ELISA法检测献血者HBsAg应用分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)在献血者HBsAg检测中的应用、影响因素及解决方法。方法利用ELISA法,对无偿献血者血液标本进行HBsAg初检、复检两次检测;实验结果0.7≤s/co<1的标本,使用原试剂进行双孔复试。结果 13796份血液标本,HBsAg阳性共24份;0.7≤s/co<1的标本57份,经双孔复试,阳性标本2份。结论应重视OD值接近临界值标本的复核工作;加强对血液标本、仪器设备及检测试剂的质量管理,规范实验操作,提高重复性;建议生产二步法试剂,避免产生高值钩状效应,提高血液安全水平。     

ELISA检测中全自动加样引起拖带假阳性现象的对策分析

随着全自动加样设备在血液筛查中的广泛应用,其加样过程导致的拖带现象已引起高度关注。笔者在进行血液标本加样检测过程中,发现抗体强阳性标本,引起拖带现象(以抗-HIV为例)进行统计分析,现报告如下。1材料与方法1.1血清标本均来自我站街头无偿献血者。     

ELISA法检测血清HBV抗-HBc假阳性的原因探讨

目的探讨ELISA法检测乙肝病毒抗-HBc假阳性的原因,提高检测结果的准确度。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）,对410例血清先用一种试剂初检,再用另外两种试剂复检,初检呈阳性反应而两种试剂复检均为阴性者判为假阳性。结果在406份标本中用科华公司的试剂检测到抗-HBc阳性标本348份,用英科兴创公司的试剂检测到抗-HBc阳性标本355份,二者符合率为98.0%。其中52份标本用两种试剂复查后抗-HBc均为阴性,假阳性占12.8%。结论用ELISA竞争法检测抗-HBc,由于非特异吸附和操作等多种原因易出现假阳性结果,尤其对于抗-HBs和抗-HBc同时阳性的标本应该复查抗-HBc。     

全自动加样器阳性拖带现象的分析

目的：通过倍比稀释，确定区别anti-HCV强阳性标本和普通阳性标本（不发生阳性拖带）的临界滴度范围。方法用HAMILTON Microlab AT Plus 2全自动加样器对经倍比稀释的anti-HCV强阳性标本和普通阳性标本（不发生阳性拖带）加样，进行ELISA检测，通过对引起阳性拖带现象的强阳性标本临界滴度和不引起阳性拖带的普通阳性标本临界滴度的比较，找到能区别两者的临界滴度范围。结果区别anti-HCV强阳性标本和普通阳性标本（不发生阳性拖带）的临界滴度范围为1：2048~1：4096。结论能够区别anti-HCV强阳性标本和普通阳性标本（不发生阳性拖带）的临界滴度是存在的，并可通过将疑似阳性拖带的标本按照临界滴度倍比稀释后所得结果来快速判断是否是阳性拖带，这在血液检测工作中具有一定的实际意义。     

全自动加样仪一次性加样针在血液检测中的应用

目前，在采供血机构配置的全自动加样仪器所使用的加样针大部分为永久性钢针，其洗针残留液体导致试剂和样本稀释、以及加样导致的拖带污染问题等隐患和缺点，已引起人们高度关注。本站于2007年9月将STAR全自动加样仪配置成一次性加样针（Tip头）对血液进行检测，同时与永久性钢针加样和手工加样两种加样模式进行对比，现报告如下。     

无偿献血者抗-HIV初筛阳性结果与确认试验阳性结果的对比分析

目的分析近五年来本市无偿献血者人群中抗-HIV初筛阳性结果与确认试验阳性结果的对比情况,探讨抗-HIV初筛酶联免疫试剂的假阳性结果及其假阳性献血员的科学回访。方法应用ELISA方法对2008年至2013年间145133名无偿献血者进行抗-HIV1/2检测,初检复检都呈阳性或单试剂双孔复试都呈阳性者,送疾控中心确认,确认阳性者为阳性结果。结果确证抗-HIV1/2抗体阳性7例,感染率为0.0048%。结论在2008年至2013年间初筛检测的145133份无偿献血者标本中的呈阳性反应的212份标本中,被艾滋病确认实验室确认7份标本为阳性,205份为假阳性,假阳性率约是96.7%,与有关文献报道正常人群中抗-HIV1/2的ELISA法普查初筛结果中97%假阳性率值接近。     

