丹参对全脑缺血后神经元PTEN表达的保护机制

目的:探讨丹参对大鼠全脑缺血再灌注后PTEN蛋白表达的影响及其神经保护机制。方法:实验于2005-03/10在解放军第三军医大学大坪医院外研所实验室进行。清洁级健康成年雄性SD大鼠90只,利用随机数字表将动物分为缺血再灌组18只;生理盐水组18只;丹参治疗组54只,丹参治疗组又分为3.0,10.0,15.0g/kg3个亚组,每组6只。①丹参治疗组和生理盐水组大鼠在缺血前30min腹腔分别注射丹参注射液(3.0,10.0,15.0g/kg)和生理盐水再进行4血管阻断建立全脑缺血模型;缺血再灌组模型建立同前,但不注射丹参和生理盐水。②缺血再灌注72h后取脑组织采用Westernblotting和免疫组织化学法检测各组海马PTEN蛋白的表达,细胞被染成棕黄色者为蛋白表达阳性细胞,计数400个细胞,按阳性细胞所占百分比进行比较;应用原位末端标记法和吖啶橙/溴乙啶技术检测各组海马神经元的凋亡,。结果:①大鼠海马PTENWesternblotting检测结果:缺血再灌注组与生理盐水组相比灰度值无明显差异(P>0.05);与生理盐水组相比丹参各治疗组PTEN表达量明显减少(F=68.73,P<0.05)。②大鼠海马PTEN免疫组织化学检测结果:缺血再灌注组PTEN阳性细胞与生理盐水组相比差异不显著(P>0.05);与生理盐水组相比,丹参各治疗组PTEN阳性细胞所占比例明显减少(F=185.44,P<0.05)。③各组细胞凋亡情况:与生理盐水组相比,丹参各治疗组吖啶橙/溴乙啶检测凋亡率下降显著(F=58.42,P<0.05)。原位末端标记法结果表明,经丹参治疗后各组凋亡细胞数量明显下降(F=32.68,P<0.05)。结论:丹参能下调PTEN的表达,抑制细胞的凋亡,从而达到神经元保护的目的。     

葛根素对大鼠脑复苏后海马CA1区神经细胞凋亡相关基因的影响

背景：Fan及P53是重要的促进凋亡的调控基因，属于肿瘤坏死因子／神经生长因子受体家族，其表达产物具有传递凋亡信号的作用，可调控脑缺血再灌注损伤时细胞的凋亡，而葛根素则能够减轻细胞的凋亡程度。 目的：观察葛根素对大鼠脑复苏后海马CA1区神经细胞凋亡相关基因Fas及P53的影响。 设计：随机对照实验。 单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科。 材料：实验于2001-09／2002-02在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成。选取清洁级3个月龄Wistar大鼠45只。随机分为假手术组、模型对照组、葛根素治疗组，15只／组。 方法：葛根素治疗组及模型对照组建立大鼠急性全脑缺血再灌注模型。假手术组只分离第一颈椎两侧翼小孔，但不电凝两侧椎动脉，只分离两侧颈总动脉，但不夹闭之。葛根素治疗组于缺血前1h给予葛根索注射液100mg／kg，模型对照组给予等量生理盐水，假手术组不给药。各组大鼠分别于脑缺血再灌注后3，6，12，24，48h即速处死，每次每组3只。分离海马组织，制备组织切片，利用免疫组化法、原位末端标记法检测各组大鼠脑缺血再灌注后不同时间点Fas及P53蛋白表达的水平及凋亡细胞数的变化。 主要观察指标：①各组脑缺血再灌注后不同时间点海马CA1区Fas及P53蛋白表达的阳性细胞数。②各组脑缺血再灌注后不同时间点海马CA1区凋亡细胞数的比较。 结果：实验纳入大鼠45只，全部进入结果分析。①各组脑缺血再灌注后不同时间点海马CA1区Fas蛋白表达的阳性细胞数：假手术组未见明显Fas基因表达。与模型对照组比较，葛根素治疗组于脑缺血再灌注后各时间点均明显降低：6，12，24，48h时差异显著[（15．0&;#177;4．3）。（13．5&;#177;4．9）；（40．7&;#177;3.4），（27．2&;#177;3．1）；（37&;#177;4．8），（22.0&;#177;2．1）；（24．7&;#177;4．1）。（18．9&;#177;5．3）个／mm；P〈0．05，P〈0．01]。②各组脑缺血再灌注后不同时间点海马CA1区P53蛋白表达的阳性细胞数：假手术组未见明显P53基因表达。与模型对照组比较，葛根索治疗组于脑缺血再灌注后24，48h均明显降低[（25．3&;#177;4．4），（12．8&;#177;2．7）；（24．3&;#177;3．6），（10．9&;#177;3．0）个／mm；P〈0．01]。④各组脑缺血再灌注后不同时间点海马CA1区凋亡细胞数的比较：与模型对照组比较，葛根素治疗组于脑缺血再灌注后12，24，48h均明显降低[（34．0&;#177;3．7），（21．0&;#177;3．7）；（41．0&;#177;4．2），（33．0&;#177;4．8）；（71．0&;#177;5.5），（41．0&;#177;3．4）个／mm；P〈0．01]。 结论：给予葛根紊治疗的大鼠缺血再灌注6-48h时Fas的表达显著降低，缺血再灌注24—48h时P53的表达亦明显减少，且凋亡细胞数也呈下降趋势，进一步证实葛根紊的脑保护作用，提示葛根素抑制脑复苏后的细胞凋亡可能与其减少促凋亡基因Fas及P53蛋白表达有关。     

