α、β和γ扰素对人白细胞介素2产生的作用

作者选择刀豆素A、葡萄球菌肠毒素A(SEA)及金黄色葡萄球菌(SAU,90℃,10分钟灭活)作为白细胞介素2(IL-2)的诱生剂,刺激人外周血单个核细胞(PBMC)产生IL-2。用小鼠IL-2依赖性细胞毒性T淋巴细胞(CTLL)及胸腺细胞增殖法检测IL-2活性。PBMC预处理的方法有两种:一种方法是以不同浓度的干扰素(IFN)在37℃下对PBMC预处     

奥沙利铂联合Exosome诱导的效应性T细胞抑制HepG2细胞增殖的研究

目的观察奥沙利铂(OXA)联合负载HepG2细胞裂解物的Exosome诱导的效应性T细胞对肝癌HepG2细胞系增殖的抑制作用。方法自健康人外周血中提取单个核细胞和T淋巴细胞,并以GM-CSF+IL-4的培养方案获得树突状细胞(DC)。将反复冻融后产生的HepG2细胞裂解物体外致敏DC,收集培养上清后以超高速离心法分离得到Exosome,电镜下观察其形态特征。用致敏DC及其分泌的Exosome刺激T淋巴细胞的增殖和活化。以ELISA试验检测不同刺激环境下T细胞分泌IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α的能力。以细胞杀伤实验(MTT法)检测不同因素刺激后的T细胞、OXA(2.5、5.0、10.0mg.L-1)以及两者联合应用对HepG2细胞生长的抑制效应。结果与未致敏DC及其分泌的Exosome相比,HepG2细胞冻融裂解物致敏的DC及其分泌的Exosome能显著促进T细胞的增殖,并使其活化和分泌大量的IL-1β、IL-2、IL-6、IFN-γ和TFN-α等Th1型细胞因子。活化后的T细胞、OXA以及两者联合应用对HepG2细胞体外增殖均有抑制作用,而活化T细胞联合10mg.L-1OXA对HepG2细胞的杀伤率最高,但与联合5 mg.L-1OXA的效应相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论负载肿瘤细胞抗原的DC所分泌的Exosome可在体外刺激T细胞,使其活化为具有抗肿瘤效应的细胞毒性T细胞,该细胞联合低浓度OXA能显著抑制肝癌细胞的体外增殖,并降低OXA的用量。     

赛尼哌

[通用名称] daclizumab,达昔单抗 [别名] 抗Tac单抗注射液 [理化性质] 抗Tac单抗瓶装成分为澄清或淡乳白色液体. [药理作用] 赛尼哌含有的抗Tac单抗是一种重组并人源化的IgGI抗Tac单抗,它特异性的作用于激活的T细胞上白介素-2(IL-2)受体的小亚单位,通过竞争性地与IL-2受体结合,阻断IL-2与IL-2受体结合所介导的T细胞增殖,从而发挥免疫抑制作用.主要通过以下途径发挥药理作用:①与活化T细胞表面IL-2受体α亚单位(Tac/CD25)结合,抑制IL-2诱导的T细胞增殖.②激活抗体-依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC).③可能使活化T细胞表面的IL-2受体表达下调.④对抗原激活的T细胞具有特异性,对淋巴细胞总数无影响.     

自然流产与T淋巴细胞及IL-2、IL-10的关系

目的 分析自然流产者外周血T淋巴细胞亚群(CD3 T、CD4 T、CD8 T细胞)及血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素10(IL-10)的水平变化,探讨其在自然流产发病中的作用.方法 应用免疫荧光标记技术和流式细胞仪检测42例自然流产患者外周血T淋巴细胞亚群,ELISA法定量检测血清IL-2、IL-10,化学发光法检测血孕酮水平,并进行相关分析,同时与健康早孕组比较.结果 (1)自然流产者外周血CD3 T、CD4 T、CD8 T细胞水平明显高于健康早孕组(P＜0.05).细胞因子IL-2水平在自然流产组较健康早孕组明显升高,而IL-10和孕酮水平明显下降.(2)孕酮水平与细胞因子IL-2及CD4 T淋巴细胞呈显著负相关(P＜0.05),与IL-10呈正相关(P＜0.05).结论 细胞免疫异常可能与孕酮的减少相关,并可能是导致自然流产的重要原因之一.     

