SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断中的临床应用性研究

目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI—TOF—US）筛选肝癌患者血清标志蛋白，探讨作为临床诊断指标的最佳标志蛋白组合模式。方法 对40倒肝癌、20例肝硬化和60例健康志愚者的血清进行分析，并反复分析寻找合理运算规则以确定能够区分肝癌和健康志愿者与肝硬化患者的蛋白组学图谱。结果 肝癌、肝硬化患者与健康对照组血清蛋白质指纹图谱之间有5个标志蛋白在肝癌患者血清中高表达，1个标志蛋白在肝癌患者血清中低表达。其中2个蛋白质峰[8943Da和4477Da质荷比（m/z）]组合构建的诊断模型Ⅰ鉴别肝癌和健康志愿者，灵敏度为90％（36／40），特异性为100％（60／60）。3个蛋白质峰（4477Da、13761Da和4097Da m／z）组合的诊断模型Ⅱ鉴别肝癌组与肝硬化组的灵敏度为85％（34／40），特异性为90％（18／20）。结论 SELDI—TOF—MS技术的特异性及敏感度远远高于目前所采用的某一单独的标志物的血清学诊断。其结果对进一步研究肝癌的蛋白质组学改变及其临床应用可能具有重要意义。     

SELDI-TOF-MS技术对胃炎诊断的应用

目的采用蛋白质剖析技术同时解析和分析多种蛋白质，从而找出更好的生物标记物，用于检测胃炎。方法用SELDI—TOF—MS技术及配套蛋白质芯片检测30例慢性胃炎和64例非胃炎疾病患者的血清蛋白质指纹图谱，建立诊断模型。结果2个蛋白质峰[5084和8691质荷比（m／z））组合构建的诊断模型鉴别慢性胃炎和健康志愿者，灵敏度为96．66％（29／30），特异性为93．55％（29／31）。2个蛋白质峰（5910和6440m/z合的诊断模型鉴别胃炎和胃癌患者的灵敏度为96．6％（29／30），特异性为90．9％（30／33）。结论SELDI—TOF—MS在慢性胃炎的诊断尤其是早期诊断及候选标志物筛选等方面具有一定价值，值得进一步深入研究。     

SELDI-TOF-MS技术在贲门癌诊断中的初步研究

目的寻找贲门癌肿瘤标记物并建立诊断模型。筛选提示发生淋巴转移的差异蛋白,为临床早期诊断贲门癌及判断预后提供新方法。方法 CM10蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测101例贲门癌患者及118例正常对照者血清蛋白,Biomarker Wizard软件和Biomarker Patterns System(BPS)分析得差异蛋白并建立贲门癌诊断分类树,双盲法验证其准确性。进一步分析对比有、无淋巴转移的贲门癌患者血清蛋白指纹图谱,得到差异蛋白。结果对照分析贲门癌患者和正常对照组的血清蛋白指纹图谱得56个差异蛋白(P<0.05),经BPS软件筛选,以质荷比为5 480.49(P<10-8)的蛋白为主根结点建立贲门癌诊断模型,其灵敏度为95.05%,特异度为95.76%。得到可提示淋巴转移的差异蛋白3 820.87(P<0.05),其灵敏度为84.4%,特异度为82.1%。结论 SELDI-TOF-MS技术可建立有较高灵敏度和特异度的贲门癌诊断模型,筛选出能够提示发生淋巴转移的差异蛋白,有助于贲门癌的早期筛查、诊断和预后判断。     

应用SELDI-TOF-MS技术筛选人肝癌细胞多药耐药相关差异表达蛋白

【目的】通过SELDI-TOF-MS技术筛选体外培养人肝癌细胞多药耐药相关差异表达蛋白。【方法】采用体外培养人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-FU,MTT法检测Bel-FU的多药耐药性;SELDI-TOF-MS技术结合CM-10芯片检测Bel-7402与Bel-FU蛋白质指纹图谱。【结果】细胞Bel-FU对于5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、长春新碱、阿霉素、柔红霉素的耐药指数分别为:89.6倍、3.9倍、37.2倍、16.5倍、3.7倍。在质荷比(M/Z)2 000～50 000的范围内,Bel-FU与Bel-7402间共检测到8个差异蛋白(P<0.05),其中上调蛋白有3个,下调蛋白有5个。【结论】SELDI-TOF-MS技术为筛选肝癌MDR蛋白标志物提供了一个简便、有效的方法。     