全自动酶免分析仪检测HIV拖带阳性解决方法的探讨

【摘要】目的探讨全自动酶免分析仪检测人体免疫缺陷病毒（HIV）拖带阳性的解决办法。方法收集常规筛查中的HIV抗体强阳性标本4份,分别在不使用外部清洗液和使用外部清洗液的情况下．用TECAN150型4针全自动酶联免疫分析仪做阳性拖带模拟试验,观察增加外部清洗液在消除加样针拖带阳性中的作用及其对酶免试验的影响。结果拖带模拟试验中,以CDS—C清洗液作为系统清洗液时,在不使用外部清洗液的情况下,HIV抗体强阳性标本4例都出现了阳性拖带现象。以CLEANER2000清洗液作为外部清洗液的情况下,HIV抗体均无阳性拖带孔出现,并且在使用CLEANER2000清洗液作为外部清洗液的情况下与无外部清洗液比较．HIV的质控品和对照品的实验结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CLEANER2000清洗液作为外部冲洗液能够避免全自动酶免分析仪加样中HIV拖带阳性现象的发生,并且对酶免试验结果无显著影响。     

部队无偿献血者血液质量分析

目的对部队无偿献血者的血液质量进行回顾性分析,评价部队无偿献血者的血液质量。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP;速率法检测ALT。初检、复检使用不同厂家的试剂,由不同人员分别操作。结果采集血液10708份,初、复检不合格者分别为299份和213份;ALT单项不合格者为313份,占总不合格人数的61.1%。结论必须严格执行对献血者血液进行初检、复检两次检测的规定;加强对献血者献血前合理进餐的宣传教育,降低假阳性率,确保血液质量。     

TRUST法与ELISA法检测梅毒螺旋体抗体的对比分析

为了保证输血安全,减少血液检测漏检,《献血法》附件的《献血者健康检查标准》规定:献血者血液检测初检、复检不得使用同一试剂厂家生产的试剂,同一标本的初、复检化验不得由同一人进行。现将TRUST法与ELISA法检测梅毒螺旋体抗体进行对比分析,报告如下。1 材料与方法 1.1 标本来源 胶南市红十字会基层血站2001年11月～2002年4月公民无偿献血者血清标     

广元市无偿献血者抗-HCV检测情况分析

目的 通过对无偿献血者进行抗-HCV检测,防止HCV经血液传播,提高血液质量,确保输血安全.方法 对2006年1月～2010年9月广元市82875名无偿献血者的血液标本,用国产进口抗-HCV试剂盒进行初检和复检,对2种试剂同时阳性或1种试剂为阳性结果者,直接进行血液报废.结果 本组结果显示广元市的HCV感染率较低.结论...     

部队无偿献血者血液报废原因分析（摘要）

2000年1月～2003年12月对31978名部队无偿献血者采血。采血后留取血样，选择两种不同厂家试剂。由2人进行丙氨酸转氨酶(ALT)及ELISA法抗．HCV、抗、HIV、HBsAg和梅毒抗体5项指标的初检和复检。ALT。采用赖氏法检测，初检用微板法，复检用试管法。结果表明，31978人中因5项指标检测结果异常而报废的血液643份，占2．1％。     

ELISA双抗原夹心法在梅毒检测中的重要性分析

梅毒是由苍白螺旋体(treponema pallidum,TP)感染引起的性传播疾病,也是血液传播性疾病之一。由于快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)为非特异性血清试验,敏感性与特异性有一定的局限性,在一期和晚期梅毒的阳性率只有53%~85%[1]。为保证梅毒的检出率,笔者对初检TRUST阴性,复检酶联免疫吸附试验(ELISA)阳性标本做TP抗体血凝试验(TPPA),并对3种方法作一比较。1材料和方法1.1标本来源2006年3月至2008年4月本院手术患者ELISA阳性而TRUST检测阴性的标本,共41例。1.2试剂和方法TP双抗原夹心ELISA试剂由珠海丽珠试剂有限公司生产,批号,20060112TRUST试剂由上海荣盛生物工程有限公司生产,20061015,TPPA试剂由日本富士株式生物工程公司提供,批号VN10804均按试剂说明操作。1.3仪器anthos2010洗板机fluds anthos自动恒温温育振荡器。2结果41例ELISA阳性TRUST阴性标本中TPPA阳性37例(90%),阴性4例(10%)。3讨论TRUST为非特异性血清学试验,在早期梅毒和晚期梅毒以...     

