不同pH肝浸汤培养基培养阴道毛滴虫的观察

目的 观察不同pH值对阴道毛滴虫生长发育的影响，为实验室培养或临床诊断培养阴道毛滴虫提供参考。方法 配制pH值分别为2、2．5、3、3．5、4、4．5、5、5．5、6、6．5、7、7．5、8、8．5的肝浸汤培养基，分别接种相同数量的阴道毛滴虫，37℃恒温培养48h，用血球计数板计数滴虫数量。以pH值为横坐标，滴虫密度为纵坐标作曲线图，找出培养滴虫的最适pH值范围。同时，连续观察各pH值管滴虫生长情况，直至滴虫死亡，记录各pH值培养基中滴虫的最长存活时间。结果 阴道毛滴虫能在pH3～8的肝浸汤培养基中生长繁殖，最适pH范围为5～7．5，最适pH值是6。在pH4和pH8的培养基中连续不转代培养时，滴虫存活时间最长，分别达180h和189h。结论 肝浸汤培养基pH值为6时，滴虫生长良好，运动活泼，繁殖速度快，适用于快速繁殖滴虫，提高滴虫收获量；在pH4和pH8时，滴虫生长缓慢，但存活时间显著延长，适合保种培养。     

3种不同培养基体外培养阴道毛滴虫效果的比较

目的　探索阴道毛滴虫体外培养的适宜条件。　方法　用临床分离的阴道毛滴虫 ,按 9.0× 10 4 / ml的接种量转种至 3种不同培养基进行培养 ,p H值为 5 .6。　结果　经 3种培养基培养 ,96 h后阴道毛滴虫数量存在差异 ,其中以半胱氨酸 -肝 -胨 -麦芽糖培养基 培养基 )虫数较多 ,肝 -胨 -麦芽糖培养基 培养基 )次之 ,大豆 -肝 -胨 -麦芽糖培养基 培养基 )较少。培养基 与培养基 及培养基 相比较 ,滴虫存活率差异具有显著性意义 P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,滴虫生长密度差异也具有显著性意义 P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,生长密度高峰持续时间分别为 192 h、14 4 h和 96h,最长存活时间分别为 2 88h、2 16 h和 192 h。　结论　半胱氨酸 -肝 -胨 -麦芽糖培养基较适于阴道毛滴虫体外增殖     

在固体培养基中培养阴道毛滴虫的研究

目的研究阴道毛滴虫在固态培养基中的生长条件.方法厌养箱培养.结果阴道毛滴虫在固态培养基中生长繁殖的最佳条件为0.45%琼脂浓度,37 C,厌氧箱培养.在直径6 cm的培养皿中接种100个虫数为宜.随着培养时间增加,虫落直径增大,至培养第5 d直径最大,其后死亡率明显上升.阴道毛滴虫在固态培养基中最多可活8 d.结论阴道毛滴虫可在固态培养基中生存繁殖,此项技术为深入研究阴道毛滴虫提供了新的培养方法.     

阴道毛滴虫在两种培养基中的生长与形态观察

目的通过对改良肝浸汤培养液及RPM11640培养基内阴道毛滴虫生长情况的观察，选择适合教学和科研的培养基。方法用临床分离的阴道毛滴虫标本，分别接种至改良肝浸液及RPM11640两种培养基内进行培养，pH值为5．6～5．8，通过计数了解生长情况并观察阴道毛滴虫的形态。结果肝浸汤培养液中培养48h，阴道毛滴虫达到生长高峰，虫体呈现出多分裂相，虫体变大、呈圆形，内含4～12个细胞核，细胞膜外缘可见数丛鞭毛。RPM11640培养基中阴道毛滴虫72h达到生长高峰，虫体密度约为肝浸液高峰期的2／3，未见多分裂现象，虫体与生理盐水涂片中阴道毛滴虫形态、大小相近。结论改良的肝浸液培养基适于阴道毛滴虫的药物试验及其他实验项目的研究，RPM11640培养基更适用于教学、标本的制作及实验室保种工作。     

