莪蚕健胃方调控HIF-1ɑ、VEGF表达对胃癌前病变的影响

目的:探讨莪蚕健胃方调控胃癌前病变大鼠HIF-1ɑ、VEGF蛋白及其mRNA对血管生成的影响。方法:60只Wistar雄鼠分为正常组5只,造模组55只。用MNNG、脱氧胆酸钠等刺激24周制作胃癌前病变模型。确认造模成功后,将造模组随机分为5组,包括模型组,维甲酸组、莪蚕健胃方(8.05g/kg组、16.10g/kg组、32.20g/kg组),每组10只,给药16周后处死取材。观察大鼠病理组织,进行MVD计数,以及HIF-1ɑ、VEGF蛋白和mRNA的检测。结果:与正常组比较,造模组的MVD值和HIF-1ɑ、VEGF蛋白和mRNA的表达均明显升高,且随异型增生程度加重而增强(两两比较P0.05)。HIF-1ɑ蛋白及mRNA、VEGF蛋白及mRNA与MVD的相关系数r依次为0.742,0.621,0.770,0.690,所有P0.01。在MVD值、HIF-1ɑ、VEGF二者蛋白和mRNA的表达方面:与模型组比较,除莪蚕健胃方8.05g/kg组差异无统计学意义外,其余治疗组均能明显降低其表达。与维甲酸组比较,莪蚕健胃方16.10g/kg组差异无统计学意义,32.20g/kg组的表达明显降低。结论:(1)胃癌前病变组织中血管生成活跃,MVD及HIF-1ɑ、VEGF的蛋白与mRNA呈现高表达,且随异型增生程度加重而增强。(2)胃癌前病变组织中HIF-1ɑ、VEGF的蛋白和mRNA与MVD呈正相关,提示二者参与了血管生成。且HIF-1ɑ与VEGF在蛋白水平上呈正相关,提示二者在蛋白层面与血管生成有协同作用。(3)莪蚕健胃方可抑制胃癌前病变的血管生成,可能是通过削弱HIF-1ɑ、VEGF基因的转录及表达而发挥治疗作用的。其作用与剂量有关。     

胃癌组织中COX-2、NF-κB及VEGF的表达及与血管生成的关系

目的观察胃癌组织中环氧合酶-2(COX-2)、细胞核因子-κB(NF-κB)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况及与胃癌患者临床病理特征和胃癌组织中肿瘤血管新生的关系。方法采用免疫组织化学法检测69例胃癌患者癌组织及其中40患者癌旁组织中COX-2、NF-κB、VEGF表达情况,分析各指标与患者临床病理特征的关系;另以抗CD34抗体标记组织标本中的微血管内皮细胞,计算并比较COX-2、NF-κB、VEGF不同表达情况的胃癌患者微血管密度(MVD)。结果 COX-2及VEGF主要表达于细胞质及细胞膜中,而NF-κB主要表达于细胞核及细胞质中,且胃癌组织中COX-2、NF-κB、VEGF阳性着色更为明显;不同性别、年龄、肿瘤大小的胃癌患者胃癌组织中COX-2、NF-κB、VEGF阳性表达率比较差异均无统计学意义(P均0.05);淋巴结转移者COX-2、NF-κB阳性表达率显著高于淋巴结未转移者(P均0.05),而VEGF阳性表达率差异无统计学意义(P0.05);胃癌组织中COX-2、NF-κB、VEGF阳性表达者MVD均显著高于阴性表达者(P均0.05),且三者均阳性表达者MVD显著高于三者中任意一个阴性表达者(P0.05)。结论胃癌组织中COX-2、NF-κB、VEGF阳性表达率显著高于癌旁组织,三者均可明显促进胃癌组织中肿瘤血管新生。     

