槲皮素联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响

目的研究槲皮素联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用不同浓度槲皮素与顺铂单独及联合作用MG-63细胞;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞增殖抑制率,并通过Chou-Talaly联合指数法分析两药之间相互作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR及Western blot检测Bcl-2、caspase-3等凋亡相关分子在基因及蛋白水平的表达变化。结果槲皮素及顺铂均能抑制MG-63细胞增殖并诱导其凋亡,两药联合具有协同效应,并可下调Bcl-2及上调caspase-3基因及蛋白的表达。结论槲皮素联合顺铂能协同抑制MG-63细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2及上调caspase-3等凋亡相关分子的表达有关。     

丹参酮ⅡA通过抑制PI3K/Akt通路逆转人喉癌细胞顺铂耐药的机制研究

目的 研究丹参酮Ⅱ_A对人喉癌细胞顺铂耐药的影响作用及机制。方法 以不同质量浓度（0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 mg/L）顺铂干预对数生长期人喉癌Hep-2细胞和人喉癌顺铂耐药细胞（Hep-2/DDP）48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算半数抑制浓度（IC₅₀）和耐药指数（RI）。以不同质量浓度（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L）丹参酮Ⅱ_A干预对数生长期Hep-2细胞48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算IC₅₀;采用丹参酮Ⅱ_A（IC₅₀5.32 mg/L）＋不同质量浓度（0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 mg/L）顺铂干预对数生长期Hep-2/DDP细胞48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算2种药物联用的IC₅₀和逆转倍数（RF）。取对数生长期Hep-2/DDP细胞,设置对照组、顺铂组、丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组、丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋胰岛素样生长因子-1（IGF-1）组。各组分别给药干预48 h后,采用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞增殖抑制率和凋亡率,Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）、激活型半胱氨酸蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）、cleaved Caspase-9、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、p-PI3K、蛋白激酶B（Akt）蛋白表达情况。结果 顺铂对Hep-2细胞的IC₅₀为4.58 mg/L,对Hep-2/DDP细胞的IC₅₀为14.09 mg/L,RI为3.08;丹参酮Ⅱ_A对Hep-2细胞的IC₅₀为5.32 mg/L;丹参酮Ⅱ_A联合顺铂对Hep-2/DDP细胞的IC₅₀为3.34 mg/L,RF为4.22。与对照组比较,顺铂组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高（P<0.01）;与顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高（P<0.05）;与丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋IGF-1组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著降低（P<0.05）。与对照组相比,顺铂组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著降低,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.05）。与顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著降低,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.05）。与丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋IGF-1组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著升高,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著降低（P<0.05）。与对照组相比,顺铂组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化（p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt）水平显著降低（P<0.05）。与顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化水平显著降低（P<0.05）。与丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋IGF-1组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化水平显著升高（P<0.05）。结论 丹参酮Ⅱ_A可逆转人喉癌细胞顺铂耐药,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt通路活化而促进喉癌细胞凋亡有关。     

β-elemene联合顺铂抑制Hep-2细胞生长作用的实验研究

目的 探讨β-elemene联合顺铂对体外培养的Hep-2细胞（人喉咽癌细胞）生长的抑制作用.方法 采用MTT比色法和流式细胞分析技术检测不同组别、不同时间（12、24、48 h）对Hep-2细胞的抑制其增殖和诱导其凋亡的作用.结果 单纯β-elemene组、单纯顺铂组及β-elemene联合顺铂组,12 h时对Hep-2细胞增殖抑制率分别为19.05%、20.12%和22.24%,细胞凋亡率分别为12.21%、17.98%和20.34%;24 h时细胞增殖抑制率为40.62%、41.51%和64.65%,细胞凋亡率为25.34%、31.08%和34.62%;48 h时细胞增殖抑制率为60.50%、68.23%和71.56%,细胞凋亡率为40.63%、42.96%和63.01%.β-elemene联合顺铂组对Hep-2细胞生长抑制作用和诱导细胞凋亡的作用都明显优于其他各组（P〈0.05）.结论 β-elemene联合顺铂能够明显抑制Hep-2细胞增殖,诱导Hep-2细胞凋亡,为喉咽癌的化疗提供了一个新的启发.     

