基于Akt/mTOR信号通路探究芍药甘草汤和生麦芽对高泌乳素血症的作用机制

目的：分别考察生麦芽、芍药甘草汤对高泌乳素血症(HPRL)大鼠血清泌乳素相关激素水平及乳腺组织病理形态的影响,以及对乳腺组织p-Akt、p-mTOR、LC3等蛋白表达水平的影响。方法：随机取8只大鼠作为正常组,32只大鼠皮下注射甲氧氯普胺制备高泌乳素血症模型。造模成功的32只大鼠随机分为模型组、芍药甘草汤组、生麦芽组和溴隐亭组,每组8只。各药物组大鼠灌胃给予相应药物,正常组和模型组大鼠给予等体积蒸馏水,连续给药30 d。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清中泌乳素(PRL)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)、孕酮(Pg)、促卵泡素(FSH)含量;采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠乳腺组织病理形态变化;蛋白免疫印迹法(Western blotting)及免疫组化(IHC)检测大鼠乳腺组织p-Akt、p-mTOR、LC3等蛋白表达水平。结果：模型组大鼠血清PRL水平明显高于正常组(P<0.01),血清LH、FSH、Pg和E₂水平明显低于正常组(P<0.01);芍药甘草汤组、生麦芽组、溴隐亭组大鼠血清PRL水平明显低于模型...     

中药降乳散对大鼠催乳素瘤细胞表达 Bcl-2 、 Bax 的影响

 目的 研究中药降乳散对大鼠催乳素瘤细胞表达 Bcl-2 、 Bax 的影响。 方法 制备雌激素诱发大鼠催乳素瘤模型：成年雌性 Wistar 大鼠,切除卵巢,结扎子宫后随机分 3 组（ <> n =5 ）：对照组,皮下植入空白硅胶管;雌激素组,皮下植入含有己烯雌酚的硅胶管;降乳散组,皮下植入含有己烯雌酚的硅胶管,同时用中药降乳散汤剂（ 15 mg·kg ^{－ 1} ·d ^{－ 1} , 指干燥中药的质量）灌胃。 8 周后处死动物,垂体称重,用放免法测定血清催乳素水平。 Western blot 检测凋亡相关蛋白 Bax , Bcl-2 在大鼠垂体组织中的表达。 结果 降乳散组的垂体质量、血清催乳素水平均明显低于雌激素组,具有显著差别（ <> P <0.01 ）。 Bax 在降乳散组的表达量明显高于雌激素组（ <> P <0.01 ）。 Bcl-2 在降乳散组的表达量明显低于雌激素组（ <> P <0.01 ）。 结论 中药降乳散具有促进催乳素瘤细胞凋亡的作用。本实验从分子水平探讨了中药抗催乳素瘤的机制,为中药治疗催乳素瘤提供了理论基础。     

基于“乳为肝窍”理论探讨柴胡疏肝散对高泌乳素血症大鼠乳腺组织及性激素的影响

目的基于"乳为肝窍"理论,探讨柴胡疏肝散对高泌乳素血症大鼠乳腺组织及性激素的作用,探寻肝乳相关的现代科学依据。方法将48只大鼠随机分为正常组8只和造模组40只,造模组大鼠采用皮下注射灭吐灵方法制成高泌乳素血症模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、溴隐亭组、柴胡疏肝散高剂量组、柴胡疏肝散中剂量组、柴胡疏肝散高剂量组,每组8只。溴隐亭组灌胃溴隐亭水溶液2 mg/(kg·d),柴胡疏肝散低、中、高剂量组分别灌胃柴胡疏肝散药液3.15 g/(kg·d)、6.3 g/(kg·d)、12.6 g/(kg·d),正常组和模型组灌胃等容量生理盐水,均每日1次,连续30 d。末次灌胃后,腹腔注射麻醉大鼠,测量各组大鼠第3对乳头直径、高度,取血检测血清雌二醇(E_2)、卵泡生成激素(FSH)、泌乳素(PRL)水平,取第3对乳腺组织进行病理观察。结果模型组大鼠乳头直径、乳头高度及血清PRL水平均明显高于正常组(P均0.05),血清E_2和FSH水平均明显低于正常组(P均0.05);溴隐亭组及柴胡疏肝散中、高剂量组大鼠乳头直径、乳头高度及血清PRL水平均明显低于模型组(P均0.05),血清E_2和FSH水平均明显高于模型组(P均0.05)。模型组大鼠乳腺组织呈弥漫性增生,乳腺导管明显扩张,部分导管上皮细胞呈分泌前期改变;柴胡疏肝散高剂量组大鼠乳腺组织增生情况较模型组明显缓解。结论柴胡疏肝散可改善乳腺组织增生性、泌乳性病变,纠正高泌乳素血症大鼠血清性激素紊乱。血清性激素受肝脏代谢功能的影响,作用于乳腺所产生的生理、病理变化,可能是肝乳相关学说的现代调控依据之一。     