西替利嗪抑制组胺诱导角质形成细胞IL-8表达

目的:考察西替利嗪对组胺诱导角质形成细胞系HaCaT细胞IL-8表达的影响。方法:采用RT-PCR方法研究组胺H1受体mRNA表达,组胺及西替利嗪对IL-8mRNA表达的调节作用,并用ELISA法对分泌的IL-8进行定量。结果:HaCaT细胞有组胺H1受体mRNA表达,(1×10-5)mol/L组胺刺激细胞5h,显著增强IL-8mRNA表达;(1×10-6)-(1×10-4)mol/L组胺作用细胞24h则显著地诱导了IL-8产生;1×10-6、1×10-5mol/L西替利嗪抑制了组胺的诱导作用。结论:西替利嗪可通过抑制组胺诱导HaCaT细胞IL-8表达而具有H1受体依赖的抗炎作用。     

IL-6诱导小鼠肌原细胞系C2C12 UⅡ/UT系统的高表达

目的 观察外源给予IL-6对C2C12细胞中UⅡ/UT系统表达的影响.方法 培养小鼠肌原细胞系C2C12细胞株,应用胎盘蓝染色和测定细胞培养液中LDH的含量检测IL-6对细胞损伤的影响,应用放射免疫的方法检测细胞培养液和裂解液中UⅡ的含量,应用RT-PCR法测定C2C12中UT mRNA的表达.结果 外源给予不同浓度的IL-6,C2C12细胞裂解液中UⅡ的含量各组间无明显差异,但增加了细胞孵育液中UⅡ的含量,10 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL时较对照组分别增加了104.9％ (P＜0.01)、86.4％ (P＜0.01)和94.3％ (P＜0.01).低浓度IL-6(0.1 ng/mL、1 ng/mL、10 ng/mL和50 ng/mL)刺激明显增加了UT mRNA的表达,而高浓度的IL-6 (100 ng/mL)刺激反而使UT mRNA的表达降低.结论 IL-6作为T2DM发病因素之一的炎症因子,可能是T2DM时骨骼肌组织中UⅡ/UT系统表达增加的因素之一.     

体外阻断CD137-CD137L途径抑制移植物抗宿主病的免疫效应

目的探讨体外阻断活化的供鼠T淋巴细胞CD137-CD137L共刺激途径抑制供鼠淋巴细胞的免疫反应。方法应用雄性供鼠BALB/c脾淋巴细胞为反应细胞,雌性受鼠C57BL/6脾淋巴细胞为刺激细胞,进行混合淋巴细胞培养(MLC)。设单抗实验组(加抗CD137L单抗)和对照组(不加抗CD137L单抗),初次和再次MLC第1、3、5、7天采用流式细胞术检测CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞;RT-PCR法检测培养的细胞IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的水平。结果实验组CD3+CD8+T细胞明显低于对照组(P<0.01);实验组IL-2、IFN-γ水平明显低于对照组(P<0.01);实验组IL-10表达明显高于对照组(P<0.01)。结论体外MLC中,应用抗CD137L单抗孵育供鼠脾T淋巴细胞主要抑制供鼠CD3+CD8+T细胞的增殖,抑制Ⅰ类细胞因子IFN-γ及IL-2的表达,促进Ⅱ类细胞因子IL-10的表达。     

IL-10对HepG2细胞生长增殖的影响

目的初步探讨不同浓度的白细胞介素-10(Interleukin-10, IL-10)对肝癌细胞HepG2生长及增殖的影响作用。方法体外常规培养HepG2细胞,以0～30 ng/ml IL-10分别作用24 h,四唑盐比色法(MTT法)观察不同浓度的IL-10对HepG2细胞生长增殖的影响,酶标仪检测各组吸光度值。倒置显微镜下观察各组细胞数量及形态变化。结果与对照组(0剂量组)相比,5～15 ng/ml IL-10作用于HepG2细胞24 h,细胞的增殖水平无明显改变;20～30 ng/ml IL-10作用于HepG2细胞24 h,细胞的生长增殖能力明显增加(P0.05);且细胞的增殖能力随着IL-10浓度的升高不断增强,具有剂量依赖关系。结论一定浓度的IL-10对HepG2细胞的生长增殖具有明显的促进作用。     

