实验性煤矽肺大鼠氧化和抗氧化损伤的动态观察

大鼠经气管注入煤石英尘，观察肺泡巨噬细胞（ＡＭ）和支气管肺泡冲洗液（ＢＡＬＦ）中脂质过氧化产物和抗氧化物质的动态变化。结果表明，染尘后７天ＡＭ中ＭＤＡ含量增加，ＳＯＤ活性下降，以后恢复至正常，ＧＳＨＰｘ活性和ＧＳＨ含量染尘后７～３０天升高。ＢＡＬＦ中ＭＤＡ含量、ＳＯＤ活性无变化，ＧＳＨＰｘ活性、ＧＳＨ含量均低于石英组。说明煤石英尘诱发ＡＭ脂质过氧化反应发生于染尘初期，且明显弱于石英尘。说明脂质过氧化反应在煤矽肺病变形成中不起主要作用     

煤石英对大鼠肺泡巨噬细胞氧化系统的影响

利用染煤石英混合粉尘大鼠作为实验模型，研究在实验性大鼠煤矽肺形成过程中肺泡巨噬细胞氧化和抗氧化系统的改变。结果表明在染煤石英粉尘７天，脂质过氧化产物有轻度升高，至３０天时己恢复正常，超氧化物歧化酶在染尘后７天降低，以后恢复至正常，而还原型谷胱甘肽和谷胱甘肽过氧化物酶升高明显，这与石英所致肺泡巨噬细胞的变化明显不同，说明脂质过氧化反应在煤矽肺形成过程中作用不明显。     

矽肺,煤矽肺患者肺泡巨噬细胞的氧化和抗氧化系统

本文观察了不同时期矽肺、煤矽肺患者肺泡巨噬细胞化学发光、脂质过氧化物及超氧化物歧化酶的改变。结果表明,矽肺、煤矽肺患者肺泡巨噬细胞活性氧产生增加,脂质过氧化物含量增加。当患者肺泡巨噬细胞在体内重新受到石英粉尘刺激时,活性产生无变化,说明患者肺泡巨噬细胞由于长期受肺泡内或肺泡巨噬细胞内粉尘的作用,一直处于应激状态;而超氧化物歧化酶活性的升高,也证明了患者肺泡巨噬细胞处于代偿状态。进一步说明了活性氧自由基在矽肺的发展过程中起着重要的作用。     

纳米氧化铈对过氧化氢所致大鼠肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响

目的研究纳米氧化铈对过氧化氢致大鼠肺泡巨噬细胞NR8383氧化损伤的影响。方法将对数生长期的NR8383细胞分别暴露于终浓度为5、10、20、50、100μg/ml纳米氧化铈(20 nm)悬液孵育24 h,再加入新鲜配制的终浓度为100μmol/L的过氧化氢刺激细胞2 h,另设对照(PBS)组及过氧化氢(100μmol/L)组。采用CCK-8法检测NR8383细胞的细胞活性,采用酶标法检测培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,并测定细胞内谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)的水平。结果与对照组相比,过氧化氢对NR8383细胞造成氧化损伤,细胞的存活率下降25.25%。与过氧化氢组相比,5μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的存活率较高,而100μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的存活率较低,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);且随着纳米氧化铈染毒浓度的升高,NR8383细胞的存活率呈下降的趋势。与过氧化氢组相比,对照组NR8383细胞的LDH释放量较低,50μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的LDH释放量较高,差异有统计学意义(P0.05);而5、10μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的LDH释放量有所降低,但差异均无统计学意义(P0.05)。且随着纳米氧化铈染毒浓度的升高,NR8383细胞的LDH释放量呈上下波动。与过氧化氢组相比,对照组NR8383细胞内GSH的水平升高,而ROS的水平上升;5、10μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞内的ROS水平均下降,而10μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞内的GSH水平上升,差异均有统计学意义(P0.05)。随着纳米氧化铈染毒浓度的升高,NR8383细胞内的SOD、GSH呈上下波动,ROS的水平呈逐渐升高的趋势。结论低浓度(5、10μg/ml)的纳米氧化铈颗粒可以缓解过氧化氢对NR8383细胞造成的氧化损伤,对细胞起到保护作用。     

