miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的 探讨miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义。方法 收集经病理证实的脑胶质瘤患者的脑脊液标本63例为病例组,同期非颅内肿瘤患者脑脊液标本20例为对照组。采用PCR检测miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335在纳入群体脑脊液中的表达;采用Spearman秩相关分析miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达与在不同级别胶质瘤中的相关性。结果 病例组患者脑脊液中miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达水平显著低于对照组(P<0.05)。高级别胶质瘤患者脑脊液中miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达水平显著低于低级别胶质瘤患者(P<0.05);Spearman秩相关分析显示miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达与肿瘤级别呈显著负相关性(P<0.001)。结论 人脑脊液中miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达,可能可以作为诊断脑胶质瘤及术前判断病理分级的辅助方法。     

miRNA-126、miRNA-26a在食管癌中的表达及与患者临床特征的关系分析

目的 检测miRNA-126、miRNA-26a在食管癌患者中的表达水平,并分析miRNA-126、miRNA-26a表达情况与食管癌临床特征的关系.方法 收集113例食管癌手术切除患者的食管癌组织和癌旁组织,分析miR-NA-126和miRNA-26a在食管癌组织和癌旁组织中的相对表达量及相关性,采用受试者工作特征(...     

miRNA-130a在肝癌组织中的表达

目的探讨肝癌组织中miRNA-130a的表达及临床意义。方法收集经病理确诊的肝癌进行外科手术切除的28例患者的肝癌组织及癌旁组织,选取16例肝外伤后肝切除患者正常肝组织作为对照,应用实时定量PCR技术检测各组织中miRNA-130a的表达。结果肝癌组织中miRNA-130a表达显著高于癌旁组织及肝外伤切除正常肝组织（P〈0.05）。miRNA-130a表达与肝癌分化程度、临床分期和是否合并肝硬化有关（P〈0.05）。结论 miRNA-130a在肝癌组织中异常高表达,可能参与肝癌的发生发展过程。     

miRNA-27a在胃癌中的研究进展

miRNA-27a（miR-27a）是miR-23a-27a-24基因簇的一员,在胃癌中表达异常。miR-27a通过调控SFRP1、PHLPP2、BTG2、SOCS6、FOXO1等抑癌基因,在胃癌细胞的上皮间质化、增殖、微环境、化疗药物耐药性方面起重要作用。同时,miR-27a的单核苷酸多态性与胃癌也成为了近年的研究热...     

miRNA-20a在膀胱癌中的表达及其机制研究

  目的  探讨miRNA-20a在膀胱癌组织中的表达及其机制。  方法  收集2014年1月至2015年1月昆明医科大学第二附属医院96例患者的组织标本,运用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测miRNA-20a在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达;生物信息学方法预测miRNA-20a的靶基因并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证;qRT-PCR、Western blot以及细胞免疫荧光分别检测人膀胱癌细胞系T24和J82细胞转染miRNA-20a模拟物或阴性对照后对靶基因mRNA和蛋白表达的影响;CCK-8、Transwell侵袭小室和划痕实验检测过表达miRNA-20a后T24细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的改变。  结果  miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且与肿瘤的病理分级、临床分期、转移以及复发密切相关（P＜0.001）;双荧光素酶报告基因实验证实miRNA-20a与人源性长寿保障基因2（Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2）的3'-UTR直接靶向结合;转染miRNA-20a模拟物可显著下调膀胱癌细胞中LASS2 mRNA和蛋白的表达（P＜0.01）,增强膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力（P＜0.01）。  结论  miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且miRNA-20a可通过靶向抑制LASS2促进膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移,与膀胱癌的发生发展相关。      

miRNA-31生物学功能及其与肿瘤关系的研究进展

微小RNA(miRNA)是一类长20～25个核苷酸的单链RNA分子,能调节靶基因的表达及相关信号通路,发挥抑癌基因或原癌基因的功能,从而影响肿瘤的发生发展.miRNA-31在多种肿瘤中异常表达,在不同类型的肿瘤中发挥不同甚至完全相反的作用,其异常表达与肿瘤的发生发展密切相关.此外,miRNA可能成为肿瘤早期诊断的标志物,对肿瘤的诊断和预后具有潜在的应用价值.目前一些研究提供了与miRNA-31失调相关的上游和下游事件的信息,有助于揭示恶性肿瘤发生的分子机制.本文对miRNA-31在恶性肿瘤发生发展、转移及治疗等方面的研究进展进行综述.     