吉西他滨联合卡铂诱导NK/T细胞淋巴瘤细胞株凋亡的研究

目的:研究吉西他滨联合卡铂对NK/T细胞淋巴瘤细胞株(SNK 6)细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用细胞增殖-毒性检测法(CCK-8)检测吉西他滨、卡铂、顺铂对SNK 6细胞增殖的影响,算出各自半数抑制浓度(IC 50)值;再用吉西他滨与卡铂或顺铂做联合实验,用金氏公式计算Q值,评价联合用药效应。应用流式细胞仪检测不同药物组对细胞凋亡的影响。蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测各药物组Cleaved-caspase-3、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等凋亡蛋白的表达水平。结果:吉西他滨、卡铂、顺铂对SNK 6细胞均有较好的抑制作用;联合用药中,吉西他滨+卡铂组与吉西他滨+顺铂组对SNK 6细胞抑制作用相当,两药联合为相加作用。吉西他滨+卡铂组凋亡率稍低于吉西他滨+顺铂组,但差异无统计学意义(P>0.05)。吉西他滨可上调Cleaved-caspase-3蛋白、Bax蛋白的表达水平,下调Bcl-2蛋白的表达水平(P<0.05),吉西他滨与卡铂或顺铂联合时效果更加显著。结论:在体外环境下,吉西他滨联合卡铂可抑制SNK 6细胞增殖并诱导其凋亡,且一定浓度的吉西他滨联合卡铂对SNK 6细胞株的凋亡率与吉西他滨联合顺铂相似。     

天花粉蛋白对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗增敏作用

目的 观察天花粉(TCS)联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的化学治疗(化疗)增敏作用,并探讨其作用机制。方法 细胞计数检测试剂盒(CCK8)法检测TCS、顺铂单独或联合用药对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响;CompuSyn软件分析TCS联合顺铂的联合用药指数(CI值);细胞划痕实验与Transwell法检测药物对细胞迁移的影响;流式细胞术检测药物对细胞凋亡的影响;蛋白印迹法检测药物对HeLa细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果 TCS与顺铂均能抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,TCS+顺铂抑制作用更强,TCS对顺铂增敏指数为3.04;不同浓度TCS联合顺铂作用HeLa细胞48 h后,CI值均<1,且具有浓度依赖性(P<0.05);细胞划痕实验与Transwell法实验中,TCS+顺铂较TCS或顺铂单独给药能更明显抑制HeLa细胞迁移(P<0.05);流式细胞术中,与TCS或顺铂单独给药相比,TCS+顺铂可增加HeLa细胞凋亡比例(P<0.05);蛋白印迹实验中,与TCS或顺铂相比,TCS+顺铂可上调促凋亡蛋白Bax、c-PARP表达,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达(P<...     

重组人血管内皮抑制素联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞VEGF基因表达、增殖及侵袭力的影响

目的 观察重组人血管内皮抑制素(rhEndo)联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞VEGF基因表达、增殖及侵袭力的影响.方法 顺铂、rhEndo、rhEndo联合顺铂分别处理MG-63细胞,采用RT-PCR和Western blot检测细胞VEGF mRNA和蛋白表达量,CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室体外迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力.结果 rhEndo联合顺铂组对VEGF mRNA和蛋白表达量、细胞增殖、侵袭迁移的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用均显著高于rhEndo、顺铂单药组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 重组人血管内皮抑制素联合顺铂能够在抑制骨肉瘤MG-63细胞VEGF表达、细胞增殖和侵袭力、促进细胞凋亡方面发挥协同作用.     

青蒿素联合顺铂抑制肝癌细胞HepG2增殖的影响

目的探讨青蒿素联合顺铂对肝癌细胞HepG2增殖的影响并初步探讨其作用机制。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,分别用100、200、400、600、800和1 000μmol/L青蒿素或青蒿素联合3μg/ml顺铂作用24 h,采用MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期,Hoechst荧光染色法观察细胞凋亡形态,细胞分析仪检测凋亡,Western blot法检测细胞内PCNA、cyclin D1、Bax、Bcl-2、Cyt C和caspase-3蛋白表达。结果同对照组相比,不同浓度青蒿素作用HepG2细胞24 h后,细胞增殖受到抑制(P0.05);青蒿素与顺铂联合作用后,抑制程度明显高于单一药物处理组,表明二者具有协同抑制作用(P0.05);青蒿素与顺铂联合作用后,细胞G0/G1期比例逐渐增加;细胞核出现染色质不均匀,核浓缩聚集、碎裂凋亡形态,凋亡率明显升高(P0.05);PCNA、cyclin D1、Bcl-2蛋白表达下调,Bax、Cyt C和激活型caspase-3蛋白表达升高。结论青蒿素与顺铂联合作用对人肝癌细胞HepG2增殖抑制具有协同作用,其机制可能与阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡有关。     

