丙型肝炎病毒抗体诊断试剂质量评估

目的对国内外不同厂家的丙型肝炎(丙肝)病毒的15种酶联免疫吸附法(ELISA)诊断试剂及8种胶体金法诊断试剂的质量进行评价。方法使用国家艾滋病参比室基础血清盘、参比室干扰血清盘、商业阳转血清盘,以阳性符合率、阴性符合率等指标评价试剂的质量。结果共检测80份样本,15种丙肝ELISA试剂的阳性符合率、阴性符合率均≥97.5%(39/40);8种丙肝胶体金试剂阳性符合率为82.5%～100%(33/40～40/40),阴性符合率均≥97.5%(39/40)。对阳转血清盘检测,ELISA试剂的平均延长天数分布于8-19天之间。丙肝ELISA和胶体金试剂的分析特异性均为100%。结论参评的ELISA试剂具有较高的阳性符合率和阴性符合率。胶体金试剂的阴性符合率较高、阳性符合率有差异。丙肝ELISA试剂适合于中国一般人群的筛查检测。丙肝胶体金试剂的敏感性有待于进一步提高。     

微阵列酶联免疫法在临床输血检测中的应用

目的：探讨微阵列酶联免疫法检测的临床价值。方法：用酶联免疫法（ELISA）和微阵列酶联免疫法检测对照组样本的抗-HIV抗体、抗-TP抗体、HBsAg。分别统计2种方法检测阳性、阴性的样本数目，并进行统计学处理。结果：2种方法分别检测140份实验组样本，统计检测结果并经卡方检验证明差异无统计学意义。除了HBsAg检测结果的总符合率为98．6％，其余指标检测结果的总符合率均为100％。结论：微阵列酶联免疫法与ELISA法差异无统计学意义，初步证明可以满足临床输血检测的要求。     

ELISA和TRUST检测梅毒螺旋体方法比较分析

目的 比较ELISA(酶联免疫吸附试验)、TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)法诊断梅毒螺旋体感染的方法学差异.方法 用目前国内最常用的诊断梅毒螺旋体感染的TRUST试剂及ELISA试剂检测722例标本,同时与TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验)的检测结果进行比较,从而得到各试验的假阴性率和假阳性率.结果 对722份样本的检测中,ELISA和TPPA的阳性符合率为98.26％,假阴性率和假阳性率分别为0.46％和1.91％,2种方法差异无统计学意义(P ＞0.05); TRUST和TPPA的阳性符合率为84.39％,假阴性率和假阳性率分别为21.08％和5.10％;ELISA和TURST检出率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 ELISA测定梅毒螺旋体的方法在日常大量标本检验时优于TRUST.     

蛋白芯片技术对自身免疫性抗体的检测及评价

目的 探讨蛋白芯片技术检测自身抗体的临床价值。方法 用酶联免疫吸附试验（ELISA）、蛋白芯片法检测抗dsDNA、抗Ro-60／SSA、抗Ro-52／SSA、抗SSB、抗Jo-1、抗磷脂IgG抗体．用间接免疫荧光法（IIF）、蛋白芯片法检测抗核抗体（ANA），分别统计两种方法检测均阳性、均阴性和单阳性的标本数目．并进行评价。结果 芯片法检测ANA的灵敏度为89％、特异度为60％．芯片法对其他6种自身抗体检测的灵敏度为70．0%～87．5%、特异度为92．7％～98．9％。结论 蛋白芯片法检测自身抗体与常规方法比较，特异度较高，有待进一步改善技术提高其灵敏度。     

