蛇毒毒素的抗肿瘤作用及其在医药领域的应用

目的 探讨蛇毒毒素的抗肿瘤作用及其在医药领域的应用。方法 综述蛇毒毒素的抗肿瘤组分、抗肿瘤作用及其机制的研究进展。结果 蛇毒毒素对多种肿瘤均有抑制作用,具有直接杀伤肿瘤细胞、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制血管再生等作用。结论 对蛇毒毒素抗肿瘤组分及其作用机制进行深入研究,是当前抗肿瘤药物研究的重要方向。     

舟山眼镜蛇毒细胞毒素的分离纯化及其体外抗肿瘤活性

目的从眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素 F(CTX F)并鉴定其活性。方法应用凝胶过滤、离子交换柱色谱及疏水柱色谱等方法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化CTX F ,以SRB法观察CTX F对体外培养癌细胞的杀伤作用。结果眼镜蛇毒粗毒经凝胶过滤获得 4个蛋白峰 ,将CTX所在第Ⅳ峰用阳离子交换柱色谱获A、B、C、D、E、F和G等7个组分 ,其中E、F和G具CTX活性 ,将F组分再经凝胶过滤和疏水色谱进一步纯化得不含磷酯酶A2 (PLA2 )的CTX纯品 ,暂定名为CTX F ,它对多种癌细胞株有杀伤作用。结论应用凝胶过滤、离子交换和疏水色谱等方法可从眼镜蛇毒中获得不含PLA2 的CTX ,其组分F有抗肿瘤活性     

蛇毒抗肿瘤成分的研究进展

目的探讨蛇毒抗肿瘤成分的作用及其在医药领域的应用,为蛇毒成分在抗肿瘤领域的研发提供参考。方法查阅并总结资料文献,对国内外蛇毒抗肿瘤成分的研究进行综述。结果蛇毒具有多种抗肿瘤成分,对多种肿瘤均有抑制作用,可抑制肿瘤相关的基因表达、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管再生与转移等。结论对蛇毒抗肿瘤成分进行深入研究,开发其在抗肿瘤药物研究领域的价值。     

蛇毒抗肿瘤蛋白心脏毒素的分离纯化与鉴定

目的:对蛇毒抗瘤蛋白的活性组分进行分离与鉴定。方法:采用 RP-HPLC 分离蛇毒抗瘤蛋白各组分,收集纯化组分Ⅱ。RP-HPLC 及 SDS-PAGE 测定组分Ⅱ的纯度;MALDI—TOF 质谱仪测定组分Ⅱ的相对分子质量;对组分Ⅱ进行 N-末端氨基酸序列测定。结果:蛇毒抗瘤蛋白组分Ⅱ经 RP-HPLC 和 SDS-PAGE 分析为单一成分,MALDI-TOF 质谱仪测得其相对分子质量为6719.49,其 N-末端氨基酸序列为 L-K-C-N-K-L-V-P-L-F-Y-K-T-C-P。结论:经分离鉴定,蛇毒抗瘤蛋白组分Ⅱ为心脏毒素。     

眼镜蛇毒粗纯蛋白的柱层析分离及其各馏分的抗肿瘤活性研究

目的:眼镜蛇毒粗纯蛋白的分离及其馏分抗癌活性研究。方法:应用离子交换层析法分离眼镜蛇毒粗纯蛋白,通过高效液相色谱行为分析、含量测定和抗肿瘤活性试验对各馏分进行了性质研究。结果:以Tris-HCl缓冲液(20 mmol.L-1,pH8.0)为洗脱体系,在DEAE-sephacel填料离子交换柱上对眼镜蛇毒粗纯蛋白以0～0.5 mol.L-1氯化钠的Tris-HCL溶液进行线性梯度洗脱,可得到4个洗脱峰。第1个洗脱峰馏分抗癌活性最强,含有两类疏水性、紫外吸收特性各异的蛋白混合物;另3个洗脱峰对应馏分蛋白成分较单一。结论:眼镜蛇毒粗纯蛋白分离馏分对体外培养的癌细胞株有一定的抑制作用。     

蛇毒抗肿瘤作用及其机制研究进展

目的总结蛇毒抗肿瘤作用及其机制研究进展,为蛇毒抗肿瘤成分的开发研究提供参考。方法查阅国内外文献资料进行整理和归纳。结果蛇毒具有直接杀伤肿瘤细胞,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制血管形成,提高人体免疫力等作用。结论对蛇毒抗肿瘤作用机制进行深入研究,其在抗肿瘤方面有相当大的发展空间。     

