结肠小袋纤毛虫滋养体体外成囊条件的筛选和优化

目的 筛选和优化结肠小袋纤毛虫滋养体体外形成包囊的条件。方法 设定不同动物粪便、孵育液、pH值、Ca²⁺浓度、温度、静置和振荡培养等不同条件,孵育24 h观察其成囊情况。另外,用体外形成的包囊接种给仔猪,验证其感染性。结果 滋养体在新鲜的正常猪粪便和鸡粪便中,于37 ℃、28 ℃、15 ℃~20 ℃和-11 ℃~-2 ℃环境下,均没观察到包囊形成;在不含小牛血清和淀粉的蒸馏水、生理盐水、PBS溶液以及DMEM培养基中孵育,镜检发现在生理盐水(pH6.5)和PBS中存在大量滋养体和少量早期包囊出现;在pH值3~5之间的生理盐水中包囊的形成的数量明显增加,28 ℃环境下平均成囊率达到38.9%,相同pH值范围的蒸馏水却没发现包囊和滋养体。Ca²⁺浓度、温度、振荡和静置培养等因素对其体外成囊效果均没有明显影响。两头仔猪接种包囊后第4 d,均在粪便中检出该虫滋养体。结论 在15 ℃~28 ℃,pH值3~5的不含小牛血清和淀粉的生理盐水中是结肠小袋纤毛虫体外成囊的适宜条件。     

结肠小袋纤毛虫体外培养观察

本文对猪结肠小袋纤毛虫 (Balantidiumcoli)在体外培养的条件进行了试验并观察其生长情况。试验结果表明 :小袋纤毛虫在外界环境中接触空气 1h左右由滋养体形成包囊 ,滋养体在相对厌氧环境下的深层粪便中 ,或RSS培养液(Ringer液—血清—淀粉 )中能存活并繁殖。在 2 8.0～ 32 .3℃的夏季室温下小袋纤毛虫滋养体在 4cm深层粪便中存活至10 8h ,在RSS培养液中滋养体存活时间最长达 192h ,比在 37℃培养时间延长 96～ 12 0h。培养基pH值 6 .2～ 6 .4与 pH7.0～7.2相比未见明显差异 ;米粉用量过多加速滋养体死亡。本试验尚为摸索阶段 ,以上结论还需进一步验证     

结肠小袋纤毛虫的培养分离及硝基咪嗪和甲硝哒唑的作用速度

在墨西哥用硝基咪嗪(Nitrimidazine)25毫克/公斤/日×5治疗3例结肠小袋纤毛虫引起的痢疾患者取得良好效果之后,作者用含有20%马血清的单相培养基(磷酸氢二钠1.61克,磷酸二氢钾0.41克,氯化钠7.3克,肝浸膏1克,蒸馏水1升,pH7.2)对硝基咪嗪和甲硝哒唑杀死结肠小袋纤毛虫的作用进行了试验。结果接触硝基咪嗪的3株结肠小袋纤毛虫,2株在2小时内、1株在4小时内发生作用;接触甲硝哒唑时,1株在4小     

人结肠小袋纤毛虫滋养体的扫描电镜观察

结肠小袋纤毛虫是热带亚热带常见的一种寄生虫。目前用扫描电镜观察本虫的报道甚少,因此,我们选用本虫作电镜扫描研究,为防治结肠小袋纤毛虫病提供一些形态学依据。一、材料和方法将结肠小袋纤毛虫患者的粪便接种于洛克氏液加羊血水的培养基内(按5∶7的比例将羊血与无菌蒸馏水混合,溶血,然后以1∶4比例将羊血水与洛克氏液混     

人芽囊原虫在199单相培养基中的体外培养

目的观察199单相培养基对人芽囊原虫(Blastocystishominis)的体外培养情况。方法采用199单相培养基对B.hominis进行体外连续培养,比较不同pH值、血清种类及接种量等条件下虫体生长繁殖情况及影响因素。结果B.hominis在199培养基中最适培养条件为:10%~20%小牛、人或马血清;接种量不小于1×105原虫/管;青、链霉素于37℃条件下厌氧培养;pH为7.0、7.5及8.0时,B.hominis繁殖高峰分别为第4、8天,第3、6、9天和第2、4、7、9天。结论使用199单相培养基可以对B.hominis进行体外长期培养。     

人体泌尿系统感染结肠小袋纤毛虫1例

结肠小袋纤毛虫(Balantidium coli)具有大多数自由生活和某些寄生生活纤毛虫的特性。有滋养体和包囊两个发育阶段。在我国西南、中南及华南地区,猪感染结肠小袋纤毛虫比较普遍,人体的感染比较少见。结肠小袋纤毛虫主要寄生在人体的结肠肠道处,偶尔也感染泌尿系统。最近我们在武汉市郊区某一农村小学做寄生虫病普查时,在一个学生     