单人份核酸检测在降低输血感染人类免疫缺陷病毒残余风险中的应用

目的 分析单人份核酸检测技术(individual donor-nucleic acid amplification test,ID-NAT)对窗口期人类免疫缺陷病毒(HIV)阳性标本的检出能力,探讨ID-NAT对降低输血感染HIV残余风险的作用.方法 采用Procleix Tigris单人份核酸检测系统和两种不同厂家的ELISA试剂对采集的血液标本进行平行检测,对ELISA检测阴性ID-NAT检测阳性标本进行HIV鉴别试验,并对HIV鉴别阳性的献血者进行追踪检测.结果 采集血液标本196900份,检出ELISA阴性ID-NAT联检阳性标本256例,HIV鉴别实验阳性标本2例.第1例HIV阳性献血者献血后29 d免疫印迹确证试验为HIV-1抗体阳性,且HIV(1+2)抗体及HIV-1 P24抗原ELISA双试剂检测均呈阳性反应.第2例HIV阳性献血者,献血后第0、4、7 d血液标本病毒载量呈上升趋势,第4天仅单试剂ELISA检测呈阳性反应,第7天和第14天时,双试剂ELISA检测已均呈阳性反应,且第30天确证试验为HIV-1抗体阳性.结论 ID-NAT应用于血液筛查可缩短HIV检测窗口期,降低输血感染HIV残余风险,从而有效提高血液安全性.     

ELISA一步法和二步法检测HBsAg及NAT检测HBV-DNA结果分析

目的 依托NAT 检测结果,对ELISA 一步法和二步法检测HBsAg 结果进行比较分析.方法 采用2 种不同厂家试剂一步法对33483 人份无偿献血者血液标本进行检测,二步法对35064 人份无偿献血者血液标本进行检测,剔除双试剂阳性后再进行NAT 检测.结果 ELISA 二步法检测总阳性率明显高于一步法;HBV-JH 及HBV-XC 2 种厂家试剂二步法阳性率均明显高于一步法;2 种试剂厂家一步法检测结果不相符现象无明显差异,二步法检测结果不相符现象有明显差异;二步法双试剂阳性率明显高于一步法;HBV-JH 由一步法改二步法后单试剂阳性越来越高,HBV-XC 由一步法改二步法后单试剂阳性越来越低;经二步法剔除双试剂阳性标本后进行NAT 检测阳性率明显低于一步法剔除双试剂阳性标本后的NAT 阳性率.结论 ELISA 试剂由一步法改二步法后ELISA 阳性率明显增加,NAT 阳性率有了明显下降提示HBsAg 漏检得到一定控制;试剂方法改变过程中不同厂家试剂质量出现了较大差异,各试剂厂家在强调ELISA 血液筛查试剂检测灵敏度的同时,应积极改善其检测特异性,减少假阳性避免血液不必要浪费.     

第三代抗-HCV ELISA试剂盒抗干扰能力分析

目的 了解目前国内用于抗-HCV检测的第三代ELISA试验盒抗干扰能力之间的差异.方法 使用四家国产和一家进口抗-HCV ELISA试剂盒检测,结果呈阳性的样本均用HCV BLOT（免疫转印）检测确认,并对.HCV BLOT测定不确定的样本用RT-PCR方法测定HCVRNA.结果 对所选择的可能存在干扰物质的268份样本,五家ELISA试剂盒测定的假阳性率为0.37%～12.68%.不同厂家的测定结果之间有较大程度的不一致性,随机两家试剂组合,可使假阳性率降至0～2.2%（P＜0.01）.结论 目前国内使用的第三代抗-HCV ELISA试剂盒在抗干扰能力方面差异明显.因此,对抗-HCV初检阳性的标本,应使用不同于初检试剂的国产或进口试剂盒进行复检,条件许可则可用HCV BLOT予以确认.     

核酸检测与酶联免疫吸附试验在血液标本内乙肝病毒检测中的价值

目的 研究核酸检测(NAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)在血液标准内乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)检测中的价值.方法 20140例无偿献血者的血液标本为研究对象,先进行ELISA检测,对ELISA无反应性的标本再进行NAT,跟踪随访并分析检测结果.结果 20140份血液标本中,ELISA检测双试剂阳性6份,单试剂阳...     