miRNA-125a靶向调控SMURF1对结肠癌生物学行为的影响

目的探讨miRNA-125a通过对靶基因SMURF1的调控在结肠癌中的影响。方法 qRT-PCR检测结肠癌患者血清中miRNA-125a和SMURF1表达水平并分析其与结肠癌相关临床指标的相关性;microRNA靶基因数据库预测miRNA-125a靶基因SMURF1并使用荧光素酶报告基因法验证其结合;qRTPCR和Western blot检测miRNA-125a模拟物对SMURF1mRNA及蛋白表达的影响;HE染色检测结肠癌组织中SMURF1的表达;CCK-8法、细胞划痕实验及流式细胞法检测miRNA-125a模拟物和SMURF1对SW480细胞增殖、迁移及周期的影响;构建结肠癌肿瘤异种移植小鼠模型,采用称重及PCNA染色检测miRNA-125a模拟物对小鼠体内肿瘤生长的影响。结果结肠癌患者血清中miRNA-125a表达水平与结肠癌相关临床指标呈负相关性,SMURF1表达水平与结肠癌相关临床指标呈正相关性。结肠癌组织中miRNA-125a的表达水平显著降低,miRNA-125a模拟物可抑制SMURF1的mRNA翻译及蛋白水平。结肠癌肿瘤组织中SMURF1表达水平明显升高,miRNA-125a模拟物可以抑制SW480细胞的增殖、迁移和S期细胞周期的聚集,然而这种抑制效果会因SMURF1表达升高而减弱。miRNA-125a模拟物抑制小鼠体内结肠癌生长及SMURF1的表达。结论 miRNA-125a通过下调SMURF1的表达在结肠癌的发展过程中发挥抑制作用,具有成为结肠癌诊断及治疗靶点的潜力。     

miRNA-130a与非小细胞肺癌侵袭转移相关研究进展

microRNA(miRNA)是近年来发现的一类长度为18-25个核苷酸的非编码小分子单链RNA。它主要通过与靶标基因3’UTR(非翻译区)的完全或不完全配对,降解靶标基因mRNA或抑制其翻译,从而参与调控个体发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命活动。越来越多的实验证据表明,miRNA可通过调控其靶标基因参与的信号通路,影响肿瘤的发生和发展,发挥类似于癌基因或抑癌基因的功能。miRNA的发现为肿瘤发病机制的研究提供了新思路,也为肿瘤诊断和治疗提供了新的策略。本综述主要介绍miRNA-130a与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancinoma,NSCLC)侵袭转移相关研究进展。     

miRNA-302a在子宫内膜癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的:检测miRNA-302a在子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)组织中的表达,研究其与临床病理特征之间的关系.方法:应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测34例子宫内膜癌组织及30例正常子宫内膜组织中miRNA-302a的相对表达量,并分析miRNA-302a在不同临床病理资料的子宫内膜癌组织中的表达的差异性.结果:miRNA-302a在子宫内膜癌组织中的表达水平低于在正常子宫内膜组织中的表达水平(P=0.049,<0.05),在不同的组织学分化程度(高、中、低分化)的子宫内膜癌组织中,miRNA-302a的表达存在统计学差异(P=0.017,<0.05);在不同的肌层浸润深度(深度≤1/2、深度>1/2)的子宫内膜癌组织中miRNA-302a的表达具有统计学差异(P=0.012,<0.05);而miRNA-302a在子宫内膜癌组织中的表达水平与病理手术分期、淋巴转移及脉管浸润等临床病理资料之间无明显统计学关系(P>0.05).结论:与正常子宫内膜组织相比,miRNA-302a在子宫内膜癌组织中的明显低表达,并且与组织学分化程度(高、中、低分化)、肌层浸润深度(深度≤1/2、深度>1/2)有关提示其可能发挥抑癌基因的作用.     

miRNA-146a在甲状腺癌细胞中的靶基因预测及相关通路分析

摘 要：［目的］利用生物信息学方法对miRNA-146a在甲状腺癌细胞BCPAP中的作用进行转录组测序,从分子水平研究miRNA-146a对甲状腺癌发病的作用机制,寻找潜在的治疗靶点。［方法］ 对甲状腺癌细胞BCPAP分别转录miRNA-146a的模拟物、空白模拟物和miRNA-146a的抑制物及空白抑制物,荧光定量PCR检测细胞miRNA-146a的表达;高通量测序检测差异miRNA;对检测结果的差异基因与miRTarBase、miRWalk2.0和TargetScan中miR-146a靶基因数据库共分析,预测miRNA-146a靶基因;用Cluster Profiles 3.0.5软件进行富集分析。［结果］转录组测序结果与miRTarBase、miRWalk2.0和TargetScan中miRNA-146a靶基因数据库共分析,提示miRNA-146a靶基因与CXCL8、CXCR4、IRAK1、PRKCE和LFNG等9个靶基因相关。GO功能注释预测靶基因集合富集在炎症反应、细胞运动及迁移的正调节、趋化性调节、G蛋白偶联受体结合、细胞因子活性及受体结合。KEGG信号通路富集结果提示与Toll样受体信号通路、Notch信号通路、Fc epsilon RI信号通路和趋化因子信号通路等相关。［结论］ miRNA-146a在甲状腺癌组织中的表达可能是其分子诊断的有用生物标志物和潜在的靶点,可为甲状腺癌的临床诊断提供一定参考。     

