失神经支配创面的研究进展

目前临床上对于普通创面治疗的研究已经取得很大成效,但关于失神经支配难愈性伤口的研究较少。近年来,机体组织创伤伴所支配神经缺失的特殊创面发生率呈上升趋势,带给临床工作者的压力不断增大,这种特殊创面概括起来主要包括糖尿病性溃疡、截瘫后压力性溃疡及动、静脉性溃疡等。虽然新的创面治疗方法不断更新,但临床上这种迁延不愈的特殊创面仍是一大难题,它们多伴有支配创面的感觉神经受损或障碍。本文就对其可能的内在机制和治疗措施进行综述,旨在为临床工作者提供更加合理的思路及帮助。     

失神经支配的腓肠肌组织中myostatin基因CDS部分序列克隆

目的 :克隆大鼠坐骨神经离断时失神经支配的腓肠肌组织myostatin基因CDS区部分片段。方法 :大鼠行坐骨神经离断术 ,术后 2周提取失神经支配的腓肠肌组织总RNA ,扩增myostatin基因CDS片段 ,克隆入T载体 ,并经序列测定。结果 :采用RT -PCR法 ,扩增出一特异产物与预期长度相符 ,T载体克隆测序与myostatin基因 1 0 0 %同源。结论 :采用RT -PCR和T载体技术可获得大鼠失神经支配的腓肠肌组织myostatin基因CDS部分片段的克隆     

大鼠失神经支配后胫前肌变化的实验研究

目的:研究胫前肌在失神经支配后不同时间点的变化.方法:建立SD大鼠坐骨神经离断模型,失神经支配后0、7、14、21和28天,采用透射电镜观察胫前肌肌细胞超微结构,显微镜下测量肌细胞截面积,ELISA法检测肌组织中IL-6含量,Western b1ot法测定肌组织中Bc1-2和Bax蛋白表达.结果:与失神经支配后0天比较...     

不同程度失神经支配的面神经和面肌超微结构观察

目的：探讨不同程度失神经支配的面神经和面肌的病理变化,为判断预后和制定治疗方案提供参考。方法：制作豚鼠面神经不同损伤程度的面神经麻痹实验模型,应用航向电镜扫描电镜观察面神经和口轮匝肌超微结构变化。结果：压榨面神经５s组只见髓鞘轻度病变,肌纤无异常改变;３０s组髓鞘和轴突及肌纤维都呈重度病理改变;１５s组神经纤维和肌纤维处于前两组改变的中间状态。结论：面神经失神经支配程度越重,面神经纤维和面肌肌纤维的     

颞骨内面神经麻痹失神经支配程度测试的意义

目的：探讨面神经失神经支配程度与预后的关系及其机理。方法：应用神经兴奋性测试仪测试失神经支配程度。制作豚鼠颞骨内面神经麻痹（ＦＰ）模型,观察面肌功能恢复时间。透射电镜观察面神经的病理改变。结果：１９０例ＦＰ由恢复到临床治愈,失神经支配阴性组需（３３．１±２１．３）ｄ;失神经支配Ⅰ度组需（６３．３±１２．４）ｄ;失神经支配Ⅱ度组需（９０．１±１１．７）ｄ;失神经支配Ⅲ度组需（２１０．２±３７．５）ｄ;４组间差异显著。压迫面神经５ｓ,神经兴奋性传导恢复时间和瞬目反射恢复时间都是（６０．７±４５．３）ｈ;１５ｓ组神经兴奋性传导恢复时间（９８２．６±３６．６）ｈ,瞬目反射恢复需（４６±１２）ｄ;３０ｓ组神经兴奋性传导和瞬目反射无１只恢复到正常。电镜观察５ｓ和１５ｓ组髓鞘板层开离,３０ｓ组髓鞘融解轴突破坏。结论：失神经支配程度是预后诊断的指标,并与髓鞘和轴突破坏程度有关。     

复容1号治疗失神经支配面瘫的疗效观察

复容１号治疗失神经支配面瘫的疗效观察鞍山市第一商业局职工医院（１１４００１）哈丽君中国医科大学附属第一医院耳鼻喉科马秀岚，董有毅，任重笔者应用＂复容１号＂（简称１号）治疗面瘫发病３周内的失神经支配阳性贝尔氏面瘫，临床观察效果满意，报道如下。临床资料一...     