人的结肠小袋纤毛虫病病例报道

<正> 结肠小袋纤毛虫(Balantid-ium Cali)是世界范围较少见的一种动物源性疾病。1857年Mainsten在两名痢疾患者的粪便中,首先发现了一种纤毛虫,定名为Parame Cium Coli。1862年Stein将该种归于小袋属,(Balantidium),更名为结肠小袋纤毛虫。本病主要在热带及亚热带地区,我国也有此病发生,但报告极少。结肠小袋纤毛虫寄生于人体结肠内,侵犯宿主肠组织,引起     

结肠小袋纤毛虫病研究概况

结肠小袋纤毛虫病是由结肠小袋纤毛虫感染引起, 猪是主要传染源。人感染结肠小袋纤毛虫可引起痢疾样腹 泻, 也可发生肠外感染以及与其他病原体的混合感染, 甚至引起肠坏死等。加强人和猪的粪便管理, 注意个人卫生和劳 动保护, 及时治疗病人和感染者是防治结肠小袋纤毛虫病的主要措施。     

创伤弧菌FJ03-X2株培养条件的优化研究

目的探讨创伤弧菌毒株FJ03 X2的优化培养。方法以创伤弧菌毒株FJ03 X2进行实验,研究摇瓶培养温度、接种量、培养基、初始pH值、溶解氧等因素对菌株生长的影响,确定最适培养条件为：TSB培养基初始pH值为7.0,适宜接种量10%,培养温度28℃,装液量25mL/250mL,转速180r/min。培养菌数可达8×109cfu/mL,生物量为25mg/mL。以TSB为基础培养基,采用单因子和正交实验相结合的方法,确定最佳培养基主要成份为：葡萄糖0.2%、胰蛋白胨1.8%、大豆胨0.4%和玉米浆0.4%。以最佳培养基配方给菌体提供营养,在最适培养条件下培养,可以使培养液中的细菌生物量高达50mg/mL以上。结果得出创伤弧菌FJ03 X2的优化培养条件和培养基配方。结论国内首次优化鳗源创伤弧菌培养条件,并给出相关依据。     

泌尿系结肠小袋纤毛虫病1例报告

患儿,女,10岁,山东烟台人。持续性肉眼血尿6年,曾到外地医院诊为肾炎,给予大剂量激素及中药治疗,均未见好转。1992年3月在当地医院从尿及大便中首次镜检出结肠小袋纤毛虫包囊及滋养体,给予灭滴灵、四环素等药物治疗后血尿减轻,为进一步确诊转我所。患儿有猫、狗、猪接触史。查体:一般情况尚好,无双肾区叩痛等阳性体征。化验:Hb120g/L,RBC3.6×10~(12)/L;尿淡绿色,RBC“艹”,WBC少许,蛋白“-”,pH值5.5,比重1.008,查见结肠小袋纤毛虫包囊及滋养体。诊断为泌尿系结肠小袋纤毛虫病。给予50％灭滴灵250ml静滴,1次/d×10,同时服用PPA、土霉素,并给     

氟涂层对AZ31B镁合金植入初期降解作用的影响

目的观察氟涂层对AZ31B镁合金植入初期降解速度的影响。方法分别将无涂层（对照组）和氟涂层（观察组）的AZ31B镁合金浸泡于骨细胞培养基DMEM溶液（模拟体液）,分别于浸泡1、3、5、7、14 d时后观察两组模拟体液pH值,扫描电镜下观察两组浸泡前和浸泡7 d时AZ31B镁合金材料表面形貌。结果对照组镁合金浸泡1、3、5、7、14 d模拟体液pH值分别为7.51±0.15、8.32±0.10、9.36±0.10、9.79±0.09、9.87±0.09,呈升高趋势,观察组分别为7.29±0.07、7.44±0.06、7.47±0.11、7.65±0.11、7.74±0.08,各时点pH值相比,P均〉0.05。对照组浸泡前镁合金表面相对光滑,观察组镁合金表面致密、光滑,有一些同向的纹理;浸泡7 d后,无涂层AZ31B镁合金表面呈龟裂状;氟涂层AZ31B镁合金表面无明显改变,可见散在腐蚀凹陷。结论氟涂层可以在一定程度上抑制AZ31B镁合金植入初期的降解作用。     