利用SELDI-TOF-MS技术从结直肠癌患者血清中筛选特异的生物标记物

目的 通过对血清中蛋白质组的质谱分析来发现可用于结直肠癌鉴定的生物标记物。方法 随机取73例结直肠癌患者血清、31例正常人血清及16例结直肠相关良性疾病患者血清。将血清与金属亲和表面（IMAC3）芯片结合后,用蛋白芯片仪读取数据并进行软件分析。结果 软件分析结果显示3类血清蛋白质在质荷比为4467,8131,8939,9192,9134,8221,5928,8324,11732D9处含量有显著差异,得到树状分类规则,其分类准确率为98．33％（118／120）,灵敏度为97．26％（71／73）,特异性为100％（47／47）。结论 用SELDI—TOF—MS技术对正常人、良性病患者及结直肠癌患者进行比较蛋白质组学研究,发现了结直肠癌病理发展中生物标记物。     

应用SELDI-TOF-MS技术筛选2型糖尿病肾病血清差异表达蛋白

目的 采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术建立2型糖尿病肾病血清蛋白指纹图谱,筛选其差异表达蛋白.方法 收集2型糖尿病肾病(T2DN)患者31例、2型糖尿病(T2DN)不伴肾病患者32例和正常对照血清30例,采用SELDI-TOF-MS技术建立蛋白指纹图谱,应用BioMarker Wizard 3.1软件对实验数据进行分析.结果 糖尿病肾病组与糖尿病不伴肾病组相比较,有14个差异表达蛋白峰(P＜0.05),其中糖尿病肾病组有2个蛋白峰高表达,12个蛋白峰低表达;糖尿病肾病组与正常对照相比较,有25个差异表达蛋白峰(P＜0.05),其中糖尿病肾病组有13个蛋白峰高表达,12个蛋白峰低表达.结论 糖尿病肾病具有多种差异表达蛋白,这些蛋白可能为其诊断的潜在标志物.     

SELDI-TOF-MS技术在血液系统疾病诊疗中的应用进展

表面增强激光解析电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术是近年来蛋白组学研究的先进技术,文章主要介绍该技术在以下方面的应用:寻找不同亚型非霍奇金淋巴瘤、儿童急性淋巴细胞白血病的潜在的生物标志物和探讨苯致白血病的发病机制;儿童急、慢性免疫性血小板减少症的早期诊断和预后监测;以及预测镰状细胞贫血患者急性疼痛发作的频率和严重程度,可能与载脂蛋白A1和血清淀粉酶A水平有关.     

SELDI-TOF-MS技术在筛选肝癌患者血清标记物中的应用

目的:筛选肝癌患者血清中特异标记物.方法:利用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及其配套蛋白质芯片,对33例肝癌患者、33例正常人和17例慢性肝病患者的血清蛋白质图谱进行检测,结合Biomarker Patterns Software(BPS)建立诊断模型.结果:肝癌患者与正常人和慢性肝病患者血清蛋白质图谱在相对分子质量为2 000～50 000范围内,有73个蛋白质峰差异有统计学意义(P＜0.05).经软件分析,建立由相对分子质量为4 177和7 789的标记蛋白组成的肝癌诊断模型,其诊断肝癌灵敏度为81.8%(27/33),特异度为80%(40/50).结论:SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术是一种快速、简便易行、用量少和高通量分析方法,不仅能直接筛选出肝癌患者血清中相对特异的潜在标记物,而且具有较好的临床应用价值.     

SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术在宫颈癌早期诊断和鉴别诊断中的应用

目的 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术检测宫颈浸润癌和原位癌患者血清蛋白质指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物.方法 应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集74例宫颈癌(44例宫颈浸润癌和30例宫颈原位癌)患者和51例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白,应用Biomarker patternsoftware 5.0.2版建立诊断模型,并盲法验证其诊断效率.结果 宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有12个差异表达的蛋白质峰(P<0.05),筛选出分子量分别为5642、5912、5905、5660、2288和8700 Da 6个标志蛋白,将125例血清随机分为30例宫颈癌和30例健康人血清作为训练组用于建立人工神经网络(ANN)模型,44例宫颈癌和21例健康人血清作为验证组,其对宫颈癌的诊断敏感性为95.45%,特异性为95.23%.宫颈浸润癌与原住癌血清蛋白质谱有16个差异表达的蛋白质(P<0.01),筛选出分子量分别为13776、2796、2697、2070、2768和9222 Da 6个标志蛋白,随机将15例宫颈浸润癌和15例原位癌血清分为训练组,29例浸润癌和15例原位癌作为验证组,其鉴别宫颈浸润癌的敏感性为93.10%.特异性为93.33%.宫颈原位癌患者与对照组血清蛋白质谱比较有6个差异表迭的蛋白质(P<0.05),分别随机选取15例宫颈原位癌和15例健康人血清作为训练组,15例原位癌和36例健康人血清作为验证组,其诊断宫颈原位癌的敏感性为60%,特异性为98.08%.结论 血清蛋白质谱技术可望用于宫颈浸润癌和原位癌的鉴别,标志蛋白的鉴定可能对宫颈癌浸润机制的探讨和新的治疗手段的开展具有重要的指导意义.     

应用SELDI-TOF-MS技术分析慢性乙肝患者血清差异表达蛋白

【目的】应用表面加强激光解析离子化飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption-ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术分析慢性乙肝患者血清差异表达蛋白。【方法】选择临床明确诊断的慢性乙肝患者和正常健康体检者各12名,利用弱阳离子芯片CM10经质谱分析血清中差异表达蛋白。【结果】样品血清中共获得与芯片结合的67个有效蛋白质峰。其中相对分子质量4107、4980、5650、5923道尔顿的4个蛋白峰有差异,相对分子质量为4980道尔顿的蛋白峰在慢性乙肝组高表达。经检索,发现相对分子质量为4980道尔顿的蛋白与细胞色素B相对分子质量相符。【结论】利用SELDI-TOF-MS技术寻找慢性乙肝患者无创性血清学指标是一种可行的方法,细胞色素B可能在慢性乙肝形成中起一定作用。     

应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱筛选大肠癌血清特异标志物

目的 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测大肠癌患者与健康对照者血清中蛋白的差异,为大肠癌的早期诊断提供理论依据.方法 应用SELDI-TOF-MS技术及弱阳离子蛋白质芯片(WCX2)检测36例健康成人(对照组)和36例大肠癌患者(大肠组)血清中蛋白含量.结果 在质荷比为2 000Da～30 000Da的范围内,两组样本检测到了对照组82个蛋白峰.其中3 604.240 Da蛋白峰大肠癌组明显高于对照组(P＜0.05),而12 861.368 Da的蛋白峰对照组明显高于大肠癌组(P＜0.05).利用这两个蛋白筛查大肠癌的特异度为86.11%(31/36),敏感度为77.78%(28,36),阳性预测值为87.5%.结论 质荷比为3 604.240 Da与12 861.368 Da的两个蛋白峰可以作为大肠癌早期诊断的备选标志物.     

应用芯片技术对非霍奇金淋巴瘤标志物的研究

目的应用蛋白质组学技术寻找非霍奇金淋巴瘤与健康对照组血清中差异表达的蛋白。方法选择山西省肿瘤医院72例非霍奇金淋巴瘤患者,男性47例,女性25例;年龄11～83岁,中位年龄52.5岁。正常对照组32例,男性17例,女性15例;年龄10～74岁,中位年龄26.5岁,均为健康志愿者。应用SELDI-TOF-MS技术通过WCX-2蛋白芯片检测他们血清中的蛋白质谱,运用Ciphergen Proteinchip 3.0版本的分析软件自动采集数据,结果采用Biomarker Wiz-ard软件分析二组间蛋白质谱中的差异蛋白。结果笔者在非霍奇金淋巴瘤患者的血清中找到了一系列特异表达的蛋白质,其质荷比分别为3193 Da,3398 Da,7974 Da,8564 Da,8693 Da和15934 Da。72例NHL患者与30例正常人的血清中有5个差异明显的潜化标志蛋白,患者血清中高表达且正常人血清低表达的蛋白质的相对分子量为15 934 Da,患者血清中低表达且正常人血清高表达的蛋白质相对分子量为3193 Da,3398 Da,8564 Da,8693 Da。结论质荷比3193 Da,3398 Da,8564 Da,8693 Da和15 934 Da的蛋白质可能是非霍奇金淋巴瘤的生物学标志物。     