血管内皮生长因子C和黏蛋白1的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的探讨胃癌中血管内皮生长因子C(VEGF-C)和黏蛋白1(MUC1)的表达与胃癌侵袭和淋巴结转移的关系。方法采用SP免疫组化技术,分别检测207例胃癌组织、癌旁组织、区域淋巴结及40例正常胃黏膜组织中VEGF-C及MUC1的表达水平。同时应用间接免疫荧光法检测VEGF-C和MUC1在正常胃黏膜细胞系(GES-1)、胃高分化腺癌细胞系(N87)、胃低分化腺癌细胞系(BGC-823)的表达和定位。结果 VEGF-C和MUC1在胃癌组织中的阳性表达率明显高于正常胃黏膜及癌旁组织;在区域淋巴结癌转移组中的阳性表达率明显高于无癌转移组(P<0.01);伴有淋巴结转移的胃癌组织中VEGF-C,MUC1的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组织(P均<0.01);VEGF-C及MUC1表达与淋巴结转移、浸润深度、TNM分期及分化程度有密切关系(P均<0.01),而与患者年龄、性别、肿瘤大小无关(P均>0.05)。VEGF-C及MUC1在正常胃黏膜细胞系、高分化胃癌细胞系、低分化胃癌细胞系的表达有显著性差异(P均<0.01)。结论 VEGF-C和MUC1的表达可作为评估胃癌患者转移与复发的一个观测指标。     

血小板反应蛋白-1在复发性流产患者绒毛膜组织中的表达及其价值探讨

目的探讨复发性流产(RSA)患者绒毛膜组织中血小板反应蛋白-1(TSP-1)的表达水平及临床意义。方法收集42例行早期人工流产的复发性流产患者记为观察组,选择同期35例既往分娩过足月正常胎儿、无不良生育史且自愿行人工流产产妇记为对照组,2组流产时分别留取绒毛、蜕膜组织并采用免疫组化SP法检测TSP-1表达水平,同时采用CD34标记血管内皮细胞检测绒毛、蜕膜组织中微血管密度(MVD)。结果 2组绒毛组织中TSP-1阳性区域灰度值均明显低于蜕膜组织(P均0.05),即绒毛组织中TSP-1表达量高于蜕膜组织,观察组绒毛组织中TSP-1灰度值明显低于对照组(P0.05),即RSA患者绒毛组织中TSP-1表达量高于对照组。观察组绒毛组织中MVD分别较对照组、本组蜕膜组织低(P均0.05),而对照组绒毛组织中MVD显著高于蜕膜组织(P0.05)。RSA患者绒毛、蜕膜组织中TSP-1灰度值与MVD均呈显著正相关(r=0.584,0.397,P均0.05),即绒毛、蜕膜组织中TSP-1表达量与MVD呈显著负相关。结论 RSA患者绒毛、蜕膜组织中TSP-1表达量异常升高,绒毛组织中MVD较蜕膜组织异常偏低,RSA患者绒毛膜组织中TSP-1的异常高表达可能是血管生成障碍、复发性流产的重要影响因素。     

Cyr61和CD105在胃癌中的表达及临床意义

目的检测CCN家族成员Cyr61和CD105标记的微血管密度(MVD)在胃癌组织中的表达情况,探讨Cyr61对胃癌血管形成的作用。方法应用免疫组织化学方法检测130例胃癌患者及50例正常人胃黏膜组织中Cyr61和CD105的表达情况,观察其临床意义及与CD105标记的血管密度的关系。结果胃癌组织中Cyr61蛋白表达的阳性率和MVD明显高于正常胃黏膜组织,二者的表达与胃癌的肿物大小、分化程度及淋巴结转移密切相关,胃癌组织中Cyr61和MVD呈正相关。结论 Cyr61在胃癌的发生、发展中具有重要作用,Cyr61可以促进CD105标记的血管新生,联合检测Cyr61和CD105的表达可能成为预测胃癌预后的重要指标。     

