HPLC-MS/MS法测定人血浆中乌苯美司浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中乌苯美司浓度。方法采用API3000型HPLC-MS/MS液质联用系统,Ultimate C18分析柱(50mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(70∶30∶0.05,V/V/V),流速为0.2mL/min,格拉司琼作为内标。样品经过固相萃取后浓缩进样,多反应离子检测模式,正离子扫描,离子源为ESI源。结果检测乌苯美司的线性范围为0.4～4000ng/mL,最低定量限为0.4ng/mL。批内精密度和批间精密度均小于6%。结论本法具有快速简便、灵敏准确的特点,可满足乌苯美司临床药物浓度测定的需要。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中阿戈美拉汀的浓度

目的采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中阿戈美拉汀血药浓度,并将该方法应用于药动学研究中。方法血浆样品经碱化后,采用乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比4∶1)萃取,以托莫西汀为内标,采用HPLC-MS/MS法测定。色谱柱为Agilent Eclipse plus C18(4.6 mm×150 mm,3.5μm),流动相为甲醇-水(体积比95∶5,含0.005 mol.L-1甲酸铵和质量分数0.1%甲酸),流速为0.5 mL.min-1,柱温为40℃;质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子电离,选择性离子检测(MRM),阿戈美拉汀m/z为244.2→185.2,托莫西汀m/z为256.1→44.1。结果阿戈美拉汀质量浓度在0.025～10μg.L-1范围内线性关系良好,提取回收率在84.45%～86.94%之间,批内、批间精密度分别小于3.76%、12.23%。结论本文建立的用于测定人血浆中阿戈美拉汀的HPLC-MS/MS方法快速、准确、灵敏,可用于药动学研究及治疗药物监测。     

液液萃取-超高效液相色谱-串联质谱法定量测定污水中10种毒品

建立一种基于液液萃取-超高效液相色谱-串联质谱法（LLE-UPLC-MS/MS）同时测定污水中10种毒品的氘代内标定量分析方法。污水样品经二氯甲烷-乙酸乙酯（1∶1）液液萃取浓缩,采用C₁₈色谱柱,流动相为0.1%甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液和乙腈,线性梯度洗脱分离,ESI正离子化多反应监测进行定量分析。10种待测物在各自的标准曲线范围内线性关系良好（r≥0.995 7）,定量限为1 ng/L（除苯丙胺为2.5 ng/L）,相对回收率范围为96.36% ~ 106.43%,日内与日间精密度均小于4.70%。该方法准确可靠、重复性好,适用于污水中10种毒品的定量检测,对影响固相萃取富集的复杂基质污水同样适用,为实时监测药品滥用提供了新的分析手段。     

Cobas e601全自动免疫分析仪检测白细胞介素6的性能分析

目的 评估Cobas e601全自动免疫分析仪检测白细胞介素6 (IL-6)的性能。方法 对Cobas e601全自动免疫分析仪检测IL-6进行系统的方法学评价,包括精密度评价、线性范围验证、准确度评价及参考范围验证等。结果 Cobas e601全自动免疫分析仪检测IL-6的低水平批内、批间精密度分别1.73%、1.82%;高水平批内、批间精密度分别为1.40%、1.48%;2.92～4504.50 pg/ml内线性关系良好(Y=0.9951X+6.044 7,R²=0.999 9);回收率为103.0%;参考区间<7.0 pg/ml。结论 基于Cobas e601全自动免疫分析仪对IL-6的检测性能良好,准确度高,精密度好,线性范围宽,值得临床实验室推广。     

HPLC紫外检测法测定血浆甲磺酸瑞波西汀浓度

目的建立测定血浆甲磺酸瑞波西汀浓度的高效液相色谱检测法。方法以麦普替林为内标,取血浆样本1mL,用饱和Na2HPO4碱化后以重蒸乙醚5mL提取,再用0.2mol.L-1盐酸0.2mL反提取,80℃～100℃热水浴下氮气吹干盐酸层,用50μL流动相重组后进样。采用InertsilODS-3柱(GLSciense,5μm,4.6mm×150mm)进行分离。流动相为乙腈-50mmol/L磷酸钠缓冲液(pH=6)(40:60,v/v),流速为0.6mL.min-1,紫外检测波长210nm。结果瑞波西汀对内标的峰高比与血浆甲磺酸瑞波西汀浓度直线相关,相关系数r=0.9997,线性范围3.12～200ng.mL-1。甲磺酸瑞波西汀的最低检测限0.5ng,最低检测浓度2ng.mL-1,提取回收率在82.50%～86.08%之间,批内和批间RSD分别为2.02%～5.33%和3.83%～8.50%。结论本法具有较高的灵敏度、精密度和特异性,适用于甲磺酸瑞波西汀的药代动力学和治疗药物监测的研究。     