化学发光法检测抗髓过氧化物酶抗体和抗蛋白酶3抗体

目的研究全自动、定量和随机上样化学发光法(chemiluminescent immunoassay,CLIA)检测抗髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)抗体和抗蛋白酶3(proteinase 3,PR3)抗体的临床应用价值,为临床抗MPO抗体和抗PR3抗体检测方法的选择提供参考。方法对临床242例常规申请抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic autoantibodies,ANCA)检测的样本采用间接免疫荧光法(immunofluorescent assay,IFA)筛查的同时,应用CLIA和酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)平行检测抗MPO抗体和抗PR3抗体。对上述检测结果进行统计学分析。结果 CLIA与ELISA针对抗MPO抗体的检测表现出良好的一致性和符合率,其中总符合率为93.8%,阳性符合率81.9%,阴性符合率98.8%,一致性结果显示kappa=0.845,受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)以下面积(area under the curve,AUC)为0.966。两种方法学在检测抗PR3抗体时一致性和符合率表现较低,其中总符合率为86.8%,阳性符合率为35.1%,阴性符合率为96.1%。ROC曲线分析显示AUC为0.839;抗PR3抗体两种方法检测结果不一致的样本经第三方试剂验证结果显示,CLIA检测结果与第三方试剂验证结果差异无统计学意义(P0.05),而ELISA检测结果与第三方试剂验证结果差异存在统计学意义(P0.05)。CLIA检测结果与IFA检测结果阳性符合率为60.8%、阴性符合率为94.8%、总符合率为79.8%。而ELISA检测结果与IFA检测结果阳性符合率、阴性符合率和总符合率则分别为73.6%、77.2%和75.6%。结论与ELISA比较,CLIA检测抗MPO抗体具有良好的一致性和符合率,而检测抗PR3抗体时一致性和符合率偏低。在检测抗PR3抗体和抗MPO抗体时,CLIA的特异性均优于ELISA。建议实验室开展抗MPO抗体和抗PR3抗体检测方法选择时,应同时结合IFA抗体筛查试验、样本临床信息以及方法学自身特点等因素进行严格的判断和评价。     

牛分枝杆菌脂多糖在动物结核病血清学诊断中的应用价值

目的:评价牛分枝杆菌脂多糖在动物结核病血清学诊断中的临床应用价值。方法:从灭活的牛分枝杆菌中提取具有生物活性的脂多糖，用提取的脂多糖进行酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA),检测阴性牛血清和结核病、副结核病、布鲁氏菌病、口蹄疫、衣原体病和新孢子虫病阳性牛血清，判断脂多糖用于动物结核病诊断的特异性。同时，收集牛血清样本245份[结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test, TST)阳性177份，TST阴性68份],梅花鹿血清样本29份(TST阳性10份，TST阴性19份),獐子血清样本14份(TST阳性14份),通过ELISA方法检测血清中的抗体水平，以TST结果为参照，评估脂多糖在动物结核病血清学诊断中的临床应用价值。结果:除结核病阳性牛血清外，其余阳性病牛血清的检测结果与阴性牛血清差异无统计学意义(P>0.05),且均低于Cut off值。基于脂多糖建立的ELISA抗体检测方法与TST结果的总符合率为88.54%(255/288),总敏感度为87.56%(176/201),总特异度为90.80%(7...     

金免疫斑点渗滤法检测日本血吸虫抗体的应用

建立了检测血吸虫病人血清抗体的金免疫斑点渗滤法(DIGFA)。以该法检测107份粪检阳性血吸虫病人血清,阳性率为96.2%。119份健康人血清均为阴性。与常规ELISA对照,符合率达99.1%。显示两法敏感性和特异性相近,但DIGFA操作更为简便快速。     

抗结核抗体检测方法及临床意义

目的 探讨抗结核抗体检测技术在临床诊断中的应用价值.方法 对1823例确诊肺结核患者、580例非结核病的其他呼吸系统疾病患者及500名健康体检者进行抗酸染色法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法、金标法及蛋白芯片法检测,并进行相关统计分析.结果 ELISA法、金标法及蛋白芯片法对肺结核患者的检出敏感性分别为59.1%、62.7%和71.2%,均显著高于抗酸染色(18.4%).蛋白芯片法对抗酸染色阴性肺结核患者的抗结核抗体检出率为67.9%.结论 3种结核抗体检测技术均可用于肺结核的快速辅助诊断.相对于ELISA法及金标法而言,蛋白芯片法敏感性和特异性更高,对痰菌阴性肺结核患者的辅助诊断更具积极意义.     

