姜黄素对实验性肝纤维化大鼠肝损伤的保护作用

目的:观察姜黄素对实验性肝纤维化大鼠肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用胆管结扎法诱导大鼠肝纤维化模型,将21大鼠随机分为假手术组(不建模,只给予生理盐水)、肝纤维化模型组(建模后给予生理盐水)和姜黄素给药组(建模后给予姜黄素400 mg·kg^-1),每组7只,给药2周后检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和总胆红素(Tbil) 水平;HE染色观察大鼠肝脏组织病理形态学;Massion染色观察大鼠肝脏组织胶原沉积;Western blotting法检测大鼠肝脏组织中转化生长因子β1 (Tgf-β1)和 α-平滑肌肌动蛋白(α-Sma)表达水平。结果:与假手术组比较,肝纤维化模型组和姜黄素给药组大鼠血清中ALT、AST活性和Tbil水平明显升高(P<0.05);与肝纤维化模型组比较,姜黄素给药组大鼠血清中ALT、AST活性和Tbil水平明显降低 (P<0.05)。肝纤维化模型组大鼠肝脏组织明显破环,大量炎症细胞浸润、胶原沉积及胆管增生,姜黄素给药组大鼠肝纤维病理变化明显减轻。Western blotting 检测,与假手术组比较,肝纤维化模型组大鼠肝脏组织中Tgf-β1和 α-Sma蛋白表达水平升高(P<0.05);与肝纤维化模型组比较,姜黄素给药组大鼠肝脏组织中Tgf-β1和α-Sma蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:姜黄素有治疗肝纤维化的作用,有望成为预防和治疗胆汁淤积性肝纤维化的药物。     

四氯化碳、酒精与四氯化碳联合、胆管结扎致SD大鼠肝纤维化病理学比较

目的 研究四氯化碳、酒精与四氯化碳联合、胆管结扎致SD大鼠肝纤维化模型肝脏的病理学改变,初步探讨肝纤维化发病机制.方法 四氯化碳组SD大鼠以3 mg/kg的剂量(首次剂量加倍)皮下注射50％四氯化碳(四氯化碳∶橄榄油=1∶1),每周2次,连续注射6周;酒精与四氯化碳联合组SD大鼠每日按照10 mL/kg剂量灌服酒精混合物(酒精∶吡唑∶玉米油=10 mL∶25 mg∶2 mL),同时每周2次按0.3 mL/kg剂量给予腹腔注射四氯化碳:橄榄油(1∶3),连续造模60 d;胆管结扎组大鼠按10 mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉,腹部皮肤消毒,无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔,分离出胆管,在胆管近端和远端2处结扎胆管,28 d后结束实验.试验结束后麻醉动物,解剖取动物肝脏组织,用10％福尔马林固定,进行病理学检查.结果 四氯化碳致SD大鼠肝纤维化模型表现为弥漫性脂肪肝、肝炎、肝纤维化;酒精与四氯化碳联合致SD大鼠肝纤维化模型表现为酒精性脂肪肝、肝炎、肝纤维化;胆管结扎致SD大鼠肝纤维化模型表现为胆管增生、肝炎、肝纤维化.结论 这3种方法都可以引起大鼠肝脏发生纤维化,其中胆管结扎致SD大鼠肝纤维化造模方法适合于临床胆汁淤积所致肝纤维化的模型建立,其它两种方法适合于化学性、病毒性肝炎引起的肝纤维化模型的建立,可根据不同的实验目的选择不同的方法构建相应的动物模型.     

鳖甲煎丸对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化的治疗作用

目的：探讨鳖甲煎丸对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化模型是否具有改善作用。方法：腹腔注射猪血清7周制成大鼠免疫性肝纤维化模型后,经口灌胃分别给予鳖甲煎丸3．0、1．5、0．75、0．375g／kg以及阳性药秋水仙碱0．25mg／kg。给药3周后,计算脏器系数;检测大鼠血清中的肝功能指标丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）;检测肝匀浆上清液中肝纤维化指标I型胶原（CoI）、Ⅲ型胶原（Com）、1V型胶原（C0Ⅳ）、Ⅲ型前胶原（PCUI）、透明质酸（HA）、层黏蛋白（LN）;并经Masson染色和HE染色观察不同组别大鼠肝脏的纤维化程度和肝脏细胞的形态。结果：①空白对照组、模型组和给药组动物的体质量和肝脏脏器系数差异均无统计学意义;②鳖甲煎丸的4个剂量组对猪血清致大鼠免疫性肝纤维化模型动物的相应肝功能指标也无明显影响;③3．0g／kg的鳖甲煎丸及0．25mg／kg的秋水仙碱均明显降低了肝匀浆CoI水平（P〈0．05）;0．375、0．75、1．5、3．0g／kg的鳖甲煎丸均不同程度地降低了PCⅢ、HA和LN水平（P〈0．01或0．05）;④Masson以及HE染色结果显示鳖甲煎丸的4个剂量组均不同程度地使肝脏的纤维化组织减少或消失,使大部分肝脏结构恢复正常。结论：鳖甲煎丸对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化具有良好的治疗作用。     