HPLC-MS/MS法测定血浆中华法林对映异构体浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中华法林对映异构体的浓度。方法 以乙酸乙酯为萃取剂,采用MS Chiral? MS-OD(50×2.1 mm, 3 μm)为手性柱,流动相为甲醇∶水∶甲酸=85∶15∶0.05,流速为0.18 mL/min。采用负离子模式,电喷雾离子源（ESI）,以萘普生为内标定量,华法林和内标的检测离子对质荷比分别为（m/z）307.2→160.9和（m/z）228.9→185.1。结果 R-华法林批内精密度,其相对标准偏差(RSD)为3.2%~5.8%,批间RSD为2.5%~5.1%;方法回收率(96.1±5.6)%~(105.4±4.7)%,提取回收率80.7%~84.4%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%;S-华法林批内精密度RSD为3.7%~5.2%,批间RSD为3.2%~4.8%;方法回收率(98.3±5.1)%~(103.7±3.8)%,提取回收率81.3%~84.6%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%。最低定量限均为0.1 μg/mL。结论 本文建立的方法准确、灵敏、可靠,可用于人血浆中华法林对映体的拆分和血药浓度的测定。     

反相高效液相色谱法测定人血清中氯氮平含量

目的　探讨血清中氯氮平含量的测定方法。方法　以C18色谱柱、甲醇 -水 (80∶2 0 )、0 .1%三乙胺 (pH =7.75 )为流动相 ,在 40℃、2 30nm波长下分离、检测氯氮平 ,以安定做内标 ,内标法定量。结果　线性范围为 0～ 16 0 0ng·ml-1,r =0 .9998。氯氮平的相对回收率为99.85 %～ 10 1.2 0 %。三浓度的平均日内相对标准偏差 (RSD)为 2 .5 % ,平均日间RSD为 4.0 %。结论　本方法快速、简便、准确 ,可用于科研和临床工作中氯氮平血药浓度的快速检测     

HPLC-MS法快速定量分析人血浆中硫普罗宁浓度

目的建立快速测定人血浆中硫普罗宁浓度的HPLC-MS联用分析方法.方法在全血中加入抗氧剂半胱氨酸后,于分得的血浆中加入霉酚酸为内标,酸化后经乙酸乙酯提取,进行HPLC-MS测定.色谱柱为Shim-pack VP-ODS C18 column (250 mm×2.0 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1 %乙酸(7030),流速为0.2 mL/min.结果方法的线性范围为30～4 000 ng/mL,提取回收率大于70%,批间和批内精密度均小于8.5%,单样品分析时间7.5 min.并将所建立的方法成功地应用于硫普罗宁片生物等效性研究.结论本方法操作简单、快速,灵敏度、准确度、精密度和定量分析线性关系均良好,符合生物样品测定要求.     

液相色谱-质谱法测定孕妇尿液中3种残留的氯霉素类抗生素

目的 建立液相色谱-质谱法测定孕妇尿液中3种残留的氯霉素类抗生素,并进行方法学验证。方法 尿液利用Oasis HLB固相萃取小柱进行净化和富集,液相分离采用SHISEIDO MG-C18(100 mm×3.0 mm,3.0μm)色谱柱,流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸）,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源,选择离子监测模式检测[M-H]-：氯霉素m/z 320.8、氟苯尼考m/z 355.8、甲砜霉素m/z 353.8、甲苯磺丁脲（内标）m/z 268.9。结果 尿液中3种残留的氯霉素类抗生素在5～500 ng/mL范围内呈良好的线性关系（均r>0.999）;批内和批间的精密度及准确度良好（RSD<8.9%,∣相对误差（RE）∣<9.3%）;提取回收率为71.4%～108.5%,稳定性良好（∣RE∣<11.8%）;几乎没有残留;稀释不影响测定的精密度和准确度。共检测了18份不同孕期（孕早期、孕中期和孕晚期）孕妇的尿样,大部分样品能检测到氯霉素（但浓度低于最低定量限5 ng/mL）,其中少量样品能测出氟苯尼考,完全没有检测到甲砜霉素残留。结论 该方法操作简便、重现性好...     

