碳酸酐酶Ⅸ在直肠癌中的表达及其与血管内皮生长因子和肝转移关系

目的 检测缺氧标记物碳酸酐酶Ⅸ(CA-Ⅸ)在128例直肠癌不同部位组织中的表达,探讨它与直肠癌肝转移及与血管内皮生长因子(VEGF)的关系,了解其对直肠癌细胞体外生长能力的影响.方法 以CA-Ⅸ和VEGF为研究对象,应用蛋白免疫印迹方法检测两者在正常直肠组织,直肠腺瘤,直肠癌患者原发癌灶、系膜组织、肝转移组织中的差异性表达,判断它们作为直肠癌和直肠癌转移相关因子的意义.观察CA广谱抑制剂乙酰唑胺对体外直肠癌细胞生长能力的影响.结果有肝转移的直肠癌患者原发灶中VEGF和CA-Ⅸ阳性率均为83.3%,高于正常直肠组织(16.7%和0%)、直肠腺瘤(16.7%和36.7%)和无肝转移直肠原发癌灶(72.1%和65.4%)(P<0.01),肝转移直肠癌患者系膜组织中VEGF和CA-Ⅸ阳性率也高于无肝转移患者,但差异无统计学意义(P>0.05),VEGF与CA-Ⅸ表达和肝转移发生无明显相关.乙酰唑胺能提高不同浓度5-氟尿嘧啶(5-Fu)体外对直肠癌细胞的杀伤能力(P<0.05).结论 CA-Ⅸ在直肠癌组织中高表达,对直肠癌细胞生长增殖有促进作用,但不宜作为诊断肝转移的独立因子.     

直肠癌中碳酸酐酶Ⅸ表达的临床意义

目的 探讨缺氧标记物碳酸酐酶Ⅸ(carbonic anhydrases-Ⅸ,CA-Ⅸ)作为直肠癌肿瘤标记物和转移相关蛋白的意义.方法 应用蛋白免疫印迹(Western-blot)方法检测CA-Ⅸ在正常直肠组织,直肠腺瘤,原发直肠癌灶、系膜组织、肝转移组织中的差异性表达,与血管内皮生长因子(VEGF)比较,判断CA-Ⅸ作...     

碳酸酐酶Ⅸ与血管内皮生长因子在直肠癌组织中表达及其临床意义

目的 探讨直肠癌组织中碳酸酐酶Ⅸ(CA-Ⅸ)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及与临床病理的关系.方法 应用蛋白免疫印迹方法 (Western blot)检测104例直肠癌、30例正常直肠组织、30例直肠腺瘤中CA-Ⅸ和VEGF的表达.结果 直肠癌组织中CA-Ⅸ和VEGF阳性表达率分别为72.1%和65.4%,高于正常直肠组织和腺瘤组织(P<0.05).CA-Ⅸ的表达与Dukes'分期及淋巴结转移相关,Dukes'分期A至C期CA-Ⅸ阳性率下降(P<0.05),淋巴结转移组CA-Ⅸ阳性率低于无淋巴结转移组(P<0.05).直肠癌组织和系膜组织VEGF的表达与淋巴结转移关系密切,N2组VEGF阳性表达率分别为81.3%和75.0%,高于NO组的53.7%和25.9%(P<0.05).CA-Ⅸ和癌组织和系膜组织的VEGF的表达无明显相关(r=0.092和r=-0.292).结论 CA-Ⅸ和VEGF表达与直肠癌发生、发展和浸润转移有关,但两者作用机制不同.     