鼠疫菌对不同剂量和pH值的糖(醇)培养基发酵观察

目的观察并探讨鼠疫菌对不同剂量和pH值的糖(醇)培养基发酵结果,以便在工作中找出鼠疫菌对糖(醇)类发酵的理想选择值。方法选取对鼠疫菌有典型鉴定特征的5种糖(醇)类:阿胶糖、鼠李糖、麦芽糖、蜜二糖、甘油,用鼠疫菌生化实验常规制备方法配制糖(醇)基础培养液,按不同剂量(0.5～1.0 g)、不同pH(7.2、7.4、7.6)制成的糖(醇)培养基,接种鼠疫菌,观察其对鼠疫菌发酵影响。结果 1%和pH7.6糖(醇)培养基对鼠疫菌正常发酵结果优于0.5%和pH7.2～7.4的糖(醇)培养基,特别是对阿胶糖和甘油。结论制备糖(醇)培养基时选取剂量1%和pH7.6为鼠疫菌发酵的理想选择值。     

Serum albumin decreases transendothelial permeability to macromolecules

We examined the effects of serum albumin and other serum proteins on the fluxes of tracer 125I-albumin (MW 69 kDa) and 125I-haptoglobin (MW 100 kDa) across the pulmonary artery endothelial monolayer in vitro to test the role of serum proteins in modulating the endothelial barrier function. Replacement of control complete culture medium (20% fetal calf serum in DMEM) with DMEM alone increased the transendothelial 125I-albumin clearance rate (a measure of 125I-albumin permeability) by 83% of the control value. Repletion with 50% calf serum or with 2.0 g% albumin (i.e., the albumin concentration in 50% serum) decreased 125I-albumin permeability to the control value. This effect of serum or albumin was concentration-dependent since neither 12.5% serum nor 0.5 g% albumin (i.e., albumin concentration in 12.5% serum) altered 125I-albumin permeability from control values. The ammonium sulfate-precipitated serum protein fraction rich in albumin decreased 125I-albumin permeability from the control DMEM value, whereas serum fractions containing predominantly gamma-globulin or depleted of protein did not significantly alter 125I-albumin permeability. Other serum proteins that have been proposed to reduce endothelial permeability, alpha 1-acid glycoprotein (0.035-0.14 g/100 ml) and fibronectin (5 mg/100 ml), did not decrease 125I-albumin permeability from DMEM values. The endothelial permeability of 125I-haptoglobin of 4.63 +/- 0.53 x 10(-6) cm/sec in the presence of DMEM was 30% of the 125I-albumin permeability value. The addition of 2.0 g% albumin or 50% serum decreased 125I-haptoglobin permeability to 57 and 31%, respectively, of the DMEM value. These results indicate the critical role of serum albumin in regulating the restrictiveness of the endothelial barrier to macromolecules.     

不同利什曼原虫分离株在培养基中生长繁殖观察

目的　比较我国不同类型内脏利什曼病流行区利什曼原虫前鞭毛体在不同培养基中的生长繁殖情况，为选择合适培养基用于利什曼原虫培养提供实验依据。方法　将3 ×105个KS?2、Cy、JIASHI?5株利什曼原虫前鞭毛体分别接种至1 mL NNN培养基、1 mL M199 + 20%胎牛血清培养基、1 mL M199 + 20%马血清培养基及1 mL 脑心浸液培养基（含血红素）中，22 ℃温箱中无菌静置培养，显微镜下连续观察计数8 d，绘制3株利什曼原虫前鞭毛体的生长曲线。 结果 KS?2、Cy、JIASHI?5株利什曼原虫前鞭毛体均能在NNN培养基、M199 + 20%胎牛血清培养基和M199 + 20%马血清培养基中生长繁殖，在NNN培养基中培养不同时间后的3株利什曼原虫前鞭毛体计数均显著高于M199 + 20%胎牛血清培养基和M199 + 20%马血清培养基（P均 < 0.05），在这3种培养基中培养不同时间后的KS?2株利什曼原虫前鞭毛体计数均显著高于Cy和JIASHI?5株（P均 < 0.05）。KS?2、Cy、JIASHI?5株利什曼原虫前鞭毛体均不能在脑心浸液培养基中生长繁殖。结论　分离自我国不同类型内脏利什曼病流行区的利什曼原虫在同一培养基中生长增殖速度有差异，同一利什曼原虫分离株在不同培养基中的生长繁殖速度亦有差异。NNN培养基是最适合我国内脏利什曼病流行区利什曼原虫分离株的培养基。     