锌对SiO2致大鼠肺泡巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的 观察锌对SiO2致肺泡巨噬细胞（alveolar macrophages,AMs）产生氧自由基的动态变化和超微结构、膜酶的影响。方法 对AMs产生的O2^-和H2O2进行原位显示、定量测定并做相关趋势分析;以ATPase作为膜功能酶改变的反映;在亚细胞水平观察细胞形态结构。结果 与单纯SiO2组比较,锌保护组AMs O2^-和H2O2反应强度降低,超微结构及膜酶损伤减弱。结论 锌能减弱SiO2致AMs氧自由基的反应强度,降低超微结构和膜酶的损伤,保护AMs。其作用机制可能与锌增强AMs抗氧化作用有关,给临床用药提供了理论指导。     

Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的缓解作用

目的 探讨Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响。方法 应用支气管灌洗的方法获得大鼠肺泡巨噬细胞(AM),纯化后与终浓度50μg／ml的温石棉分别孵育2h和4h,在孵育的同时加入不同浓度的Oncolyn,检测AM中DNA损伤状况以及抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性。结果 肺泡巨噬细胞与温石棉共同培养2h后,DNA损伤和SOD、GSH—Px活性增加,表现出彗星出现率和DNA迁移长度增加;当培养4h后,彗星出现率比培养2h更高,DNA迁移长度不再增加,而SOD、GSH-Px活性均下降。在AM与温石棉作用的同时加入不同浓度的Oncolyn后,DNA损伤减轻,抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性上升。结论 Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞的氧化损伤有一定的缓解作用。     

镍化合物对大鼠肺泡巨噬细胞凋亡影响

目的 研究镍化合物导致大鼠肺泡巨噬细胞凋亡机制.方法 用Ni3S2和Ni2O3,对大鼠进行染毒,16个月后收集各组动物的肺泡巨噬细胞,运用流式细胞术(FCM)测定细胞的周期分布、胞内钙离子浓度和线粒体膜电位.结果 Ni3S2组大鼠肺泡巨噬细胞较对照组的凋亡率(%)明显增加[(8.6±5.5)和(2.2±0.7),P<0.05],胞内游离钙浓度增加((26.6±8.7)和(19.5±0.5),P<0.05],线粒体膜电位变小[(7.7±3.4)和(10.9±0.84),P<0.05].Ni2O3组较对照组的凋亡率和胞内游离钙浓度均增加,线粒体膜电位下降.结论 线粒体膜电位下降,胞内外Ca2+浓度的改变可能是造成染镍大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的原因.     

矽肺大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能检测方法研究

目的研究适用于矽肺模型大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的检测方法.方法气管注入法制备矽肺模型,分别两次通过气道、腹腔给予矽肺大鼠模型及正常对照动物卡介苗（BCG）.第2次免疫后35天气道注入鸡红细胞,评价肺泡巨噬细胞的吞噬功能.结果矽肺动物肺泡巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率、吞噬指数都显著低于正常对照大鼠.结论本实验室应用的大鼠半体内肺泡巨噬细胞吞噬功能测定方法,简单适用,能反映动物肺泡巨噬细胞吞噬功能;矽肺动物肺泡巨噬细胞吞噬功能显著下降.     

二氧化硅粉尘对实验大鼠肺泡巨噬细胞的毒性效应

目的观察二氧化硅粉尘对大鼠肺泡巨噬细胞(AMs)的毒性作用。方法测定不同二氧化硅(SiO2)粉尘浓度培养AMs24小时以及培养不同时间的AMs上清中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量,并记录不同浓度粉尘刺激AMs的死亡率。同时以二氧化钛粉尘为阴性对照。结果巨噬细胞死亡率随粉尘浓度的增加而增加,AMs上清中LDH及MDA含量与SiO2粉尘浓度呈良好的剂量-反应关系,且与其刺激时间呈良好的时间-效应关系。结论染SiO2粉尘的实验大鼠巨噬细胞呈现明显的毒性效应。     

