2D-HPLC-QTOF法对比阿培南开环物鉴定

摘要：目的 建立在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱(2D-HPLC-QTOF)法鉴定比阿培南开环物的质谱方法。方法 采 用在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法,一维液相进行分离,二维液相进行脱盐后直接进行质谱分析,根据推测结构进行 化学合成该杂质,然后进行核磁结构确认。结果 该方法有效地解决了比阿培南流动相中含不挥发性盐的色谱系统不适用于液 相色谱-质谱快速鉴定杂质的难题并确认该未知杂质为比阿培南开环物。结论 该方法可以快速、简便、灵敏、准确地用质谱来 定性测定比阿培南中的开环物。     

凝胶色谱法测定比阿培南聚合物的含量

目的：建立比阿培南聚合物的测定方法。方法：采用葡聚糖凝胶SephadexG-10不锈钢柱（10min×300mm）,流动相A：磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钾5．59g,与磷酸二氢钾0．41g,加水使其溶解成1000ml）;流动相B：水;流速为0．3ml／min;检测波长为254nm;进样量为200ul;柱温为室温;对照品采用法罗培南。结果：比阿培南在100．40～400．55mg／ml范围内,浓度与聚合物的峰面积呈良好线性关系（r=0．9999）。结论：凝胶色谱法方法简便,结果可靠,可以用于比阿培南中高分子聚合物杂质的检测。     

高效液相色谱法测定青霉素盐的有关物质

目的建立青霉素钠（钾）中有关物质检查的高效液相色谱（HPLC）法。方法采用C18柱,以磷酸盐缓冲液（0．1mol／L磷酸二氢钾溶液用磷酸调pH至2．5）-乙腈（80：20）为流动相A,以磷酸盐缓冲液（0．1mol／L磷酸二氢钾溶液用磷酸调pH至2．5）-乙腈（75：25）为流动相B,采用线性梯度洗脱,流速1．0mg／mL,检测波长225nm。结果在所建立的色谱条件下,各色谱峰峰形正常,保留时间适中,主成分峰与各杂质峰分离良好。结论所建立的HPLC法简便、准确、灵敏,可同时对产品中的有关物质进行准确监控。     

注射用美罗培南有关物质测定方法学研究

目的：建立注射用美罗培南有关物质的测定方法。方法：采用HPLC法,0.1%三乙胺溶液∶乙腈（93.5∶6.5）为流动相,检测波长为220nm,柱温为40℃。结果：美罗培南开环物（杂质A）、美罗培南、美罗培南二聚体（杂质B）间的分离度良好,纯度系数均大于0.99。结论：该方法简便、专属性强、重现性好,可用于注射用美罗培南的杂质检查。     

阿莫西林/克拉维酸钾原料及制剂中有关物质测定方法的比较

目的建立两种HPLC线性梯度洗脱测定阿莫西林／克拉维酸钾有关物质的方法，并对其进行比较。方法两种方法均采用C18柱，流速1．0mi／min，所用流动相为磷酸盐缓冲液：乙腈色谱系统。方法一中流动相A为0．05mol／L磷酸盐缓冲液（pH5．0）；乙腈（99：1），流动相B为0．05mol／L磷酸盐缓冲液（pH5．0）：乙腈（80：20）；方法二中流动相A为0．01mol／L磷酸盐缓冲液（pH6．0），流动相B为0．01mol／L磷酸盐缓冲液（pH6．0）：乙腈（20：80）。两种方法的梯度变化不同。方法一和方法二的检测波长分别为254和215nm。结果两种方法的线性范围、检测限及测定结果基本一致。结论两种方法准确，专属性强，灵敏度高，适用于阿莫西林／克拉维酸钾中有关物质测定，且方法一的稳定性优于方法二。     