结直肠腺瘤—腺癌组织微阵列制作及上皮钙黏附素和β—链接素的检测

目的 建立结直肠癌组织微阵列,探讨上皮钙黏附素和β－链接素的表达在结直肠癌发生、发展过程中的作用。方法 应用微阵列制作机制作结直肠正常黏膜－腺瘤－腺癌微阵列,用免疫组织化学法检测组织微阵列22例结直肠腺瘤和结直肠癌63例中上皮钙黏附素和β－链接素的表达。结果 制作了85例患的结直肠腺瘤－腺癌组织微阵列;原发各层腺癌组织及其转移灶中出现不同程度的β－链接素核阳性表达,与正常黏膜相比（远处转移灶除外）,β－链接素细胞核内表达增加,差异有显性意义（P＜0．01）;上皮钙黏附素和β－链接素膜表达在结直肠癌的发生、发展过程中呈下降趋势,肌层内癌、浆膜层内癌和淋巴结转移癌灶与正常黏膜、腺瘤及黏膜、黏膜下癌相比,β－链接素膜表达减少（P＜0．01）,差异有显性意义;正常黏膜与各癌灶,淋巴结转移灶与原发各层癌组织之间上皮钙黏附素的膜表达差异有显性意义（P＜0．05）。结论 结直肠腺瘤－腺癌组织微阵列的建立使得结直肠癌相关基因或蛋白的筛选工作快捷、简便,黏附分子上皮钙黏附素和β－链接素的表达水平及表达部位异常与结直肠癌的发生、浸润转移有密切的关系。     

GPAA1在结直肠癌中表达增强及其意义

目的 通过检测GPAA1在结直肠癌组织中的表达以探讨其与结直肠癌增殖、侵袭、转移的关系.方法 取新鲜结直肠癌原发灶组织(52例)、正常结直肠黏膜(52例)和肝转移灶组织标本(11例)分别行免疫组织化学检测;实时定量PCR检测每个组织样本中GPAA1基因表达水平;高表达GPAA1 mRNA结直肠癌组织和低表达GPAA1 mRNA结直肠癌组织行原代细胞培养,将培养获得的原代细胞进行Boyden小室体外增殖、侵袭实验.结果 52例结直肠癌患者标本经免疫组织化学检测,GPAA1在结直肠正常肠黏膜、癌原发灶、肝转移灶中的表达阳性率分别为21.15% ( 11/52)、55.76% (29 /52)、和72.73% ( 8/11).GPAA1在结直肠癌原发灶、肝转移灶中表达阳性率均高于正常肠黏膜组织(P＜0.01).通过实时定量PCR检测发现GPAA1 mRNA表达水平在结直肠癌原发灶、肝转移灶中均高于结直肠正常肠黏膜(P＜0.01);在肝转移灶中的GPAA1 mRNA水平高于癌原发灶(P＜0.05);高表达GPAA1 mRNA的原代细胞穿透Matrigel微孔滤膜细胞数明显高于低表达GPAA1 mRNA组.结直肠癌组织中GPAA1 mRNA的表达水平与组织分化程度相关,而与年龄、性别及Dukes分期无明显相关,(P<0.05).结论 GPAA1表达增强与结直肠癌的发生、侵袭、转移有密切关系.     

Claudin-5和claudin-10在结直肠癌中的表达及其意义

目的 研究claudin-5和claudin-10在结直肠癌中的表达及其意义.方法 应用免疫组化sP法(streptavidin perdcidase)检测经病理证实的50例正常结直肠黏膜(正常组),25例结直肠腺瘤(腺瘤组),25例无淋巴结转移及25例伴淋巴结转移的结直肠癌(癌组)中claudin-5和claudin-10的表达.统计学方法采用X~2检验.结果 claudin-5阳性表达率在正常组,腺瘤组,癌组分别为82%,76%,68%,方差分析提示多组间差异无统计学意义(X~2=2.638,P＞0.05).claudin-5的表达与淋巴结转移有关(P＜0.05),与性别,年龄,肿瘤部位,分化程度,肿瘤直径,浸润深度无关(P＞0.05).claudin-10阳性表达率在正常组,腺瘤组,癌组分别为54%,56%,72%,方差分析提示多组间差异无统计学意义(X~2=3.839,P＞0.05).clandin-10的表达与肿瘤直径,浸润深度,淋巴结转移有关(P＜0.05),与性别,年龄,肿瘤部位,分化程度无关(P＞0.05).结直肠癌中claudin-5与claudin-10的表达无相关性(r=0.050,P=0.732).结论 claudin-5和claudin-10在正常结直肠黏膜,结直肠腺瘤,结直肠癌中均有表达,它们与结直肠癌的发生无关.claudin-5和claudin-10均与结直肠癌淋巴结转移相关,claudin-10还与肿瘤直径,浸润深度相关.结直肠癌中claudin-5与claudin-10的表达无明显相关.     

