开口箭对S-180细胞和实体瘤的抑制作用研究

目的研究开口箭(Tupistra chinensis Baker)对S-180细胞及其实体瘤的抑制作用。方法 SPF级BALB/c-nu小鼠30只,将肿瘤生长良好且小鼠精神状态佳者进行随机分为5组,每组6只:生理盐水组,开口箭低剂量组,开口箭中剂量组,开口箭高剂量组,环磷酰胺(cytoxan,CTX)组。观察细胞形态变化及实体瘤生长状况;用流式细胞术检测各组S-180细胞DNA含量及周期,比较各组对肿瘤细胞生长周期的影响;利用透射电镜观察开口箭干预各组实体瘤细胞超微形态结构的变化。结果实验结果发现S-180细胞呈圆形或椭圆形,于接种第10天剥取实体瘤,瘤体组织生长良好;开口箭将S-180细胞生长周期阻滞在S期;电镜下开口箭各组细胞形态不规则,染色质凝聚、边缘化,细胞核固缩,与生理盐水组和CTX组比较有明显结构改变。结论开口箭对S-180细胞及其实体瘤均有明显抑制作用,开口箭阻滞S-180细胞生长周期,导致细胞形态的变化,诱导肿瘤细胞凋亡。     

开口箭属植物化学成分与药理作用研究进展

该文主要对开口箭属植物的化学成分及其抗炎、抗菌、抗肿瘤等药理作用进行综述, 论述开口箭属植物的民间应用情况, 并展望发展前景.     

开口箭乙醇提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡活性研究

目的探讨开口箭根部乙醇提取物(ERT-95)对肝癌细胞HepG2生长的影响及其抗肿瘤作用的可能机制。方法采用MTT法绘制HepG2细胞生长曲线,检测ERT-95对HepG2细胞的生长抑制作用;采用光学显微镜观察HepG2细胞的凋亡形态变化;采用Hochest染色原理检测HepG2细胞凋亡情况;采用Western blot检测Cyt C蛋白的表达;采用caspase活性检测试剂盒检测caspase-3、caspase-9的活性变化;采用DNA ladder凝胶电泳技术检测DNA的裂解情况。结果 MTT结果显示,ERT-95对HepG2细胞的抑制作用呈剂量依赖性(IC50为52.57μg·mL-1);光学显微镜下,处理组细胞出现皱缩、变圆等形态变化;Hochest-33258染色后的处理组细胞呈现典型的凋亡结构;Western blot结果显示,随着药物浓度增加,Cyt C蛋白表达上调;caspase活性检测显示,caspase-3、caspase-9活性逐步升高;与对照组相比,处理组琼脂糖凝胶电泳图谱出现DNA条带。结论ERT-95有显著的体外促肿瘤细胞凋亡作用,初步研究其促肿瘤细胞凋亡机制是通过线粒体释放Cyt C,进一步活化caspase-9和caspase-3而激活内源性核酸内切酶,导致DNA裂解而实现的。     

三七总皂苷对B16黑色素瘤生长及转移的作用

目的观察三七总皂苷（PNS）对B16黑色素瘤生长及转移的作用,及其对B16黑色素瘤表达缝隙连接蛋白Connexin32的影响。方法实验采用B16黑色素瘤自发性肺转移模型,来观察PNS对B16黑色素瘤生长及转移的影响。免疫组织化学检测Connexin32在黑色素瘤原发灶的表达情况。结果（1）PNS对黑色素瘤生长有较好的抑制作用,其中PNS高剂量组抑瘤率可达50．85％。（2）与模型组相比PNS中、高剂量组能有效抑制黑色素瘤的肺转移,转移灶数量与对照组相比有明显减少。（3）免疫组织化学检测,发现PNS各用药组均能增强黑色素瘤原发灶细胞膜上Connexin32的表达。结论PNS能够抑制B16黑色素瘤的生长和转移,并能有效增强肿瘤细胞膜上Connexin32的表达。     

吉祥草与开口箭挥发性成分与金属元素比较

目的研究开口箭与吉祥草中的挥发性成分和8种金属元素含量异同点。方法采用GCMS法分析开口箭与吉祥草中挥发性成分的种类和含量,用火焰原子吸收分光光度仪测定两种植物提取物中Na、Mg、K、Cu、Zn、Cr、Mo和Ca共8种元素的含量。结果从两种植物提取物中共鉴定了16种组分,分别占吉祥草和开口箭提取物的78.3%和88.0%。两种植物中8种金属元素有较大差异。结论吉祥草与开口箭中挥发性成分和金属元素含量都有较大不同。     