阴道毛滴虫在两种培养基中的生长与形态观察

目的 通过对改良肝浸汤培养液及RPMI1640培养基内阴道毛滴虫生长情况的观察,选择适合教学和科研的培养基。 方法 用临床分离的阴道毛滴虫标本,分别接种至改良肝浸液及RPMI1640两种培养基内进行培养,pH值为5.6~5.8,通过计数了解生长情况并观察阴道毛滴虫的形态。 结果 肝浸汤培养液中培养48 h,阴道毛滴虫达到生长高峰,虫体呈现出多分裂相,虫体变大、呈圆形,内含4~12个细胞核,细胞膜外缘可见数丛鞭毛。RPMI1640培养基中阴道毛滴虫72 h达到生长高峰,虫体密度约为肝浸液高峰期的2／3,未见多分裂现象,虫体与生理盐水涂片中阴道毛滴虫形态、大小相近。 结论 改良的肝浸液培养基适于阴道毛滴虫的药物试验及其他实验项目的研究,RPMI1640培养基更适用于教学、标本的制作及实验室保种工作。     

在固体培养基中培养阴道毛滴虫的研究

目的 研究阴道毛滴虫在固态培养基中的生长条件。方法 厌养箱培养。结果 阴道毛滴虫在固态培养基中生长繁殖的最佳条件为0．45％琼脂浓度,37℃,厌氧箱培养。在直径6cm的培养皿中接种100个中虫数为宜。随着培养时间增加,虫落直径增大,至培养第5d直径最大,其后死亡率明显上升。阴道毛滴虫在固态培养基中最多可活8d。结论 阴道毛滴虫可在固态培养基中生存繁殖,此项技术为深入研究阴道毛滴虫提供了新的培养方法。     

阴道毛滴虫固态培养基建立及两种培养方法的比较

目前阴道毛滴虫的培养多用液态培养基，获得单克隆虫株难度较大。本研究就固态培养基培养阴道毛滴虫的实验条件进行探讨，为深入研究阴道毛滴虫提供新的培养方法。     

不同品牌洗涤剂体外杀灭阴道毛滴虫的效果观察

为了解新型洗涤剂对阴道毛滴虫的杀灭效果,采用常用洗衣粉、肥皂和浴液各３种,观察其在不同浓度、不同时间内对阴道毛滴虫的杀灭效果。结果显示,洗衣粉、浴液、肥皂对阴道毛滴虫均有杀灭作用,其效果随浓度的增大和作用时间的延长而提高。以浴液杀虫效果最佳,肥皂和洗衣粉次之。     

甲硝唑不同剂型抗阴道毛滴虫的效果

甲硝唑原药、膜剂和栓剂对阴道毛滴虫有抑制和致死作用，其最低致死浓度均为２５ｍｇ／ｍｌ。阴道毛滴虫在１．２５×１０４～２×１０５个／ｍｌ范围内随着虫数增加，药物杀虫率升高，虫数少时虫体死亡率低。甲硝唑的３种剂型对阴道毛滴虫长期保存株和新分离株具有同等的杀虫效果。甲硝唑膜剂杀虫速度比甲硝唑原药和栓剂快，并具有药量少，杀虫效果高的优点。     

不同品牌洗涤剂体外杀灭阴道毛滴虫的效果观察

为了解新型洗涤剂对阴道毛滴虫的杀灭效果,采用常用洗衣粉、肥皂和浴液各3种,观察其在不同浓渡、不同时间内对阴道毛滴虫的杀灭效果。结果显示,洗衣粉、浴液、肥皂对阴道毛滴虫均有杀灭作用,其效果随浓度的增大和作用时间的延长而提高。以浴液杀虫效果最佳,肥皂和洗衣粉次之。     