肝纤维化发病机制研究进展

肝纤维化是是各种慢性肝病向肝硬化发展所共有的病理改变和途径,是细胞外基质在肝脏的过度沉积,其质与量均发生变化。而肝星状细胞是细胞外基质产生的主要细胞来源,它的激活、凋亡均受到众多细胞因子及细胞内信号转导系统的调节。     

水稻黄酮对大鼠实验性肝纤维化的作用

目的：研究水稻黄酮（4′,5－二羟基－3′,5′－二甲氧基黄酮－7－0－B－D－葡萄糖甙）对大鼠实验性肝纤维化的作用,并从自由基的产生及清除方面探讨其机理。方法:腹腔注射硫代乙酰胺诱导的大鼠肝纤维化模型和胆管结扎上引起大鼠肝纤维化模型,以γ－干扰素作对照,测定相应肝功能和肝纤维化指标,及肝组织中GSH－Px、MDA、SOD活力。结果：水稻黄酮可显著改善肝功能与肝纤维化,降低MDA含量,提高SOD、GSH－Px活力。结论：水稻黄酮对肝纤维化有明显的抑制作用,而水稻黄酮还可显著改善肝功能,提高肝组织中自由基清除系统的功能,加强肝组织清除自由基及MDA,减轻自由基对肝组织的损害。     

迷迭香酸对免疫性肝纤维化的治疗作用

目的 研究迷迭香酸对大鼠免疫性肝纤维化的治疗作用.方法 建立牛血清白蛋白致大鼠免疫性肝纤维化模型,根据体重、血清白蛋白和纤粘连蛋白水平随机分组,迷迭香酸治疗60 d后,检测血清肝功能及纤维化指标水平,检测肝组织羟脯氨酸的含量.结果 迷迭香酸能够降低天门冬氨酸氨基转移酶的活性,减少总胆红素的表达并使白蛋白/总蛋白比值增大,降低血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原和肝组织羟脯氨酸的含量.结论 迷迭香酸能够改善纤维化大鼠的肝功能,延缓纤维化的发展.     

异种动物血清诱导的大鼠肝纤维化模型及其机制

研究建立免疫性肝纤维化模型，并探讨该模型形成过程中的形态变化特点及模型形成的始动机制。Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹腔注射猪血清诱导免疫性肝纤维化模型，以光镜和电镜观察肝纤维化不同阶段的形态变化，并计数嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）和肥大细胞，以免疫荧光法检测肝内ＩｇＧ和补体Ｇ３。结果：①猪血清洲射８周后均形成肝纤维化；②肝纤维化形成过程中除肝星状细胞（ＨＳＣ，原称Iｔｏ细胞）增多外，尚发现原始间叶细胞（ＰＭＣ）增多     

绞股蓝总皂苷对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响

目的:研究绞股蓝总皂苷(GPs)对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响。方法:36只大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化组和GPs组3组,每阻各12只。采用人血清白蛋白攻击注射大鼠建立免疫性肝纤维化模型,GPs治疗组大鼠则在连续30 d给予白蛋白攻击注射的同时给予0.5 mg GPs。采用全自动生化仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)水平以评价肝功能,应用放射免疫法(RIA)检测血清中透明质酸(HA)、Ⅲ型胶原(PCⅢ)和层粘蛋白(LN)含量以评价肝纤维化程度,并以大鼠肝组织切片病理变化验证。结果:白蛋白攻击注射可显著升高肝纤维化大鼠血清中ALT、TBIL、TBA水平和HA、PCⅢ、LN水平(P<0.01,P<0.05)。GPs治疗可显著降低大鼠血清中 ALT、TBIL、TBA水平和HA、PCⅢ和LN水平(P<0.01,P<0.05)。GPs还可显著减少白蛋白攻击所致的胶原纤维生成,并改善大鼠肝纤维化病理损伤。结论:GPs可保护大鼠肝功能,抑制大鼠肝纤维化形成。     