无偿献血者血清学标志物检测分析

为了解献血人群4项血清学标志物感染状况及其流行特征,我们对开封市2008年1月-6月无偿献血人群血液4项血清学标志物检测结果做了分析,现报告如下。1材料与方法1.1对象2008年1月至6月到本站献血的9542名无偿献血者,年龄18～55岁。献血主体为军人、农民、工人、大中专院校学生、机关干部和个体经营者。1.2方法1.2.1检测仪器Microlab STAR全自动样品处理器;Mi-crolab FAME全自动酶免分析系统(瑞士)。1.2.2检测试剂HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒初检、复检。均采用ELIEA法,献血前进行HBsAg快速检测。初检试剂HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒,复检试剂HBsAg、抗-HCV、梅毒,抗-HIV,操作按照试剂盒说明书进行。初复检试剂同时检测为反应性者才判断为阳性。抗-HIV和梅毒抗体阳性确认试验由开封市疾控中心完成。2结果见表1。表1开封市无偿献血人群4项血液标志物检测结果例数HBsAg阳性(%)抗-HCV阳性(%)抗-HIV阳性(%)梅毒阳性(%)合计(%)008年1月16126(0.37)10(0.62)04(0.25)20(1.24)008年2月1165...     

进口与国产酶免疫诊断试剂盒试剂的比较探讨

<正>酶免疫诊断试剂盒是基于酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理,利用抗原抗体反应进行的检测方法。其特点是方法简单、快速、成本低且具有较好的特异性和较高的灵敏度。特别适合大批量献血者的筛查。根据1998年国家卫生部规定采供血机构对每份血液标本使用2种不同厂家的试剂进行初、复检[1]的要求。目前我国采供血机构在实施初、复检过程中,部分为国产试剂+国产试剂,部分为国产试剂+进口试剂。对初、复检阳性的标本再用同样的试剂进行双孔复试后确定结果。用不同厂家的试剂进行2次检测可以利用试剂之间的优势取长补短,提高检出率。但如何选择试剂应根据具体要求、     

HBsAg和抗-HCV两次酶联免疫检测方法与血液病毒核酸筛查技术的关联

目的采用酶联免疫方法对抗-HCV、HBa Ag进行检测,以此探讨与分析两次酶联免疫检测措施和NAT技术对HCV、HBV检测的相关性。方法根据酶免检测试剂说明书严格操作,通过ELISA方式常规酶联免疫血液筛查门诊血液标本的抗-HCV与HBs Ag。结果50份HBs Ag阳性血清学筛查标本中,HBs Ag进口与国产酶免检测阳性标本26例,进口阳性标本7例,国产阳性标本6例;48份抗-HCV阳性血清学筛查标本中,进口与国产酶免检测阳性标本13例,进口阳性标本2例,国产阳性标本1例。HBs Ag的单一进口与单一国产试剂ELISA阳性率为0.07%、0.04%,进口与国产双试剂ELISA检测阳性率为0.35%;抗-HCV的单一进口与单一国产试剂ELISA阳性率为0.1%、0.06%,进口与国产双试剂ELISA检测阳性率为0.18%。国产与进口联用试剂检测阳性率明显高于其他两组,P<0.05,具有统计学意义。结论进口和国产抗-HCV、Hbs Ag的ELISA试剂阳性差异性不明显,而进口国产双试剂的酶联免疫检测和核酸检测具有较高相符率。     

ELISA法检测乙肝病毒抗-HBc和抗-HBe假阳性原因分析

目的：通过分析影响酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙肝病毒血清抗-HBe与抗-HBc出现假阳性的因素,旨在找出一些克服办法。方法：对采用酶联免疫吸附试验（ELISA）2次检测出的78例抗-HBc阳性和72例抗-HBe阳性的血清标本,用时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）试剂进行复检,ELISA方法初检呈阳性反应而TRFIA复检为阴性者判为假阳性。结果：ELISA法检测出的78例抗-HBc阳性和72例抗-HBe阳性的血清标本,用TRFIA方法复检出抗-HBc阳性71例,抗-HBe阳性63例,以TRFIA方法为准,ELISA法检测乙肝病毒抗-HBc和抗-HBe假阳性率分别为8.97%和12.50%。结论：有多种影响因素可影响酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙肝病毒抗-HBc、抗-HBe出现假阳性,除了消除其影响因素外,对怀疑假阳性的标本,还应进一步采用更敏感的方法如时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）和化学发光等方法重新检测。