HPLC法测定比阿培南二聚物方法研究及其降解途径考察

目的:建立了测定比阿培南二聚物的高效液相色谱法,同时考察二聚物的降解途径。方法:采用高效液相色谱法:色谱柱为C18柱,流动相为0.05%三氟乙酸溶液-乙腈(92∶8),检测波长为318 nm,流速为1.0 mL.min-1。结果:比阿培南溶液浓度在0.000 2～0.076 8 mg.mL-1范围内,溶液浓度与峰面积线性关系良好(r=1.000)。比阿培南二聚物A和二聚物B测定结果的重复性良好,RSD(n=6)分别为2.5%和0.8%。结论:本方法操作简便,结果可靠,可以用于比阿培南中二聚物的检测。     

HPLC法测定利格列汀原料药的有关物质

目的：采用HPLC法测定利格列汀原料药的有关物质。方法采用C18（150mm ×4．6mm,5μm）色谱柱,流动相A为0．1％磷酸;流动相B为乙腈,梯度洗脱;流速为1mL? min －1,检测波长为225nm。结果利格列汀及其已知杂质（杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E）的线性范围分别为0．05～1．2μg? mL －1;平均回收率分别为97．5％、100．2％、103．6％、97．6％和99．0％。结论本法简便、准确、可靠、适合于利格列汀原料药有关物质测定。     

非布索坦的有关物质测定方法研究

目的：探讨非布索坦有关物质测定的最佳方法。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）,用Hyseril ODS-BP色谱柱,采用梯度洗脱的方式进行检测。流动相A为乙腈-0．1％醋酸铵溶（60：40,用冰醋酸调节pH值至4．6）;流动相B为乙腈;检测波长340nm;流速1．0ml／min。结果：检测纯度因子均为0．9999,检测限为0．1ng。结论：HPLC测定非布索坦有关物质准确、简便、快速,可对产品中的有关物质进行准确监控。     

高效液相色谱法测定呋布西林钠的含量及有关物质

目的探讨用高效液相色谱（HPLC）法测定呋布西林钠的含量及有关物质。方法采用C18柱，以磷酸盐缓冲液（0.1mol／L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH值至3.5）-乙腈（80：20）为流动相A，以磷酸盐缓冲液（0．1mol／L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH值至3．5）-己腈（75：25）为流动相B，对含量测定以流动相B等度洗脱，对有关物质测定以线性梯度洗脱，流速为1．0mL／min，检测波长为225nm。结果呋布西林钠质量浓度的线性范围为0．02256～0．9024mg／mL，r=0．9999，平均加样回收率为99.8％，RSD为0．60％（n=6）。结论HPLC法简便、准确、灵敏度高，可同时对产品的含量及有关物质进行准确监控。     

梯度洗脱HPLC法测定头孢唑肟钠的有关物质

目的 建立梯度洗脱HPLC法测定头孢唑肟钠的有关物质。方法 采用DiamonsilC1．（4.6mm×150mm，5μm）色谱柱，0．01mol／L磷酸二氢钾溶液（用lmol／L磷酸调pH为4．0）为流动相A，甲醇：乙腈：水（250：200：50）为流动相B，梯度洗脱，流速1．0ml／min，检测波长254nm，柱温35℃。结果 头孢唑肟在1．0～31．79g／ml范围内，浓度与峰面积呈良好线性关系，r=0．9999。结论 本法简便，准确，可定量测定头孢唑肟钠的有关物质。     

反相高效液相色谱法测定注射用比阿培南聚合物杂质含量

目的 对注射用比阿培南聚合物进行定量检查,采用HPLC-TOF-MS法鉴别其聚合物.方法 用Century SIL C18 BDS (250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相A为乙腈,B为0.01 mol·L-1碳酸氢铵溶液,洗脱程序:0～27 min,99％～70％B; 27～40 min,70％B,流速为1 mL·min-1,柱温(30±0.15)℃,检测波长220hm.采用自身对照法测定比阿培南聚合物的含量,并采用高效液相色谱飞行时间质谱(HPLC-TOF-MS)鉴定聚合物杂质.结果 自身对照法能准确测定比阿培南中聚合物含量,用液质联鉴定出含有2种聚合物.结论 采用高效液相色谱法和液质联用技术能对比阿培南聚合物杂质进行定性定量分析,方法简易准确可行.     