应用表面加强激光解析电离-飞行时间质谱技术建立非活动性HBsAg携带者血清蛋白质谱筛选模型

目的 比较非活动性HBsAg携带者和健康人的血清蛋白标记物并建立相关筛选模型.方法 用表面加强激光解析电离-飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)及CM10蛋白芯片对35例非活动性HBsAg携带者、35例健康人血清样本进行分析,将获得的血清蛋白质指纹图谱用计算机软件进行比较分析,建立非活动性HBsAg携带者的比较筛选模型.结果 非活动性HBsAg携带者组与健康人对照组共有28个差异有统计学意义的蛋白峰;建立诊断模型的灵敏度94%(33/35),特异度80%(28/35),准确率为87%(61/70).结论 建立的血清蛋白质指纹图谱模型能够区分非活动性HBsAg携带者与健康人,SELDI技术在诊断及特异性血液生物标志分子的筛选等方面具有较好的临床应用价值.     

SELDI—TOF—MS技术建立早期肝硬化患者血清蛋白质谱筛选模型

目的：比较早期肝硬化患者和健康人的血清蛋白质谱并建立相关血清诊断模型。方法：用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱（SELDI-TOF—MS）技术及CM10蛋白芯片对50例早期肝硬化患者、50例健康人血清样本进行分析,将获得的血清蛋白质指纹图谱,用计算机软件进行比较分析。结果：早期肝硬化患者与健康人对照组共有25个差异有统计学意义的蛋白质峰;建立诊断模型的灵敏度为96％（48／50）,特异度为90％（45／50）,准确率为93％（93／100）。结论：两组人的蛋白质谱有明显的差异,建立的诊断模型能够区分早期肝硬化患者与健康人,SELDI—TOF—MS技术在诊断及特异性蛋白质生物标志分子的筛选等方面具有较好的临床应用价值。     

SELDI-TOF-MS技术在中医证候及中药抗肿瘤研究中的应用进展

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)是蛋白质组学新近发展起来的一种研究方法,具有高通量、快速、高灵敏性和样本要求低等优点,近年来被广泛应用于中医药领域。对SELDITOF-MS技术在中医证候及中药抗肿瘤研究中的应用进行综述,以进一步挖掘该技术的应用前景。     

大肠癌唾液蛋白指纹图谱分子诊断模型研究

目的：研究建立大肠癌（colorectal cancer,CRC)）唾液蛋白质指纹图谱新型分子诊断模型。方法采集34例肠癌患者、45例健康志愿者（正常组）的唾液标本,用弱阳离子交换型（WCX）纳米磁珠联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术进行检测,获得各标本的蛋白指纹图谱。用Biomarker Wizard软件分析所获得的蛋白指纹图谱找出差异蛋白,再用Biomarker Patterns 5.0.2建立鉴别诊断模型。结果共检测到312个肠癌差异蛋白质峰,两组比值大于3（肠癌/正常对照＞3,或者正常对照/肠癌＞3）,其中有37个差异蛋白质峰有统计学意义（P＜0.05）;其中有7个差异蛋白质峰肠癌组表达上调,28个差异蛋白质峰肠癌组表达下调,有35个差异蛋白质峰有显著差异（P＜0.01）。筛选建立了由m/z为2501.26、4779.95、3140.39的3个差异蛋白峰组成的肠癌与正常组的诊断模型,该模型的灵敏度和特异度分别为88%（30/34）和98%(44/45);通过交叉验证法进一步验证诊断模型的可靠性,结果该模型的灵敏度和特异度分别为85%(29/34)和88%(37/45)。结论用WCX结合MALDI-TOF-MS技术建立的唾液蛋白诊断模型为肠癌的诊断提供了新途径。     