快速酶联免疫吸附试验检测TORCH-IgM抗体的研究

目的建立快速检测TORCH-IgM抗体的方法。方法利用聚乙二醇（PEG）能加速抗原、抗体反应的特点，在常规间接ELISA法检测TORCH—IgM抗体基础上，在样本稀释液、酶标记物稀释液中各加入3％PEG，以缩短反应时间。结果温育时间缩短到15min（37℃）的快速ELISA法对检测人TORCH—IgM抗体强阳性、弱阳性、阴性标本具有稳定性好，精密性、特异性强的特点；稀释液中不加PEG的常规15min法，采用37℃、15min试验条件，可能会造成弱阳性标本漏检情况。结论快速ELISA法的建立为TORCH病原体感染的快速检测和流行病学调查提供了新的手段。     

ELISA双抗原夹心法检测鼠疫FI抗体的效果评价

目的比较ELISA双抗原夹心法与IHA法检测人血清中鼠疫FI抗体的最低检出限,符合率以及检测ELISA的特异性,以确定ELISA检测技术能否在鼠疫监测、诊断和流行病学调查中得到应用。方法分别用ELISA双抗原夹心法和IHA（间接血凝法）检测血清298份和鼠疫阳性诊断血清1份。结果ELISA双抗原夹心法检出4份阳性血清,IHA也检出4份阳性血清,2种方法阳性检出率无差别,符合率为75％,最低检出限均为1：160。结论ELISA特异性强,阳性检出率与IHA相当,结果容易判定,可以在鼠疫病例诊断及鼠疫监测中作为常规方法推广使用。     

ELISA检测TORCH感染的交叉反应性探讨

目的　探讨TORCH四联抗原的交叉反应性。方法　采用间接ELISA检测人群血清中TORCH的IgM及IgG抗体 ;制备四项抗血清进行交叉血清学试验。结果　 144份人血清的TORCHIgM阳性率分别为 :TOX 6 .9%、RV 6 .9%、CMV 6 .9%、HSV 2 .8% ,其中 4项阳性 4例 ,3项阳性 4例 ,2项阳性 3例 ;34 3份人血清的TORCHIgG阳性率分别为 :6 1%、8 2 %、10 2 %和 8 7% ,其中 4项阳性 3例 ,3项阳性 14例 ,2项阳性 17例 ,单独阳性 2 6例 ;7份抗血清与相应抗原反应的强度高低不等 ,但同一份抗血清在四种抗原板上的终点滴度基本相似。结论　TORCH四联ELISA检测存在较严重的交叉反应性 ,由此提示四联抗原间可能存在着部分共同抗原     

孕妇上呼吸道感染与TORCH感染的相关研究

目的探讨孕妇上呼吸道感染与TORCH感染的相关性。方法采用ELISA法检测165例上呼吸道感染孕妇的TORCH IgM,同期选择180例正常无上呼吸道感染的孕妇作为对照组。结果上呼吸道感染孕妇的TORCH IgM(+)总阳性率为10.30%(17/165),显著高于对照组TORCH IgM(+)总阳性率3.33%(6/180)(P<0.05)。结论有上呼吸道感染的孕妇是TORCH感染筛查的高危人群。     

五种艾滋病病毒抗体诊断试剂临床质量比较

目的 为掌握中国市售艾滋病病毒(HIV)抗体诊断试剂的实际应用状况。方法 对4种国产HIV抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂(其中3种为国产双抗原夹心法试剂)和美国Abbott HIV快速法诊断试剂用200份血清盘样品进行了统一测试。200份血清盘标本包括100份经过确认的HIV抗体阳性、弱阳性、阴性标本和100份高危人群的血清标本。初筛阳性和可疑样品再用蛋白印迹法(WB)做确认对比分析。结果 5种试剂的敏感性为90.7％～98.9％,特异性为93.0％～99.1％,假阳性率为0.9％～7.0％,假阴性率为1.2％～9.3％,总符合率为94.5％～97.5％,约登指数为89.5％～95.4％,阳性预示值(PPV)为91.2％～98.7％,阴性预示值(NPV)为93.4％～99.1％。结论 随着中国双抗原ELISA试剂的研制和市场投放使用,HIV抗体诊断试剂内在质量指标虽有所提高,但其漏检率仍需进一步改进。     