"胃肠安"对胃癌模型裸鼠肿瘤的抑制作用及其机理的初步研究

目的:研究中药"胃肠安"对胃癌模型裸鼠肿瘤生长、转移的抑制作用及其对瘤体VEGF和MVD表达的影响.方法:建立裸鼠原位移植人胃癌模型,将模型裸鼠随机分为中药组、西药组、对照组各8只,观察和比较各组裸鼠平均胃重和肿瘤转移情况,用免疫组化法比较各组裸鼠瘤体VEGF和MVD的表达.结果:所有荷瘤鼠胃壁上均有肿瘤生长,中药组、西药组和对照组的平均胃重分别为(1.77±0.78)g、(1.11±0.73)g、(2.57±0.53)g;中药组和西药组的脏器转移和远处淋巴结转移率均为28.57%,低于对照组的100%,有显著性差异.各组裸鼠瘤体VEGF表达的阳性率没有显著性差异;中药组裸鼠瘤体MVD表达低于对照组,有显著性差异.结论:胃肠安方可抑制胃癌生长、转移,其作用机制之一可能与其对胃癌血管生成的抑制有关.     

益气化瘀方对大鼠前列腺增生组织MMP-2/TIMP-2表达的影响

目的:观察益气化瘀方对大鼠前列腺增生组织血管新生和基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制物(TIMP-2)表达的影响。方法:50只SD大鼠去势7天后,皮下注射丙酸睾酮5mg.kg-1.d-1,同时给予益气化瘀方、非那雄胺混悬液灌胃,30天后股动脉放血处死大鼠,摘取前列腺,测量前列腺体积,计算前列腺指数(PI),检测前列腺微血管密度(MVD)和前列腺组织中MMP-2及其抑制物(TIMP-2)表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠前列腺指数明显增大(P<0.01),前列腺组织MVD明显增高(P<0.01),MMP-2蛋白表达显著增高(P<0.01),MMP-2/TIMP-2比值明显增大(P<0.05);各给药组前列腺前列腺指数、MVD、MMP-2表达、MMP-2/TIMP-2比值均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);益气化瘀方中、高剂量组大鼠前列腺指数、MMP-2表达量、MMP-2/TIMP-2比值与非那雄胺组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但前列腺组织MVD明显低于非那雄胺组(P<0.05)。结论:中药益气化瘀方具有抗前列腺组织增生作用,其机制可能与抑制MMP-2过度表达,进而抑制前列腺增生组织新生血管形成有关。     

固本消瘤胶囊抑制小鼠Lewis肺癌生长及抗血管生成研究

目的 :探讨中药固本消瘤胶囊对小鼠Lewis肺癌抑瘤作用及机制。方法 :体内动物实验观察小鼠肿瘤生长 ;免疫组化染色S P法、病理彩色图像定量分析法检测小鼠肿瘤组织中微血管密度 (MVD)、血管内皮生长因子 (VEGF)表达。结果 :中药组、化疗组、中药加化疗组对小鼠Lewis肺癌抑制率分别为为 4 0 5 %、5 2 6 9%、6 1 0 9% ,与对照组比较有显著差异 (P <0 0 1)。中药组、中药加化疗组MVD、VEGF表达水平以及化疗组MVD水平明显下降。结论 :固本消瘤胶囊对小鼠Lewis肺癌有明显抑制作用 ,能够抗肿瘤新生血管生成     

益气活血化瘀中药对大鼠前列腺增生组织血管新生及bFGF表达的影响

目的:观察益气活血化瘀中药对大鼠前列腺增生组织血管新生及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法:50只SD大鼠去势7d后,皮下注射丙酸睾酮5mg.kg-1.d-1,同时给予益气活血化瘀方、泽桂癃爽混悬液灌胃,30d后股动脉放血处死大鼠,摘取前列腺,测量前列腺体积、计算前列腺指数(PI)、检测前列腺微血管密度(MVD)和前列腺组织中bFGF蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠前列腺体积、指数均明显增大(P<0.01),前列腺组织MVD明显增高(P<0.01),bFGF蛋白表达显著增高(P<0.01);各给药组前列腺体积、前列腺指数、MVD、bFGF蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);益气化瘀中、高剂量组前列腺体积、前列腺指数、MVD、bFGF蛋白表达均明显低于泽桂癃爽组(P<0.05)。结论:益气活血化瘀中药抗前列腺增生的作用机制与其抑制bFGF过度表达,进而抑制前列腺增生组织新生血管形成有关。     