氯化锂对沙土鼠前脑缺血后神经细胞凋亡及P53、核转录因子κB蛋白表达的影响

背景：氯化锂能抑制各种原因引起的神经细胞凋亡，其确切的脑保护作用较复杂。目的：观察氯化锂预处理后，短暂前脑缺血沙土鼠脑海马CAl区神经细胞凋亡及促凋亡基因P53、核转录因子κB蛋白表达的变化。设计：随机对照实验。单位：南京医科大学人体解剖学教研室。材料：实验于2003—10／2004—03在南京医科大学人体解剖学教研室实验室完成。选择清洁级雄性健康沙土鼠54只，体质量55-70g。方法：54只沙土鼠随机分为3组，假手术组、缺血再灌注组和氯化锂组，每组18只。各组又分别依假手术后或脑缺血再灌注后处死动物时间的不同分为1，3，7d组，每组6只。氯化锂组腹腔注射氯化锂3mEq／kg，1次／d，连续7d。缺血再灌注组、假手术组以生理盐水代替氯化锂。于第8天晨开始制作前脑缺血再灌注动物模型：沙土鼠经戊巴比妥钠麻醉后，应用微动脉夹同时夹闭双侧颈总动脉，夹闭5min，松开动脉夹恢复脑血流即为再灌注。假手术组仅游离双侧颈总动脉但不夹闭。各组沙土鼠于脑缺血再灌注后各规定时间点处死，于视交叉后1．7-4．0mm行冠状切块，切片，片厚4μm。测定凋亡细胞应用原位末端标记染色法，测定P53、核转录因子κB阳性细胞表达应用免疫组织化学染色法。计数单位面积（1mm^2）内凋亡细胞数及P53、核转录因子κB阳性细胞数。主要观察指标：脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及P53、核转录因子κB蛋白的表达。结果：54只沙土鼠全部进入结果分析。①脑海马CAl区凋亡细胞表达情况：缺血再灌注3d组显著高于氯化锂3d组[（552．0&;#177;145．5，142．4&;#177;103．5）个／mm^2，（t=5．623，P〈0．01）]。脑缺血再灌注7d组凋亡细胞有所减少，但仍显著高于氯化锂7d组[（408．0&;#177;119．8，156．0&;#177;108．2）个／mm^2，（t=8．242，P〈0．01）]。②脑海马CAl区P53阳性细胞表达情况：缺血再灌注1，3，7d组表达显著高于相应的假手术组和氯化锂组（F=37．668-89．545，P〈0．01）。③脑海马CAl区核转录因子κB阳性细胞表达情况：缺血再灌注1d，3d组表达均增高（78．5&;#177;25．2），（176．5&;#177;35．5）个／mm^2，再灌注7d组表达消失。氯化锂3d组显著低于缺血再灌注3d组[（64．5&;#177;30．8）个／mm^2，（t=5．824，P〈0．01）]。结论：氯化锂预处理能显著减轻沙土鼠短暂前脑缺血后海马CAl区神经元凋亡，下调促凋亡基因P53蛋白及核转录因子κB蛋白的表达可能是氯化锂产生脑保护作用的原因之一。     