归芪通乳合剂对溴隐亭诱导大鼠产后缺乳的催乳作用

目的观察归芪通乳合剂对缺乳大鼠模型血清催乳素(PRL)、雌二醇(E2)、多巴胺(DA)水平的影响,探讨其催乳机制。方法建立溴隐亭诱导的大鼠缺乳模型,采用酶联免疫法检测归芪通乳合剂对缺乳大鼠血清PRL、E2、DA水平的影响。结果与溴隐亭缺乳大鼠模型组比较,归芪通乳合剂各剂量组能显著提高溴隐亭缺乳大鼠血清PRL、E2含量(P<0.05),降低DA的水平(P<0.05)。结论归芪通乳合剂催乳机制与提高PRL、E2含量及降低DA的水平有关。     

疏肝补肾方结合溴隐亭治疗肝郁肾虚型高泌乳素血症的临床观察

目的评价疏肝补肾方结合溴隐亭治疗肝郁肾虚型高泌乳素血症的临床疗效。方法将60例肝郁肾虚型高泌乳素血症患者随机分为西药组、中西药结合组,每组30例。西药组予溴隐亭治疗,中西药结合组联合应用疏肝补肾方与溴隐亭;两组疗程均为3个月,观察中医证候及血清泌乳素(PRL)水平变化情况。结果中西药结合组、西药组总有效率分别为90.0%、73.3%,中西药结合组中医证候疗效优于西药组(P0.05)。治疗后,中西药结合组中医证候积分及血清PRL水平均明显下降(P0.05),西药组仅血清PRL水平下降(P0.05),而中医证候改善不明显(P0.05);中西药结合组在降低中医证候积分值及血清PRL水平方面优于西药组(P0.05)。结论疏肝补肾方结合溴隐亭治疗高泌乳素血症临床疗效良好,可以降低血清泌乳素水平,改善患者的临床症状。     

疏肝敛乳方治疗高泌乳素血症46例疗效观察

应用疏肝敛乳方治疗高泌乳素血症 4 6例 ,并设溴隐亭为对照组治疗 4 1例 ,观察结果表明 ,血清泌乳素( PRL )水平在 2 5～ 5 0 ng/ ml时 ,两者总有效率和排卵率接近 ;PRL水平在 5 0～ 10 0 ng/ m l时 ,疏肝敛乳方虽然有一定效果 ,但排卵率不甚满意 ,与溴隐亭相比存在明显差异 ( P>0 .0 5 ) ;PRL >10 0 ng/ m l,尤其是合并垂体微腺瘤时 ,疏肝敛乳方疗效甚微。提示在治疗高泌乳素血症时 ,要根据 PRL水平及是否合并微腺瘤来选择是应用溴隐亭或疏肝敛乳方。     

补肾抑乳汤配合溴隐亭治疗高催乳素血症临床观察

目的观察中药配合溴隐亭治疗高催乳素血症的临床疗效。方法将96例患者随机分成治疗组和对照组。治疗组口服中药和溴隐亭,3个月为1疗程,对照组仅口服加大剂量的溴隐亭,3个月为1疗程。结果治疗结束治疗组和对照组总有效率分别为92%和89.1%,统计学无显著性差异;两组治疗前后血清泌乳素变化也无显著性差异;但治疗组口服溴隐亭剂量小,副作用小,停药后随访复发率低,对照组副作用大,停药后随访复发率占45.7%,需重新服用溴隐亭,故治疗组和对照组在副作用及复发率统计学有显著性差异(P0.05)。结论中药配合溴隐亭治疗高催乳素血症同单纯口服溴隐亭在临床疗效、临床症状改善及泌乳素水平变化无显著性差异,但临床治疗副作用小,复发率低,故值得推广应用。     

