人体寄生虫的分类阶元

生物学分类可反映过去和现在种群间的进化关系。传统的人体寄生虫分类鉴定主要基于某些重要形态学特征,故在形态学特征相似的近缘物种分类中具有较大局限性。近年来分子生物学技术的发展,尤其是核糖体、线粒体基因等分子标记的有效应用和测序技术的快速发展,极大促进了人体寄生虫分子分类学的发展。国际上有关人体寄生虫分类也在不断修订和完善。本文对人体寄生原虫、吸虫、绦虫和线虫的分类阶元进行了梳理,旨在为研究寄生虫分子系统学和遗传进化提供参考。     

PCR在动物寄生虫病定性和定量诊断上的应用

PCR对于寄生虫系统发生学、流行病学、免疫学、宿主 寄生虫相互作用、重组DNA疫苗研制和最近通过DNA直接测序、表达序列标签 (ESTs)或通过迅速发展的功能蛋白组学的全基因组分析领域获得的进展均具有重要影响。本文重点介绍PCR在寄生虫检测和鉴定以及在疾病诊断中的应用。特别注重于多重PCR、实时荧光PCR和PCR定量技术     

PCR-RFLP技术在寄生虫分类鉴定中的应用

PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术是一种简便、快速的鉴定寄生虫种类的方法.目前,PCR-RFLP技术广泛应用于寄生虫学领域.该文综述了PCR-RFLP技术在医学原虫和蠕虫分类鉴定中的应用现状.     

PCR在动物寄生虫病定性和定量诊断上的应用

PCR对于寄生虫系统发生学、流行病学、免疫学、宿主．寄生虫相互作用、重组DNA疫苗研制和最近通过DNA直接测序、表达序列标签(ESTs)或通过迅速发展的功能蛋白组学的全基因组分析领域获得的进展均具有重要影响。本文重点介绍PCR在寄生虫检测和鉴定以及在疾病诊断中的应用。特别注重于多重PCR、实时荧光PCR和PCR定量技术。     

分子遗传学方法在寄生虫鉴定和分类上的价值

目前有许多方法可供寄生虫学家鉴定寄生虫虫种并进行分类。本文主要阐述分子遗传学技术用于对寄生虫的鉴定和种系发生的研究。以检测ＤＮＡ为基础的各种方法随技术进步不断完善，具有很高的特异性和灵敏度，尤其是ＰＣＲ相关方法所需寄生虫材料极少，对未来的寄生虫研究肯有很高价值。     

DNA条形码及其在寄生虫学中的应用

寄生虫作为与人类健康密切相关的特定生物类群,其分类是寄生虫学研究的重要基础。DNA条形码(DNA barcoding)即通过使用一段标准DNA片段进行快速、准确的物种鉴定。它是继RFLP、PCR-RFLP、SSR-PCR、ISSR等之后,在计算机及互联网得到广泛应用基础上,新发展起来的一项分子标记技术。因其具有在动物分类中可克服表型可塑性(Phenotypic plasticity)和遗传可变性(Genetic variability)的影响,以及不受性别和发育阶段限制等突出特点,而成为当前分类学研究的热点。本文阐述了DNA条形码的概念形成及发展、基本方法及尚存在的部分争议,介绍了该技术在寄生虫学原虫、蠕虫和节肢动物分类鉴定中的应用概况,同时对DNA条形码相关技术的发展以及在寄生虫学研究中的应用前景进行了展望。     

PCR-RAPD技术在医学蠕虫研究中的应用进展

PCR-RAPD技术是建立在PCR基础上的一种随机引物扩增技术,已广泛应用于种系鉴定、遗传分析、连锁图的构建、疾病诊断和基因分离等众多领域。近年来该技术在寄生虫研究中应用较广,本文介绍了国内外有关吸虫、绦虫和线虫等蠕虫方面的应用报道。     

分子标记技术在寄生虫分类鉴定中的应用

寄生虫在生物学上有差异的亚种和株具有不同的致病性, 其分类学对于寄生虫病的病原学、流行病学和防治等方面具有实际意义。DNA分子标记是以生物大分子的多态性为基础的遗传标记, 具备多态性高、无基因多效性、能够明确辨别等位基因等优点。本文综述第1代（限制性片段长度多态性、随机扩增多态性DNA等）、第2代（微卫星锚定PCR、简单重复序列间扩增等）和第3代（单核苷酸多态性）分子标记技术在寄生虫分类鉴定中的应用。     