白桦三萜类物质抗黑色素瘤B16,S180肉瘤作用及其机制的实验 …

目的 研究白桦三萜类物质（ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅｓ ｏｆ ｈｅｔｕｌａｐｌａｒｙｐｈｙｌｌａ ｓｕｋ，ＴＢＰ）抗黑色素瘤Ｂ１６、Ｓ１８０肉瘤及其诱导细胞凋亡作用和对细胞周期的影响。方法 建立小鼠体内茶和生命延长率。用形态学检测方法（Ｇｉｅｍｓａ染色法）和流式细胞光度术检测ＴＢＰ诱导的细胞凋亡和对细胞周期的影响。结果 ＴＢＰ具有明显的抗肿瘤作用，１．２ｇ．ｋｇ＾－１ＴＢＰ对黑色素瘤Ｂ１６的的抑瘤率为５     

重组人纤连蛋白CH50对黑色素瘤生长及转移的影响

目的：研究重组人纤连蛋白ＣＨ５０对小鼠黑色素瘤生长的影响及其抗肿瘤机制。方法 进行小鼠动物实验及黑色素瘤Ｂ１６细胞实验。结果：ＣＨ５０在体内明显抑制黑色素瘤生长及实验性肺转移,ＣＨ５０在体外能附粘黑色素瘤Ｂ１６细胞,抑制Ｂ１６细胞粘附层粘蛋白并明显提高腹腔巨噬细胞对Ｂ１６细胞杀伤活性,结论：ＣＨ５０抑制小鼠黑色素瘤的生长和转移,ＣＨ５０的抗肿瘤机制与其粘附肿瘤细胞,提高巨噬细胞杀瘤性活性有关。     

开口箭不同提取部位对异丙肾上腺素致小鼠心肌缺血损伤的影响

目的：研究开口箭不同提取部位对异丙肾上腺素（ISO）致小鼠心肌缺血损伤的保护作用。方法： 将105只小鼠随机分为正常组、模型组、开口箭石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位组和地奥心血康组;各给药组分别灌胃给予相应的药物,正常组及模型组给予等容量的 0.5%CMC Na灌胃,给药 7 d 后,随后 3 d 在给药后 30 min,模型组、开口箭提取物组和地奥心血康组皮下注射ISO 5.0 mg/kg,正常组则皮下注射同体积的生理盐水。给药结束次日取血处死小鼠,测定心脏脏器指数;左心室匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧物酶（GSH—Px）、丙二醛（MDA）水平;血浆中谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同功酶（CK—MB）、羟丁酸脱氢酶（HBDH）活力,另取心脏组织,分别进行心脏组织形态学和超微结构分析。结果：开口箭不同提取部位均可显著逆转ISO升高的心脏脏器指数,心肌中异常的MDA含量及SOD、GSH—Px水平,明显降低血液中升高的AST、LDH、HBDH、CK、CKMB水平,降低心肌炎性浸润、溶解坏死和胶原纤维面积,与模型组比较,开口箭正丁醇和乙酸乙酯部位均具有统计学差异（P〈0．05,P〈0．01）,其治疗效果与地奥心血康相当;石油醚部位在改善HBDH、SOD等方面有统计学差异（P〈0．05）;水部位除LDH、CK、GSH—Px外,均具有统计学差异（P〈0．05）。结论：开口箭不同提取部位对ISO致小鼠心肌缺血损伤具有较强的保护作用,其作用效果由强至弱依次为：开口箭正丁醇部位、乙酸乙酯部位、水部位和石油醚部位。     

治疗转移性黑色素瘤新药达拉菲尼

达拉菲尼是一种靶向BRAF激酶抑制剂,美国食品和药物管理局批准用于治疗转移性黑色素瘤和不能行手术治疗的黑色素瘤患者。本文对达拉菲尼的合成路线、作用机制、药动学特征、临床疗效、药物相互作用、药物不良反应及联合用药等作一综述。     