CXC趋化因子受体5及其配体CXCL13在结直肠癌中的表达及意义

目的 观察CXC趋化因子受体-5(CXCR5)及其特异性配体CXCL13在结直肠癌组织中的表达,探讨其与临床病理特征、预后的关系.方法 用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测25对结直肠癌及13例结直肠腺瘤冰冻新鲜标本中CXCR5及CXCL13 mRNA的表达,应用免疫组织化学法(IHC)检测153例结直肠癌及相对应的癌旁组织、62例结直肠腺瘤标本中CXCR5及CXCL13蛋白的表达,分析其与临床病理特征、术后生存率的关系.结果 CXCR5及CXCL13mRNA及蛋白表达在结直肠癌组织中的表达率均高于癌旁组织及结直肠腺瘤组织(P均＜0.05).CXCR5与CXCL13的mRNA及蛋白表达呈正相关(PCR:r =0.681,P＜0.01;IHC:r =0.196,P＜0.05).CXCR5-CXCL13蛋白表达与肿瘤的淋巴结转移、远处转移、肿瘤分期及复发相关;在有淋巴结转移、有远处转移、中晚期患者及出现复发的患者中阳性率都明显较高(P＜0.05).此外,CXCL13阳性表达与结直肠癌的组织分化程度相关,分化越差组阳性率越高(P＜0.05).CXCR5-CXCL13表达与其他临床病理特征无关(P＞0.05).CXCR5及CXCL13阳性表达患者的5年复发率和5年生存率明显差于其阴性表达的患者(5年复发率:CXCR5:48.6％比14.8％,CXCL13:41.5％比22.7％;5年生存率:CXCR5:55.6％比91.4％,CXCL13:61.5％比84.1％)(P＜0.05);CXCR5及CXCL13阳性表达患者的中位复发时间和中位生存时间明显短于其阴性表达的患者[中位复发时间:CXCR5 (13.0±1.3)个月比(45.0±7.8)个月,CXCL13(13.0±1.3)个月比(29.0±11.2)个月;中位生存时间:CXCR5(17.0±1.1)个月比(55.0±14.4)个月,CXCL13(17.0±1.9)个月比(25.0±11.2)个月](P＜0.05).结论 CXCR5及CXCL13在结直肠癌的发生、发展和转移、复发中可能起着重要的作用,可作为预测结直肠癌转移和复发的有价值指标.     

分化抑制因子2和表皮生长因子受体及人类表皮生长因子受体2在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的 研究分化抑制因子2(Id2)、表皮生长因子受体(EGFR)及人类表皮生长因子受体2(Her-2)在结直肠癌中的表达以及与患者预后的关系.方法 采用PV6000二步法检测359例结直肠癌及35例癌旁正常组织中Id2、EGFR及Her-2的表达.结果 (1)结直肠癌组织中Id2的阳性率为68.0%,EGFR的阳性率为64.9%,二者在结直肠癌组织中的表达均显著高于癌旁正常组织中的表达(P值均＜0.05).Her-2在结直肠癌组织中的阳性率为1.7%,与癌旁正常组织中的阳性率相比差异无统计学意义(P=0.441).(2)Id2的阳性表达与患者的TNM分期、组织学分级、肿瘤组织的肠壁浸润深度、淋巴结转移情况以及腹腔和远处转移情况等相关(P值均＜0.05).(3)Id2阳性表达组的无瘤生存时间较阴性表达组短(P=0.002),阳性表达组的5年生存率低于阴性组(P=0.001).结论 Id2可能在结直肠癌的发生、发展及转移中发挥重要作用,可以作为评价结直肠肿瘤生物学行为及判断预后的指标之一.     

结直肠腺瘤及腺癌中P73表达与VEGF的关系

目的:探讨结直肠腺瘤和腺癌组织中P73的表达及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的关系.方法:采用免疫组化(SP法),检测P73抗体与VEGF蛋白的表达.结果:结直肠腺瘤中18例P73表达有17例(94.4%)阳性反应,与结直肠腺癌组间无显著性差异(P＞0.05),而与癌旁正常组织间存显著性差异(P＜0.01);同一标本中,癌组织中P73的染色强度均大于其癌旁组织(P＜0.01).腺癌各组VEGF阳性表达率高于腺瘤(P＜0.01), 整个腺癌组VEGF阳性表达率显著高于腺瘤组(84.1%∶33.3%,χ2=3.911,P＜0.05).结论:结直肠腺瘤及腺癌中P73与VEGF有显著的相关性, 加强术前检测P73,对高表达的患者有助于结直肠腺瘤癌变或腺癌早期诊断,及指导术后治疗.     