铜绿假单胞菌通过MAPK信号传导通路诱导U937细胞表达IL-8

目的探讨铜绿假单胞菌(PA)活菌对不同分化状态的U937细胞表达IL-8的诱导作用及通过MAPK信号传导通路的调控机制。方法应用人单核白血病细胞系-U937细胞,采用ELISA和RT-PCR法对PA诱导不同分化状态的U937细胞IL-8蛋白分泌和其mRNA表达进行研究,并观察MAPKs抑制剂PD98059和SB203580对IL-8表达的影响。结果PA可促进U937细胞及PMA分化的U937细胞IL-8的mRNA及蛋白分泌,而且具有明显的量效和时效关系。分别用SB203580抑制p38MAPK通路、用PD98059抑制ERK通路,均能引起抑制剂浓度依赖的IL-8的表达(P<0.01)。结论PA以浓度和时间依赖的方式感染U937细胞,促进IL-8的分泌和mRNA表达,PA可能通过MAPK信号通路启动IL-8的高效表达和分泌。     

γ干扰素不是抗病毒因子而是一种T淋巴细胞生长促进因子

本文报道T淋巴细胞系对γ干扰素(IFN-γ)的反应。作者用IFN-α/β和其他细胞系作对比,发现T淋巴细胞对IFN-γ的反应和对IFN-α/β的反应有许多不同。IFN-γ对T细胞系和非T细胞系的作用也不同。首先,不同于IFN-α/β,IFN-γ对T细胞系不能诱生抗病毒状态和激活2′-5′寡腺苷酸(2′-5′A)合成酶;其次,T淋巴细胞对IFN-γ的抗病毒作用缺乏敏感性并非由于特异性膜受体缺如,因为通过~(125)I标记的IFN-γ对T细胞和其他细胞的结合实验表明,实验中所用的T细胞系都具有IFN-γ特异性受体,其结     

异丙肌苷阻止人免疫缺陷病毒致艾滋病的疗效

业已证明,异丙肌苷(inosine pranobex,isoprinosine)可增加免疫系统多种细胞功能,可能与增加白细胞间素-1(IL-1)和IL-2的产生有关;亦有增加T细胞增殖反应和自然杀伤细胞活性,从而发挥抗病毒作用。作者采用随机双盲安慰剂对照试验方法评估了异丙肌苷阻止人免疫缺陷病毒(HIV)致艾滋病的疗效及安全性。 886例HIV感染无艾滋病表现的患者,根据病人CD_4细胞数分为3组(即<200×10~6,200～500×10~6,>500×10~6/L),每组病     

CpG寡脱氧核苷酶对2型糖尿病患者外周血Th1/Th2型免疫应答的调节作用

目的观察CpG寡脱氧核苷酶(ODN)对2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法将20例T2DM患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、CpG ODN组(2μmol/L)。用实时足量聚合酶链反应(real time-PCR)法检测PBMC IFN-γmRNAI、L-12 mRNA和IL-10 mRNA的表达。结果T2DM患者PBMC空白对照组IFN-γmRNA和IL-12 mRNA的表达低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10 mRNA的表达与健康人相似(P>0.05)。经CpGODN刺激,IFN-γmRNA和IL-12 mRNA的表达高于空白对照组(P<0.01,P<0.01),但低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10 mRNA的表达与空白对照组相似(P>0.05),与健康人差异无统计学意义(P>0.05)。结论CpG ODN可促进T2DM人PBMC产生IFN-γ和IL-12,增强Th1型免疫反应。     

慢性HBV感染不同临床类型机体免疫对HBsAg和HBV DNA水平的影响

目的 探讨慢性HBV感染不同临床类型患者的机体免疫状态对HBsAg和HBVDNA水平的影响.方法 以慢性HBV感染患者作为研究对象采集外周血,采用ELISA法和流式细胞仪分别对研究对象血清及全血进行HBVM、细胞因子白细胞介素2(IL-2)、IL-10和淋巴细胞亚群CD4+、CD8+T细胞检测,荧光定量聚合酶链反应法对HBV DNA进行检测,将HBV DNA指数结果进行对数转换进行相关性分析.结果 慢性重症肝炎(慢重肝)组和肝硬化组免疫学指标IL-2、IL-10、CD4+、CD8+T细胞与HBsAg滴度及HBV DNA水平均无显著性相关(P＞0.05).慢性乙型肝炎(慢乙肝)组CD4+T细胞与HBV DNA水平呈显著负相关(P＜0.05);免疫学指标IL-2、IL-10和CD8+T细胞与HBsAg和HBV DNA水平均无显著性相关性(P＞0.05).结论 慢性肝病不同临床类型患者机体免疫状态对HBsAg和HBV DNA水平的影响不尽相同.慢乙肝组CD4+T细胞与HBV DNA水平呈显著负相关,在慢乙肝患者中CD4+T细胞对HBV似有抑制作用.     