垂宁方治疗泌乳素型垂体腺瘤临床疗效观察

目的观察垂宁方治疗泌乳素(PRL)型垂体腺瘤的临床疗效。方法将176例PRL型垂体腺瘤患者随机分为2组,分别接受垂宁方联合溴隐亭和单纯溴隐亭治疗,比较PRL水平、治愈率、有效率和不良反应发生率等差异。结果 2组治疗后3、6、9、12个月PRL水平均较治疗前下降,差异有统计学意义(P0.05)。2组PRL水平在治疗后3、6、9、12个月组间差异均有统计学意义(P0.05);2组治愈率、有效率差异亦有统计学意义(P0.05)。结论垂宁方联合溴隐亭降低血泌乳素水平安全有效。     

丹栀逍遥胶囊与溴隐亭联用治疗高泌乳素血症30例临床观察

目的:观察丹栀逍遥胶囊与溴隐亭联合治疗高泌乳素血症的临床疗效。方法:将高泌乳素血症患者90例分为丹栀逍遥胶囊组、溴隐亭组、丹栀逍遥胶囊+溴隐亭组,每组30例,各组采用相应药物治疗,观察比较3组临床疗效。结果:3组血清催乳素、促卵泡刺激素、黄体生成素水平均较治疗前改善(P0.05),丹栀逍遥胶囊+溴隐亭组较丹栀逍遥胶囊组和溴隐亭组效果更加明显(P0.01)。丹栀逍遥胶囊+溴隐亭组较其余两组更为明显(P0.01)。丹栀逍遥胶囊+溴隐亭组治疗后的总有效率(90.00%)明显优于丹栀逍遥胶囊组(60.00%)和溴隐亭组(56.67%),组间比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:采用丹栀逍遥胶囊联合溴隐亭治疗高泌乳素血症有较好疗效。     

麦芽4个化学部位通过多巴胺D2受体对产后缺乳模型大鼠催乳作用研究

目的基于多巴胺D2受体(DRD2),考察小剂量麦芽4个化学部位的催乳作用,初步探讨小剂量麦芽生物碱对产后缺乳模型大鼠泌乳素(PRL)分泌的调节机制。方法采用ig甲磺酸溴隐亭方法制备缺乳大鼠模型,造模成功后,各给药组均ig给予相应的药物,应用ELISA法检测各组大鼠血清PRL、雌二醇(E_2)、孕酮(P)水平;HE染色观察各组大鼠乳腺组织病理改变;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组大鼠脑垂体中泌乳素受体及DRD2 mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中PRL、P及E_2水平、脑垂体PRL mRNA表达水平显著降低;脑垂体DRD2 mRNA表达水平显著升高。与模型组比较,麦芽总生物碱组大鼠乳腺小叶体积明显增加,导管明显扩张,且导管及腺泡内含有大量乳汁。麦芽总生物碱明显增加模型大鼠血清中PRL、P、E_2水平及脑垂体PRL mRNA表达水平,降低脑垂体DRD2 mRNA表达水平。结论麦芽催乳的主要药效物质为总生物碱,其作用机制可能与促进PRL分泌,增加脑垂体PRL受体、降低DRD2 mRNA表达水平有关。     

吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏骨桥蛋白表达的影响

 目的 观察吡格列酮对糖尿病大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组。链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠。造模成功的大鼠随机分为糖尿病组、吡格列酮3,15 mg·kg^-1·d^-1组。8周末测大鼠24 h尿微量白蛋白、血糖,血肌酐。HE染色观察肾组织形态,免疫组织化学法及逆转录-聚合酶链反应法分别测大鼠肾组织骨桥蛋白及骨桥蛋白mRNA的表达。结果 吡格列酮3 mg·kg^-1·d^-1组、吡格列酮15 mg·kg^-1·d^-1组血肌酐、微量白蛋白、肾质量/体质量较糖尿病组明显下降（P<0.05）。与糖尿病组比较,吡格列酮15 mg·kg^-1·d^-1组血糖明显降低（P<0.05）,吡格列酮3 mg·kg^-1·d^-1组血糖无明显改善,差异无统计学意义（P>0.05）。糖尿病组肾组织骨桥蛋白及骨桥蛋白mRNA表达水平较正常对照组明显升高（P<0.05）。吡格列酮3,15 mg·kg^-1·d^-1组肾组织骨桥蛋白、骨桥蛋白mRNA表达水平较糖尿病组均明显下降（P<0.05）。结论 糖尿病大鼠肾组织骨桥蛋白表达增加,提示骨桥蛋白可能参与糖尿病肾脏病变的发病过程。吡格列酮干预可以减少糖尿病大鼠尿微量白蛋白,对肾脏有保护作用。吡格列酮对肾脏的保护作用部分可能与吡格列酮抑制肾脏骨桥蛋白的表达有关。     

