-2荧光染色,每高倍视野阳性细胞比例A组[(35.26±2.53)%]高于B组[(27.63±3.45)%],差异有统计学意义(P<0.05);GFAP荧光染色,每高倍视野阳性细胞比例A组[(62.42±3.78)%]低于B组[(70.18±1.26)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论激活态SCs能够促进NSCs向神经元的分化进程,提高神经元的分化比例。     

毛囊神经嵴干细胞的培养、鉴定及其向雪旺细胞诱导分化的实验研究

目的 培养并鉴定Wistar小鼠毛囊神经嵴干细胞,并使其诱导分化成为雪旺细胞（Schwann cell,SCs）.方法 采用Wistar小鼠毛囊隆突贴块培养法培养小鼠毛囊神经嵴干细胞,并对培养的细胞进行并行免疫荧光细胞化学双重染色鉴定,诱导染色阳性的细胞初步分化后进行S-100染色,鉴定其分化产物为雪旺细胞.结果 采用Wistar小鼠毛囊隆突贴块培养法培养的毛囊神经嵴干细胞,免疫细胞化学染色呈现nestin及P75双阳性;对培养贴壁出的细胞胰酶消化后传代培养,诱导分化后进行S-100免疫细胞化学染色显示S-100阳性细胞突起的末端呈扁平状膨大.结论 利用Wistar小鼠毛囊可以体外培养出毛囊神经嵴干细胞,对其进行初步的诱导分化可以得到S-100阳性的细胞.     

Synergistic effect of schwann cells and retinoic acid on differentiation and synaptogenesis of hippocampal neural stem cells in vitro

INTRODUCTION Schwann cells (SCs) secrete growth factors or NGF-like proteins, such as nerve growth factor (NGF), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), NT-3, basic fibroblast growth factor (bFGF), and glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF)[…     

Differentiation of rat embryonic neural stem cells promoted by co-cultured Schwann cells

Objective To explore the factors which induce differentiation of embryonic neural stem cells. Methods Rat embryonic neural stem cells were co-cultured with newborn rat Schwann cells in serum-free medium. The phenotype and specific-markers including tubulin-β, glial fibrillary acidic protein (GFAP) and galactorcerebroside (GalC), were domonstrated by phase contrast microscopy and double immunofluorescence staining. Results Overall, 80%±5% of neural stem cells protruded several elongated processes and expressed tubulin-β antigen at high levels, while 20±3% of them protruded several short processes and were GalC or GFAP positive. Conclusion The factors secreted by Schwann cells could induce rat embryonic neural stem cell to differentiate.     

Effects of co-engraftment of Schwann cells with neural stem cells into rats with Parkinson disease

Neural stem cells （NSCs） are effective in treating Parkinsonian animals. Although cell transplantation is considered a promising treatment for Parkinson disease （PD）, its clinical use has been limited to only a few patients. The major limiting factors of this therapy are difficulty in obtaining sufficient viable embryonic mesencephalic tissue and the controversial ethical and/or legal issues raised by the use of human fetal allografts. Some reports suggest that Schwann cells （SCs） can promote the proliferation of embryonic stem cells and the induction of dopaminergic neurons. Our research focused on potential curative effects of co-graft SCs with mesencephalic stem cells into Parkinsonian animals and elucidating the underlying mechanisms.     

特定微环境下诱导脐血间充质干细胞向神经细胞的分化

目的 在体外分离培养人脐血间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs),探讨脐血间充质干细胞体外培养生长特性及向神经细胞分化的诱导条件.方法 在体外将脐血MSCs进行向神经细胞的定向诱导,观察脐血MSCs的形态变化,并在诱导后第5天用免疫荧光染色检测脐血MSCs中神经元细胞特异性的标志物;并与单纯低糖DMEM培养基培养的对照组脐血MSCs相比较.结果 诱导组中的脐血MSCs生长伸展,形成突起,呈放射状,并可互相形成连接,免疫荧光显示特异性烯醇化酶(neuronspecific enolase,NSE)阳性,表现出神经元细胞的特性.而对照组中的脐血MSCs未形成神经样形态结构,免疫荧光NSE阴性.结论 脐血MSCs可在体外经化学方法 定向诱导分化为神经细胞,可应用于神经修复及再生等领域.