微小RNA-148a抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移的作用机制

目的:研究微小RNA-148a(miR-148a)在乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的表达,探讨上调miR-148a的表达对其迁移的影响及机制.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞株MDA-MB-231中miR-148a的表达水平.应用脂质体法将miR-148a mimic及阴性对照分别转染MDA-MB-231细胞,qRT-PCR检测转染效率;细胞划痕实验检测转染前后MDA-MB-231细胞迁移能力的变化;Western blot方法检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白Slug、Snail和E-cadher-in表达水平的变化.结果:与MCF-10A细胞相比,MDA-MB-231细胞中miR-148a的表达水平明显降低(P<0.05);与阴性对照组相比,miR-148a转染组中miR-148a的表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-148a后,MDA-MB-231细胞迁移能力明显下降,Slug和Snail蛋白表达明显降低,E-cadherin蛋白表达明显增加.结论:miR-148a可通过调控Slug、Snail及E-cadherin蛋白的表达抑制EMT,进而抑制乳腺癌细胞的迁移能力.     

腺病毒介导miRNA-29a过表达抑制人胃癌细胞的增殖

目的： 利用重组人5型复制缺陷型腺病毒载体介导miRNA-29a(miR-29a)过表达,观察miR-29a对人胃癌细胞系SGC-7901 及AGS的增殖抑制作用。 方法： 构建含pre-miR-29a的重组腺病毒Ad-miR29a及含LacZ基因的对照腺病毒Ad-LacZ,分别感染人胃癌SGC-7901及AGS细胞,采用real-time PCR法检测SGC-7901及AGS细胞中miR-29a的表达,CCK-8法检测miR-29a对SGC-7901及AGS细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测SGC-7901及AGS细胞的细胞周期,Transwell法检测miR-29a对SGC-7901及AGS细胞迁移能力的影响。 结果： 与Ad-LacZ对照组相比,Ad-miR29a组感染后胃癌SGC-7901及AGS细胞中miR-29a的表达均显著增加[（17.35±0.71） vs （1.12±0.09）,（26.50±1.09） vs （ 0.95±0.04）;均P<0.01];且胃癌SGC-7901及AGS细胞增殖明显受到抑制,感染6 d后D值均显著降低[（0.54±0.03） vs （0.77±0.04）,（0.70±0.03） vs （088±0.04）;均P<0.01）],而Ad-LacZ感染组与未感染组相比则无明显变化（P>0.05）;与Ad-LacZ对照组相比,Ad-miR29a组SGC-7901及AGS细胞中G0/G1期细胞比例均显著增加[（63.10±4.91）% vs （47.60±5.31）%,（6980±3.15）% vs （54.60±4.22）%;均P<0.05],但胃癌SGC-7901及AGS细胞的迁移能力并没有明显差异。 结论： miR-29a过表达可有效抑制胃癌SGC-7901及AGS细胞的增殖,miR-29a有望成为治疗胃癌的新靶标。     

miRNA-30a 在肾细胞癌中的表达及作用

目的：探讨微小RNA （miRNA ）- 30a 在肾细胞癌组织和细胞中表达及其临床意义。方法：收集95例2006年4 月至2011年3 月哈尔滨医科大学附属第二医院收治患者,从获取的新鲜肾细胞癌组织和对应的正常对照组织样本以及肾癌细胞系中分别提取总RNA ,应用荧光实时定量PCR（qRT-PCR）法检测miRNA-30a 表达水平,并分析miRNA-30a 与临床病理资料和预后的关系。采用生物信息学方法预测可能的靶基因并进行验证。利用MTT 法验证miRNA-30a 对细胞增殖的作用。结果：miRNA-30a 肾癌组织中表达水平显著低于正常肾组织（P < 0.01）,在肾癌细胞系中表达低于正常肾上皮细胞。miRNA-30a 可抑制肾癌细胞的增殖。生物信息学方法和qRT-PCR表明,异黏蛋白（MTDH）为miRNA-30a 靶基因。Kaplan-Meier 生存分析显示,miRNA-30a 高表达的肾癌患者总生存期优于低表达者（P < 0.01）。 结论：miRNA-30a在肾癌中低表达,miRNA-30a 低表达与肾癌不良预后有关,并且miRNA-30a 可通过MTDH 抑制肾癌细胞的增殖。     

