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0引言卜葡萄糖醛酸耷酶(以下简称eG)是溶酶体内的一种水解糖昔酶,与机体的许多生理、病理及药物代谢过程关系密切「“.近年研究表明,该酶的活性高低,与肿瘤的恶性程度及侵袭能力有关.抗体导向前体酶解前体药疗法(ADEPT)已将该酶作为重要的研究对象”’,为了特异地研究pG作为前体酶及预施前体药抗肿瘤的生物学效应,我们构建了含人pG一全片段的逆转录病毒表达载体pDOR-pG,为探讨pG对肿瘤生物学行为的影响及基因治疗奠定了基础,1材料和方法1.l材料pGEM-4-pG质粒由加拿大Toronto大学KyleJW教授惠赠,在其ECORI位点… 相似文献
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抗β—葡萄糖醛酸苷酶抗体的制备及意义 总被引:2,自引:0,他引:2
0引言β-葡萄糖醛酸告酶(eG)为溶酶体内的一种酸性水解糖着酶,该酶与机体的许多生理、病理及药物代谢过程关系密切。近年研究证明该酶的活性高低与肿瘤的恶性程度及侵袭能力有关。制备抗RG抗体对该酶的定性、定位和原位定量研究及对肿瘤组织和血液中游离6G的定量分析等具有重要意义。国内外尚未见抗RG抗体的商品供应,为此我们制备了兔抗pG抗体。回材料和方法采用pG(Sigma公司,EC3.2.1.3.l)为抗原,经背部多点皮下注射的方法免疫体重1.8kg~2.5kg的雄性新西兰大白兔(3只)及1.8kg~2.0kg日本大耳白兔门只),每只动物一… 相似文献
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目的:通过观察β-半乳糖苷结合蛋白-3(Galectin-3)与β-葡萄糖醛酸苷酶(β-G)在大肠癌组织中的表达,与大肠癌的生物学特征进行比较,以探讨其临床意义.方法:采用SP免疫组织化学方法检测98例临床新鲜标本,其中包括15例癌旁正常大肠黏膜组织及83例大肠癌组织中galectin-3和β-G的表达情况,并进行两种蛋白的表达相关性分析. 结果:Galectin-3和β-G蛋白在浸润程度深、分化程度低及Dukes分期较晚的大肠癌组织中的表达高于浸润程度浅(0.15±0.03 vs 0.16±0.05, P=0.02)、分化程度高(0.15±0.012 vs 0.16±0.03, P=0.03)及Dukes分期较早(0.18±0.06 vs 0.17±0.05)的大肠癌组织(P<0.05);在大肠癌组织中,galectin-3的表达和β-G的表达呈正相关(r=0.628,P<0.01). 结论:Galectin-3和β-G的异常表达在大肠癌的发生、发展中起着重要作用,具有一定的诊断价值. 相似文献
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目的 同步探讨原发性肝细胞癌组织中β-葡萄糖醛酸酶(β—G)mRNA及蛋白的表达和肿瘤分级的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反β(RT—PCR)方法和Westemblot法,对25例原发性肝细胞癌组织和10例正常肝脏组织进行检测。结果β-GmRNA在正常肝及肝癌组织中均有表达.但在不同分化程度肝癌组织中的表达有显著差异,分别是高分化组(2.24±1.12)、中分化组(3.91±1.32)和低分化组(5.86±1.69);β-G蛋白在上述组织中的表达同样呈显著差异,分别是高分化组(0.24±0.08)、中分化组(0.49±0.12)和低分化组(0.96±0.18),两者均随着肿瘤恶性程度的增加而表达呈递增趋势。结论β-G与原发性肝细胞癌密切相关,随着癌细胞恶性程度的增加,β-G其表达量呈逐步递增,提示β-G可能参与肝细胞的癌变过程。 相似文献
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目的观察结肠黏膜上皮细胞内β-葡萄糖醛酸酶在超微结构水平的精确定位。方法应用低温包埋、紫外线照射、胶体金标记、免疫电镜技术,在透射电镜下观察由White树脂包埋后的结肠黏膜上皮细胞内的β-葡萄糖醛酸酶。结果结肠黏膜上皮细胞的内质网、溶酶体内散在分布着标记β-葡萄糖醛酸酶的金颗粒,表明该酶主要分布于上述几种细胞器内。结论本研究为进一步研究结肠的各种疾病尤其是肿瘤中β-葡萄糖醛酸酶活性的变化,建立了实用的形态学模型。 相似文献
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肝癌细胞内逆转录病毒介导β-葡萄糖醛酸苷酶基因的表达 总被引:2,自引:2,他引:0
目的 建立高表达β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glu)的肝癌细胞株。方法 采用脂质体介导法,将重组逆转录病毒表达载体pDOR-βG转染肝癌细胞,G418筛选出阳性克隆,用免疫组化法、酶组织化学法、原位杂交法及酶活性测定等方法观察β-Glu表达情况。结果 共获得4株转染阳性克隆,其中F1,H4为β-Glu高表达克隆。免疫组化法发现转染细胞β-Glu免疫阳性物质主要分布于胞质及胞核内,酶组织化学法观察转染细 相似文献