螺旋藻对动物矽肺模型体内抗氧化水平的影响

目的研究螺旋藻对动物矽肺模型体内抗氧化水平的影响。方法实验设空白对照组、染尘组和染尘螺旋藻组，用非暴露式气管注入方法复制大鼠矽肺模型，饲养12周。结果螺旋藻能够显著提高染尘大鼠体内超氧化物歧化酶和谷胱苷肽过氧化物酶的活性，降低肺组织中丙二醛的含量和支气管肺泡灌洗液中乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶的含量。结论螺旋藻具有提高矽肺动物模型体内抗氧化水平的作用。可在一定程度上延缓或抑制矽肺病变的发展，作用的机制可能与含有丰富的微量元素硒(Se)和β-胡萝卜素等营养成分有关。     

沙尘暴PM_(2.5)、PM_(10)对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

目的　探讨了沙尘暴PM2 5、PM10 对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响。方法　沙尘暴颗粒物采集自北京市城区 ,细胞毒性测定用MTT法 ,巨噬细胞吞噬功能采用流式细胞法 ,以荧光标记的胶珠 (Latexbeads ,D =2 4 μm)来测定。 结果　MTT结果显示 ,随着染毒浓度的增加 ,巨噬细胞存活率逐渐减低 ,高剂量组约为对照的 85 %左右。流式细胞仪分析表明 ,各颗粒物染毒组细胞的平均荧光强度逐渐减弱 ,提示巨噬细胞摄入沙尘暴颗粒物后 ,其吞噬荧光胶珠的能力明显减低 ;另外各染毒组的平均侧向光散射强度 ,即摄入的总颗粒数 (沙尘暴颗粒 +荧光胶珠 )低于对照 ,提示巨噬细胞的吞噬功能受到了损伤。沙尘暴PM2 5的细胞毒性比相同浓度的PM10 大 ,对吞噬功能的损伤也更明显。结论　沙尘暴PM2 5、PM10 均能损伤大鼠肺泡巨噬细胞的吞噬功能 ,削弱其非特异性防御能力。     

大鼠实验矽肺的超微结构观察

为了探明石英和肺纤维化的关系,本文对20只大鼠每只注入石英50mg,于1、15、30、45、60天分别解剖,用光镜和电镜观察肺组织。结果表明,实验矽肺的纤维化过程中,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生,是全过程的始动环节,最终以大量的纤维化告终,其中心环节是肺泡巨噬细胞的反复增生和坏死。     

蘑菇孢子抗原致敏大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的变化

在蘑菇的培植过程中,由于吸入担孢子致使蘑菇工人发生肺部疾患,其病因学尚不完全清楚。临床观察表明该病属于呼吸道变态反应性疾病。本文仅对蘑菇孢子抗原致敏大鼠肺泡巨噬细胞(MPH)的吞噬功能进行了观察。结果表明,致敏大鼠经激发后48小时的MPH吞噬率最高。经多次激发后的致敏大鼠的MPH吞噬率亦比正常大鼠高(P<0.05)。蘑菇肺很可能是一种过敏性肺泡炎。     

桦木尘和柞木尘对大鼠肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响

为研究体外桦木尘（ＢＤ）和柞木尘（ＯＤ）对大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）分泌细胞因子的影响，从支气管肺泡灌洗液中分离３０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠的ＡＭ，进行体外培养，分别以不同剂量的ＢＤ或ＯＤ（１００、１５０、２００、２５０μｇ／ｍｌ）诱导ＡＭ，于不同时间（４、２４、４８、７２小时），检测ＡＭ分泌ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦα的活性。结果显示：ＢＤ和ＯＤ诱导ＡＭ分泌ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦα，其活性均高于或明显高于对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），而ＢＤ组与ＯＤ组相比，也有不同或明显不同（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。在２００μｇ／ｍｌ的时间曲线中也显示ＢＤ组高于或明显高于ＯＤ组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。提示：ＢＤ和ＯＤ均能刺激ＡＭ分泌ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦα的活性增加，而ＢＤ较ＯＤ更为明显。     