全麻复合硬膜外阻滞对老年患者开胸手术围术期免疫反应及细胞因子的影响

目的研究硬膜外阻滞复合全麻对老年患者开胸手术围术期T细胞亚群、IL-1、IL-6及IL-10等细胞因子的影响.方法选择择期开胸手术老年患者38例,ASA Ⅰ～Ⅱ级,随机分为两组.对照组(全麻组):芬太尼、丙泊酚、维库溴铵诱导,丙泊酚、维库溴铵、异氟醚维持;研究组(复合组):全麻方法同上;术前术中硬膜外持续输注利多卡因.两组于麻醉前(T0)、切皮后1 h(T1)和术毕(T2)、术后24 h(T3)、48 h(T4)检测外周血CD 3、CD 4、CD 8、CD 23,B细胞及单核细胞HLA-DR表达和IL-1、IL-6及IL-10的变化.同时测定外周血肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)的浓度.结果对照组切皮后1 h及术毕CD 3细胞下降,T3 CD 4细胞和CD 4/CD 8比值降低,研究组于T1 CD 4/CD 8升高.两组T3 CD 23、B细胞、IL-1、IL-6和IL-10均显著升高,单核细胞HLA-DR表达显著下降.研究组在术中、术后NE值均显著低于对照组.结论硬膜外阻滞加全麻能够较好地抑制手术应激反应,抑制术后CD 3、CD 4细胞下降.     

B7-H4在肾癌组织中表达的意义及其机制研究

目的 探究B7-H4在肾癌组织中表达的意义及其机制.方法 选择初诊肾细胞癌患者50例设为研究组,取10例健康人肾脏组织做对照组,构建人B7-H4重组逆转录病毒(pEGZHA-Term)载体,将载体转染L929细胞.将转基因细胞与T细胞共同培养,用空白T细胞做对照.用流式细胞仪检测B7-H4对T细胞增殖和凋亡的影响;研究B7-H4在正常肾脏与肾癌中的差异.结果 研究组白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素IL-4、白细胞介素IL-10和干扰素-o(IFN-α)分别为(65.16±8.18)、(96.57±25.56)、(57.35±4.58)、(66.48±13.25) ng/L,对照组分别为(82.88±9.75)、(73.82±22.92)、(53.84 ±9.10)、(92.25±18.45) ng/L,两组差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 B7-H4的过分表达可能是决定肿瘤发生和预后的重要因素,B7-H4是T细胞的一个强有力的减弱因子.     

IL-10抑制脂多糖诱导的Hela细胞IL-15和IL-6转录

目的研究IL-10对脂多糖(LPS)诱导的Hela细胞IL-15mRNA和IL-6 mRNA表达的影响,分析其激活的信号转导通路。方法培养的Hela细胞,经不同浓度的LPS及IL-10单独或联合处理后,提取细胞总RNA和总蛋白,RT-PCR分析IL-15和IL-6转录水平的变化,Westernblot分析信号转导通路蛋白变化。结果RT-PCR分析得知①1ng～10μgLPS刺激Hela细胞12h后,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA水平均明显上调(与对照组比较:P<0.01),且存在剂量依赖关系,100ng/mL时达峰值;100ng/mLLPS刺激Hela细胞0～24h,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA水平亦明显上调(与对照组比较:P<0.01),24h内存在时间依赖关系,12h时达峰值。②单独IL-10(10ng/mL)作用于Hela细胞12h后,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA没有明显变化(与对照组比较:P>0.05)。不同浓度的IL-10(1,10,100ng/mL)均下调100ng/mLLPS诱导的Hela细胞IL-15 mRNA和IL-6 mRNA的表达,且浓度越高IL-10抑制作用越明显。Western blot分析显示LPS主要通过磷酸化信号蛋白PI3K/AKT和ERK1/2上调IL-15和IL-6转录,IL-10能阻断AKT的磷酸化而对ERK1/2的磷酸化没有影响。结论IL-10可抑制LPS诱导的炎症细胞因子IL-15和IL-6的转录,这可能与其阻断AKT的磷酸化有关,因而,IL-10可能应用于某些临床感染性疾病的预防和治疗。     

高能聚焦超声治疗对原发性胰腺癌患者免疫功能的影响

目的 观察高能聚焦超声(HIFU)治疗后,原发性胰腺癌患者的免疫功能变化.方法 应用FEP-BY01型肿瘤超声治疗机对46例原发性胰腺癌患者进行治疗,分别取HIFU治疗前和治疗后4周外周血10 ml,检测T细胞亚群:CD4、CD8、CD4/ CD8;Th细胞因子;γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-10.结果 46例胰腺癌患者治疗后CD4T细胞百分数、CD4/ CD8比值较治疗前明显升高,而CD8T细胞百分数下降;治疗后IL-2、IFN-γ含量较治疗前明显升高,而IL-4、IL-10含量较治疗前明显下降.结论 应用HIFU技术治疗原发性胰腺癌可以改善患者体内的细胞免疫功能.     

