中和剂及中和产物对戊二醛消毒剂灭菌试验结果的影响研究

摘要 目的 〖HT5"SS〗了解高浓度中和剂及中和产物对消毒剂灭菌试验结果的影响,为建立专门的消毒剂灭菌试验中和剂选择试验方法提供依据。方法 以TSB培养基为对照,用2%戊二醛和枯草杆菌黑色变种芽孢进行试验,观察含不同中和剂、中和产物的TSB培养基对正常菌和消毒后残存菌生长的情况。结果 所有配方中和剂及中和产物对正常菌生长无影响,但对残存菌有抑制作用,尤以含中和产物培养基明显。结论 消毒剂灭菌试验采用在定量方法鉴定合格的中和剂中加入TSB培养基粉末配制培养基,造成培养体系中和剂及其中和产物浓度过高,可能引起假阴性结果;消毒后残存菌的生长复苏能力大大弱于正常菌,应以消毒后残存菌进行消毒剂灭菌试验中和剂选择试验。     

中和剂选择试验中和产物组稀释液对结果的影响

试验表明，在中和剂选择试验中，中和产物组活菌计数用磷酸盐缓冲液作稀释液，可能掩盖中和产物的抑菌作用。改用中和产物溶液作稀释液，可避免上述结果。     

用载体定量法鉴定中和剂对低浓度消毒剂中和效果观察

目的研究载体定量法鉴定中和剂对低浓度消毒剂中和效果。方法采用载体定量杀菌试验程序鉴定中和剂对降低消毒剂试验浓度后的中和效果。结果用含5 g/L卵磷脂、20 g/L吐温80的磷酸盐缓冲液和含5 g/L亚硫酸钠、3 g/L卵磷脂、30 g/L吐温80的磷酸盐缓冲液,中和相对应的75%乙醇和20 g/L戊二醛消毒液,结果第1,2组全部无菌生长。用相同浓度的中和剂,可分别中和60%乙醇和16 g/L戊二醛消毒液,结果第1,2组长菌数符合规范要求。结论可用载体定量杀菌试验方法,对最低有效浓度的消毒剂进行中和剂鉴定试验。     

评价化学消毒剂对病毒灭活效果的中和剂选择试验

目的探讨五种化学消毒剂在灭活病毒试验中选择中和剂的试验。方法采用细胞感染法和噬斑计数法(Pfu)观察了消毒剂灭活病毒试验中所用中和剂的效果。两种病毒灭活试验中均以噬斑数计算中和剂、中和产物、稀释液三组间误差率。结果在流感病毒中和剂鉴定试验中,所有消毒剂试验组所得的误差率均小于15%;说明该方法选择的中和剂可用于该病毒灭活试验中残余物去除。在脊髓灰质炎病毒中和剂鉴定试验中,除邻苯二甲醛之外,另外4种消毒剂所得的三组间平均误差率均大于15%,说明该中和剂选择试验程序不适合所试验的消毒剂灭活脊髓灰质炎病毒试验。结论在消毒剂灭活病毒试验中,培养细胞对中和剂及其产物较试验病毒更为敏感,该中和剂对MDCK影响较对VERO的影响小。本试验方法可用于流感病毒灭活试验的中和剂鉴定试验。     

戊二醛对脊髓灰质炎病毒灭活效果及影响因素的实验观察

为了解戊二醛对脊髓灰质炎病毒的灭活效果及其影响因素,采用悬液定量灭活试验方法,对脊髓灰质炎病毒Ⅰ型疫苗株进行灭活试验。结果,以含3000 mg/L戊二醛消毒液对悬液内脊髓灰质炎病毒Ⅰ型疫苗株作用3m in,平均灭活对数值为4.11。随着温度的升高,戊二醛对脊髓灰质炎病毒的灭活效果逐渐增强;有机物对戊二醛灭活脊髓灰质炎病毒的效果基本无影响;碱性戊二醛对脊髓灰质炎病毒的灭活效果比酸性戊二醛强。结论,低浓度戊二醛即可有效灭活脊髓灰质炎病毒,其灭活效果受温度和pH值的影响。     