高效液相色谱-大气压化学电离源-质谱法测定人血浆中帕洛诺司琼浓度

目的:建立液质联用法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中帕洛诺司琼浓度的方法?方法:色谱条件为Hypersil GOLD(150.0 mm × 4.6 mm,5 μm)柱,流动相为0.2%醋酸铵水溶液(含0.1%甲酸)-甲醇(50∶50),质谱条件为大气压化学电离源(APCI源),血浆样品中加入内标,碱化后用乙酸乙酯提取,浓缩后采用高效液相色谱-质谱联用进行测定?结果:血浆样品中帕洛诺司琼浓度在0.04~20.00 ng/ml的线性范围内关系良好(r = 0.999 9),定量下限为0.04 ng/ml;低?中?高浓度的回收率?批内及批间精密度均符合生物样本测定方法学要求?结论:本方法灵敏度高?专属性强?重现性好,可用于帕洛诺司琼药代动力学研究及血药浓度监测?     

妥舒沙星人体血药浓度测定及药代动力学研究

目的建立反相高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中妥舒沙星浓度的方法。方法以加替沙星为内标,血浆经酸化采用20%高氯酸提取,色谱柱为XDB C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为乙腈-甲醇-20 mmol.L-1磷酸二氢钾(15∶15∶70),荧光检测(λex=342 nm,λem=420 nm)。结果妥舒沙星血浆浓度在10.80~1296 ng.ml-1内具有良好线性关系,平均相对回收率大于95%,萃取回收率大于60%,日内、日间相对标准差(RSD)均小于4.3%。结论该方法灵敏、准确,可用于妥舒沙星的药动学研究。     

高效液相色谱法测定血清叶黄素和玉米黄素

目的:建立C30-高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)内标法测定血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素。方法:应用Develosil C30-UG色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为乙腈∶甲醇(体积比60∶40),流动相B为甲基叔丁基醚,梯度洗脱。流速1 mL/min,检测波长450 nm,进样量20μL,柱温25℃。内标物为全反式-β-阿扑-8'-胡萝卜醛。结果:血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的分离效果良好,保留时间分别为9.9min、10.3 min和21.2 min,日内相对标准差分别为3.22%、3.81%和1.60%。血清叶黄素、β-胡萝卜素在0.012 5～12.5 mg/L(r=0.999 5、r=0.999 7),玉米黄素在0.005～5.0 mg/L(r=1)范围内呈良好线性关系。58名正常老年人(年龄50岁)血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的平均浓度分别为0.410μmol/L、0.054μmol/L和0.128μmol/L。结论:该C30-HPLC内标法是定量分析血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的可靠方法之一。     

反相高效液相色谱法同时测定血清中多索茶碱和茶碱的浓度

目的：建立同时测定人血清中茶碱和多索茶碱浓度的反相高效液相色谱方法。方法：采用内标法,咖啡因为内标,分析柱为WondaSilCl8,流动相为甲醇-水-三乙胺-冰醋酸（35：65：0.01：0.01）,流速为1.0mL/min,柱温：30℃,检测波长为273nm;血清样品经12%高氯酸直接沉淀蛋白离心后取样进行色谱分析。结果：样品与内标的峰面积比（R）同样品浓度（C）间线性均良好,线性范围均在2.5-40mg/L,回归方程分别为：茶碱C=3.746R＋0.4436,r=0.9997,多索茶碱C=10.24R-4.506,r=0.9999;平均回收率为：茶碱99.89%（RSD=1.07%,n=5）,多索茶碱99.60%（RSD=0.81%,n=5）。结论：该方法简单方便,快速,准确     

Analysis of Tablets Containing Estradiol Valerate and Norethisterone by HPLC

To develop a HPLC method for determination of estradiol valerate and norethisterone in compound batlets.Methods The chromatographic system consisted of Zorbax CN column and mobile phase of MeCN-H2O (47:53),with a detection wavelength at 280 nm.Progesterone was as the internal standard.Results The average (n=9)recovery both for estradiol valerate and norethisterone was 100.6% with RSD 0.9% and 100.2% with RSD 0.8%,respectively.Three batches of samples were analyzed,and satisfactory results were achieved.Conclusion Without complicated sampling procedure,the method was simple,rapid and accurate for the assay of the components in this pharmaceutical formulation.     