矽宁、汉防己甲素及磷酸羟基喹哌对实验性矽肺疗效的比较

对矽宁、汉防己甲素(汉甲)和磷酸羟基喹哌在等毒条件下进行了大鼠实验性矽肺的疗效研究,结果表明,治疗3个月后全肺湿、干重及肺胶原蛋白含量明显低于矽肺对照组,差别显著,但治疗组之间无明显差异;病理形态显示矽宁和汉甲组对矽肺纤维化有更明显的抑制作用,病灶间和肺泡腔内具有大量泡沫样细胞浸润。治疗组的肺巨噬细胞内均有细小的棕褐色颗粒。矽宁治疗组血清中SOD和铜蓝蛋白的含量明显低于其它治疗组。     

中波紫外线对实验性矽肺大鼠氧化损伤影响

目的探讨中波紫外线照射对实验性矽肺大鼠氧化损伤的影响。方法健康成年SD雄性大鼠32只,随机分为4组,通过一次性非暴露式气管注入二氧化硅粉尘混悬液及施加中波紫外线照射后,采用比色法测定大鼠组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(HYP)和血清中铜兰蛋白(CP);测量大鼠体重增长量、脏器湿重。结果(1)注入二氧化硅粉尘后大鼠肺组织匀浆中SOD活性明显降低(P<0.01),肺匀浆中MDA含量显著升高(P<0.01);肺组织匀浆中HYP含量和血清中CP活性显著升高(P<0.05)。(2)照射中波紫外线后大鼠肺组织匀浆中SOD活性降低(P<0.01);MDA、HYP和CP在照射中波紫外线后均无变化(P>0.05)。(3)中波紫外线和二氧化硅粉尘对大鼠肺组织匀浆中SOD、HYP和血清中CP存在交互作用(P<0.01);中波紫外线和二氧化硅粉尘对大鼠肺组织匀浆中MDA存在交互作用(P<0.05)。结论二氧化硅粉尘可致大鼠肺组织氧化损伤,导致肺组织纤维化;而中波紫外线的照射可以降低矽肺模型大鼠肺组织的氧化损伤程度,减轻模型鼠肺组织纤维化程度。     

温石棉与纤维水镁石矿物粉尘体外细胞毒性对比

目的比较温石棉与纤维水镁石矿物粉尘对肺泡巨噬细胞体外细胞毒性来评价纤维水镁石的安全性。方法采用体外细胞培养技术,测定细胞死亡率、乳酸脱氢酶及超氧化物歧化酶活力、细胞膜流动性、丙二醛含量,采用光学显微镜以及扫描电镜观察肺泡巨噬细胞形态变化。结果温石棉及纤维水镁石均产生了肺泡巨噬细胞毒性。结论作为温石棉代用品的纤维水镁石对肺泡巨噬细胞的作用也并不是绝对安全的。     

矽肺患者肺泡巨噬细胞培养上清对人胚肺成纤维细胞c-myc基因表达的影响

目的 探讨矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)培养上清对人胚肺成纤维细胞(HEFB)c-myc基因表达的影响.方法 AM分为加尘组(SiO2,30μg/ml)和对照组,培养1、2、6、12、24和36 h,收集培养上清.Ⅲ代HEFB用质量分数为0.5%的血清培养液培养48 h使大部分细胞处于静止期后,加人SiO2刺激6 h的AM培养上清(S6组),用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法观察c-mycmRNA和蛋白的时程变化.然后将各组AM上清与静止状态的HEFB孵育2和7 h,观察c-myc mRNA和蛋白表达的变化.结果 HEFB在静止状态时c-myc mRNA和蛋白的表达为0,在对照组中,培养不同时间的AM上清刺激了c-myc mRNA及蛋白的表达,以AM培养12 h的卜清作用最明显,比值分别为0.749±0.088和0.759±0.101.加尘组中各上清也刺激了c-myc mRNA和蛋白的表达,但作用高峰提前,以SiO2刺激6 h的上清作用最明显,比值分别0.982±0.147和0.978±0.141.与同期对照相比,SiO2刺激1、2和6 h的AM上清诱导mRNA和蛋白表达增多,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 SiO2激活的AM培养上清可促进HEFB c-myc基因的表达.