含氯消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活试验方法的研究

为研究含氯消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活试验方法 ,依照 2 0 0 2年版《消毒技术规范》规定的试验程序进行了实验室观察。结果 ,含有效氯 80 0mg/L的次氯酸钠、10mg/L的优氯净和 5 0mg/L二氧化氯对Vero细胞生存率无影响 ;用 0 .0 1mol/LPBS配制的 5g/L硫代硫酸钠中和剂对Vero细胞生存率无影响。用含 5g/L硫代硫酸钠中和剂对含有效氯 4 0 0mg/L的次氯酸钠设计的 6组中和剂鉴定试验 ,结果符合设计要求。用该方法检测证明 ,以含有效氯4 0 0mg/L次氯酸钠消毒剂 ,作用 30min ,对脊髓灰质炎病毒平均灭活对数值≥ 4 .0。试验发现 ,0 .0 3mol/L的PBS、卵磷脂以及吐温 80对Vero细胞生存率均有影响     

改进中和剂鉴定试验方法的研究

目的改进中和剂鉴定试验方法,以解决消毒剂标示使用浓度过高而造成判定困难的问题。方法采用悬液定量杀菌试验程序鉴定中和剂效果的方法,对改进后中和剂鉴定试验方法的效果进行了观察。结果按照产品标示浓度进行中和剂鉴定试验,第1、2组无菌生长,按照2002年版《消毒技术规范》规定,判定设计的中和剂对二氧化氯和碘伏消毒剂中和效果不合格。通过降低产品标示浓度和调整作用时间,按原程序进行中和剂鉴定试验,结果所有实验组生长菌数全部符合设计要求,判定中和剂有效。结论消毒产品标示浓度过高,需要对其试验浓度进行适当降低,以最低有效杀菌浓度进行中和剂鉴定试验,应更符合试验实际要求。     

复方中和剂对隐形眼镜护理液中和效果观察

目的观察复方中和剂对隐形眼镜护理液中和效果。方法采用悬液定量杀菌试验程序,对由硫代硫酸钠、卵磷脂、吐温组成的复方中和剂中和含有双胍类杀菌成分的隐形眼镜护理液的效果进行了检测。结果用含5g/L硫代硫酸钠、5 g/L卵磷脂、10 g/L吐温80组成的复方中和剂可有效中和含双胍类和表面活性剂的隐形眼镜护理液的残留作用,中和剂鉴定试验结果符合规范规定的技术指标。结论鉴定试验证明,该复方中和剂可用于含双胍类杀菌成分的隐形眼镜护理液杀菌试验。     

聚维酮碘对脊髓灰质炎病毒杀灭效果及影响因素的观察

为科学评价化学消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活效果及影响因素,以聚维酮碘为观察对象,采用悬液定量试验法进行了实验室观察。结果,在检测聚维酮碘对脊髓灰质炎病毒灭活效果评价试验中,去除残余消毒剂可采用中和稀释法,配制中和剂可用Hanks生理盐水或0.03 mol/L磷酸盐缓冲液;采用含5%新生牛血清的细胞维持液作稀释液,对Vero细胞贴壁生长基本无毒性作用。结果显示,以含有效碘1000 mg/L的聚维酮碘消毒剂,作用10m in,对悬液内脊髓灰质炎病毒灭活效果达到消毒合格要求;有机干扰物对聚维酮碘灭活病毒的效果有一定的影响。     

吐温80对硫代硫酸钠中和消毒剂效果的影响

进行了硫代硫酸钠加吐温８０中和金星消毒剂效果的试验。结果，吐温８０可使硫代硫酸钠对消毒剂的中和效果降低。     

低浓度戊二醛灭活伪狂犬病毒中和剂选择与灭活效果的研究

目的研究低浓度戊二醛对伪狂犬病毒的灭活效果。方法采用细胞感染法进行低浓度戊二醛中和剂选择试验和对伪狂犬病毒灭活效果的实验研究。结果经中和剂及中和产物处理的PK-15细胞,接种伪狂犬病毒后出现细胞病变;经中和剂及中和产物处理的伪狂犬病毒对细胞的感染滴度与对照组基本一致,所用中和剂及中和产物对细胞和病毒无影响。用含量3000mg/L碱性戊二醛消毒液作用30min,对悬液内伪狂犬病毒可达到完全灭活。结论低浓度戊二醛可有效灭活伪狂犬病毒。     