异黄酮genistein对小鼠恶性黑色瘤转移的实验性治疗

目的:研究异黄酮genistein 对肿瘤转移的治疗作用。方法:B16-BL6 细胞由尾静脉注入C57BL/6 小鼠体内,于d 15 观察动物肺转移灶。genistein 混悬于2% 卵磷脂中,从接种瘤细胞前1 天开始ip,剂量为100 和200mg·kg^-1·d^-1 。结果:genistein 可抑制肺转移灶形成,200 mg·kg^-1 用药组小鼠转移灶数目明显减少;作为对照,腹腔给予环磷酰胺100 mg·kg^-1 后,形成的转移灶数目无明显变化,但形成的转移瘤灶体积减小。当genistein 和环磷酰胺合用时,转移小鼠的存活时间明显延长。结论:genistein 可抑制肿瘤转移,其作用与细胞毒药物不同, 与细胞毒药物合用可提高其抗肿瘤转移的作用。     

蟾毒灵通过下调PKM2抑制黑色素瘤细胞增殖、 迁移与侵袭的实验研究

目的：考察蟾毒灵（Bufalin）对黑色素瘤细胞增殖、迁移与侵袭,以及对有氧糖酵解关键酶M2型丙酮酸激酶（pyruvate kinase M2,PKM2）的调控作用。方法：分别使用MTT、划痕及Transwell实验,考察蟾毒灵对A375黑色素瘤细胞增殖、迁移与侵袭的影响;利用试剂盒检测蟾毒灵对A375细胞有氧糖酵解主要指标乳酸、葡萄糖及丙酮酸激酶的影响;蛋白免疫印迹实验探讨蟾毒灵对PKM2蛋白表达的影响,以及对下游肿瘤迁移与侵袭相关蛋白表达的影响。结果：蟾毒灵能显著抑制A375细胞的增殖、迁移与侵袭;还能抑制A375细胞的有氧糖酵解及PKM2的蛋白表达,进而下调肿瘤转移相关蛋白MMP-2、MMP-9、N-cadherin的表达。结论：蟾毒灵对A375黑色素瘤细胞的增殖、迁移与侵袭具有明显的抑制作用,其抑制机制可能与抑制肿瘤有氧糖酵解途径中关键酶PKM2有关。     

Effects of genistein, a soybean-derived isoflavone, on proliferation and differentiation of B16-BL6 mouse melanoma cells

Genistein, a soybean-derived isoflavone, may contribute to the lower cancer incidence in South Asian countries. In this study, the effects and molecular mechanisms of genistein on growth and differentiation of B16-BL6 mouse melanoma cells were investigated. Genistein suppressed the growth of these melanoma cells. The IC₅₀ value is 15.5μM. On the other hand, genistein induced the changes of cell shape and cytoskeletal network. The cytoskeletal filaments were induced to form a bundle along the direction of elongation of the cells. Moreover, tyrosine phosphorylation levels of cytoskeleton-associated proteins decreased after the cells were exposed to 20 or 30 μM of genistein for 3 days. All these morphological and molecular changes were accompanied by appearance of the differentiated phenotypes. Genistein induced the increase of cellular melanin content, enhancement of tyrosinase activity, and decrease of colonization potentials in soft agar in a time-dependent and dose-dependent manner. The effective concentration was no more than 10 μM after 3 days' exposure. The tumorigenic potentials of B16-BL6 cells in C57BL/6 mouse also decreased after exposure to 20 or 30 μM of genistein for 3 days. When expressions of tumor-related genes were investigated in the differentiation-induced cells, the content of P53 dramatically increased while that of c-Myc protein decreased. Therefore, due to its ability to induce cellular and molecular changes, genistein suppressed the growth and induced differentiated phenotypes in B16-BL6 melanoma cells.     

Effect of Doxorubicin Release Rate From Polyethylene Glycol-Modified Liposome on Anti-tumor Activity in B16-BL6 Tumor-Bearing Mice

To investigate the effect of doxorubicin (DOX) release rates from polyethylene glycol (PEG)-liposomes on the anti-tumor activity, several in-vitro and in-vivo studies were performed by utilizing three types of DOX-PEG-liposomes showing the slow (L-Slow), middle (L-Mid) and fast (L-Fast) release rates of DOX. L-Mid provided the highest anti-tumor activity in B16-BL6 tumor-bearing mice, although the largest amount of DOX distribution into the tumor tissue was observed in L-Slow-administered mice and the lowest was in L-Fast-administered mice. To elucidate the reason for this discrepancy, DOX distribution into cancer cells constituting the tumor tissue was determined and the highest DOX distribution into cancer cells was observed in L-Mid-administered mice. These results clearly indicate that the adequate drug release rate from liposome should make it possible to deliver the substantial amounts of drugs into cancer cells, leading to the actual anti-tumor activity.     