电针刺复合丹参对缺血再灌注心肌的协同保护作用

背景：电针刺和丹参均具有防冶缺血再灌注损伤的作用，但当两者同用时是否可产生协同作用。目的：探讨电针刺和丹参对缺血再灌注后具有心肌保护作用的心肌细胞热休克蛋白70mRNA表达以及心肌损伤的标志多巴胺水平的影响，以及电针刺和丹参之间的相互作用。设计：两因素析因设计。单位：上海第二医科大学附属仁济医院麻醉科。材料：实验于2001-09／2002-12在仁济医院动物实验室进行。取康新西兰白兔24只，随机分为4组，每组6只：（!）缺血再灌注组。②电针组。③丹参组。④电针＋丹参组。方法：①缺血再灌注组：采用夹闭心脏冠状动脉前降支30min后松解2h制成缺血再灌注模型。②电针组：同前造模，在缺血前20min电针刺“内关”，“云门”，“列缺”，电压0．8V，频率3．0～4．0Hz。③丹参组：同前造模，缺血前静脉单次注射丹参1．5mg／kg，灌注前和灌注后分别单次注射丹参1．0ms／ks。④电针刺＋丹参组：同前造模，既电针又给药。在缺血前，缺血30min和再灌注2h分别取各组免静脉血测定血中多巴胺的含量；取缺血区和非缺血区心肌热休克蛋白70mRNA的表达通过反转录一聚合酶链反应方法测定。结果：经补充后24只兔进入结果分析。①心肌热休克蛋白70mRNA的表达：各组缺血再灌注后均较缺血前显著增加（P〈0．01），其他3组均高于缺血再灌注组（P〈0．05），电针＋丹参组高于电针组和丹参组（F=4．48，P〈0．05）。②多巴胺水平：各组缺血再灌注后均较缺血前显著升高（P〈0．01），其他3组缺血30min和再灌注2h时血中多巴胺水平显著低于缺血再灌注组（P〈0．05），电针＋丹参组低于电针组和丹参组（F=5．95，P〈0．05）。结论：①电针刺和丹参都能激发缺血再灌注后热休克蛋白70mRNA的表达，增强热休克蛋白70的蛋白稳定作用，减轻心肌损害。②电针刺和丹参能抑制缺血再灌注后体内多巴胺含量的增加，减少多巴胺介导的损伤，保护心肌。③电针刺和丹参之间有相互协同效应。     