肝纤维化的发病机制研究进展

肝纤维化是慢性肝炎发展至肝硬化的必经病理过程,肝纤维化在一定程度上可以逆转,从而使"慢性肝炎-肝纤维化-肝硬化-肝癌"这备慢性进展过程得以终止。掌握其的发病机制对肝纤维化的防治具有重要意义,本文将其发病机制的研究作以综述。     

加味四逆散防治大鼠免疫性肝纤维化的实验研究

目的：观察研究加味四逆散对大鼠免疫性肝纤维化的防治效果,初步探索该方的防治机理。方法：采用人血清白蛋白（HSA）复制免疫性肝纤维化大鼠模型，设西药秋水仙碱组为对照：预防组在造模的第48天开始用加味四逆散给大鼠灌胃用药，共42天；治疗组在模型形成后（造模的第90天）开始用加味加逆散灌胃给药，共30天；用自动分析法检测大鼠血清ALT，AST，TP，ALB，GP含量，用光镜对大鼠肝脏进行病理组织学检查。结果：预防组和治疗组大鼠在应用加味加逆散后，血清AWLT，AST，TBil明显降低，ALB升高，A／G值改善；肝脏组病理学损害明显减轻，胶原沉积减少，肝细胞坏死得以修复，肝脏微循环有明显改善。与病理模型组比较有显著性差异（P＜0．05）。与秋水仙碱组比较也有显著性差异（P＞0．01）。结论：加味四逆散效的保护肝细胞，恢复肝功能，抑制星状细胞活性，减少肝内胶原蛋白的合成与沉积，促进胶原降解，具有肯定良好的预防和治疗肝纤维化作用，其预防效果优于治疗效果，并且明显优于秋水仙碱。     

SD大鼠胆汁淤积性肝纤维化动物模型的建立与评价

目的 通过胆管结扎法建立胆汁淤积性肝纤维化动物模型,并对模型进行评价与探讨.方法 选用禁食12 h、能自由饮水的SD雄性大鼠,腹腔麻醉后,分离胆管,以丝线两处剪断1 cm结扎胆管,分别于0、2、4、6、8周测定大鼠体质量、肝脏质量、肝功能、肝纤维化酶谱,镜下观察肝脏组织学及超微结构的改变,并设立假手术组和对照组.结果 4~6周后,模型组大鼠体质量及肝脏质量较假手术组和对照组明显下降(P＜0.05),肝脏湿质量明显下降(P＜0.05),造模第2周即可见肝功能及肝纤维化酶谱较0周时明显升高(P＜0.05),病理切片可见肝组织结构明显破坏,大量炎细胞浸润、胶原纤维增生及假小叶形成.结论 胆汁     

胆汁淤积性肝硬化大鼠模型的改良

目的构建肝纤维化大鼠模型,并对经典结扎胆总管(BDL)复制模型方法进行适当改进。方法 80只SD雄性成熟大鼠,按随机数字表法分为A组40只、B组40只,分别运用胆总管结扎法和肝门部肝总管缝扎法先后两次造模,各取其中10只为假手术组进行对照,术后1周眼眶取血采用酶联免疫吸附法检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、白蛋白/球蛋白(A/G),术后4周HE染色观察大鼠肝组织病理学变化,采用免疫组化染色分析肝脏组织α-SMA和CK-19表达水平。结果两种方法均表现出明显肝功能损害;标本胆小管增生明显,肝脏假小叶形成,达到早期肝硬化,肝脏α-SMA和CK-19表达水平明显升高,胆总管结扎组死亡率为66.7%,肝门部肝总管缝扎组死亡率为26.7%。结论肝门缝扎法可成功建立胆汁淤积性肝硬化大鼠模型,能够明显降低模型动物死亡率,提高模型质量及实验效率。     

秋水仙碱对大鼠胆管结扎所致胆汁淤积模型肝损伤的影响

考察秋水仙碱对大鼠胆管结扎所致胆汁淤积模型肝损伤的干预作用。采用胆总管结扎建立大鼠胆汁淤积模型,模型动物分别灌胃秋水仙碱0.12和0.24 mg/kg,连续7 d。通过血清生化指标、肝脏髓过氧化物酶(MPO)活力及肝脏组织病理学检查来评价秋水仙碱的作用。结果显示,秋水仙碱可显著降低模型动物血清ALP、γ-GTP、TBA水平。秋水仙碱高、低剂量组对肝脏MPO活力均有显著抑制作用,同时可明显改善肝脏的组织病理学改变。实验结果表明,小剂量的秋水仙碱(≤0.24 mg/kg)对于大鼠胆管结扎所致的胆管损伤具有明显的改善作用,而抑制炎性细胞活化和浸润可能是其重要的作用机制。     