计算机辅助专家系统在动物分类鉴定中的应用

本文对计算机辅助技术在动物分类鉴定中的应用现状进行了综述,并对各种技术的优劣进行比较,认为目前专家系统技术优势明显,技术成熟,有较好的应用前景。同时,对专家系统技术作了较详细的介绍,就专家系统在寄生虫分类鉴定中的应用现状和发展前景作了概述。     

PCR技术在寄生虫学研究中的应用

近年来,越来越多的分子生物学技术应用到寄生虫学与寄生虫病研究领域,其中PCR技术因其敏感性高、特异性强等优点得到了广泛应用.目前,分子生物学的发展及其在寄生虫学中的应用对寄生虫病的诊断、防治起到了十分重要的作用,该文就PCR技术的最新研究进展及其在寄生虫学方面的应用作一介绍.     

一次食物中毒相关的侵袭性大肠杆菌分子分型分析

目的对一起食物中毒分离的病原菌进行鉴定、毒力基因检测及分子分型。方法利用生化试验、血清学试验对病原菌进行鉴定,用普通PCR和real-time PCR对病原菌进行毒力基因检测,用PFGE对其同源性进行分析。结果分离的12份病原菌均为Escherichia coli I,血清型为EIEC O₁₃₆K₇₈,12份病原菌均携带uid、ipaH基因,其中5份检测携带vir基因。PFGE电泳图谱显示12株病原菌带型完全相同,表明来源于同一克隆株。结论分子生物学技术与传统方法的有机结合对侵袭性大肠埃希菌的快速鉴定及分子分型具有重要意义。     

不动杆菌属分类的研究进展

不动杆菌属是目前导致医院感染的常见细菌且耐药率很高,引起广泛关注。自1911年不动杆菌被分离鉴定以来,不动杆菌种属的分类和命名一直处于不断更新的状态。早期依据不动杆菌形态学和生化表型特征进行种属鉴定,但识别精度不高,经常出现菌种被错误鉴定的情况。随着分子生物学技术的发展,不动杆菌属的菌种可以通过全基因组测序技术被精确地鉴定和区分,这为深入研究不动杆菌的毒力和致病性差异提供了有力的支撑。本文对不动杆菌的分类历史和研究现状进行综述。     

分子生物学技术在带绦虫分类中的应用

传统的带绦虫分类是根据成虫和囊尾蚴的形态特征,有一定的局限性,尤其是对形态相近的虫种鉴别困难.近年来发展的分子生物学技术从基因水平检测带绦虫种间或种内个体间的遗传差异,若将两者有机结合,虫种鉴别将更加全面和客观.该文综述了PCR-限制性片段长度多态性技术(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)、随机扩增多态性DNA(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)、DNA序列分析等分子生物学技术在带绦虫分类研究中的应用.     

吸血蠓分子分类研究进展

随着分子生物学技术的发展,分子系统学相关技术日臻完善,在物种分类研究中已经取得了很多令人瞩目的成就,引起越来越多学者的广泛关注。分子分类技术作为一种新的物种鉴定手段,可以弥补传统分类技术的不足,可有效区分近缘种、隐种,并在物种种群进化、起源及亲缘关系的研究中显示出广阔的应用前景。该文综述了吸血蠓的分子分类研究进展,对几个常用标记基因的应用进行了介绍。     

呼吸道感染性疾病病原学诊断的挑战与解决策略

呼吸道感染性疾病是全球成人和儿童发病和死亡的重要原因,其病原体的诊断非常重要,并且是难点问题.现行的临床病原学检测的方法中,传统方法包括涂片染色镜检法、抗原检测法、培养法等.对于阳性的培养物还可以用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行菌种鉴定.最近几年发展较快的是分子生物学检测方法,包括普通...     

肠道菌鉴定培养基的研究进展

目前,细菌学的分类和鉴定技术有了很大的发展,但是,临床上肠道菌鉴定主要还以生化反应为主.单管多用的显色培养基筛选微生物是一种较新的技术,其操作简便、特异性强,能提高微生物细菌鉴定在临床上的地位,单管多用的显色培养基的开发、应用是今后的发展趋势.     