中药降乳散对乙烯雌酚诱发的大鼠泌乳素瘤的抑制作用

目的：研究中药降乳散对乙烯雌酚诱发的大鼠泌乳素（PRL）瘤的抑制作用。方法：用皮下植入雌激素的方法制备大鼠PRL瘤模型，将成功诱发出PRL瘤的大鼠随机分3组，分别给予安慰剂、降乳散以及诺果宁灌胃，用药治疗4周后处死动物，垂体称质量，用放免法测定血清PRL水平。用反转录．PCR方法分析垂体肿瘤转化基因（PTTG）在大鼠PRL瘤组织中的表达量。结果：降乳散组和诺果宁组大鼠血清PRL水平和垂体质量均明显低于安慰剂组（P〈0．001），PTTGmRNA水平在降乳散组较安慰剂组明显降低（P〈0．001）。结论：降乳散具有抗高PRL血症和抑制PRL瘤生长的作用，降低癌基因PTTG表达水平可能是降乳散抗PRL瘤的重要机制之一。     

逍遥散加减对高泌乳素血症模型大鼠中枢多巴胺受体ERK信号转导通路的影响

目的:以疏肝健脾为核心,运用逍遥散加减治疗高泌乳素血症(HPRL)模型大鼠,探讨逍遥散加减对HPRL大鼠模型中枢多巴胺受体细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路的作用机制。方法:96只SD雌性大鼠,随机分为正常组,模型组,溴隐亭组(0. 001 g·kg~(-1)),逍遥散加减高、中、低剂量组(60,30,15 g·kg~(-1)),多巴胺第一受体(D1R)拮抗剂组(SCH23390组,SCH23390+逍遥散加减中剂量组,SCH23390+溴隐亭组),多巴胺第二受体(D2R)拮抗剂组(氟哌啶醇组,氟哌啶醇组+逍遥散加减中剂量组,氟哌啶醇组+溴隐亭组)。采用垂体移植法制作HPRL大鼠模型,给药30 d后,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠下丘脑癌蛋白Ras,Raf蛋白的表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠下丘脑丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激酶1/2(MEK1/2) mRNA,细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2) mRNA的表达;采用电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构。结果:与正常组比较,模型组Ras,Raf蛋白,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达显著降低(P 0. 01);运用SCH23390拮抗DIR后,与模型组比较,SCH23390组Ras,Raf蛋白,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达有升高趋势,运用氟哌啶醇拮抗D2R后,与模型组比较,氟哌啶醇组Ras,Raf蛋白表达有下降趋势,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达显著下降(P 0. 01);运用逍遥散加减治疗后,能显著提高Ras,Raf蛋白,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达(P 0. 01),且逍遥散加减高、中剂量组表达增加最明显(P 0. 01),效果优于溴隐亭组。电镜下模型组卵巢颗粒细胞形态及线粒体数量、结构异常,运用逍遥散加减治疗后,颗粒细胞形态和线粒体结构趋于正常。结论:逍遥散加减通过激动D2R,抑制D1R,调节ERK/MAPK信号通路,并有效改善卵巢颗粒细胞线粒体功能,促进卵泡发育,说明逍遥散加减治疗HPRL是多靶点的作用机制。     

益母草提取物对大鼠高尿酸血症的调控作用

该研究采用灌胃给予SD大鼠氧嗪酸钾(300 mg·kg·d)制备高尿酸血症模型, 并将其分为正常组、模型组、别嘌醇组、益母草提取物高、中、低剂量组(200, 100, 50 mg·kg·d), 给予氧嗪酸钾1 h后给药, 连续给药7 d。分别测定血清尿酸(serum uric acid, SUA), 肌酐(serum creatinine, SCre), 尿中尿酸(uric acid, UA)及肾脏中相关转运体的表达水平, 研究益母草提取物对高尿酸血症大鼠血尿酸、肾功能的影响及肾脏相关转运体的mRNA的调节作用。结果显示与模型组相比, 益母草提取物可以显著性降低高尿酸血症大鼠血清尿酸, 肌酐的水平, 升高尿尿酸水平;同时, 益母草提取物可以显著性下调肾脏尿酸盐转运体(urate transporter 1, URAT1), 葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9, GLUT9) mRNA 的表达, 上调有机阳离子转运体(organic cation transportanter, OCT), 肉毒碱转运体(carnitine transporter, OCTN)mRNA的表达, 具有促进肾脏尿酸排泄的作用。     