丙戊酸联合顺铂对体外人非小细胞肺癌细胞的增殖抑制作用

目的探讨丙戊酸（VPA）联合顺铂（DDP）对人非小细胞肺癌细胞A549、NCI．H460增殖抑制及细胞凋亡的影响,以及两药联合影响肺癌细胞增殖的机制。方法3组不同质量浓度的VPA与DDP单药及联合作用于人非小细胞肺癌细胞A549、NCI—H460,培养24、48、72h后,观察细胞数量和形态的变化,用MTF法分析药物对细胞增殖的抑制率（IR）及联合用药对细胞增殖抑制率q值,Hoechst／PI双染检测细胞凋亡的数量变化,Westernblot观察联合用药对Bcl．2、Caspase．3、Caspase．8蛋白的表达变化。结果培养48h后,各用药组细胞数目减少十分明显,其中VPA＋DDP组较单独用药组减少更为显著,其细胞形态发生较大改变;MTF法及q值计算结果显示,对A549细胞,VPA的增殖抑制作用呈现明显的时间与浓度依赖性,在高质量浓度时（300mg·L-1）与DDP具有协同作用;对NCI—H460细胞,当VPA的质量浓度≤100mg·L-1时,未显示出明显的时间与浓度依赖性,所有浓度均未显示出VPA与DDP的协同作用。VPA联合DDP可以进一步促进A549与NCI—H460的细胞凋亡,导致两细胞中凋亡因子Bcl-2水平的明显下调。联合作用对A549细胞更为明显,可能与该细胞中抑凋亡因子Bcl-2低表达及促凋亡因子Caspase-3、Caspasel8高表达有关。结论VPA能增强DDP对人非小细胞肺癌细胞的增殖抑制作用,联合作用的协同性与药物浓度及细胞类型有关,不同类型细胞对药物敏感性的差异可能与细胞自身表达的凋亡因子的含量有关。     

欧前胡素对顺铂的骨肉瘤细胞抗肿瘤作用的增效作用

目的 研究欧前胡素是否能提高人骨肉瘤细胞(human osteosarcoma cells,HOS细胞)对顺铂的敏感性。方法 HOS细胞用欧前胡素和顺铂处理,MTT法检测体外细胞活力,Western blot检测Bcl-2 蛋白家族成员(Mcl-1、Bcl-2、Bcl-xl、Bad和Bax)的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平和线粒体膜电位的变化情况。构建Mcl-1真核表达载体,MTT法检测Mcl-1表达载体转染对欧前胡素联合顺铂治疗骨肉瘤疗效的影响。结果 欧前胡素在体外可显著提高顺铂对骨肉瘤细胞系HOS的杀伤活性。欧前胡素可显著降低HOS细胞Mcl-1的表达,而顺铂对Mcl-1的表达水平无影响。相比于欧前胡素或顺铂单治疗组,两者联合可显著诱导HOS细胞发生凋亡并降低其线粒体膜电位。体外转染Mcl-1真核表达载体显著降低顺铂联合欧前胡素对HOS细胞的杀伤活性。结论 欧前胡素通过靶向于Mcl-1增强顺铂对骨肉瘤细胞的杀伤活性。     

二氢杨梅素诱导凋亡增敏顺铂抗肺癌A549细胞的研究

目的：探讨二氢杨梅素（dihydromyricetin,DMY）增强肺癌A549细胞对顺铂化疗敏感性的作用及机制,为肺癌减毒增敏治疗提供新思路。方法：体外培养A549细胞,分组（对照组、顺铂组、DMY组、顺铂+DMY组）干预细胞;倒置显微镜观察细胞生长状态;CCK-8检测各组细胞增殖情况;流式细胞术AV/PI双染检测各组细胞凋亡情况;蛋白印迹实验检测凋亡相关蛋白Parp、cleaved Parp、caspase-3、cleaved caspase-3、Bax和Bcl-2表达水平。结果：DMY联合顺铂对细胞的抑制作用显著高于单独应用DMY或顺铂组;流式细胞术AV/PI双染显示联合组的凋亡率显著高于单独用药组;蛋白印记结果显示联合组与单独用药组或与对照组比较总Parp及caspase-3蛋白表达显著降低,cleaved Parp及cleaved Caspase-3蛋白表达显著增加,Bax蛋白水平升高的同时Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比值显著升高。结论：DMY可以增强顺铂对A549细胞的治疗作用,其机制可能与抑制Parp表达介导的线粒体凋亡有关。     