若干因素对戊二醛含量测定及稳定性影响的试验研究

为了解戊二醛配方中常用配伍成分对其含量测定和稳定性的影响,采用理化分析方法进行了实验室研究。结果,不加任何配伍成分的纯品戊二醛,其含量在18~25 g/L范围,用羟胺法测定误差范围在1.19%~2.24%。在含量为22.39 g/L戊二醛溶液中分别加入3.0 g/L与5.0 g/L亚硝酸钠,戊二醛溶液的pH值由3.93增加为4.84与5.00;戊二醛含量由22.39 g/L下降为22.26 g/L和22.01 g/L。在含量为21.88 g/L戊二醛溶液中分别加入1.0~3.0 g/L碳酸氢钠,其pH值由原来的3.93增加到7.37~7.80;戊二醛含量由原来的21.88 g/L下降到21.07~19.91 g/L。在含有碳酸氢钠和亚硝酸钠的戊二醛溶液中加入2.5 g/L脂肪醇聚氧乙烯醚,于室温下储存28 d,戊二醛下降率为3.70%;不加者下降率为5.67%。结论,用羟胺法测定戊二醛含量,随戊二醛溶液pH值变化,测定结果也会发生改变。戊二醛溶液中加入碳酸氢钠或亚硝酸钠,其戊二醛测定值下降。戊二醛溶液中加入脂肪醇聚氧乙烯醚,其稳定性有所加强。     

过氧化氢消毒液的中和剂筛选试验研究

目的研究市售过氧化氢消毒液杀菌试验中和剂,以确定有效的中和剂。方法采用悬液定量试验程序进行中和剂选择鉴定试验。结果用含10g/L硫代硫酸钠磷酸盐缓冲液作为中和剂,试验第4组无菌生长。用含10g/L硫代硫酸钠与10g/L吐温80的磷酸盐缓冲液组成中和剂和含10g/L硫代硫酸钠+10g/L吐温80+10g/L卵磷脂的磷酸盐缓冲液组成的中和剂,第3、4、5组的组间菌落数误差率达不到规范要求。只有用含20g/L硫代硫酸钠的磷酸盐缓冲液作为中和剂,可有效中和30g/L过氧化氢消毒液残留作用,且试验各组菌数均符合规范要求。结论市售过氧化氢消毒液杀菌试验中和剂选择比较复杂,试验证明用20g/L硫代硫酸钠溶液能完全中和30g/L过氧化氢消毒液。     

高浓度氯已定类消毒剂的中和剂筛选研究

目的观察三种中和剂对高浓度氯已定类消毒剂的中和作用,以筛选出可有效中和高浓度氯已定类消毒剂的中和剂配方。方法分别采用载体定量与悬液定量鉴定试验,对三种不同配方的中和剂中和高浓度氯已定类消毒剂效果进行评价。结果在载体定量鉴定试验中,使用中和剂A不能有效中和10 g/L葡萄糖氯已定醇对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的残留作用。在相同条件下,使用中和剂B和中和剂C均可以有效中和该葡萄糖氯已定醇溶液对试验菌的残留作用。在悬液定量鉴定试验中,使用中和剂A亦不能中和含量10g/L葡萄糖酸氯己定醇对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的残留作用。使用中和剂B只能中和该葡萄糖酸氯己定醇对白色念珠菌的残留作用,使用中和剂C均可中和10 g/L葡萄糖氯已定醇溶液对两种试验菌的残留作用。结论中和剂A和B作为常规氯己定中和剂不能有效中和葡萄糖酸氯己定醇,而中和剂C则可用于高浓度葡萄糖氯已定醇溶液杀菌试验。     

酸碱度对复方戊二醛理化性能及杀菌效果的影响

目的了解pH值对复方戊二醛消毒液理化性能和杀菌效果的影响。方法采用理化分析和悬液定量杀菌试验方法进行了实验室观察。结果复方消毒液中戊二醛含量测定值随pH值的升高而降低。戊二醛消毒液pH值为7.60时,对不锈钢、铜、铝、碳钢均基本无腐蚀性;pH值降到6.15时,同浓度戊二醛消毒液对碳钢和铝的腐蚀性增强,显示出轻度腐蚀。pH值在4.0~8.0范围,随着pH的升高,戊二醛消毒液对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭效果有明显提高。结论戊二醛消毒液pH值的变化对戊二醛含量测定值有明显干扰作用,偏酸性的戊二醛消毒液显示出对金属腐蚀性增加,戊二醛消毒液pH值在8.0以下对细菌芽孢的杀灭效果可随其升高而增强。     

中和剂鉴定试验方法评价

为解决中和剂鉴定试验中消毒剂使用浓度过高而造成判定困难的问题,通过对试验作用时间的控制,进行了中和效果的观察。结果,经过缩短第4组消毒剂与中和剂作用时间后即与细菌作用,只要细菌生长正常即可证明中和作用迅速且有效。改进后结果证明,以试验中和剂中和含有效碘5000 mg/L的碘伏消毒剂和含有效氯1250mg/L的84消毒液,第4组细菌生长正常,菌数与第3、第5组误差在允许范围内。结论,改进的中和剂鉴定试验结果符合设计要求。