CDX2及CK20在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的 探讨人结直肠癌组织中尾型同源盒转录因子2(CDX2)和细胞角蛋白20(CK20)的表达与其临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化学Envision法检测65例结直肠癌和30例PPH手术切除的正常直肠黏膜组织中CDX2和CK20的表达水平.结果 CDX2和CK20在结直肠癌组织中表达的阳性率分别为58.5％和93.8％,在正常直肠黏膜组织中表达的阳性率分别为96.7％和46.7％,差异有统计学意义(P＜0.05).结直肠癌组织中CDX 2的低表达和CK20的高表达与淋巴结转移、分化程度、TNM分期有关,CDX2的低表达还与浸润深度有关,CK20的高表达还与远处转移及肿瘤大小有关.结直肠癌组织中CDX2和CK20的阳性表达呈负相关(r＝-0.196,P＜0.05).结论 CDX2和CK20在结直肠癌的发生、发展、转移中起着重要作用,联合检测是判断结直肠癌恶性程度和预后的有效指标.     

ID-1在直肠癌中的表达及其与Ki-67和VEGF的关系

目的： 探讨ID-1在直肠癌组织中的表达及其与Ki-67和VEGF的关系和临床意义。方法：采用免疫组化法检测62例直肠癌组织中ID-1,Ki-67,VEGF的表达,分析三者的相互关系。结果： ID-1与Ki-67蛋白表达,ID-1与VEGF蛋白表达以及Ki-67与VEGF蛋白表达,两两之间均呈正相关关系（r=0.89,0.78,0.92,均P<0.05）;三者的高表达与肿瘤细胞的浸润程度有关。结论： ID-1,Ki-67和VEGF蛋白的高表达可能与直肠癌产生侵袭转移有关,其检测对临床治疗和预后判断可能有一定的应用价值。     

Carbonic anhydrase IX as a specific biomarker for clear cell renal cell carcinoma: comparative study of Western blot and immunohistochemistry and implications for diagnosis

Abstract Objective. This study aimed to evaluate the usefulness of carbonic anhydrase IX (CA-IX) expression in clear cell renal cell carcinoma (CCRCC) using two different techniques to detect protein expression. Material and methods. An experimental, cross-sectional, analytical study was conducted to analyse proteins in renal tumour and healthy tissue specimens from 38 consecutive patients who underwent nephrectomy for renal cancer. CA-IX protein expression was measured by immunohistochemistry and Western blot analysis and quantified. Statistical analysis was performed with the positive and negative specific agreements and kappa coefficient. The sensitivity and specificity of both techniques were assessed. Statistical tests were conducted to analyse the association between CA-IX expression quantitation and normal prognosis factors (TNM stage and Fuhrman nuclear grade), only in CCRCC. Results. The mean patient age was 65 years, 78.9% of patients were men and 57.9% of tumours were CCRCC. CA-IX protein expression was positive in 63.2% of tumours by immunohistochemistry and in 60.5% by Western blot. Both techniques detected CA-IX expression only in CCRCC and unclassifiable tumours. High concordance indices were observed for CCRCC diagnosis. Western blot and immunohistochemistry had a sensitivity of 95.5% and 100%, respectively; the specificity was 100% in both techniques. CA-IX expression quantitation did not correlate with tumour stage or Fuhrman nuclear grade. Conclusions. Immunochemistry and Western blot techniques can be used to detect abnormal CA-IX protein expression in CCRCC and to support morphology-based diagnostic techniques.     

Livin蛋白在中下段直肠癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨Livin蛋白表达与中下段直肠癌不同临床病理特征及预后的关系。方法：采用免疫组织化学Envision二步法检测Livin蛋白在180例中下段直肠癌组织及30例正常大肠组织中的表达,倩况。结果：Livin在中下段直肠癌组织中的表达明显高于正常大肠组织（53．33％VS6．67％,P〈O．05）;Livin蛋白表达与中下段直肠癌病理类型、T分期和淋巴结转移有关（P〈O．05）。经Cox回归模型多因素分析,Livin蛋白表达和淋巴结转移是影响中下段直肠癌患者生存预后的独立因素（P〈O．05）。结论：Livin蛋白表达在中下段直肠癌组织中表达增高,其与中下段直肠癌患者的预后有关。     