芍药苷对细菌脂蛋白诱导的THP-1细胞炎症因子表达的影响

目的 研究芍药苷对细菌脂蛋白(BLP)诱导的人单核细胞系(THP-1)细胞炎症因子表达的影响.方法 采用THP-1进行细胞培养,加入同一浓度BLP(1000 ng/ml)分别培养1、2、4、6、8、12、24,36、48 h,及将BLP刺激后的THP-1细胞与不同浓度芍药苷(10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L)分别作用4 h和48 h后,收集细胞上清液;用ELISA法分别测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平.结果 给予BLP刺激后,TNF-α及IL-6均有明显增加,TYF-α在4 h达高峰,IL-6在24 h后显著升高,48 h达高峰.芍药苷体外作用可呈浓度依赖性抑制BLP刺激后THP-1细胞表达TNF-α、IL-6的水平(P<0.01).结论 芍药苷可通过抑制TNF-α、IL-6的释放,减轻炎症反应.     

CD_3单克隆抗体加白细胞介素2活化的杀伤T细胞系治肿瘤的安全性

目的 :探讨CD3单克隆抗体 (CD3McAb)与小剂量白细胞介素 2 (IL 2 )活化的杀伤T细胞系治疗肿瘤病人的安全性。方法 :从健康人外周血、脐血、人胎胸腺或病人自体血分离淋巴细胞 ,经诱导、激活传代后获淋巴因子活化的杀伤细胞 (LAK)和CD3AK细胞系 ,先分别试用 10例病人 ,(1～ 5 )×10 8,iv ,每个疗程 5次 ,显示安全有效后增加病例 ,LAK细胞组 5 0例 ,CD3AK细胞组 4 0例。结果 :效应细胞生长形态良好 ,多数能长出细胞集落。生长曲线表明CD3AK细胞比LAK细胞增殖快 ,生长时间长 ;CB CD3AK和PBL CD3AK细胞对数生长期为d 9～ 18,能从 10 6 扩增到 10 8,而其他细胞对数生长期为d 6～ 15 ,扩增到 10 7,110例病人经iv 5 48次治疗 ,不良反应主要为发热和寒颤 ,偶有恶心、呕吐 ,眩晕 ,皮疹 ;HFT LAK发生率为 11% ,其他约 5 % ,CD3AK平均不良反应发生率为 3.6 %。结论 :CD3McAb与小剂量IL 2活化的杀伤T细胞系可以安全地用于治疗肿瘤。     

滋肾通络方对胶原性关节炎小鼠Th17/Treg细胞分化及平衡的影响

目的观察滋肾通络方(ZTF)对胶原性关节炎(CIA)小鼠Th17/Treg细胞分化平衡的影响,探讨其治疗类风湿关节炎的机制。方法 DBA/1小鼠随机分为正常对照组、模型组和ZTF组(8.4 g生药·kg~(-1)),造模21 d后每日灌胃给药,连续4周。检测关节炎指数、关节病理改变、血浆IL-10和IL-17水平、外周血和脾脏Th17/Treg细胞比例、CD4~+T细胞IL-10、IL-17 mRNA水平。结果 CIA小鼠踝关节病变明显,血浆IL-17水平、外周血和脾脏Th17细胞比例、CD4~+T细胞IL-17 mRNA表达明显升高;血浆IL-10水平、外周血和脾脏Treg细胞比例、CD4~+T细胞IL-10 mRNA表达明显降低。ZTF能明显减轻CIA小鼠关节病变,降低血浆IL-17水平、外周血和脾脏Th17细胞比例、CD4~+T细胞IL-17 mRNA表达;升高血浆IL-10水平、外周血和脾脏Treg细胞比例、CD4~+T细胞IL-10 mRNA水平。结论 CIA小鼠存在Th17/Treg细胞失平衡,ZTF可调节Th17/Treg细胞比例,重构Th17/Treg细胞平衡,调节相关细胞因子释放,这可能是ZTF治疗类风湿关节炎的机制之一。