腹腔持续注射血管紧张素(-1-7)对胆管结扎大鼠肝纤维化的抑制作用

目的探讨血管紧张素(1-7)[Ang-(1-7)]对胆管结扎(BDL)大鼠肝纤维化的抑制作用。方法 18只Wister雄性大鼠随机分为假手术(SHAME组)组,BDL组和Ang-(1-7)治疗组。假手术组:行开腹术再关腹,在腹腔埋注射泵,以25μg.kg-1.h-1的速度持续注射生理盐水;BDL组:开腹结扎胆总管建立肝纤维化模型,在腹腔埋注射泵,以25μg.kg-1.h-1的速度持续注射生理盐水;Ang-(1-7)治疗组:BDL建立肝纤维化模型,同时在腹腔埋注射泵,以25μg.kg-1.h-1的速度持续注射Ang-(1-7)。4周后宰杀动物、取肝组织,行Masson胶原染色,肝纤维化评分,测定羟脯氨酸含量,免疫组织化学检测α-肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与BDL组相比,Ang-(1-7)治疗组肝纤维化评分(2.33±0.52 vs 5.17±0.75)、胶原面积(23.71±3.43 vs 89.77±9.92)、羟脯氨酸含量(0.36±0.03 vs 0.52±0.04)、α-SMA的表达(54.11±17.55 vs 191.84±31.72)均减少,有统计学意义(P<0.01)。结论Ang-(1-7)对胆总管结扎所致的肝纤维化具有抑制作用。     

胆总管结扎引起胆汁淤积对小鼠肝脏细胞增殖的影响

目的：探讨胆总管结扎引起的胆汁淤积对小鼠肝脏增殖的影响．方法：采用胆总管结扎手术制备胆汁淤积小鼠模型;利用全自动生化分析仪检测小鼠血清肝脏生化指标水平;用免疫组织化学方法检测小鼠肝脏中增殖相关的指标的表达情况．结果：通过胆总管结扎手术成功制备了梗阻性胆汁淤积小鼠模型;小鼠血清生化指标以及病理组织学变化表明小鼠肝脏功能受损,胆总管结扎手术成功;胆总管结扎引起胆汁淤积后,肝脏细胞有丝分裂相增加,肝细胞和胆管细胞中增殖相关的标志物表达升高,表明细胞增殖活性增强．结论：胆总管结扎引起的胆汁淤积可以引起肝脏细胞以及胆管上皮细胞的增殖．     

桑黄酸性多糖对胆管结扎所致小鼠肝纤维化的改善作用及其机制

目的：探讨桑黄酸性多糖（PIP）对胆管结扎（BDL）所致小鼠肝纤维化的改善作用,阐明其可能的作用机制。方法：60只4周龄雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组和PIP给药组（PIP组）,每组15只。对照组小鼠只绕胆总管穿过手术线但不结扎,模型组、阳性药组和PIP组小鼠结扎胆管。术后给药3周,末次给药12 h后眼球取血,处死小鼠。称量小鼠体质量和肝脏质量,并计算肝脏指数;微板法检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平;双抗体夹心法检测各组小鼠血清中Ⅲ型前胶原（PCⅢ）和Ⅳ型胶原（ColⅣ）水平;HE染色和天狼猩红染色观察各组小鼠肝组织病理形态表现和肝纤维化程度;检测各组小鼠肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）水平。Western blotting法检测各组小鼠肝组织中核因子E2相关因子（Nrf2）、血红素加氧酶1 (HO-1)和醌氧化还原酶1 (NQO1)蛋白表达水平。结果：与对照组比较,模型组小鼠体质量差异无统计学意义（P>0.05）,肝脏质量和肝脏指...     