淮南地区孕早期妇女TORCH感染筛查结果分析

【摘要】 目的  分析淮南地区孕早期妇女弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒和单纯疱疹病毒的检测结果,探讨其临床意义。 方法  采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对淮南地区4 832例孕妇TORCH-IgM抗体和TORCH-IgG抗体进行检测分析。 结果  HSV-IgM和HSV-IgG阳性率最高,差异有统计学意义（P＜0.05）;因CMV感染导致的不良妊娠发生率为48.84%（21/43）,与其他病毒感染导致的不良妊娠相比有统计学意义（P＜0.05）;不良妊娠结局表现中,流产发生率为65.12%（28/43）,与其他不良妊娠结局表现相比,差异有统计学意义。 结论  淮南地区孕早期妇女存在一定的TORCH阳性率,TORCH感染是不良妊娠结局的重要危险因素之一,因此在孕早期或孕前进行TORCH检测对指导本地区优生优育工作及提高新生儿人口素质具有重要指导意义。     

Evaluation of sandwich ELISA galactomannan test in samples of positive LA test and positive aspergillus antibody

OBJECTIVE: The detection of circulating Aspergillus galactomannan antigen is a useful tool for serodiagnosis of aspergillosis. However, the latex agglutination test for the detection of galactomannan is not completely reliable due to it's low sensitivity. The sandwich ELISA was developed to achieve high sensitivity. MATERIALS: The sandwich immunocapture ELISA was evaluated by testing 56 sero-positive and 56 sero-negative samples of circulating galactomannan detected by LA test retrospectively. RESULTS: Sixty of the samples were positive for galactomannan as measured by sandwich ELISA. Fifteen samples out of 56 samples negative by LA test were positive by ELISA and 4 samples out of 56 samples positive by LA test were negative by ELISA. Among 47 serum samples positive for anti-Aspergillus antibody, 14 samples were positive by ELISA. CONCLUSION: In conclusion, galactomannan may be detected in more samples of by the new sandwich ELISA than by LA test.     

Detection ofHelicobacter pylori DNA in gastric juice by the polymerase chain reaction: Comparison with findings in bacterial culture and the detection of tissue IgA and serum IgG antibodies againstHelicobacter pylori

The detection ofHelicobacter pylori in gastric juice by the polymerase chain reaction (PCR) was undertaken in 124 patients with peptic ulcer or chronic gastritis. PCR products were evaluated by agarose gel electrophoresis and Southern hybridization ofH. pylori-specific DNA sequences. Positive and negative results of the PCR analysis in 72 examinations were compared with those from bacterial culture, and with the detection of tissue IgA antibody againstH. pylori by enzyme-linked immunosorbent assay ELISA; Serion, Wuerzburg, Germany, and detection of serum IgG antibody againstH. pylori by ELISA; Radim Pomezia, Italy. Thirty-four PCR-positive samples evaluated by electrophoresis and hybridization coincided with positive samples in 56% of bacterial cultures, 59% of tissue IgA antibody identifications, and 94% of serum IgG antibody evaluations; 26 PCR-negative samples coincided with negative samples in 96% of bacterial cultures, 81% of tissue IgA antibody evaluations, and 38% of serum IgG assessments. We compared the detection achieved with theH. pylori PCR assay in gastric juice with that in biopsies taken from the antrum and upper corpus in 90 examinations, and found them to be both positive in 34 (38%) and 36 (40%) of specimens, both negative in 37 (41%) and 30 (33%) specimens, gastric juice-positive but biopsynegative in 10 (11%) and 12 (13%) specimens, and vice versa in 9 (10%) and 12 (13%) specimens, when detected by electrophoresis and hybridization, respectively, showing equivalent detection rates. In relation to the type of disease, the positive PCR assay results with gastric juice, evaluated by electrophoresis and hybridization, respectively, were: gastric ulcer 34/53 (64%) and 39/53 (74%), duodenal ulcer 23/38 (61%) and 25/38 (66%), and chronic gastritis 20/33 (61%) and 23/33 (70%), showing no significant difference in positive rates between peptic ulcer and chronic gastritis. Of the samples of 16 patients withH. pylori-positive gastric juice by the PCR assay, 7 were negative by PCR assay analyzed by electrophoresis and hybridization after the completion of treatmentH. pylori. However, after treatment, 3 were negative on electrophoresis but still had positive results with hybridization, indicating that a minimal number of bacilli may have still remained. Detection ofH. pylori in gastric juice has potential advantages for examiningH. pylori infection in the entire stomach and for follow up after treatment for the eradication ofH. pylori. This study was supported by Grants-in-Aid for Cancer Research from the Ministry of Health and Welfare, Japan.     