原发性肝细胞癌血管内皮生长因子与微血管密度的免疫组化研究

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)、微血管密度 (MVD)与原发性肝细胞癌 (PHCC)发展的关系。方法 :应用免疫组织化学技术检测 42例PHCC组织及 10例癌旁组织中VEGF的表达和MVD。结果 :42例PHCC组织中 2 3例 (5 4.8% )VEGF阳性表达 ,MVD均值为 15 3 .7± 5 6.0 ,显著高于癌旁组织。VEGF表达阳性组MVD明显高于阴性组 (P <0 .0 5 )。VEGF ,MVD与淋巴结转移、门静脉癌栓形成、包膜完整性和患者生存期长短密切相关 (P <0 .0 1) ,而与癌结节多少和患者HBsAg是否阳性无关。结论 :PHCC组织中VEGF ,MVD与其浸润、转移及预后有关 ,可作为监测PHCC预后的重要指标     

黄连素对多囊卵巢综合征大鼠卵巢血供的影响

目的：探讨黄连素对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠卵巢血供的影响。方法：30只大鼠随机分为模型组、实验组和阳性对照组,采用脱氢表雄酮（DHEA）皮下注射构建PCOS大鼠;另选10只仅皮下注射大豆油作为对照组,1次/d,连续注射20 d。实验组和阳性对照组分别灌胃黄连素（80 mg/kg）和罗格列酮（3 mg/kg）,模型组和对照组灌胃生理盐水（10 mL/kg）,1次/d,连续干预22 d。检测大鼠血清睾酮（T）和游离睾酮（FT）含量,苏木精-伊红（HE）染色观察大鼠卵巢组织形态及微血管密度（MVD）,原位杂交法与免疫组化法分别检测大鼠卵巢组织血管内皮生长因子（VEGF）mRNA水平与甾体类生成快速调节蛋白（StAR）蛋白表达。结果：模型组大鼠卵巢组织MVD、VEGF mRNA表达及StAR蛋白相对表达量较对照组升高,实验组和阳性对照组较模型组降低,且实验组低于阳性对照组（P<0.05）。结论：黄连素可通过调控PCOS大鼠卵巢组织血供及血管生成而改善卵巢组织形态,同时可通过下调StAR蛋白表达改善高雄激素血症。     

启膈方对小鼠前胃癌转移相关因子的影响

目的观察启膈方对小鼠前胃癌移植瘤的上皮性钙黏附蛋白（E-Cad）、基质金属蛋白水解酶-2（MMP-2）、微血管密度（MVD）、血浆α颗粒膜蛋白（GMP-140）、血栓素B2（TXB2）的影响。方法小鼠前胃癌（FC）细胞接种在30只615小鼠右腋皮下,接种后随机分为启膈方组、氟尿嘧啶（5-FU）组、空白对照3组,每组各10只。接种后16 d摘除小鼠眼球取血,获得血浆备用,处死小鼠,剥离肿瘤组织。用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶（SP）法检测各组肿瘤组织E-Cad、MMP-2、MVD的表达,用放射免疫法检测各组小鼠血浆TXB2水平,用酶联免疫法检测小鼠血浆GMP-140水平。结果启膈方组E-cad的表达强于空白对照组、5-FU组（P〈0.01）,5-FU组E-cad的表达强于空白对照组（P〈0.05）。空白对照组MVD明显高于启膈方组（P〈0.01）和5-FU组（P〈0.05）,启膈方组低于5-FU组（P〈0.05）。启膈方组、5-FU组的MMP-2表达弱于空白对照组（P〈0.05）、5-FU组与启膈方组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。启膈方组、5-FU组的血浆GMP-140与TXB2含量均明显低于空白对照组,尤其是血浆GMP-140含量,启膈方组、5-FU组与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,启膈方组与5-FU组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。血浆TXB2水平,启膈方组低于5-FU组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论启膈方可通过提高E-Cad的表达,降低MMP-2的表达,降低MVD,降低小鼠血浆GMP-140、TXB2水平,起到抑制肿瘤转移的作用。     