蛇毒膜毒素抗肿瘤机制的研究进展

蛇毒是从毒蛇的毒腺中分泌出来的一种毒液,主要成份为蛋白质和多肽。其中的膜活性多肽（membrane active polypeptide）是一种碱性蛋白,其毒性通过破坏细胞膜而实现，又被称为膜毒素（membrane toxin，MT）。因膜毒素具有多种生物学活性，是一类对心脏具有毒性又有抗癌活性的组份，又被称作心脏毒素（cardiotoxin，CTX），[第一段]     

蜂毒素的纯化方法及体外抗肿瘤作用研究

目的从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 ,观察其体外对多种肿瘤细胞的生长抑制作用。方法用SephadexG 2 5、SephadexG 5 0、SephadexG 75进行 3步色谱法从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 ,以高效液相色谱法进行含量测定 ;溴化四唑蓝比色法观察蜂毒素对SMMC 772 1、BEL 74 0 2和Hep 3B等 3种肿瘤细胞的生长抑制作用。结果高效液相色谱测定结果显示供试品为单峰 ,保留时间与对照品一致 ;蜂毒素剂量依赖性地抑制 3种受试肿瘤细胞的生长。结论以凝胶过滤色谱可制得高纯度的蜂毒素 ,蜂毒素在体外呈现出明显的抗肿瘤作用     

五步蛇蛇毒化学成分分析及其抗肿瘤活性筛选研究

目的:对五步蛇蛇毒进行化学成分分析及其抗肿瘤生物活性研究,为蛇毒成分在抗肿瘤领域的进一步开发提供参考.方法:采用考马斯亮蓝法测定五步蛇蛇毒总蛋白含量,SDS-PAGE法分析蛇毒蛋白成分;以肝癌细胞Hep G2、乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象,采用MTT法对蛇毒抗肿瘤活性进行筛选.结果:蛇毒总蛋白平均含量为65...     

蛇毒蛋白基因的大肠杆菌表达研究进展

蛇毒是多种生物活性蛋白和多肽的混合物，由于蛇毒在基础医学和临床上的特殊作用以及天然蛇毒蛋白获取方法的局限性，采用生物工程方法规模化生产高纯度的蛇毒蛋白已成为当前及今后的研究方向。该文就蛇毒蛋白基因在大肠杆菌中表达的研究近况进行介绍。     

新生儿用地西泮栓剂的稳定性考察

目的 　研究新生儿用地西泮栓剂的稳定性。方法 　用反相高效液相色谱法测定地西泮含量 ,通过初均速法对地西泮栓剂作稳定性实验 ,并与留样观察作对照。结果 　地西泮栓剂的热解反应活化能为 2 3 .0 75 kcal· mo L- 1 ,室温 (2 5℃ )贮存期为 3 43 d,与留样观察 3 60 d结果也基本相符。 结论 　初均速法测定新生儿用地西泮栓剂的稳定性方便可行。     

TAT-EGFP融合蛋白对小鼠生物膜穿透性的研究

探讨TAT-穿透生物膜的效应,为临床上应用生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供实验基础。按分子克隆常规操作构建pET28a-TAT-EGFP重组表达载体,转导入宿主菌BL21后用IPTG诱导TAT-EGFP融合蛋白表达,经镍金属鳌合层析柱纯化获得融合蛋白。通过腹腔注射到小鼠体内,观察TAT-EGFP融合蛋白穿透各组织生物膜及达到各组织的时间、浓度。腹腔注射TAT-EGFP,30 min后各主要脏器经检测均有荧光出现,4 h各组织荧光强度达最大值。证明在生物大分子的N-末端加上TAT具有穿透力的蛋白转导区肽段形成的融合蛋白可有效穿透细胞膜到达各组织。     

儿茶药材化学成分分析——反相高效液相色谱法测定儿茶中儿茶素和表儿茶素的含量

目的：测定儿茶中主要成分儿茶素及表儿茶素的含量。方法：采用反相高效液相色谱法,以儿茶素及表儿茶素为对照品。结果：按选定的色谱条件,儿茶素及表儿茶素分别在０２５６～１２８、０７２８～３６４１μｇ范围内线性良好。２种成分的平均加样回收率分别为１００１％和９６０％,ＲＳＤ分别为２４％和２７％（ｎ＝５）。结论：本方法操作简便、快捷,重现性好。     

