经皮给药后尼索地平在大鼠体内血药浓度的LC-MS法测定

建立了液相色谱-质谱法测定大鼠血浆中的尼索地平,并考察尼索地平微乳凝胶经皮给药后在大鼠体内的药动学.采用电喷雾离子源(ESI源),正离子检测,选择离子监测(SIM),监测离子对为m/z 411(尼索地平)和m/z 441(尼莫地平,内标).血浆中尼索地平在0.5～50 ng/ml浓度范围内线性关系良好,方法回收率为95％～102％,RSD≤5.8％.血浆中药物的提取回收率大于70％.采用雄性SD大鼠考察微乳凝胶经皮给药后的体内药动学行为并与口服混悬剂进行比较.含尼索地平20 mg的微乳凝胶经皮给药后的主要药动学参数分别为tmx (42.00±6.92)h,cmax (27.53±1.88) ng/ml,AUC0→72h(1736.31±106.59) ng·h·ml1,AUC0→∞(1999.66±119.26) ng·h·ml-1,MRT (44.02±0.77)h和t1/2 (7.61±0.70)h.     

高效液相色谱-质谱法测定大鼠血浆中硫酸酯型脱氢表雄酮和孕烯醇酮

目的:建立同时测定SD大鼠血浆中脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)和孕烯醇酮硫酸酯(PREGS)的高效液相色谱-质谱法。方法:选择雌酮硫酸酯(ES)作为内标。SD大鼠的血浆使用乙腈沉淀除去蛋白后,经固相萃取,水解,衍生化后,以高效液相色谱-质谱测定脱氢表雄酮硫酸酯和孕烯醇酮硫酸酯的浓度,采用大气压化学离子源(HPLC/APCI-MS),选择离子检测方式。结果:血浆中脱氢表雄酮硫酸酯和孕烯醇酮硫酸酯线性范围分别为:0.050~2.00ng,0.030~2.00ng,相关系数分别为0.9990和0.9979。低、中、高浓度血样的提取回收率在66.8%~82.3%之间,相对回收率为:98.4%~111.6%,日内、日间变异均小于15%。正常SD大鼠的血浆脱氢表雄酮硫酸酯和孕烯醇酮硫酸酯分别为0.070±0.020ng/ml、0.13±0.031ng/ml。结论:本实验方法具有灵敏度高、准确度好及变异较小的特点,适合测定SD大鼠血浆中脱氢表雄酮硫酸酯和孕烯酮硫酸酯的含量。     

双氯芬酸依泊胺凝胶在大鼠体内的药动学

建立了液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中的双氯芬酸,并考察皮肤局部给予双氯芬酸依泊胺凝胶后大鼠体内的药动学特征.血浆样品用甲醇沉淀蛋白,以布洛芬为内标,采用ESI源负离子模式、多反应监测(MRM)进行定量分析.检测离子对为m/z 295.9→m/z 252.0(双氯芬酸)和m/z 205.1→m/z 161.2(布洛芬).双氯芬酸在1～200 ng/ml浓度范围内线性关系良好,方法回收率为97.80％～104.4％,日内、日间RSD分别小于6.12％和7.51％.SD大鼠经皮给予0.3 g双氯芬酸依泊胺凝胶后,主要药动学参数分别为:cmax(79.90±29.8)ng/ml,AUC0 →,(1 198±349) ng·ml-1·h,AUC0 →∞(1 358±567) ng.ml-1·h,tmax(4.8±23)h,t1/2 (9.208±4.60)h,MRT0→1(11.22±1.06)h.     

硝呋太尔中有机溶剂残留量的GC测定

采用毛细管气相色谱法，以外标法测定硝呋太尔中有机溶剂甲醇、乙醇、二嚼烷、N，N-二甲基甲酰胺的含量。采用二乙烯基苯／苯乙烯多孔聚合物为固定液的毛细管石英色谱柱，程序升温的方法。各组分的线性关系良好(r均大于0．999)，平均回收率分别为99．2％、96．2％、90．7％和98．8％，检测限分别为2．9、3．0、2．2和1．8ng。     

气相色谱氮磷检测器法测定人血浆毒鼠强浓度

目的建立测定人体血浆中毒鼠强(TET)浓度的毛细管气相色谱/氮磷检测器(GC/NPD)分析法。方法血浆中TET用乙酸乙酯作液-液提取,以乙酸乙酯为溶媒,载气为氦气,色谱柱为HP-5弹性石英毛细管柱,GC/NPD测定毒鼠强的浓度。结果在100~500 ng.mL-1浓度范围内线性关系良好,r=0.997 2(n=5),最低检测浓度为100ng.mL-1。TET血浆样品的低、中、高3个浓度(100,200和400 ng.mL-1)日内、日间变异系数(RSD)均≤10%,方法回收率均≥80%。结论该法操作简便,结果准确,可用于TET中毒的实验室鉴别和临床救治过程中的体内毒物浓度监测。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中伊立替康及其活性代谢产物SN-38的含量