miRNA-34 a对人结肠癌细胞 HCT116增殖及侵袭转移的影响

目的：研究微小RNA-34a（microRNA-34a,miR-34a）在人结肠癌细胞株HCT116中的过表达对细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法设计合成并构建携带绿色荧光蛋白（ GFP）的miR-34a真核表达载体,脂质体法稳定转染HCT116细胞。通过Realtime PCR验证转染后miR-34a的表达变化。 MTT法检测转染前后HCT116细胞增殖能力变化, Transwell法检测转染前后HCT116细胞侵袭能力改变,western blot检测目的蛋白的表达。结果 miR-34a转染HCT116细胞后其表达量增加到（7．32±1．34）倍,而HCT116细胞增殖能力也受到显著抑制,下降到（0．49±0．10）;Bcl-2蛋白受到miR-34a表达的抑制,而BAX的表达则受到miR-34a表达的增强;HCT116细胞侵袭能力在miR-34a过表达后显著增强,相应的MMP-2和MMP-9表达也出现显著增强。阴性对照组与空白对照组比较无显著性差异。结论 miR-34a的过表达能够抑制人结肠癌细胞HCT116的增殖及侵袭转移,与调控Bcl-2／BAX和MMP-2和-9蛋白的表达密切相关。     

miRNA-15a通过靶向Wnt3a调控Wnt/β-catenin信号通路抑制卵巢癌的发展和转移

目的 :研究在卵巢癌发展转移进程中miRNA-15a的作用, 并探讨其作用机制。 方法 :收集锦州医科大学附属第一医院2012年5月至2015年6月32例卵巢癌患者的手术切除标本, 采用RT-PCR检测miRNA-15a表达。将培养的卵巢癌SKOV-3细胞分为转染miRNA-15a模拟物的实验组和转染无义miRNA的对照组, 采用CCK8、Transwell及流式细胞术检测细胞增殖、侵袭和凋亡的变化, 采用Western blot法检测相关蛋白表达。通过生物信息学方法预测miRNA-15a靶基因, 采用双荧光素酶报告基因实验结合Western blot法验证miRNA-15a对靶基因的调控。检测Wnt3a与miRNA-15a模拟物共转染SKOV-3细胞后对细胞增殖和侵袭的影响。 结果 :与癌旁组织中的miRNA-15a相对表达量0.692±0.228相比, 显著低于卵巢癌组织中的0.911±0.209, 差异具有统计学意义(P < 0.05)。与对照组细胞增殖能力相比, miRNA-15a过表达显著抑制实验组细胞增殖能力, 差异具有统计学意义(P < 0.05)。与对照组189.667±14.742相比, miRNA-15a过表达显著抑制实验组的细胞侵袭能力96.667±13.614, 差异具有统计学意义(P < 0.05)。miRNA-15a过表达实验组的细胞凋亡率27.400%±0.854%显著高于对照组细胞凋亡率6.933%±0.379%, 差异具有统计学意义(P < 0.05)。miRNA-15a模拟物下调Wnt3a和β-catenin的表达, 抑制细胞周期蛋白(Cyclin D1)和血管内皮生长因子(vascu-lar endothelial growth factor, VEGF)的表达, 促进E-钙离子依赖的细胞黏附素(E-calcium-dependent adhesion, E-cad)的表达。双荧光素酶报告基因实验和Western blot结果表明miRNA-15a靶向抑制Wnt3a表达。上调Wnt3a能显著降低miRNA-15a对卵巢癌细胞增殖、侵袭和对Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用。结论:miRNA-15a通过靶向Wnt3a调控Wnt/β-catenin信号通路的激活以抑制卵巢癌的发展和转移。      

MircoRNA-26a与肿瘤

微小RNA(microRNAs,miRNAs)是一类由20个-22个核苷酸组成的小片段非编码RNA,通过靶向结合基因mRNA的3'非翻译区(3'-UTR)调控其表达.许多研究报道miRNAs参与肿瘤的发生发展.MiR-26a在不同的肿瘤中发挥不同的作用,在肿瘤增殖、转移侵袭、血管形成、生物代谢及诊断预后中都有作用.本文就miR-26a与肿瘤关系的研究进展进行综述.