实验性血管性痴呆小鼠中枢神经系统细胞凋亡与迟发性神经元坏死

目的：探讨实验性血管性痴呆小鼠中枢神经系统细胞凋亡与迟发性神经元坏死的关系。方法：实验于1998—01／1999—07在白求恩医科大学实验动物中心完成。选用6-7周龄雄性昆明小鼠40只，随机分为假手术组和缺血再灌流组；假手术组5只作为对照，缺血再灌流组根据再灌注提取标本的时间不同并分7组，即术后1h，1，3，7，14，28，42d组，每小组5只。制备动物模型，选用跳台，避暗反应等行为学检测确定。评价采用卒中指数评分和神经病学症状评分标准。制作病理切片，应用光镜，电镜，流式细胞仪，原位末端标记等方法检测神经细胞凋亡在不同时间缺血再灌注时与迟发性神经元坏死发生、发展关系。结果：在整个实验过程中无动物死亡，全部进入结果分析。①动物模型卒中指数及神经病学指数评价：缺血再灌注1d时卒中指数及神经病学指数与对照组比较差异显著（3．5&;#177;0．53，0，P〈0．05），（4．6&;#177;0．54，0，P〈0．05）。②各组病理形态学改变：重复缺血再灌注24h神经细胞问质水肿，核浓染固缩，顶树突延长。再灌注3d，皮质少量小胶质细胞增生，海马可见颗粒细胞变性呈空泡样。再灌注7d，皮质胶质细胞增生聚集成堆，海马CA1区锥体细胞变性，部分坏死。再灌注28d，皮质神经细胞大量缺失代之胶质细胞，海马CA1、CA4区锥体细胞大量缺失、变性、坏死。电镜观察可见细胞核基质肿胀，破坏。排列紊乱，并有空泡形成。粗面内质网扩张，小胶质细胞核染色质凝聚，可见变形。③额叶、海马区细胞凋亡变化：重复缺血再灌注3d流式细胞仪检测额叶皮质、海马神经细胞凋亡百分率最高。随再灌注时间的延长，海马神经细胞凋亡数逐渐下降至42d最低点。各不同时间点再灌注细胞凋亡数百分比与对照组比较差异显著性（P〈0．05）。原位末端标记法正常阳性对照组可见少量散在阳性细胞，缺血再灌注1h后原位末端标记法染色阳性细胞增多，3d后皮质、海马阳性细胞明显增多达高峰，核固缩，染色质聚集，一些细胞可见凋亡小体，阳性染色细胞核呈深棕色，缺血再灌注7d时皮质、海马区阳性细胞逐渐减少。至再灌注42d时阳性细胞数略有增多，但仍少于再灌注3d。电镜下受累神经细胞多单个存在，早期为染色质固缩，常聚集于核膜呈境界分明的颗粒、块状或新月形小体，细胞浆浓缩。核内细胞器和致密染色质保持完整。细胞周围无炎性细胞浸润。结论：脑缺血再灌注损伤全过程中均伴随着神经细胞凋亡，但细胞凋亡的高峰期在缺血再灌注后的两三天，随缺血再灌注时间延长，神经细胞坏死加重，凋亡数量减少。迟发性神经元死亡是通过细胞凋亡完成的，且细胞凋亡作为一种主要表现形式。     

低氧预适应对脑缺血-再灌注大鼠神经元凋亡及P53蛋白表达的影响

目的：探讨低氧预适应对局部缺血-再灌注大鼠脑的保护作用及其分子机制。方法：24只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注（I/R）组、低氧预适应（HP＋I／R）组。用线穿法建立大鼠局灶脑缺血-再灌注模型。脑缺血前12h将HP＋I／R组大鼠放在8％低氧舱中完成低氧预适应。分别用免疫组化、原位末端标记法检测P53的表达和神经元凋亡，并进行神经体征观察。结果：缺血3h再灌注24h后HP＋I／R组神经行为缺陷计分明显低于I／R组（P〈0．05）；HP＋I／R组凋亡细胞数明显少于I／R组（P〈0．05）；HP＋I/R组P53蛋白阳性细胞数明显低于I／R组（P〈0．05）。结论：低氧预适应可降低大鼠脑缺血再灌注后的神经功能缺陷和神经元凋亡。下调神经元中P53蛋白表达可能是低氧预适应脑保护作用的分子机制之一。     

参附注射液对再灌注期间肠黏膜上皮细胞凋亡的抑制

背景：肠上皮细胞异常凋亡是缺血再灌注期间肠黏膜损伤的主要原因，参附注射液对小肠黏膜损伤有良好的防治作用。目的：建立大鼠肠缺血再灌注模型，观察缺血再灌注时给予参附注射液对肠上皮细胞凋亡数目、凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2的表达及肿瘤坏死因子水平的影响。设计：随机对照实验。单位：武汉大学人民医院麻醉科。材料：实验于2002-12／2003-06在武汉大学人民医院麻醉科实验室完成。选取健康清洁级SD大鼠24只，随机分为空白对照组、肠缺血再灌注组、参附注射液组，8只／组。方法：各组大鼠给予氨基甲酸乙酯1mg／kg腹腔注射麻醉，肠缺血再灌注组和参附注射液组用血管钳夹闭肠系膜上动脉1h然后再灌注2h．空白对照组不用血管钳夹闭肠系膜上动脉。参附注射液组于阻断前30min静注参附注射液0．02mL／g，空白对照组和肠缺血再灌注组静脉输注等量生理盐水。制备切片进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2蛋白的表达及细胞凋亡检测。主要观察指标：①各组大鼠细胞凋亡指数的比较。②各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达。③各组肠粘膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较。结果：实验选用24只大鼠，全部进人结果分析。①各组大鼠细胞凋亡指数的比较：参附注射液组的凋亡指数明显低于肠缺血再灌注组．但比空白对照组高【（7．75&;#177;1．89）％，（28．25＋8．50）％，（4．25＋2．63）％．P均〈0．01]。（（2）各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达：参附注射液组组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达低于肠缺血再灌注组，但高于空白对照组[（0.2116&;#177;0．0875），（0．3547＋0．0778）．（0．1941&;#177;0.0574），P〈0．01，P〉0．051；Bcl-2的表达在肠缺血再灌注组比空白对照组显著增高（P〈0．05），参附注射液组的表达比肠缺血再灌注组明显降低（P〈0．01）。（2）各组肠黏膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较：肠缺血再灌注组肿瘤坏死因子的表达显著高于空白对照组和参附注射液组[（189．7＋56．3），（38．6＋10．4），（47．5&;#177;18．7）mg／L，P均〈0．011，参附注射液组和空白对照组基本相似（P〉0．05）。结论：参附注射液通过抑制肿瘤坏死因子的含量、降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达、上调Bcl-2基因而抑制缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡，从而减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。     