复方止咳颗粒中甘草酸含量测定方法学研究

目的采用RP-HPLC法对复方止咳颗粒中甘草酸的含量进行测定。方法采用Kromasil C18柱,流动相:甲醇-1%醋酸溶液(68∶32),流速:1.0mL.min-1,检测波长:250nm。结果甘草酸在0.17～4.25μg范围内有良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为98.4%,RSD为0.94%。结论本法简便快捷,结果准确,重复性好。     

桂枝挥发油化学成分的GC／MS分析

目的 :用气相色谱 -质谱法对桂枝挥发油进行化学成分的分析。方法 :采用水蒸气蒸馏法从桂枝中提取挥发油。试用不同类型的毛细管柱进行分析 ,找出最佳分析条件 ,用归一化法测定其百分含量 ,并用气相色谱-质谱法对化学成分进行鉴定。色谱条件 :SE - 5 4毛细管柱 (2 5m× 0 2 5mm ,0 2 5 μm) ,柱温 90℃ (8min)4℃·min-12 30℃ (10min) ;分流进样 ,分流比 1∶5 0 ;进样温度 2 5 0℃ ,FID检测器 ,温度为 2 5 0℃。结果 :共鉴定了 37个成分 ,占挥发油总成分的 92 %以上。结论 :本方法稳定可靠 ,重现性好 ,适用于中药挥发油的化学成分分析     

蛋白多肽类药物体内动力学分析方法的研究新进展

蛋白多肽类药物由于其在生物体内含量低、半衰期短和易受内源性物质干扰等特点而使其体内动力学的研究面临很多挑战。生物样品分析方法是进行药物体内动力学研究的基础。综述了研究蛋白多肽类药物体内动力学的常规分析方法:免疫学分析法、同位素标记示踪法、生物检定法和理化分析技术。展望了荧光标记近红外检测技术在蛋白多肽类药物体内动力学无损实时在位分析上的应用前景。     

银翘解毒浓缩丸的质量标准研究

目的:建立银翘解毒浓缩丸的质量控制方法.方法:采用TLC法鉴别荆芥、牛蒡子、桔梗、连翘;用RP-HPLC法测定绿原酸的含量.结果:薄层色谱斑点清晰,空白对照无干扰;绿原酸在0.051 3～0.461 7μg范围呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为100.52%,RSD=1.37%.结论:方法简便,结果准确,可用于该制剂的质量控制.     

蒙药复方协日嘎四味汤散的化学成分研究

目的:研究蒙药复方协日嘎四味汤散的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱法和柱色谱法分离纯化复方协日嘎四味汤散的提取物,根据其理化性质并运用波谱技术鉴定化合物结构。结果:从复方协日嘎四味汤散中分离得到11个化合物,经鉴定为黄柏酮(1)、黄柏内酯(2)、十六烷酸(3)、去甲氧基姜黄素(4)、姜黄素(5)、小檗碱(6)、双去甲氧基姜黄素(7)、姜黄醇(8)、香草酸(9)、汉黄芩素(10)、京尼平苷龙胆二糖苷(11)。结论:鉴定的11个化合物均为首次从该复方中分离得到。本试验结果可为复方协日嘎四味汤散的药效物质基础研究提供依据。     

荜澄茄RP-HPLC指纹图谱研究

目的建立荜澄茄药材RP-HPLC指纹图谱研究方法。方法采用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液进行梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长254和268nm,柱温35℃,分析时间70min。结果在HPLC指纹图谱中,确定了14个共有峰,并对16批不同产地荜澄茄药材相似度进行了比较。结论荜澄茄药材指纹图谱特征性、专属性强,为荜澄茄的质量控制提供了依据。     

石花多糖脱蛋白工艺研究

［摘要］目的对地衣类石花多糖进行脱蛋白处理，筛选最佳方法。方法采用Sevag法、酶法、Sevag/酶法、三氯醋酸 正丁醇法、酶法结合三氯醋酸 正丁醇等5种方法对石花多糖进行脱蛋白处理。结果酶法结合三氯醋酸 正丁醇联合使用脱蛋白效果较其他4种方法好。结论酶法和三氯醋酸 正丁醇联合使用脱蛋白方法，当蛋白酶用量为底物浓度的1%，pH为7时，50 ℃水浴酶解3 h，再加入与多糖溶液同体积的三氯醋酸 正丁醇液（V/V＝1：10），振摇20 min，静置1.0 h，蛋白质去除率最高且多糖损失较少，是一种良好的脱蛋白方法。