目的:建立同时测定大鼠血浆中伊立替康(CPT-11)及其活性代谢产物7-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38)浓度的高效液相色谱法。方法:以10-羟基喜树碱作为内标,先用7%高氯酸酸化血浆,再用7%高氯酸-乙腈(50∶50)沉淀蛋白。采用Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离;以0.05 mol·L-1的磷酸氢二钠-甲醇-三乙胺(50∶50∶0.025,磷酸调pH 3.0)为流动相;荧光检测波长:激发波长380 nm,发射波长550 nm。结果:大鼠血浆中CPT-11和SN-38线性范围分别是20～5000 ng·mL-1(r=0.9997)和2～500 ng·mL-1(r=0.9999)。两组分最低检出限分别为15 ng·mL-1和1.7 ng·mL-1。2组分平均相对回收率分别是98.7%和99.9%;平均绝对回收率分别87.2%和94.7%。2组分日内、日间精密度均小于12%。结论:本方法快速、简便、准确,灵敏度高,可用于CPT-11及其活性代谢产物SN-38药代动力学的研究。     

依那普利在大鼠体内的药动学研究

目的通过LC-MS/MS法测定大鼠血浆中依那普利活性代谢产物依那普利拉浓度,研究依那普利在大鼠体内的药动学。方法 Wistar大鼠ig依那普利15 mg/kg,采用固相萃取法对大鼠血浆样品预处理,洗脱液为甲醇、水。色谱与质谱条件为Diamond C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–5 mmol/L乙酸铵(45∶55);体积流量:0.5 mL/min;柱温:30℃;进样量:5μL。采用ESI(+)离子源;干燥气(N_2)体积流量11.0 L/min,压力275.8 k Pa,温度350℃;毛细管电压3 500 V;多级反应监测(MRM)模式,正离子模式;EMV为400 e V。结果血浆中内源性物质对测定无干扰,依那普利拉的线性范围为20~1 500 ng/mL,最低定量限为20 ng/mL。准确度和精密度良好。血浆样本中依那普利拉的提取回收率大于85%,且无浓度相关性。经2次冻融以及冷冻14 d稳定良好。大鼠体内依那普利拉的主要药动学参数:AUC_(0-t)为(8015±297.7)ng/mL·h,C_(max)为(1 405±269.10)ng/mL,t_(max)为(2.45±0.19)h,t_(1/2)为(4.82±0.32)h,Clz/F为(2.18±0.10)L/kg·h,Vz/F为(12.63±1.31)L/kg。结论本方法专属性强、灵敏度高、准确性好。通过测定代谢产物依那普利拉经时血药浓度,可以考察依那普利的药动学特征。     

大鼠血浆中抗精神分裂症候选新药SIPI6360立体异构体的LC-MS/MS法测定

建立了液相色谱-串联质谱法拆分并测定大鼠血浆中SIPI6360的立体异构体.采用Daicel Chiralpak IA手性柱,以甲醇为流动相,采用ESI源正离子模式、多反应监测进行定量分析.结果显示,(R)-(+)-SIPI6360与(S)-(-)-SIPI6360立体异构体分离良好,在0.5～100 ng/ml浓度范围内线性关系良好.方法回收率为94.0％～102.8％,批内和批间RSD小于5.2％和11.4％.     

液相色谱-串联质谱法研究升麻提取物在大鼠体内的药动学

目的:建立同时测定大鼠血浆中升麻4组分,升麻素、升麻亭、7,8-二脱氢-27-脱氧升麻亭和25-O-甲基升麻醇-3-β-D-半乳糖苷的液相色谱-串联质谱方法。方法:采用20(S)-人参皂苷Rg3为内标,血浆样品经固相萃取处理后,在负离子条件下多反应监测(MRM)方式进行扫描。结果:血浆中4种组分的线性范围为0.1～500 ng.mL-1,最低定量下限为0.1 ng.mL-1。方法的日内和日间精密度(RSD)均小于11.6%,样品提取回收率大于89.5%。结论:该方法灵敏、快速、准确,可用于大鼠血浆中升麻提取物有效成分含量的测定。     

HPLC同时测定大鼠血浆中克泻灵片的生物碱

目的建立克泻灵片中生物碱成分的大鼠血浆HPLC同时测定方法。方法灌胃克泻灵片,以乙酰苯胺为内标,RP—HPLC—UV法在220nm波长处进行血药浓度测定。结果槐定碱和苦参碱在大鼠血浆中定量准确,最低检测限分别为350ng·mL^100ng·mL^-1,回收率大于98％。结论该方法简便、准确、重复性好,可为克泻灵片的体内药动学研究提供方法学参考。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中替诺福韦的浓度