复方木鸡颗粒联合顺铂对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的机制研究

目的探讨复方木鸡颗粒联合顺铂对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡的影响及其潜在的作用机制。方法体外培养人肝癌Hep G2细胞,取对数生长期细胞,将其消化后随机分为对照组,复方木鸡颗粒高、低(10、5mg/m L)剂量组,顺铂组(1mg/m L)和复方木鸡颗粒(5mg/m L)联合顺铂(1mg/m L)组,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用Hoehcst染色法检测细胞凋亡情况,采用免疫荧光联合激光共聚焦分别检测各组细胞中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、蛋白天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、细胞色素C氧化酶(Cyt-C)表达水平。结果与对照组比较,复方木鸡颗粒10、5 mg/mL组及顺铂组、联合组的细胞活力显著降低(P0.01),细胞凋亡显著增加,细胞内Bcl-2蛋白表达显著下调(P0.05、0.01),而Bax、Caspase-9、Cyt-C蛋白显著上调(P0.05、0.01),且联合组在抑制人肝癌Hep G2细胞增殖、促进其凋亡、调控凋亡相关蛋白表达的作用效果最佳。结论复方木鸡颗粒可显著抑制Hep G2细胞增殖并促进其凋亡,其与顺铂联合起到协同增效的效果,其作用机制可能与下调人肝癌Hep G2细胞内抑凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-9、Cyt-C表达水平有关。     

异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联用诱导HeLa细胞凋亡机制的初步研究

目的探讨异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合应用对Hela细胞生长的影响。方法体外培养Hela细胞,分别用顺铂、多西他赛、总酚、顺铂+总酚、多西他赛+总酚处理Hela细胞,并设对照组。MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡率和Bcl-2表达,半定量RT-PCR法检测生存素表达。结果总酚、顺铂和多西他赛对Hela有明显的抑制及促凋亡作用,早期凋亡率分别为(12.80±0.70)%、(18.87±3.79)%和(15.87±3.81)%(P<0.05)。应用总酚、顺铂和多西他赛处理Hela细胞后,Bcl-2表达分别降低(63.63±3.84)%、(49.20±4.08)%和(51.40±6.35)%,生存素表达分别降低(0.636±0.040)%、(0.431±0.048)%和(0.577±0.040)%;联合使用时更明显(P<0.01)。结论异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合可能通过降低Bcl-2和生存素表达促进Hela细胞凋亡。     

姜黄素增加HepG2细胞对顺铂敏感性的作用及机制研究

目的　探讨姜黄素对肝癌细胞株HepG2 对顺铂敏感性的影响及其作用机制。方法　采用不同浓度姜黄素（0、2.5、5、7.5、10 μM）及顺铂（10、20、40、80 μM）单用或联用处理HepG2 细胞株后,通过MTT 检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Real-time PCR 技术检测Survivin、Cyto-C、Bcl2、Bax 的基因表达情况;western blot 检测Survivin、Cyto-C、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax 的蛋白表达。结果　姜黄素以浓度依赖性方式抑制HepG2细胞株Survivin 的mRNA 表达和蛋白表达（P<0.05）;姜黄素联合顺铂处理的HepG2 细胞增殖抑制率及细胞凋亡率较单用顺铂处理均明显增加（P<0.05）;姜黄素联合顺铂可显著抑制Survivin 的蛋白表达,降低Bcl-2/Bax 比例,增加Cyto-C、cleaved caspase-3 蛋白表达（P<0.05）。结论　姜黄素可增加HepG2 细胞对顺铂的敏感性,可能与其抑制Survivin 的表达,降低Bcl-2/Bax 比例,增加cleaved caspase-3、Cyto-C 蛋白的表达有关。     