Cylin Y在直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨细胞周期蛋白Cyclin Y在直肠癌组织中的异常表达及其临床意义。方法收集2014年7月至2015年6月72例行直肠癌根治术的患者组织标本,采用免疫组织化学法检测Cyclin Y的表达情况,30例距肿瘤5 cm以上的直肠黏膜组织作为正常直肠黏膜作实验对照。统计方法采用SPSS 20.0统计软件处理,Cyclin Y蛋白表达率及其与各病理因素的关系采用卡方检验、Kruskal-Wallis检验等方法分析,以P0.05为差异具有统计学意义。结果 Cyclin Y蛋白在直肠癌细胞中的表达定位以细胞膜和胞质为主。Cyclin Y在直肠正常黏膜中表达阳性率为43.3%(13/30),在直肠癌组织中表达阳性率为80.5%(58/72),各组之间相比差异有统计学意义(P0.05)。Cyclin Y蛋白在直肠癌中的表达水平与患者的性别、年龄、家族史、肿瘤大小及浸润深度无关(P0.05),而与淋巴结转移、直肠癌病理分期有显著相关性(P0.05)。结论 Cyclin Y在直肠癌中存在过表达现象,可能在直肠癌发生发展过程中起重要的调节作用。     

直肠癌微淋巴管密度与podoplanin表达的关系

目的:探讨podoplanin在直肠癌组织中的表达及其在淋巴结转移的关系.方法:应用免疫组化法检测110例直肠癌组织中podoplanin的表达水平和微淋巴管密度(LMVD),并以90例良性病变直肠组织为对照.结果:podoplanin在直肠癌中的表达阳性率明显高于良性直肠组织(P＜0.01).podoplanin阳性LMVD在Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.01);有淋巴结转移者的LMVD明显高于无淋巴结转移者(P＜0.01).podoplanin的表达与直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤分化程度无关.结论:podoplanin在直肠癌淋巴管生成中起着重要的作用,可作为直肠癌诊断和判断预后的免疫组织化学标志物.     

microRNA-25高表达与直肠癌细胞的侵袭和迁移的关系

目的:探讨micro RNA-25(mi R-25)在直肠癌细胞中的表达及作用。方法:检测多种不同直肠癌细胞中mi R-25的表达,并检测直肠癌细胞转染mi R-25前体(pre-mi R-25)上调mi R-25的表达或转染mi R-25抑制剂(anti-mi R-25)下调mi R-25的表达后生物学行为的变化。结果:与正常直肠黏膜组织比较,不同的直肠癌细胞中mi R-25的表达均不同程度的明显升高(均P0.05)。在mi R-25表达水平相对较低的直肠癌HR-834细胞中转染pre-mi R-25,在mi R-25高表达的直肠癌SW-837细胞中转染anti-mi R-25后,两种细胞的增殖、细胞周期、凋亡无明改变(均P0.05),但侵袭及迁移能力在HR-834细胞的明显增强,SW-837细胞减弱(均P0.05)。结论:mi R-25在直肠癌细胞中的表达升高,且其升高程度与细胞的侵袭和迁移能力密切相关。     

术前辅助放疗对直肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的通过对直肠癌术前放射治疗的对比研究,观察放疗效果与直肠癌细胞增殖和凋亡关系。方法将80例pTNMⅡ期和Ⅲ期直肠癌患者分为2组,每组40例。对照组直接手术治疗,放疗组术前行40Gy放射治疗,放疗结束后1～2周手术。应用免疫组织化学法检测Ki-67表达,用TUNEL法检测细胞凋亡。结果放疗组术前有14例肿瘤显著缩小,18例部分缩小,8例轻微缩小;显效率35.0%,总有效率80.0%。放疗前癌组织的自发凋亡与Ki-67标记指数也有显著的正相关性(r=0.563,P=0.027);放疗后癌组织的Ki-67表达显著低于放疗前,也显著低于对照组(P=0.017和P=0.011);癌旁2cm正常黏膜Ki-67表达较对照组显著降低。放疗后癌细胞的凋亡指数显著高于放疗前,也显著高于对照组(P=0.013和P=0.018)。结论放疗主要通过抑制肿瘤细胞增殖和促进癌细胞凋亡产生治疗作用。Ki-67表达的高低可作为放疗的筛选指标。