目的:建立大鼠血浆中替诺福韦浓度的测定方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。取6只大鼠单次灌胃给予富马酸替诺福韦酯100mg.kg-1,检测给药45min后血浆中药物浓度,以恩替卡韦为内标,选用阳离子固相萃取柱除去血浆中的蛋白质。色谱柱为AcquitybenUPLC-C18,流动相为0.2%甲酸水溶液(含40mmo.lL-1醋酸铵)-乙腈=97:3,流速为0.25mL.min-1,柱温为40℃,电喷雾正离子(ESI+)源,监测离子对分别为质荷比(m/z)287.9→175.7(替诺福韦)和m/z277.9→151.7(恩替卡韦)。结果:替诺福韦检测浓度的线性范围为10～800ng.mL-1(r=0.9992),最低检测限为10ng.mL-1,回收率为(100.22±9.47)%～(102.76±4.99)%,日间、日内RSD均小于9.4%;给药45min后血浆样品中替诺福韦的平均浓度为819.2ng.mL-1。结论:该方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可用于血浆中替诺福韦的浓度测定。     

高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中奥昔布宁的浓度

目的 建立一种用高效液相色谱-电喷雾离子化质谱联用技术测定奥昔布宁血药浓度的方法。方法 以0．0lmol／L乙酸铵水溶液-甲醇(15：85)为流动相，盐酸非洛普为内标，血浆样品经用环己烷萃取后上样，经C18柱分离后，以质谱为检测器，采用选择性离子检测(SIM)测定人体血浆中奥昔布宁的浓度。结果 线性范围0．2～50ng／mL(r=0．9948)，平均相对回收率在90％～110％之间，日内和日间精密度的RSD均小于10％，奥昔布宁的定量限为0．2ng／mL，提取回收率大于90％。结论 该方法快速、准确、灵敏，可用于奥昔布宁的药代动力学研究。     

HPLC法同时测定大鼠血浆中紫杉醇棕榈酸酯及其活性代谢产物紫杉醇的含量

目的 建立高效液相色谱法同时测定大鼠血浆中紫杉醇棕榈酸酯(PTX-PA)及其活性代谢产物紫杉醇(PTX)含量.方法 以多西他赛作为内标,以乙腈和水作为流动相进行梯度洗脱,流速为1mL·min-1,检测波长227nm,柱温30℃.结果 紫杉醇棕榈酸酯(r=0.9993)、紫杉醇(r =0.9999)在0.1～50μg·mL-1范围内线性关系良好.紫杉醇棕榈酸酯、紫杉醇定量限分别为100ng-mL-1、50ng·mL-1,两组分提取回收率均大于80％,两组分日内、日间精密度RSD％均小于5％.结论 本方法快速、简便、准确可靠,适合于大鼠血浆中紫杉醇棕榈酸酯及其活性代谢产物紫杉醇的检测.     

大鼠体内兰索拉唑血药浓度测定方法的研究

本文建立大鼠血浆测定的HPLC法,研究大鼠血浆中兰索拉唑的药动学.应用HPLC法,替硝唑为内标,用C18柱分离,用乙醚-二氯甲烷(3∶2)提取处理,流动相:乙腈-水(36∶64,0.2％三乙胺)磷酸调pH9.0,流速0.7mL·min-1.兰索拉唑在大鼠血浆中线性为20.0～20000ng·mL-1,日内、日间RSD均小于15％.本方法专属、稳定.     

电感耦合等离子体质-谱法测定人血浆中铋的浓度

目的 建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定人血浆中铋的浓度.方法 血浆样品经硝酸硝化处理后,用ICP-MS进行检测,检测元素:Bi、Ti(内标),RF功率:1 550 W,等离子体气流速:15 L· min-1,反应气模式:关,样本深度:7.5 mm,雾化室温度:2℃.结果 血浆中铋在0.312～20 ng·mL-1线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.312 ng·mL-1,绝对回收率为92.7％～97.5％,日内及日间精密度RSD均＜6.2％.健康志愿者单次给予复方雷尼替丁胶囊2粒(含铋220mg)后铋吸收迅速,平均峰浓度均＜50 ng·mL-1.结论 硝酸硝化前处理及ICP-MS测定人血浆中铋的方法灵敏、准确、简便,能满足生物样品分析的要求,可用于铋体内过程研究.     

青蒿中樟脑龙脑和异龙脑的含量测定

目的:测定青蒿中樟脑、龙脑、异龙脑含量.方法:采用毛细管气相色谱法,HP-5石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 m);FID检测器;程序升温.结果:樟脑、龙脑、异龙脑进样量分别在0.196～9.82 ng、0.139～6.94 ng、0.0596～2.98 ng范围内有良好线性关系.平均回收率分别为99.0％、99.0％和98.7％.结论:本方法简单、准确,重复性好,可用于青蒿药材樟脑、龙脑、异龙脑的含量测定.     