固相杂交技术检测真菌性角膜病常见致病菌的初步研究

目的探讨快速、准确检测真菌性角膜病常见致病菌的方法。方法将临床上常见的角膜致病真菌6属12种经氨基化修饰的特异性寡核苷酸探针固定在醛基化的载玻片上。用一对荧光标记通用引物对上述真菌的DNA基因片断进行扩增，将带有荧光标记的扩增产物与载玻片上排列的探针进行杂交，置于荧光显微镜下观察其显色情况。结果12种真菌都产生了530～630bp的PCR扩增产物，在相同的条件下对其进行杂交检测,得到了具有各自特征的杂交后荧光显色图谱，通过荧光信号可直接对不同菌种进行区分判断。结论采用固相杂交技术能够在3～4h完成对临床上常见的12种角膜致病真菌的菌种检测。     

Principles of the Polymerase Chain Reaction in Haematology

The polymerase chain reaction (PCR) is an automated process that specifically amplifies selected DNA sequences that are usually chosen to reflect the presence of genes, or parts of genes, in the sample material. Since many genetic alterations resulting in the onset of disease are now detectable using PCR, it can be used as both a diagnostic and prognostic tool. Genetic changes can occur in DNA due to mutation, deletion, inversion or chromosomal translocation. As a consequence, genes become either non functional or are aberrantly expressed. Research in recent years has now associated many defined genetic abnormalities with specific diseases. Therefore detection and surveillance of such lesions has led to disease diagnosis and subsequent monitoring of disease progression, for example, during and after administration of therapeutic regimens. The major effect of PCR in this area is that genetically abnormal cells can be detected within a normal cell population at a far lower incidence level than any other existing technology. Moreover, PCR can be used to identify naturally existing genetic polymorphisms that can be used as personal identifiers, or tags, for a given individual. Where these polymorphisms occur within a genetically modified region resulting in disease, identification of the polymorphism within families can be used as a predictor of disease carrier status or likelihood of inheritance of the disease.     

大肠杆菌O-抗原血清型鉴定研究进展

大肠杆菌在一定条件下能引发宿主疾病,其表面O-抗原与毒力有关。O-抗原的化学组成和结构具有高度多样性,并且O-抗原血清型种类与大肠杆菌致病性有一定联系。因此,大肠杆菌O-抗原血清型鉴定对流行病学调查,防御和控制致病性大肠杆菌病有重要意义。传统的血清学分型方法耗时长、费用高、准确度不理想。随着科学技术的发展,研究者对大肠杆菌196种O-抗原基因簇进行了破译,比较分析了不同O-抗原基因簇序列,并针对基因簇中特异性DNA序列设计分子标记,运用PCR方法对O-抗原血清型进行分型,其中包括一般PCR、多重PCR、实时PCR、DNA芯片和微球悬浮列阵法。此外,还有rbf-限制性片段长度多态性分析法,磁性微球免疫分析法和基于全基因组序列预测法,这些方法丰富了O-抗原血清型鉴定方法,弥补了传统血清学分型方法的不足。本文概述了O-抗原合成基因簇序列和O-抗原血清型鉴定方法相关研究进展。     

Heterozygous large deletions of Factor 8 gene in females identified by multiplex PCR-LC

Summary.  Haemophilia A is the most common X-linked recessive bleeding disorder. In 5% of severely affected patients the mutations responsible for the disease are large deletions encompassing from one exon to the complete Factor 8 ( F8 ) gene. Large deletions in a male haemophilic patient are easily detected by the absence of the corresponding PCR product. However, in female carriers, identification of the various heterozygous large deletions is difficult representing a major limitation to accurate carrier diagnosis. The deletion is masked by the presence of the second allele that serves as template for the PCR reaction. Quantitative PCR can differentiate between the presence of one or two alleles. Here we report an assay based on multiplex amplification of several exons of the F8 gene of various length and subsequent quantitative evaluation of the amplicons by liquid chromatogphy (LC). Using this approach we achieved an accurate classification of 16 female carriers and eight non-carriers for deletions in the F8 gene in 19 investigated families. One mother and one grandmother were classified as non-carriers, underlining the high de novo mutation rate of large deletions in female germ cells. The large deletions in three families were confirmed by fluorescent in situ hybridization. In conclusion, the multiplex PCR-LC technique represents a rapid, simple and reliable method for detection of heterozygous large deletions in female carriers.