胃癌中医证型与病灶组织中MMP-9、TIMP-2和HER-2表达的相关性分析

目的:研究胃癌组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织基质金属蛋白抑制剂2(TIMP-2)和人类表皮生长因子受体2(HER-2)蛋白表达水平及与中医证型的相关性。方法:以2012年1月至2015年12月就诊的124例胃癌患者为观察组,以同期就诊的50例慢性萎缩性胃炎患者为对照组,检测2组患者病灶组织中MMP-9、TIMP-2和HER-2蛋白表达阳性率,对观察组患者进行中医辨证分型,比较胃癌不同中医证型患者MMP-9、TIMP-2和HER-2蛋白表达水平。结果:脾胃虚寒型和肝胃不和型Ⅰ期+Ⅱ期的比例明显高于Ⅲ期+Ⅳ期(P0.05),痰湿凝结型、瘀毒内阻型和气血双亏型Ⅲ期+Ⅳ期的比例明显高于Ⅰ期+Ⅱ期(P0.05),胃热伤阴型Ⅰ期+Ⅱ期的比例和Ⅲ期+Ⅳ期相比无明显差异(P0.05);观察组MMP-9、TIMP-2、HER-2的阳性表达率分别为67.74%、69.35%、71.43%,明显高于对照组的4.00%、6.00%、0.00%(P0.05)。结论:胃癌各类中医证型中MMP-9、TIMP-2和HER-2蛋白阳性表达率均明显高于慢性萎缩性胃炎患者,且实证患者MMP-9、TIMP-2和HER-2蛋白阳性表达率较高,虚证患者则较低,即胃癌患者的不同中医证型可能处在不同的病变发展阶段,可以在一定程度上反映胃癌的严重程度及预后情况。     

胃癌组织中Hpa、bFGF及FGFR-2表达水平的研究

目的探讨胃癌组织中Hpa、bFGF及FGFR-2表达水平与胃癌发生、发展的关系。方法对55例胃癌、癌旁组织及正常胃组织应用免疫组化方法检测Hpa、bFGF及FGFR-2的表达水平并进行分析。结果对照组的bFGF、FGFR-2表达低于其余2组(P均<0.05);Hpa在胃癌组表达显著高于其他2组(P<0.01);bFGF、FGFR-2及Hpa的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关(P均<0.01)。结论bFGF、FGFR-2及Hpa可能在胃癌的浸润和转移中起重要作用,可作为胃癌生物学行为的重要指标。     

电针大鼠“四白”穴和胃扩张传入信息在孤束核的汇聚——c-fos表达的研究

目的:探讨电针足阳明经“四白”穴和胃扩张刺激诱导大鼠孤束核(NTS)的原癌基因c -fos表达及意义。方法:将SD大鼠随机分为4组:电针“四白”穴组、电针“四白”穴旁开0 .5cm组、胃扩张模型组和空白对照组。采用免疫组织化学方法观察c- fos在孤束核的表达。结果:电针“四白”穴组和胃扩张模型组孤束核内Fos样免疫反应(FLI)阳性神经元均主要分布于内侧亚核,以延髓的中尾段分布较多;电针“四白”穴组在内侧亚核内FLI神经元数目与胃扩张模型组比较无明显差异(P >0 .0 5 ) ,与“四白”穴旁开组比较,差异有非常显著性意义(P <0 .0 1 )。结论:电针“四白”穴和胃扩张刺激的感觉传入可能在孤束核发生汇聚、整合,是针刺“四白”穴调节胃功能的中枢途径之一。     