姜黄素与顺铂联合应用对胃癌SGC-7901的体外抑制作用

目的观察姜黄素、顺铂对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用,并探究其机制。方法体外培养胃癌SGC-7901细胞,姜黄素、顺铂分别单独应用及联合应用后,采用MTT法检测细胞凋亡情况;RT-PCR检测T-Akt、p-Akt、p53 mRNA表达水平的变化;Western blot检测Bcl-2蛋白表达水平变化。结果 MTT结果显示,姜黄素、顺铂均可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05),且联合组肿瘤细胞的凋亡率明显高于单药组(P<0.01);RT-PCR检测显示,与单独给药组相比,联合用药在显著上调T-Akt和p53 mRNA表达的同时,降低p-Akt mRNA的表达(P<0.01)。Western blot结果显示,单独给药、联合用药均能降低SGC-7901细胞中Bcl-2蛋白的表达。结论姜黄素与顺铂均能通过诱导细胞凋亡,抑制胃癌SGC-7901细胞生长,联合用药抑制SGC-7901细胞的增殖可能是通过抑制p-Akt基因、Bcl-2蛋白表达,同时上调T-Akt和p53基因的表达来实现的。     

顺铂诱导人宫颈鳞癌细胞Caski细胞凋亡的分子机制

目的研究顺铂对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及凋亡的影响,探究顺铂诱导宫颈鳞癌细胞凋亡的分子机制。方法运用体外细胞培养,顺铂以不同浓度（20、10、5、2、1μg/ml）作用于人宫颈癌Caski细胞。采用噻唑蓝（MTT）法测定顺铂对细胞杀伤率;用流式细胞检测法测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNALadder现象;Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2等表达;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变。结果顺铂对人宫颈癌Caski细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和剂量依赖性;可使Caski细胞G2/M期比例明显下降（P〈0.01）,S期比例升高（P〈0.01）;诱导细胞凋亡发生;顺铂作用Caski细胞后,Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase3活化,线粒体膜电位改变。结论顺铂在体外可有效抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,可能通过影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布、诱导凋亡发挥抑制细胞增殖作用,其凋亡分子机制与Bcl-2家族表达调控,线粒体膜跨膜电位下降的线粒体参与凋亡途径相关。     

α干扰素增强顺铂诱导的骨肉瘤细胞凋亡

目的探讨α干扰素对顺铂诱导骨肉瘤细胞凋亡的作用及其机制。方法使用α干扰素和顺铂单独或联合处理骨肉瘤U2OS(p53正常)和MG63细胞(p53突变),通过MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测凋亡,Hochest 33258荧光染色检测凋亡形态学变化,RT-PCR检测p53的mRNA表达,Western blot法检测p53、p21、Mdm2、Bax、Bcl-2和PARP蛋白水平的表达。结果药物处理72 h,α干扰素单独对U2OS和MG63细胞的生长无影响,但在U2OS而非MG63细胞中增强顺铂引起的生长抑制和凋亡,并增强凋亡形态学改变和PARP裂解。α干扰素+顺铂可增强p53和Bax的表达,减弱Bcl-2的表达,对p21的表达无影响,α干扰素没有增强顺铂引起的p53的mRNA表达。结论α干扰素通过p53通路在骨肉瘤U2OS细胞中增强顺铂诱导的生长抑制和凋亡。     

大蒜素对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡的影响

目的 研究大蒜素(Allitridi)对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 分别以不同浓度大蒜素(25、50、100 mg·L-1)和顺铂(1.8 mg·L-1)干预对数生长期人喉癌Hep-2细胞,药物干预24 h后经Hoechst染色后利用倒置显微镜观察细胞的形态,采用MTT比色法测定大蒜素对Hep-2细胞的增殖抑制作用,采用FCM测定细胞周期分布、检测细胞凋亡率;采用RT-PCR检测Bax、Bcl-2 mRNA表达水平,Western-blot检测caspase-3蛋白表达.结果 大蒜素各组和顺铂1.8 mg·L-1组人喉癌Hep-2细胞较空白对照组出现不同程度损伤,以大蒜素100 mg·L-1组损伤最为严重;大蒜素(50、100 mg·L-1)组和顺铂1.8 mg·L-1组人喉癌Hep-2细胞增殖抑制率显著升高,细胞周期G0/G1期显著增长、G2/M期显著缩短,细胞凋亡数量明显增多、凋亡率显著升高,凋亡相关基因bcl-2 mRNA表达显著下调而Bax mRNA显著上调、Bax/bcl-2表达比值显著升高,促凋亡蛋白caspase-3表达显著上调,上述均差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 大蒜素对人喉癌Hep-2细胞生长具有抑制作用,其机制可能与大蒜素能够阻滞人喉癌Hep-2细胞周期进程、抑制细胞增殖并促进其凋亡有关.     