阴道毛滴虫病毒介导的EGFP在阴道毛滴虫细胞内的表达

目的研究阴道毛滴虫病毒(Trichomonas vaginalis virus,TVV)介导外源基因进入阴道毛滴虫体内表达的能力,探索TVV作为双链RNA病毒转染载体的可能性。方法根据TVV基因组的序列特征,用绿色荧光蛋白(EG-FP)编码基因替换TVV的全部或部分基因编码区,构建TVV与增强型EGFP编码基因的嵌合体pTVV-EGFP,其体外转录体经电穿孔方法转染携病毒阴道毛滴虫株,RT-PCR及SDS-PAGE方法检测EGFP的表达情况。结果电穿孔转染后培养的虫体在荧光显微镜下观察到绿色荧光信号,且续传15代后仍然存在;RT-PCR检测到EGFP的mRNA,SDS-PAGE检测到转染后虫体及培养上清中有分子质量单位为27 ku的蛋白,与已知EGFP的分子质量相符。结论TVV能成功介导外源性EGFP编码基因在阴道毛滴虫体内表达。     

复方牛胎肝提取物治疗非酒精性脂肪性肝炎临床观察

目的研究复方牛胎肝提取物治疗非酒精性脂肪性肝炎患者的临床效果。方法选择2014年1月~2016年1月我院收治的非酒精性脂肪性肝炎患者120例,采用随机数字表法将患者分为研究组和对照组,每组各 60例。所有患者均给予同样的饮食指导,使热量和脂肪的摄入减少,并且指导患者每日运动。不给予对照组患者任何影响脂肪代谢及保肝药物治疗,给予研究组患者复方牛胎肝提取物片剂。治疗前及治疗后分别对两组患者肝功能、血脂及肝纤维化指标、Fibroscan评分（CAP值）等进行检查。结果治疗3个月,研究组患者血清AST、ALT、GGT水平分别为（38.53±10.56） U/L、（42.35±12.04） U/L和（44.99±8.74） U/L,显著低于对照组水平【（48.83±9.46）U/L、（57.92±13.84） U/L和（50.35±9.84） U/L,P<0.05】;治疗后研究组患者血甘油三脂和HDL-C水平分别为（4.41±1.12） mmol/L和（0.87±0.17） mmol/L,均低于对照组水平【（5.20±0.79） mmol/L和（0.74±0.11） mmol/L,P<0.05）】;治疗后研究组患者血清HA、LN、PCⅢ、C-Ⅳ水平分别为（70.18±20.57） μg/L、（126.84±27.15） μg/L、（113.84±25.68）μg/L、（61.96±9.46） μg/L,均显著低于对照组【分别为（82.18±21.53） μg/L、（133.19±26.68） μg/L、（128.85±26.35）μg/L和（67.94±10.75）μg/L,P<0.05】;与对照组患者相比较,治疗后研究组患者CAP值下降更显著（P<0.05）。结论复方牛胎肝提取物可以改善非酒精性脂肪性肝炎患者肝功能指标、血脂水平和肝纤维化指标。     

改良吉氏染色法观察体外培养的阴道毛滴虫分裂繁殖

采用改良吉氏染色法观察体外培养的阴道毛滴虫分裂相。结果显示，分裂间期为66.5%，二分裂期为24.1%，多分裂期为9.4%。二分裂虫体可划分为前有丝分裂期、前期、中期、后期和末期。多分裂虫体可见含3～7或8个子体，其中含3和4个子体的分别占69.1％和24.5％。还可见一些形态异常虫体。     