鸦胆子油乳对小鼠黑色素瘤高转移细胞黏附、侵袭及转移能力的影响

目的研究鸦胆子油乳对B16-BL6小鼠高转移细胞黏附、侵袭及转移能力的影响.方法采用细胞黏附实验、重组基底膜侵袭实验以及小鼠黑色素瘤自发性转移模型,观察鸦胆子油乳对B16-BL6细胞黏附、侵袭及转移能力的影响.结果在3和6μL·mL-1浓度时,鸦胆子油乳与B16-BL6细胞作用24h,可抑制其与纤粘连蛋白的黏附,抑制率分别为24.5%和63.2%;也抑制其与层粘连蛋白的黏附,抑制率分别为17.0%和34.5%;对B16-BL6细胞侵袭重组基底膜的抑制率为26.7%和41.3%.在小鼠黑色素瘤自发性转移模型中,鸦胆子油乳2.5,5.0,10.0mL·kg-1连续注射给药1个月,小鼠肺转移灶与对照组相比明显减少.结论鸦胆子油乳具有抑制B16-BL6细胞黏附、侵袭及转移的作用.     

盐酸小檗碱对B16细胞的分化诱导作用

目的测定盐酸小檗碱对小鼠黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用。方法以MTT法测定盐酸小檗碱对B16细胞增殖的抑制作用,通过克隆形成实验、细胞黑色素含量的测定以及B16细胞体内成瘤能力的测定观察盐酸小檗碱对B16细胞的诱导分化作用。结果盐酸小檗碱对B16细胞具有明显的增殖抑制作用;并使B16细胞生长缓慢,平铺不重叠,呈正常上皮样细胞分化,细胞的克隆形成能力降低,细胞内的黑色素生成能力增强,C57/BL小鼠体内成瘤能力降低。结论盐酸小檗碱对B16细胞具有诱导分化作用。     

银耳多糖抗B16黑色素瘤肺转移的作用及机理研究

探究银耳多糖(Tremella Fuciformis Polysaccharide,TFP)对B16黑色素瘤细胞静脉注射所致肺转移模型的作用及其机理.将B16黑色素瘤细胞暴露于不同浓度(0、1.25、2.5 mg·mL-1)的TFP 24h,细胞重悬于PBS中,经ICR小鼠尾静脉注射,建立黑色素瘤模型.分别采用HE染色,Western Blot(WB)及免疫荧光染色探讨TFP对在体黑色素瘤细胞的作用机理.浓度为1.25、2.5 mg·mL-1的TFP均能显著抑制B16黑色素瘤细胞肺转移的结节数目,并抑制过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达,增加CD86和CD206的表达.TFP对B16黑色素瘤细胞肺转移的抑制作用与抑制PPARγ 表达从而招募巨噬细胞有关.     

恶性黑色素瘤浸润转移相关分子机制研究

目的:探讨MMP-2、MMP-9、TIMP-2、E-cadherin在高、低恶性黑色素瘤中浸润转移中的作用。方法:将临床资料完整的恶性黑色素瘤样本60例,按CK8、CK18染色结果分为高度恶性和低度恶性2组,并进行MMP-2、MMP-9、TIMP-2、E-cadherin免疫组化染色。结果:高度恶性组黑色素瘤MMP-2、TIMP-2的表达高于低度恶性组黑色素瘤的表达,低度恶性组黑色素瘤MMP-9、E-cadherin的表达高于高度恶性组,其中低度恶性组黑色素瘤MMP-9的表达结果同高度恶性组黑色素瘤的表达差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:肿瘤浸润转移相关蛋白在不同肿瘤的浸润转移过程中作用各不相同,MMP-2、TIMP-2促进了肿瘤的浸润转移,而MMP-9、E-cadherin抑制肿瘤的转移。