不同利什曼原虫分离株在培养基中生长繁殖观察

目的　比较我国不同类型内脏利什曼病流行区利什曼原虫前鞭毛体在不同培养基中的生长繁殖情况,为选择合适培养基用于利什曼原虫培养提供实验依据。方法　将3 ×105个KS?2、Cy、JIASHI?5株利什曼原虫前鞭毛体分别接种至1 mL NNN培养基、1 mL M199 + 20%胎牛血清培养基、1 mL M199 + 20%马血清培养基及1 mL 脑心浸液培养基（含血红素）中,22 ℃温箱中无菌静置培养,显微镜下连续观察计数8 d,绘制3株利什曼原虫前鞭毛体的生长曲线。 结果 KS?2、Cy、JIASHI?5株利什曼原虫前鞭毛体均能在NNN培养基、M199 + 20%胎牛血清培养基和M199 + 20%马血清培养基中生长繁殖,在NNN培养基中培养不同时间后的3株利什曼原虫前鞭毛体计数均显著高于M199 + 20%胎牛血清培养基和M199 + 20%马血清培养基（P均 < 0.05）,在这3种培养基中培养不同时间后的KS?2株利什曼原虫前鞭毛体计数均显著高于Cy和JIASHI?5株（P均 < 0.05）。KS?2、Cy、JIASHI?5株利什曼原虫前鞭毛体均不能在脑心浸液培养基中生长繁殖。结论　分离自我国不同类型内脏利什曼病流行区的利什曼原虫在同一培养基中生长增殖速度有差异,同一利什曼原虫分离株在不同培养基中的生长繁殖速度亦有差异。NNN培养基是最适合我国内脏利什曼病流行区利什曼原虫分离株的培养基。     

细粒棘球蚴生发细胞体外培养的实验观察

目的 :为培育人源细粒棘球蚴细胞系 (株 ) ,以供用于免疫预防研究。方法 :用外科方法从临床确诊的细粒棘球蚴患者的肝脏中取出包囊 ,以生发层和原头节为培养材料 ,采用RPMI1640、199和改良 DMEM培养液 ,用鼠尾胶原蛋白包被和不包被的培养瓶 ,对其进行初培养 ,并进行对比观察。结果 :以胶原蛋白作为支撑材料 ,应用改良 DMEM培养液培养的人源细粒棘球蚴生发层和原头节效果优于其他 ,已成功地培育了人源细粒棘球蚴细胞系 ,并传至第 2 0代。原代培养时间需 2 8d- 4 5d,3代以内细胞为多形态性。结论 :建立了适合人源细粒棘球蚴细胞体外培养的方法。     

Inhibitory effects of serum and stimulatory effects of estrogen on prolactin mRNA levels in GH3 rat pituitary tumor cells.

We investigated the effects of serum and estrogen on prolactin (PRL) mRNA accumulation in GH3 cells under different cell culture conditions. Hybridization analysis of GH3 cellular RNA indicated that PRL mRNA levels decreased more than 20-fold in cells cultured for 1 week in medium containing dextran-charcoal-treated serum (stripped serum). No effects on actin mRNA levels were observed under these conditions. Furthermore, this inhibition of PRL mRNA accumulation depended on the concentration of stripped serum in the medium. Although incubation in stripped-serum medium inhibited cell growth, these culture conditions did not appear to irreversibly affect the GH3 cell population. These data indicate that a potent inhibitor of PRL mRNA accumulation is present in stripped serum. GH3 cells grown in stripped-serum medium were shown to be responsive to estrogen. Treatment of these cells with 10(-9) M estradiol resulted in a 6.6-fold stimulation of PRL gene expression. However, estrogen had no effect on cell growth under these conditions, suggesting that estrogen stimulates PRL gene expression and cell proliferation by independent mechanisms.     

人型支原体液体培养中pH与活菌浓度关系研究

目的探讨入型支原体液体培养过程中,培养时间、培养基pH与菌浓度的关系,研究人型支原体液体培养时的生长规律。方法用精密pH计定时测定人型支原体培养过程中培养基pH值,同时观察培养基颜色变化;采H{微量法测定菌浓度,每3h测定一次,连续测定48h。结果不同浓度的人型支原体在液体培养时呈现相同的生长规律,有类似于细菌的牛长曲线,最大菌体浓度（CCU）10^6／ml;人型支原体生长与培养基pH相关,pH6．8时,菌体活性最高．培养是呈橙红色;pHi〉7．0时,菌体活性逐渐下降,pH7．2时,培养基旱深红色,不冉发生明显的颜色改变,人型芰味体活菌量迅速降低。结论人型支原体液体培养基培养时,培养基pH6．8、液体颜色橙红时,可扶取较佳生长活性的高菌含量培养物。