针刺预处理全脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡和热休克蛋白70mRNA的表达

目的：探讨针刺预处理对全脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡及热休克蛋白70mRNA表达的影响，并与缺血预处理的效果进行比较。方法：实验于2003—10在黑龙江中医药大学神经解剖实验室进行。取120只Wistar大鼠随机分为5组，每组24只：①正常对照组：不干预。②假手术组：暴露4条血管，不造模。③脑缺血组：四动脉阻断法全脑缺血10min制作大鼠全脑缺血模型。④脑缺血预处理组：预全脑缺血3min，再灌注24h后再次全脑缺血10min。⑤针刺预处理组：术前7d给予针刺，双侧足三里、曲池穴，双侧连接全能脉冲电疗仪，频率为1Hz，电压为2V，30min／次，针刺百会30min／次，1次／d，7d后全脑缺血10min。每组分别于再灌注12，24，48和72h麻醉状态下取材，采用原位缺口末端标记法检测大鼠脑海马CA1区凋亡细胞数，免疫组织化学法检测大鼠脑海马热休克蛋白70阳性细胞数，原位分子杂交技术检测大鼠脑海马热休克蛋白70mRNA表达。结果：经补充后120只大鼠进入结果分析。①脑海马CA1区凋亡细胞数：正常对照组和假手术组无；脑缺血组再灌注12h即可见，且随时间延长逐渐增多，72h仍具有较高水平[（55．87&;#177;10．68）个／mm^2]，而脑缺血预处理组和针刺预处理组各时间点均显著低于脑缺血组（P〈0．05），但两组间无差异（P〉0．05）。②脑海马热休克蛋白70阳性细胞数：正常对照组和假手术组无；脑缺血组少量表达，再灌注24h为高峰[（20．84&;#177;5．93）个／mm^2]，而脑缺血预处理组和针刺预处理组各时间点均显著高于脑缺血组（P〈0．05），但两组间无差异（P〉0．05）。③脑海马热休克蛋白70mRNA阳性细胞数：正常对照组和假手术组无；脑缺血组少量表达，再灌注48h为高峰[（19．44&;#177;5．55）个／mm^2]，而脑缺血预处理组和针刺预处理组各时间点均显著高于脑缺血组（P〈0．05），但两组间无差异（P〉0．05）。结论：针刺预处理的脑保护机制可能与抑制细胞凋亡及上调热休克蛋白70mRNA、热休克蛋白70表达水平有关，其效果与脑缺血预处理相似。     