培哚普利和氯沙坦对肝纤维化组织TLR4表达的影响

目的观察大鼠正常肝脏和肝纤维化(HF)组织Toll样受体4(TLR4)表达差异及培哚普利(Pe)和氯沙坦(Lo)对其的影响。方法 Wistar雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、胆总管结扎术(BDL组)、Pe 14 d和30 d及Lo 14d和30d组,6只/组。BDL组和治疗组均通过BDL制备大鼠HF模型。予Pe(2 mg/kg)和Lo(50 mg/kg)灌胃,1次/dc 14 d和30 d后分别应用Westernblotting检测肝脏TLR4水平。结果 BDL 14 d组大鼠肝脏TLR4为Sham组的(6.53±1.11)倍(P<0.05);Pe 14 d组和Lo 14 d组TLR4分别下降到Sham组的(1.71±0.41)倍(P>0.05)和(0.95±0.38)倍(P>0.05)。Pe 30 d组和Lo 30 d组大鼠肝脏TLR4分别回升为Sham组的(6.51±0.87)倍(P<0.05)和(5.64±0.87)倍(P<0.05)。结论大鼠HF后肝脏TLR4水平上升,Pe和Lo可降低实验性HF组织的TLR4水平,但长期服用其抑制TLR4的作用减弱。     

胆总管结扎致肝纤维化模型大鼠肝脏内源性AcSDKP及其调控因子水平的变化

目的：探讨胆总管结扎致肝纤维化模型大鼠肝脏组织中内源性N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）及相关调控因子水平的变化,阐明AcSDKP在肝纤维化过程中的作用。方法：45只普通级大鼠随机分为模型组、阻断组和对照组,每组15只。模型组采用胆总管结扎建立肝纤维化动物模型;阻断组应用血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）后建立肝纤维化动物模型;对照组予以开腹,但不结扎胆总管。分别在1、2和4周后留取血清及肝组织,检测各组大鼠肝功能指标、肝组织纤维化程度以及肝组织中AcSDKP水平,应用Western blotting法检测各组大鼠肝组织中胸腺素β4、赖氨酸寡肽酶（POP）和血管紧张素转换酶（ACE）水平。结果：自第1周开始,模型组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TB）和白蛋白（ALB）水平高于其他2组（P<0.05）,而阻断组与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。自第2周开始,模型组大鼠血清中ALB及肝组织中AcSDKP水平低于其他2组（P<0.05）,而阻断组与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。第1周,3组大鼠肝组织中Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（CⅣ）和透明质酸（HA）水平比较差异无统计学意义（P>0.05）;第2周,模型组大鼠肝组织中PCⅢ、CⅣ和HA水平高于其他2组（P<0.05）,阻断组与对照组上述指标比较差异无统计学意义（P>0.05）。第2周开始,模型组大鼠肝组织中胸腺素β4和ACE蛋白表达水平高于其他2组（P<0.05）,而POP蛋白表达水平低于其他2组（P<0.05）;阻断组与对照组上述指标比较差异无统计学意义（P>0.05）。模型组大鼠肝组织中第1周结构基本正常,第2周时呈现小灶状坏死,第4周时呈现片状坏死;阻断组与对照组大鼠肝组织各时间点结构基本正常。结论：胆总管结扎致肝纤维化大鼠肝组织中内源性AcsDKP水平降低可能是通过Tβ4-POP-AcsDKP轴实现的。     

橘皮素通过抑制Notch信号通路干预小鼠肝纤维化进程

目的 探讨橘皮素对胆汁淤积性肝纤维化小鼠模型的治疗机制。方法 将45只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组（n=10）、胆总管结扎手术（biliary duct ligation, BDL）模型组（n=15）、橘皮素治疗组（n=10）及单纯橘皮素用药组（n=10）。药物治疗组中,BDL手术10d后开始橘皮素灌胃,模型建立30d后采血处死各组小鼠并留取肝组织。通过H-E染色、Masson及天狼星红染色分析各组小鼠肝组织纤维化程度;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各组小鼠血清肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及纤维化指标透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)水平;通过蛋白质印迹、荧光定量聚合酶链反应(PCR)、免疫组织化学方法检测各组小鼠肝组织中羟脯氨酸(Hyp)含量及Notch通路各组分表达量变化;通过免疫组化法检测肝纤维经典通路TGF-β1/smads通路各组分表达量变化。结果 造模30d后,与BDL模型组相比,橘皮素治疗组小鼠肝纤维化假小叶减少,纤维化病理评分值低（P<0.05）;胶原纤维沉积减少（P<0.05）,Ⅰ型胶原纤维总量减少（P<0.05）;小鼠肝功能指标ALT、AST明显降低（P<0.05）,纤维化指标HA、LN降低（P<0.05）;Hyp含量降低（P<0.05）,Notch信号通路组分Notch1、RBPJ、Hes1、Hey1蛋白及RNA表达量均下调（均P<0.05）;肝纤维化TGF-β1/smads经典通路组分TGF-β1、smad2及smad3表达量下调（均P<0.05）。结论 橘皮素作为Notch信号通路抑制剂可通过与TGF-β1/smads通路相互作用延缓肝纤维化进程。