安宫牛黄散中朱砂、雄黄对外伤性脑水肿大鼠热休克蛋白、一氧化氮合酶和炎症细胞因子的影响

目的:探讨安宫牛黄散中朱砂、雄黄的药理作用机制。方法:SD大鼠随机分成6组(12只／组):正常对照组、外伤性脑水肿膜型对照组、朱砂组(0．15 g/kg)、雄黄组(0．15 g/kg)、安宫牛黄散(下简称整方)组(1．5 g/ kg)、去朱砂、雄黄的安宫牛黄散(下简称拆方)组(1．2 g/kg),以上各组再设8 h分组和24 h分组(6只／分组)。RT-PCR法测定脑组织中热休克蛋白70(HSP70)mRNA表达;比色法测定脑组织中一氧化氮合酶(NOS)及其同工酶(iNOS、cNOS)活力;放免法测定血清中细胞因子TNF-α、IL-1β水平。结果:造模后8 h,整方组与拆方组HSP 70 mRNA表达均较模型组增高(P<0．05),且整方组诱导HSP 70 mRNA表达的作用强于拆方组(P<0．05);朱砂、雄黄、整方和拆方均能降低iNOS活力,且较模型组明显降低(P<0．05),其中整方组抑制作用最为显著。雄黄组、整方组、拆方组TNF-α水平较模型组降低(P<0．05),整方组与拆方组IL-1β水平较模型组降低(P<0．05)。结论: HSP 70、iNOS、TNF-α及IL-β参与了外伤性脑水肿的病理过程。安宫牛黄散和复方中的朱砂、雄黄对外伤性脑水肿大鼠脑组织的保护作用可能与通过增加诱导HSP 70 mRNA表达、抑制iNOS活力和炎症细胞因子TNF-α、IL-1β的生成有关。     

甘草次酸18位差向异构体对P-gp底物罗丹明123在Caco-2细胞上跨膜转运的影响

 目的 研究甘草次酸18位差向异构体即18α-甘草次酸（α-GA）、18β-甘草次酸（β-GA）对P-糖蛋白（P-gp）底物罗丹明123在Caco-2细胞上跨膜转运的影响。方法 采用MTT法检测不同摩尔浓度的18α-甘草次酸、18β-甘草次酸及维拉帕米对Caco-2细胞生长抑制作用;建立Caco-2单层细胞模型,以P-糖蛋白底物罗丹明123（Rho-123）为荧光探针,评价甘草次酸18位差向异构体和P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对罗丹明123在Caco-2细胞上跨膜转运的影响。罗丹明123浓度采用酶标仪检测。结果 高浓度（10 μmol·L^-1）18α-甘草次酸瞬时作用于Caco-2细胞单层模型,或者干预单层模型72 h后,均使罗丹明123单位面积BL-AP侧累积转运量（transport B-A）增加,外排率（ER）增大,诱导P-糖蛋白底物罗丹明123外向转运;高浓度（10 μmol·L^-1）18β-甘草次酸瞬时作用于Caco-2细胞单层模型没有表现出诱导作用,但在干预Caco-2单层模型72 h后,表现出对罗丹明123外向转运的诱导;各实验药物均没有对罗丹明123 AP-BL侧转运产生影响。结论 跨膜转运实验结果表明,18α-甘草次酸、18β-甘草次酸能诱导P-糖蛋白的外向转运,加速P-糖蛋白底物的外排,可能是甘草酸制剂增强肝脏解毒的机制之一。     

雷公藤多苷对实验性糖尿病心肌病大鼠的影响

目的:探讨雷公藤多苷对实验性糖尿病心肌病大鼠的心脏保护作用.方法:用链脲佐菌素(STZ将sD大鼠造模成糖尿病心肌病模型,分为雷公藤多苷组,模型组,另设正常组(均n=8).雷公藤多苷组给予雷公藤多苷(18 mg·kg~(-1)),其余各组给以等量生理盐水,持续给药3个月.给药结束后测血糖、心功能、心脏指数,用免疫组化法观察心肌核因子-κB(NF-κB和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达,同时用电子显微镜观察大鼠心肌超微结构变化.结果:与模型组比较,雷公藤多苷能减小心脏指数,保护心功能,抑制NF-KB和ICAM-1表达;明显延缓心肌细胞线粒体、心肌纤维细胞的病理改变.结论:雷公藤多苷具有保护糖尿病心肌病大鼠心脏作用,其机制可能与抑制炎症反应和免疫抑制作用有关.