碱性成纤维细胞生长因子对鼠缺血再灌注视网膜神经细胞凋亡及调控基因蛋白表达的干预

背景：碱性成纤维细胞生长因子是一种具有广泛神经活性的多肽生长因子，能保护神经元，促进神经生长。有证据证实碱性成纤维细胞生长因子可治疗视网膜缺血再灌注损伤。 目的：建立视网膜缺血再灌注损伤动物模型，分析碱性成纤维细胞生长因子对其视网膜细胞凋亡及调控基因蛋白表达的影响。 设计：随机分组，验证性实验。 单位：青岛大学医学院附属医院眼科。 材料：实验于2002-04／2003—12在青岛大学医学院眼科病理研究室完成。选择健康Wistar大鼠28只，随机取4只作为正常对照组，其余24只大鼠的左眼作为生理盐水对照组，右眼作为碱性成纤维细胞生长因子组。 方法：生理盐水对照组、碱性成纤维细胞生长因子组采用前房加压法制作大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型。生理盐水对照组从玻璃体腔注人生理盐水12μL，碱性成纤维细胞生长因子组从玻璃体腔注入碱性成纤维细胞生长因子12μL，4只／次。正常对照组不给药。分别于缺血1h再灌注1，6，12，24，48，72h6个时间点采用原位缺口末端标记、免疫组织化学染色检测凋亡细胞的表达，计算凋亡指数。 主要观察指标：①各组大鼠再灌注后不同时间点视网膜组织原位凋亡细胞检测结果。②各组大鼠再灌注后不同时间点视网膜组织中Fas、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2的表达。 结果：①缺血再灌注大鼠不同灌注时间下视网膜组织凋亡指数的比较：正常对照组大鼠视网膜中未见凋亡细胞。与生理盐水对照组比较，碱性成纤维细胞生长因子组于缺血1h再灌注1，6，12，24，48，72h6个时间点凋亡指数均明显降低，且再灌注12，24，48h时差异显著（t=5，362～5．595．P〈0．05）。②缺血再灌注大鼠不同灌注时间下Fas表达的变化：正常对照组大鼠视网膜中几乎无Fas表达。与生理盐水对照组比较，碱性成纤维细胞生长因子组于缺血1h再灌注1，6，12，24，48，72h6个时间点Fas表达均明显降低，且再灌注6，12，24h时差异显著（t=3．954～9．327．P〈0．05）。③缺血再灌注大鼠不同灌注时间下半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2表达的变化：正常对照组大鼠视网膜中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2蛋白不表达。与生理盐水对照组比较，碱性成纤维细胞生长因子组于缺血1h再灌注6，12，24，48，72h半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2表达均明显降低（t=4．125-15．641，P〈0．05）。 结论：碱性成纤维细胞生长因子可显著抑制凋亡基因Fas及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2在视网膜缺血再灌注损伤中的表达，从而减少神经节细胞凋亡，对视网膜缺血再灌注损伤起到治疗作用。     

乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡的影响

目的：观察乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注后导致的细胞凋亡的影响。方法：实验于2005—09／2006—05在华中科技大学协和医院麻醉学实验室完成。纳入SD大鼠81只，先以“随机数字表法”分为糖尿病组（链尿佐菌素55mg／kg腹腔注射诱导，45只大鼠诱导成功36只，成模率80％）和正常对照组（36只）。以穿线结扎左冠脉制备心肌缺血再灌注模型，两组大鼠再分别随机分为假手术组、缺血再灌注组和乙酰半胱氨酸治疗组，每组12只。乙酰半胱氨酸给药组：100mg／kg（用蒸馏水配成50g/L的溶液）灌胃，2次／d，连续1周，手术前1h再腹腔注射乙酰半胱氨酸150mg／kg；其他各组给予等量的蒸馏水。反转录-聚合酶链反应和免疫蛋白印迹分析法检测心肌半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA和蛋白的表达。原位末端标记法检测心肌凋亡细胞并计算凋亡指数。同时检测丙二醛含量和肌酸激酶同工酶活性。结果：去除诱导糖尿病模型失败的9只大鼠，最终有72只大鼠进入结果分析。①糖尿病与正常假手术组之间相比，丙二醛、肌酸激酶同工酶、凋亡指数、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA和蛋白的表达水平差异无显著性意义（P〉0．05）。（砻缺血再灌注后，糖尿病和正常乙酰半胱氨酸治疗组丙二醛、肌酸激酶同工酶、凋亡指数、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA和蛋白的表达水平均低于各自对应的缺血再灌注组（P〈0．01），高于各自假手术组（P〈0．01）。（固上述参数糖尿病缺血再灌注组高于正常缺血再灌注组（P〈0．01），糖尿病乙酰半胱氨酸干预组高于正常乙酰半胱氨酸干预组（P〈0．01）。结论：乙酰半胱氨酸可抑制缺血再灌注后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA和蛋白的表达，减少缺血再灌注引起的糖尿病和非糖尿病大鼠心肌细胞凋亡，对缺血再灌注心肌有保护作用，但糖尿病组的疗效低于正常组。