高效液相色谱法测定大鼠血浆内厄洛替尼的浓度及其药动学研究

目的 建立以高效液相色谱法测定大鼠血浆中厄洛替尼浓度的方法,并研究其在大鼠体内的药物动力学.方法 色谱柱为Dikma Diamonsil C18,流动相为乙腈-水=60∶40(pH=2.0),流速为1.2 mL· min-1,柱温为35℃;检测波长331nm.结果 厄洛替尼血药浓度在80～4 000 ng·mL-1与峰面积线性关系良好(r=0.997 7),最低检测限为80 ng·mL-1;日内、日间RSD均≤10％,提取回收率在83.77％～85.68％.6只SD大鼠单剂量静脉给予厄洛替尼(10 mg·kg-1)后药动学参数分别为:Cmax=(1.203×103士118.2)ng·mL-1; t1/2=(23.24±2.33)h;AUC0-r=(4.713×103士213.6) ng· h· mL-1;AUC0-∞=(5.363×103±323.6) ng· h· mL-1;MRT=(25.91±2.34)h;Vd=(28.44±1.58)L.结论 本方法简便、准确、灵敏、专属性强,同样适用于人血浆中厄洛替尼浓度的测定及其药动学研究,对于评价厄洛替尼疗效和安全性有重要意义.     

毛细管气相色谱法测定角鲨烯软胶囊中角鲨烯的含量

目的 建立毛细管气相色谱法测定角鲨烯软胶囊中角鲨烯的含量.方法 采用毛细管气相色谱法;色谱柱为RTX-5弹性石英毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25 μm);载气为氮气;检测器为FID;进样口和检测器温度均为280℃;柱温为250℃.结果 角鲨烯在1～50 mg·L-1与峰面积线性关系良好,r=0.997 6;加样回收率平均为100.8％(n=9);检测限为0.4 ng;定量限为2ng.结论 本法灵敏度高,简单易行,结果准确可靠,可为角鲨烯的质量控制提供依据.     

高效液相色谱-荧光法测定大鼠血浆中富马酸比索洛尔的浓度及药物动力学

目的建立大鼠血浆中富马酸比索洛尔(BF)浓度的测定方法,并研究大鼠灌胃给予BF后的体内药动学。方法以酒石酸美托洛尔为内标,采用HPLC-荧光法,测定大鼠血浆中药物浓度。色谱柱:Wondasil C18(250mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.01 mol·L-1磷酸氢二铵缓冲液(35:65);流速:1.0 mL·min-1;荧光检测的激发波长与发射波长分别为275 nm与305 nm;柱温:室温。大鼠灌胃给予0.45 mg·kg-1的BF后,于不同时间采血,测定血浆中药物浓度并估算其药动学参数。结果 BF在4.0¹28.0 ng·mL-1与峰面积线性关系良好,r=0.999 6,提取回收率为88.52%128.0 ng·mL-1与峰面积线性关系良好,r=0.999 6,提取回收率为88.52%⁹6.3%,定量下限为4.0 ng·mL-1。大鼠灌胃给予0.45 mg·kg-1的BF后,其体内消除半衰期为2.5 h。结论本方法操作简便、经济,准确度与灵敏度高,可用于大鼠血浆中BF的测定及药动学研究。     

CB1R部分拮抗剂alisol G的大鼠药动学研究及血脑屏障透过率初评

建立了UPLC-MS/MS方法测定大鼠血浆及脑脊液中大麻素受体1(CB1R)部分拮抗药泽泻醇G(alisol G)的浓度,评价其血脑屏障透过性。以利莫那班为内标,采用液液萃取前处理方法,色谱柱为ACQUITY BEH C18柱,流动相为甲醇∶0.1%乙酸溶液(90∶10),质谱采用正离子扫描的电喷雾离子源,多反应监测(MRM)模式,对m/z 455.16→m/z383.04(泽泻醇G)、m/z 464.88→m/z364.75(内标)进行定量分析。泽泻醇G血浆样品在10~4000ng/ml、脑脊液样品在4~400 ng/ml范围内线性良好;批内、批间RSD≤10.22%,样品回收率稳定(78.5%~86.5%)、贮存和处理条件下稳定性良好。本方法灵敏、可靠,能准确测定大鼠血浆及脑脊液中的泽泻醇G浓度。大鼠灌胃后血浆中cmax为312.64ng/ml,脑脊液中检测不到原型化合物,表明泽泻醇G不易透过血脑屏障。本研究结果为CB1R部分拮抗药泽泻醇G的后续研究开发提供了重要依据。