革兰染色后阴道毛滴虫形态的光镜观察

目的 显微镜观察阴道毛滴虫的生长环境和形态特征。方法 采集滴虫性阴道炎患者阴道分泌物,涂片,革兰染色后,光镜下观察分泌物特征及阴道毛滴虫形态。结果低倍镜下,阴道分泌物涂片呈云雾状;白细胞多,类似滴虫的“小体”混杂于白细胞中,染深红色,边缘清晰,周围无粘液而形成一圈透亮的“光环”;当白细胞较少时,“小体”常分布在上皮细胞附近,呈椭圆形或尾形。油镜下,滴虫体积约为白细胞的2～3倍,梨形、圆形、椭圆形、尾形或不规则形,胞浆呈红色泡沫状;胞核小、椭圆形,位于虫体前端约1／3处;近胞核端可具4根前鞭毛。结论在光学显微镜下,经革兰染色的滴虫性阴道分泌物及阴道毛滴虫显示特定的形态特征,有利于明确诊断滴虫性阴道炎,减少漏诊。     

直接免疫荧光法检测阴道毛滴虫

目的研究多克隆抗体直接免疫荧光法(directimmunofluorescenceassay,DFA)检测阴道毛滴虫的最佳反应条件及临床应用意义。方法确诊为阴道炎的患者取阴道分泌物,经培养收集虫体,稀释成悬液,制作抗原片。取阴道毛滴虫免疫山羊血清,按Marssall氏法用异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体,观察不同抗体稀释度(1:10～1:2560)、不同孵育时间(15,30,45,60,90,120min)、不同封闭剂(1％牛血清白蛋白,10％牛血清白蛋白及10％小牛血清)对DFA检测阴道毛滴虫的影响。对102例阴道炎患者标本分别用培养法、悬滴法和DFA作临床检验。结果抗体稀释度1:160、37℃孵育45min、封闭剂1％或10％牛血清白蛋白为最佳反应条件。检测102例临床标本,3种方法均阳性的16例,均阴性的68例。有13倒悬滴法、3例DFA检测阴性,而另2法阳性。1倒悬滴法阴性,DFA阳性,培养法未能证实。以培养法为标准,DFA敏感性为87.9％,特异性为98.6％。结论DFA可作为悬滴法的一种替代手段用于临床检验。     

复方牛胎肝提取物联合二甲双胍治疗非酒精性脂肪性肝炎的临床研究

研究复方牛胎肝提取物联合二甲双胍对非酒精性脂肪性肝炎的治疗作用。将68例非酒精性脂肪性肝炎患者随机分成两组,每组34例,试验组给予牛胎肝提取物联合二甲双胍治疗;对照组给予二甲双胍治疗,疗程均为3个月。治疗前后测定各组患者肝功能指标:ALT、AST、GGT;血脂指标:TG、TC、HDL-C;血清肝纤维化指标: HA、LN、CⅣ、PCⅢ。治疗后两组患者肝功能指标均明显下降,试验组下降尤为明显(P<0．01);治疗后试验组血清TG、TC均明显下降(P<0．01),HDL-C明显上升(P<0．01),对照组仅TG下降明显(P<0．01);治疗后试验组HA、LN、PCⅢ下降,与对照组比较差异有显著性(P<0．05)。复方牛胎肝提取物联合二甲双胍是治疗非酒精性脂肪性肝炎的有效方法。     

蜂胶体外抗阴道毛滴虫实验

体外无菌培养的阴道毛滴虫加入蜂胶溶剂，观察不同作用时间、不同蜂胶浓度和蜂胶在不同滴虫密度下的杀虫效果。蜂胶作用0、6、12和24 h后，阴道毛滴虫存活率分别为（91.50±3.11）%、 （43.00±6.83）%、 （22.25±5.32）%和（11.50±5.74）%， 与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。蜂胶浓度分别为0.24、0.48、0.96、1.92、3.84和7.68 mg/ml作用24 h后，滴虫存活率分别为（88.00±5.29）%、 （92.67±4.16）%、 （90.0±6.00）%、 （84.00±4.00）%、 （2.67±1.15）%和0。蜂胶作用时间越长和/（或）蜂胶浓度越高，杀虫效果越明显。     

胸水中检出阴道毛滴虫1例

本文报道1例从胸水中检出阴道毛滴虫的病例。患者治疗不彻底,因心肺衰竭而死亡。