HPLC法测定曲安奈德益康唑乳膏中的有关物质

目的:建立测定曲安奈德益康唑乳膏中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Venusil ASB C18,流动相A、B分别为甲醇-0.077%醋酸铵溶液(20∶80,V/V,磷酸调节pH至4.5)和甲醇-乙腈(40∶60,V/V),梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为225 nm,柱温为35Ⅴ,进样量为10μl。结果:曲安西龙、硝酸咪康唑以及3个单个未知杂质均能与曲安奈德益康唑乳膏中的主成分完全分离;曲安西龙、硝酸咪康唑的检测质量浓度分别在1.071⁸.568、1.0398.568、1.039⁸.312μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 8、0.999 6),检测限分别为5.15、7.31 ng,定量限分别为15.69、21.97 ng。结论:该方法灵敏、准确、专属性强、重复性好,可用于曲安奈德益康唑乳膏的质量控制。     

复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪和氯氮的有关物质分析

目的:建立测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪和氯氮产生的有关物质。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为ZORBAX SB-C8,流动相为0.05 mol/L磷酸二氢铵(p H 3.2)-甲醇(梯度洗脱),检测波长为254 nm;按照对照品保留时间归属各杂质及采用液质联用法确定氯氮中的杂质,面积归一化法计算51批10个企业样品中有关物质的量。结果:主成分与有关物质能有效分离,且空白辅料和其他组分对检测成分未见干扰,盐酸氯丙嗪和氯氮中杂质检测限分别为2.5、2 ng;51批次样品检查结果显示盐酸异丙嗪的杂质量较低(均低于1%),而氯氮的杂质量普遍较高(大多在2%⁵%),且后者中的主要杂质为7-氯-5-苯基-1,3-二氢-1,4-苯并二氮杂-2-酮(4-氧化物)。结论:本方法可用于分析复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪和氯氮产生的有关物质。     

长春西汀注射剂中有关物质定位的数字化研究

目的：用相对保留时间（RRT）的方式定位长春西汀注射剂4个已知杂质。方法：考察长春西汀4个杂质的RRT对不同的色谱仪、试剂、色谱柱及色谱条件的耐用性,确定理想的色谱方法。结果：确定流动相0．2mol·L^-1醋酸铵溶液-乙腈（40：60）（pH6．83）及不同品牌的5根色谱柱,杂质a,d,b,c和主成分的RRT分别为0．4,0．66,0．78,0．87和1。结论：通过对此方法的耐用性考察,探讨了杂质对照品定位数字化的影响因素和应对方法,希望对今后标准研究工作具有一定的借鉴作用。     

分子排阻色谱法测定头孢地尼胶囊中的高分子杂质

目的:建立测定头孢地尼胶囊中高分子杂质的方法。方法:采用分子排阻色谱法。色谱柱为依利特SephadexG-10,以0.025mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH7.0)为流动相A(供试品测定),以水为流动相B(对照品测定),流速为1.5mL·min-1,检测波长为254nm。结果:头孢地尼与高分子杂质分离度良好,头孢地尼检测浓度线性范围为3.95～11.85μg·mL-1(r=0.9995),精密度试验RSD=1.67%,检测限为9.9ng。结论:该方法简单、快速、准确、重复性好,可用于头孢地尼胶囊中高分子杂质的检测。     