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术筛选的肺腺癌血清标志蛋白与传统肿瘤标志物的比较

目的比较表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)筛选的肺腺癌血清标志蛋白与传统肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原(CA125)和细胞角蛋白19片断(CYFRA21-1)对肺腺癌诊断价值的差异。方法肺腺癌组和健康对照组各71例,按性别、年龄配对,采用SELDI-TOF-MS检测血清蛋白质质谱,筛选出血清肺腺癌标志蛋白。采用化学发光法检测血清CYFRA21-1、CEA、CA125和NSE水平。并比较联合检测对肺腺癌的诊断价值。结果①SELDI-TOF-MS检测结果:肺腺癌组有5个蛋白质峰明显呈高表达,该5个峰的相对分子质量分别为4047.79±1.60、4203.99±1.91、4959.81±2.13、5329.30±2.55和7760.12±4.11。②肺腺癌组血清CEA、CA125、NSE和CYFRA21-1水平分别为(54.38±12.79)μg/L、(130.45±54.36)mg/L、(16.85±4.65)μg/L和(23.45±5.75)μg/L,均显著高于健康对照组[(5.26±1.74)μg/L、(21.01±8.1 6)mg/L、(8.53±3.08)μg/L和(2.48±1.23)μg/L,P值均<0.05]。③5个蛋白质峰联合检测中,以3项指标阳性对肺腺癌的诊断效率最高(灵敏性、特异性分别为92.96%、90.14%);CEA、CAl25、NSE和CYFRA21-1联合检测中,2项指标阳性对肺腺癌的诊断效率较高(灵敏性、特异性分别为63.38%、56.34%)。结论SELDI-TOF-MS技术是一种快速、简便易行且高通量的分析方法,可直接筛选出相对特异的肿瘤标志蛋白,与传统肿瘤标志物相比,更利于肺腺癌早期诊断和筛查。     

胃癌及慢性胃炎幽门螺杆菌的蛋白质组学研究

目的:建立胃炎与胃癌相关幽门螺杆菌的双向凝胶电泳图谱,识别鉴定其差异表达的蛋白质,探讨细菌本身因素在发病过程中的作用.方法:利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离胃炎与胃癌相关幽门螺杆菌菌株的总蛋白质,凝胶经蓝银显色后,采用PDQuest图像分析软件比较、分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点.结果:获得分辨率较高、重复性较好的胃炎与胃癌相关幽门螺杆菌双向凝胶电泳图谱,鉴定出14个差异蛋白质,包括抗氧化作用、分子伴侣、解毒和DNA修复相关蛋白质、三大代谢相关酶类、细胞结构相关蛋白质以及信号传导相关蛋白质.结论:建立了分辨率高且重复性较好的胃炎与胃癌相关幽门螺杆菌双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定出了两种不同疾病来源幽门螺杆菌差异表达的蛋白质,其蛋白质表达的差异可能在胃癌的发生中起重要作用.     

利用时间质谱检出312例6月龄内健康婴儿鼻咽部微生态菌群的分布特征

目的 利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术研究济南地区6月龄内健康婴儿鼻咽部微生态菌群分布特征,为鼻咽部微生态研究提供样本库信息。 方法 采集2019年11月至2020年4月济南地区312例6月龄内健康婴儿鼻咽拭子,增菌后,分离培养获得纯菌株;利用MALDI-TOF MS技术鉴定分离株到种置信水平;312例婴儿分为月龄≤2组、3月龄组、4月龄组和5月龄组,组间比较采用SPSS 22.0统计学软件,卡方或Fisher确切概率法统计分析。 结果 312例健康婴儿鼻咽拭子获得纯菌株741株,分属于25个属74种细菌。优势菌属为葡萄球菌属(31.6%)、棒杆菌属(30.8%)、链球菌属(18.9%)、莫拉菌属(8.6%)和狡诈球菌属(2.0%)。同时发现一些不常见菌种,例如缺陷乏氧菌、放射根瘤菌等。金黄色葡萄球菌检出率男婴(40.5%)高于女婴(26.4%),接近棒杆菌女婴(42.4%)高于男婴(27.4%)。4个年龄组中,假白喉棒杆菌检出率依次升高(10.8%、17.7%、18.9%、46.7%);肺炎链球菌检出率依次升高(2.2%、2.3%、4.1%、20.0%)。 结论 济南地区健康6月龄内婴儿鼻咽部微生态菌群以优势菌为主呈现多样化,MALDI-TOF MS是鉴定常见和不常见微生物菌种的快速、高通量技术手段。本研究可为济南地区儿童鼻咽部微生态研究提供有价值的样本库资料。