血清中罗红霉素浓度反相高效液相色谱测定法的改进

OBJECTIVE: To make better the RP-HPLC method for the determination of roxithromycin(RM) in human serum. METHODS: RM and clarithromycin (internal standard) were extracted from alkalinized serum sample (500 microliters) with methylene chloride. After evaporation of the organic layer, the residue was dissolved in 100 microliters of acetonitrile-ammonium phosphate (1:1, pH 6.0) and washed with n-hexane, then 20 microliters was injected onto a column (5 microns, 15 cm x 4.6 mm) of Penomenex luna C18. The mobile phase was acetonitrile-0.05 mol/L phosphoric acid (39:19:42, adjusted to pH 7.2 with ammonia water) pumped at 1.2 ml/min through the column. The variable wavelength UV detector operated at 0.01 aufs and the wavelength was set at 210 nm. RESULTS: The retention times for RM and clarithromycin were 4.4 min and 5.0 min, respectively. Standard curve was linear in the concentration range of 0.25 to 32 mg/L. The detection limit in serum was 0.06 mg/L; the average method recovery 97.4%; the inter-day RSD less than 3.0%. CONCLUSION: This method was found to be simple, rapid, sensitive and accurate for determination of RM in human serum.     

血浆中萘丁美酮活性代谢物的反相高效液相色谱法测定

为研究萘丁美酮的相对生物利用度,建立了用反相高效液相色谱法测定血浆中萘丁美酮的活性代谢物６－甲氧基－２萘乙酸（ＭＮＡ）溶液的方法。实验结果表明,以萘普生作内标,甲醇：０．０２ｍｏｌ／Ｌ醋酸盐缓冲液（ｐＨ３．０）为７４．２６作流动相,用ＹＷＧ－Ｃ１８柱有良好的分离效果;血浆样品在ｐＨ３．０醋酸盐缓冲液存在下,用二氯甲烷萃取,回收率高,在２７０ｎｍ波长下检测杂质峰少。该法标准曲线在０．５～６４ｍｇ／Ｌ     

HPLC法测定紫杉醇血药浓度条件的筛选

目的：筛选小鼠血清中紫杉醇浓度测定的方法。方法：以Agilent C18柱为固定相,检测波长为227 nm,流速为1 mL.min-1,25℃条件下对流动相、内标、提取方法进行筛选。结果：确定以固相萃取方法提取样品,内标为地西泮和多西紫杉醇,流动相为磷酸水溶液-乙腈（50：50 V/V）以达到最佳的分离效果,测定线性范围在0.39～100.00μg.mL-1,回归方程为Y=13.325X＋0.851 9（R2=0.999 3）。结论：筛选出的方法血清干扰少,样品测定周期短、快速、准确,为血清中紫杉醇浓度的测定提供了优选的方法。     

高效液相色谱法测定中国健康志愿者血清中坎地沙坦及坎地沙坦西酯片的体内药动学

 目的建立高效液相色谱-荧光检测法测定人血清中坎地沙坦的方法,考察坎地沙坦西酯片在中国健康志愿者体内的药动学参数。方法 以萘普生为内标,按内标法定量。血清样品经盐酸酸化后,加入甲基叔丁基醚萃取,离心分离,取上清液置于已加入1,3-丙二醇的离心管,吹干后用流动相溶解进样。色谱柱：YMC&#61650; ODS柱 （250 mm×4.6 mm,5 µm）,柱温：30 ℃;流动相：10 mmol/L磷酸二氢钾溶液（磷酸调pH到3.0）∶乙腈=60∶40,流速：1.0 mL/min。荧光检测波长：&#61548;ex 270 nm,&#61548;em390 nm。用该方法测定20名健康志愿者口服坎地沙坦西酯片8mg后血清中的药物浓度,进行药动学分析。 结果 坎地沙坦和萘普生的保留时间分别为10.4 min和16.5 min;坎地沙坦的线性范围是1.01~202 µg/L;日内、日间RSD小于10.39%;方法回收率在94.05%~112.80%范围内。结论 此方法适合人体药动学的血样分析,结果准确可靠。     

反相高效液相色谱法测定微量血浆中卡马西平浓度

目的 :建立微量血浆中卡马西平浓度的测定方法。方法 :采用反相高效液相色谱 (HPLC)法 ,以艾司唑仑为内标 ,测定微量血浆中卡马西平浓度。色谱柱 :ShimadzuShimpackCLC -ODS 6 0mm× 15 0mm ,加保护柱 ,流动相为甲醇和水 (6 0∶40 ) ,流速 0 8ml/min ,检测波长为 2 5 4nm。结果 :卡马西平在 2～ 16mg/L浓度范围内线性良好 ,r=0 9996。最低检测限为 4 92 μg/L。卡马西平高、中、低 3种浓度的平均回收率分别为 97 0 0 % ,96 0 0 % ,93 98% ;RSD分别为 1 1% ,3 0 % ,4 1% (n =9)。日内RSD分别为 1 9% ,1 6 % ,6 3% (n =5 )。日间RSD分别为 1 8% ,2 4% ,2 9% (n =5 )。结论 :该方法准确、快速、简便 ,可作为卡马西平血药浓度常规监测方法