汉黄芩素体外抗人喉癌 Hep2细胞增殖、凋亡和侵袭的作用及机制研究

目的：研究汉黄芩素对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响,并探讨其作用机制。方法运用CCK-8检测汉黄芩素对人喉癌Hep-2细胞增殖活性的影响。运用流式细胞仪检测汉黄芩素对人喉癌Hep-2细胞凋亡的影响。运用Hoechst染色法检测汉黄芩素对人喉癌Hep-2细胞核形态变化的影响。运用transwell侵袭实验比较汉黄芩素对人喉癌Hep-2细胞侵袭能力的影响。运用Western blot检测汉黄芩素对人喉癌Hep-2细胞hTERT、Bcl-2、Bax蛋白表达水平的影响。结果 CCK-8法发现汉黄芩素能抑制人喉癌Hep-2细胞增殖,其作用呈浓度依赖性。流式细胞术分析发现汉黄芩素能诱导人喉癌Hep-2细胞发生凋亡。 Hoechst染色发现汉黄芩素能诱导人喉癌Hep-2细胞核形态变化。 Transwell实验发现汉黄芩素能抑制人喉癌Hep-2细胞的体外侵袭能力。 Western blot 检测发现测汉黄芩素能有效降低人喉癌Hep-2细胞hTERT、Bcl-2蛋白表达水平以及增加Bax蛋白表达水平（ P ＜0．05）。结论汉黄芩素在体外能够有效抑制人喉癌Hep-2细胞增殖,诱导细胞凋亡,同时抑制喉癌细胞的体外侵袭能力。其作用可能与调控Bcl-2蛋白家族及hTERT蛋白表达水平相关。     

4-HPR、顺铂对宫颈癌HeLa细胞系凋亡的影响

目的探讨4-羟苯基维胺脂（N-4-hydroxyphenyl retinode，4-HPR），顺铂联合对HeLa细胞系凋亡的影响。方法用四甲基偶氮唑蓝比色法（measurement of trititaed thymidine incorporation，MTT）观察4-HPR、顺铂对HeLa细胞的生长抑制情况；电镜观察4-HPR、顺铂对HeLa细胞超微结构的影响；流式细胞仪检测单用4-HPR、顺铂以及两者联合使用时HeLa细胞凋亡率和细胞周期变化。结果4-HPR，顺铂均可引起HeLa细胞凋亡；二者联合作用时细胞凋亡率增加。结论4-HPR，顺铂均可诱导肿瘤细胞凋亡，二者联合作用时细胞的凋亡率高。     

大蒜素联合顺铂对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用

目的探讨大蒜素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用并探讨其机制。方法取对数生长期HeLa细胞，设对照组、大蒜素（50 μg/mL）组、顺铂（5 μg/mL）组、联合给药组（大蒜素50 μg/mL+顺铂5 μg/mL）。药物干预48 h后，通过MTT法检测细胞增殖抑制率，运用CompuSyn软件计算大蒜素与顺铂联合指数（CI），流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡水平，Western blotting法检测Cyclin D1、CDK2、P27、Cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与大蒜素组和顺铂组比较，联合给药组HeLa细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05、0.01），CI为0.69（提示大蒜素与顺铂具有中度协同效应）。与对照组比较，大蒜素组和顺铂组G₀/G₁期细胞比例和细胞凋亡率显著升高（P<0.05、0.01），Cyclin D1、CDK2、Bcl-2表达显著下调且P27、Cleaved Caspase-3、Bax表达显著上调（P<0.05、0.01），Bax/Bcl-2比值显著升高（P<0.01）。与大蒜素组和顺铂组比较，联合给药组G₀/G₁期细胞比例和细胞凋亡率显著升高（P<0.05、0.01），Cyclin D1表达显著下调且P27、Cleaved Caspase-3、Bax表达显著上调（P<0.05、0.01），Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.01）。结论大蒜素联合顺铂具有协同抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用，可能与调节细胞周期和凋亡相关蛋白表达，进而阻滞细胞周期进程并促进细胞凋亡有关。