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胆红素钙结石兔模型β-葡萄糖醛酸酶的变化 总被引:4,自引:0,他引:4
通过胆红素钙结石病兔模型,用生物化学和酶组织化学的方法,动态、系统地观察兔肝胆组织和胆汁中细菌性和组织源性β-葡萄糖醛酸酶在色素石成石过程中的变化,证实内、外源性β-葡萄糖醛酸酶均可参加成石过程。外源性β-葡萄糖醛酸酶在成石前期迅速升高,以后随胆道感染被控制而下降。内源性β-葡萄糖醛酸酶在成石初期逐渐升高,以后长期维持在较高水平,在成石初期和生长期的作用不容忽视。作者还讨论了β-葡萄糖醛酸酶在成石中的作用。 相似文献
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0 引言 恶性肿瘤常见有多种酶的改变 [1 -3 ] ,近年发现 [1 ,4]肿瘤细胞含有大量的β-葡萄糖醛酸酶 ,β- GCD的水平与存活的细胞数有相关性 .采用 ELISA法测定健康人 35例 ,良性肿瘤患者 30例及恶性肿瘤患者 67例血清 β- GCD及 CEA,观察β- GCD治疗前后的变化如下 .1 材料和方法1 .1 材料 收集本院恶性肿瘤患者血清 67例 ,年龄 33~ 74(平均 44)岁 .原发未治疗癌 36例 ,转移癌 31例 (其中肺和胸壁转移癌 1 1例 ,骨转移癌 9例 ,远端淋巴结转移癌 6例 ,肝转移癌 3例 ,多器官转移癌 2例 ) .追踪转移癌 1 7例治疗前后 β-GCD和 C… 相似文献
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胆汁内源性β-葡萄糖醛酸酶真实活力的观察陈道纯,陈锡谋,林谷珍关键词:β-葡萄糖醛酸酶,胆汁,胆结石胆汁内源性β-葡萄糖醛酸酶(β-G)与胆道的结石、炎症和损伤等有密切关系,本文观察胆汁β-G活力受胆汁成分干扰的程度,探讨β-G真实活力的观察方法,并... 相似文献
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胆汁内源性β-葡萄糖醛酸酶的酸化沉淀浓缩陈道纯,陈锡谋,林谷珍关键词:β-葡萄糖醛酸酶,胆汁,乙酸缓冲液为从胆汁分离内源性β-葡萄糖醛酸酶(β-G),须先把胆汁浓缩。我室近年建立了一种酸化沉淀浓缩方法,兹报告实验结果。1材料和方法1.1胆汁为胆结石病... 相似文献
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作者测定了二株脆弱类杆菌与大肠杆菌3360(O_(157)K_(88))株的β-G活性,并进行了比较。结果表明:脆弱类杆菌ATCC25285的β-G平均活性为94.7u,明显高干脆弱类杆菌CDC14462株及大肠杆菌3360株。作者选定脆弱类杆菌ATCC25285株为胆红素结石动物模型的模式菌株。 相似文献
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淋巴细胞内β—葡萄糖醛酸酶超微结构定位研究 总被引:3,自引:3,他引:0
应用低温包埋,紫外线照射,胶体金标记免疫电镜技术,首次在透射电镜下确定White树脂包埋淋巴细胞内β-葡萄糖醛酸酶在超微结构水平的精确定位,观察到淋巴细胞的内质网,高尔基复合体,溶酶体内散在分布着标记β-葡萄糖醛酸酶的金颗粒,表明该酶主要分布于这几种细胞器内。 相似文献
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本文对65例胆红素钙结石患者胆汁及胆囊粘膜进行细菌培养,观察细菌产生β-葡萄糖醛酸酶的能力及各菌β-葡萄糖醛酸酶最适反应pH值。首次提出不同部位胆红素钙结石均有较高的需氧菌和厌氧菌检出率,所有胆道分离菌的绝大部份(98%)菌株均能产生β-葡萄糖醛酸酶的观点。 相似文献
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目的探讨内源性β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase,β-G)活性在原发性肝内胆管结石形成中的作用和意义。方法采用改良的Fishman方法对原发性肝内胆管结石患者胆汁、唾液中内源性β-G进行测定,分析内源性β-G活性变化与肝内胆管结石的关系。结果无论术前及术后,肝内胆管结石患者胆汁和唾液中内源性β-G活性均明显高于对照组(P〈0.05);与术前相比,术后2周胆汁和唾液中内源性β-G水平均较术前降低,但是只有胆汁内源性β-G水平变化有统计学意义(P〈0.05)。结论内源性β-G可能与原发性肝内胆管结石的成石有关。 相似文献
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正常肝细胞与肝癌细胞内β—葡萄糖醛酸酶免疫电镜定位 总被引:1,自引:0,他引:1
采用低温包埋、胶体金标记、免疫电镜技术,进行了正常肝细胞和肝癌细胞内β-葡萄糖醛酸酶(β-Glucuronidase,β-G)的定位研究。结果表明,β-G存在于内质网,溶酶体和高尔基复合体内,同时观察到肝癌细胞中标记β-G的金颗粒数目多于正常肝细胞中的数目。对肝细胞癌的早期发现,早期诊断可能具有意义。 相似文献