MMP-9、Survivin、COX-2在胃癌组织中的表达及相关性

目的探讨胃癌组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、凋亡抑制蛋白（Survivin）、环氧合酶-2（COX-2）的表达及其相关性。方法采用免疫组化S-P法,分别检测58例人胃癌手术标本及正常胃黏膜中MMP-9、Survivin、COX-2的阳性率。结果在胃癌组织中MMP-9、Survivin、COX-2阳性率分别为68.9%、79.31%、82.76%,均高于正常胃粘膜（P〈0.01）。MMP-9、Survivin、COX-2的表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0.05）,而与胃癌的性别、年龄、部位及大小无相关性（P＆gt;0.05）,MMP-9又与胃癌分化程度相关（P〈0.05）。三者在胃癌中表达有相关性（P〈0.05）。结论MMP-9、Survivin、COX-2共同促进肿瘤的发生、侵袭和转移,可作为反映胃癌生物学行为的指标。     

胃癌多层螺旋CT灌注成像及灌注参数与肿瘤因子的关联研究

目的研究多层螺旋CT灌注成像(MSCTPI)参数对胃癌的诊断价值,以及与肿瘤标志物之间的关联性。方法比较胃癌组与正常组的灌注参数,包括血流量(BF)、血容量(BV)、平均通过时间(MTF)、表面通透性(PS);采用Pearson相关分析方法分析灌注参数值与肿瘤标志物的关系,曲线(ROC)评估BV、BF、MTF、PS对胃癌的诊断效度。结果胃癌PS值明显高于对照组(P0.05);2组间BF差异有统计学意义(P0.05),而BV、MTT差异无统计学意义。Pearson相关分析显示PS与AFP、CEA、CA199、CA72-4均有显著相关性(r=0.58,0.40,0.38,0.77),BV、BF、MTT与CEA、AFP、CA199、CA72-4之间无明显相关性。应用ROC曲线分析BV、BF、MTT、PS对胃癌的诊断鉴别能力,其曲线下面积分别为0.62,0.64,0.50,0.83。当以PS18.85 mL/(min·100 g),作为强烈提示胃癌组织的可能性时,其敏感度和特异度分别为0.87和0.32。结论 MSCT灌注成像反映了胃肿瘤组织供血的情况,PS评估胃癌的效度最高,PS=17.98 mL/(min·100 mg)可作为判断正常胃壁与胃癌的阈值。部分灌注参数与肿瘤标志物间有相关性。     

温郁金对人胃癌裸鼠原位移植瘤中MVD表达的影响

目的：通过建立人胃癌裸鼠原位称植瘤模型,研究温郁金对人胃癌裸鼠原位移植瘤生长转移的抑制作用及对MVD表达的影响。方法：BALB/c裸小鼠12只,以荷SGC-7901人胃癌细胞株裸鼠皮下移植瘤为材料,通过手术将癌组织转移到裸小鼠胃壁建立胃癌原位称植模型;原位移植24h后开始灌胃。当动物出现明显消瘦、弓背、神萎等衰竭征象（约9周）时处死动物,观察和比较两组肿瘤抑制率和肿瘤转移情况。用免疫组织化法检测两组移植瘤瘤体中MVD的表达。结果：所有荷瘤鼠胃壁均有肿瘤生长,治疗组瘤重明显低于对照组,P〈0.01,抑瘤率为42%;模型组腹膜转移6/6、肝脏转移5/6、腹水1/6,治疗组腹膜转移2/6、肝脏转移1/6、腹水0/6,其中腹膜及肝脏转移情况差异具有统计学意义（P〈0.05）。温郁金治疗组瘤体中MVD的表达明显下调。结论：温郁金可能通过减少瘤体内MVD抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移。