TORCH感染与不良妊娠结局的相关性分析

目的 目的 了解TORCH感染与不良妊娠结局间的关系。方法 方法 采用捕获ELISA法对900例孕妇血清进行TORCH? IgM抗体检测, 对阳性孕妇进行追踪, 并随访其妊娠结局。结果 结果 孕妇血清TORCH?IgM抗体总阳性率为4.11% （37/900）,其中巨细胞病毒、 单纯疱疹病毒、 风疹病毒和弓形虫特异性IgM抗体阳性率分别为2.00% （18/900）、 0.78% （7/900）、 0.44% （4/900） 和0.89% （8/900）。31例继续妊娠的孕妇中, 不良妊娠结局20例, 占64.52%。结论 结论 TORCH感染是引起不良妊娠结局的重要危险因素。孕期进行TORCH筛查并给予适当干预, 可减少不良妊娠的发生, 预防出生缺陷。     

Sensitivity and specificity of an antigen detection ELISA for malaria diagnosis

Enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) allow for the testing of large numbers of samples within a short time frame. We tested the sensitivity and specificity of a histidine-rich protein 2 (HRP2)-based, commercially available ELISA antigen detection assay for Plasmodium falciparum (Malaria Antigen CELISA; Cellabs, Sydney, Australia). A total of 700 whole blood samples obtained from symptomatic outpatients of malaria clinics along the Thai-Myanmar border were tested relative to blinded duplicate expert microscopy adjusted with species-specific polymerase chain reaction (PCR). PCR-adjusted microscopy showed that 79 (11.3%) were infected with P. falciparum, 118 (16.9%) with P. vivax, 1 (0.1%) with P. malariae, 7 (1.0%) with mixed infections (P. falciparum and P. vivax), and 495 (70.7%) were negative. The geometric mean parasite density for P. falciparum was 7547/muL (range: 12-363,810/muL). The overall sensitivity of the HRP2 ELISA for P. falciparum malaria was 98.8% (95% CI, 93.6-100%) and the specificity was 100% (95% CI, 99.5-100%). The positive and negative predictive values for the ELISA were 100% (95% CI, 96.5-100%) and 99.8% (95% CI, 99.1-100%), respectively. The results for P. falciparum were clearly superior to expert microscopy alone, particularly in mixed infections. Microscopy combined with ELISA reaches a sensitivity and specificity similar to PCR-adjusted microscopy for the diagnosis of P. falciparum while being considerably less expensive and faster. We conclude that ELISA serves as an excellent tool to augment microscopy as the gold standard for P. falciparum diagnosis in research settings and should be further evaluated for screening in blood banks.     

HIV抗体筛查实验的检测策略评价

目的以蛋白印迹试验（WB）结果为金标准,对实验室的HIV抗体筛查,包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫层析快诊实验的检测策略进行回顾性分析与评价。方法参照2004年《全国艾滋病检测技术规范》的要求,对2007-2011年之间HIV抗体初筛呈阳性反应的标本,采用WB进行确证。结果727例HIV抗体复查标本中,确证试验阳性为540例,占筛查阳性总数的74.28％;其中两种ELISA及免疫层析快诊都呈阳性反应的为558例,确诊540例,不确定’18例,与确证试验的阳性符合率为96.77％;其余的ELISA呈阳性反应结果加上快诊结果与WB的阳性符合率为0,其中不确定72例,阴性97例。ELISA结果的1≤S／Co〈3,与确证试验阳性符合率为0.85％;S／Co值在3～6之间,与确证试验阳性符合率为11.11％;S／Co〉6,与确证试验阳性符合率为94.51％。阳性与不确定’、阳性与阴性的S／Co、不确定。的各组之间差异均有统计学意义（P均=0.00）,不确定’与阴性之间差异有统计学意义（P=0.032）;而不确定。组之间差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论ELlSA检测试剂存在一定的假阳性,随着S／Co值的增高,与确证试验的阳性符合率也将升高,但是高S／Co值的样本并不代表感染HIV,HIV抗体阳性报告建议以确证试验结果为准;WB确证方法在不确定标本中存在一定的缺陷,快诊与ELISA的联合运用可以有效区分WB结果的感染一不确定与未感染一不确定,建议根据初筛结果,分类做好不确定人群的管理,尤其对两种ELISA及快诊均呈阳性反应的人群,应加大力度做好随访工作,确保无一例漏访。