盐酸安非他酮缓释片中的有关物质研究

目的建立同时测定盐酸安非他酮缓释片中3种杂质的反相HPLC方法,并对未知杂质进行定性研究。方法采用Agelar Venusil MP C18（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-三氟乙酸-水（10：0.04：90）为流动相A,乙腈-三氟乙酸-水（95：0.03：5）为流动相B,梯度洗脱,检测波长226 nm,对已知杂质进行定性、定量分析。未知杂质用制备液相色谱纯化,再采集质谱和核磁共振谱的数据,用于结构确定。结果在选定的色谱条件下,盐酸安非他酮与各杂质峰均能良好的分离,方法学考察符合分析检测要求。根据质谱和核磁共振谱数据,对分离提纯的未知杂质进行结构确认。结论建立的方法简便、灵敏,专属性好,可同时测定盐酸安非他酮缓释片中3种杂质,对未知杂质结构的确定,为盐酸安非他酮的质量研究提供了依据。     

高效液相色谱法测定盐酸氨溴索注射液中有关物质含量

目的：建立盐酸氨溴索注射液中有关物质定量的高效液相色谱（HPLC）法。方法采用高效液相色谱双波长法测定含量。色谱柱为XB-C18柱（Agilent Zorbax 250 mm ×4.6 mm,5μm）,0.01 mol/L磷酸氢二铵溶液（用磷酸调节pH至7.0）-乙腈（42：58）为流动相,检测波长为250 nm（检测盐酸氨溴索、杂质B与其他杂质）与238 nm（检测杂质E）,柱温为40℃,流速为1.0 mL/min,进样量为20μL。结果杂质A进样量在0.020~20.02μg范围内与峰面积呈良好线性关系（ r=0.9999）;杂质B进样量在0.0602~20.08μg范围内与峰面积呈良好线性关系（ r=0.9996）,平均回收率为99.6%（ n=6）;杂质D进样量在0.0607~20.22μg范围内与峰面积呈良好线性关系（ r=0.9991）;杂质 E 进样量在0.061~20.16μg范围内与峰面积呈良好线性关系（ r=0.9993）,平均回收率为99.8%（ n=6）;盐酸氨溴索（λ=250 nm和λ=238 nm）进样量在0.060~20.16μg范围内与峰面积呈良好线性关系（ r=0.9997,r=0.9995）。结论该方法定量准确可靠,方法简便、操作简单、灵敏度高,适用于盐酸氨溴索注射液中有关物质质量控制。     

苄星青霉噻唑酸有关物质及纯度测定方法的建立

目的：建立苄星青霉噻唑酸有关物质和色谱纯度测定的HPLC法.方法：采用端基封尾完全的C18柱,流动相A为0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH至3.1）,流动相B为甲醇,流速为1.0ml·main-1,线性梯度洗脱,柱温为40℃,检测波长为220 nm.结果：苄星青霉噻唑酸分别与相邻杂质峰分离完全,检测限为3ng.结论：本法专属、灵敏,适用于首批苄星青霉噻唑酸杂质对照品的标定.     

HPLC-MS法测定甲磺酸多拉司琼原料药中有关物质和异构体含量

目的:建立甲磺酸多拉司琼原料药中有关物质和异构体含量测定的方法。方法:采用高效液相色谱-质谱法测定3批甲磺酸多拉司琼原料药中的有关物质和异构体含量。色谱柱为shim-packVP-ODS;流动相A为0.01mol·L-1甲酸铵溶液(用三乙胺调m节inp-H1;至检7测.0)波-乙长腈为(29150∶5n)m,。流质动谱相条B件为采0.0用1电mo喷l.雾L-电1甲离酸源铵(E溶S液I)(、正用离三子乙检胺测调节模式pH。至结7果.0):-有乙效腈(分2离7∶了73)甲,磺梯酸度多洗拉脱司,流琼速与为有1关.0物mL质.及异构体(R>1.5),甲磺酸多拉司琼的最低检测限为0.5ng,3批样品中单个杂质含量≤0.05%,总杂质含量<0.1%,异构体未检出。结论:本方法准确、专属性好,适用于甲磺酸多拉司琼原料药中有关物质和异构体的检测。