不同程度失神经支配后眼轮匝肌和口轮匝肌的形态学研究

目的:探讨不同程度失神经支配后,眼轮匝肌和口轮匝肌的形态学变化。方法:制作豚鼠面神经总干压榨15s、30s和切断的动物模型,分别于术后1周和1个月取眼轮匝肌和口轮匝肌,应用琥珀酸脱氢酶(SDH)染色,光镜和透射电镜下观察肌肉的形态和超微结构。结果:正常状态下,眼肌中I型纤维占29.51%,II型纤维占70.49%;口肌中只有II型纤维占100%。神经损伤后眼肌的I型纤维向II型纤维转化,当神经功能恢复时,I型纤维百分比又逐渐恢复。同时,SDH含量随损伤加重逐渐减少,随着神经功能恢复SDH含量又逐渐恢复。结论:面肌失神经和恢复神经支配时,肌纤维分型的转化提示肌肉功能的变化;面肌与面神经之间有一致性的变化趋势,提示面肌的病理改变可以成为判断面神经功能状态的科学标准。     

血管化自体颌下腺移植术后失神经支配腺体的病理变化

目的:研究血管化自体颌下腺移植术后失神经支配腺体的病理变化,探讨其分泌机制.方法:在摘除泪腺建立家兔角结膜干燥症模型的基础上进行血管化自体颌下腺移植,于移植术后分别对不同时间失神经支配腺体组织切片行HE染色、S-100蛋白抗体免疫组化染色,光镜观察,制做电镜标本透射电镜观察.结果:移植后早期可见腺实质部份轻度萎缩变性样改变,神经节及神经纤维不同程度变性.长期观察腺体结构正常,腺体内可见健康的神经节及神经纤维.电镜观察见腺泡细胞内较多分泌颗粒.结论:移植腺体能保持旺盛的分泌功能,失神经支配腺体未见萎缩.     

大鼠胫神经损伤腓肠肌组织中Myostatin的表达变化

目的：分析myostatin（MSTN）在大鼠胫神经夹伤后腓肠肌失神经萎缩与神经再支配过程中的表达变化，探讨myostatin在失神经肌萎缩过程中的可能作用。方法：建立大鼠胫神经夹伤模型；采用RT—PCR法检测失神经与神经再支配不同时FB3段腓肠肌中myostatin mRNA含量。结果：失神经支配早期，腓肠肌myostatin mRNA水平迅速上升，在第2周达到高峰，随后表达又逐渐下降，至第4周与正常组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：成功建立大鼠胫神经夹伤模型，腓肠肌失神经肌萎缩过程中，myostatin基因表达有明显变化．提示myostatin在失神经肌萎缩过程中扮演重要角色。     

失神经支配骨骼肌萎缩与细胞因子调控

周围神经损伤后的骨骼肌萎缩和再生修复是一个极为复杂的生物化学和细胞学的调控过程。近年来有关研究表明 ,这一过程所伴随的复杂的生物学调节机制与大量的细胞因子有关。本文就与失神经支配骨骼肌萎缩相关的细胞因子及其调控作用作一综述。1 成肌调节因子成肌调节因子 (myog     

双向电泳技术分析大鼠快慢肌蛋白的表达差异

目的：建立骨骼肌蛋白分离的双向电泳（2-DE）技术体系，分析趾长伸肌与比目鱼肌中快慢肌蛋白的表达。方法：提取大鼠趾长伸肌和比目鱼肌的总蛋白，定量，然后进行第一向等电聚焦0EF）和第二向十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）技术分离总蛋白，GS-800获得凝胶图像，并测量不同凝胶间蛋白斑点在IEF和SDS-PAGE方向上的位置偏差，使用PDQuest7．3软件对凝胶图像进行分析，找出趾长伸肌与比目鱼肌蛋白表达的差异。结果：在趾长伸肌和比目鱼肌组织的蛋白表达谱上，分别检测到680±19和660±27个蛋白点，平均匹配点数为590±13和580±17，匹配率达86．7％和87．8％，不同凝胶间蛋白质点在IEF方向的偏差为（0．51±0．48）mm，在SDS-PAGE方向上的偏差为（0．53±0．42）mm，对比分析趾长伸肌和比目鱼肌组织的2-DE图谱，发现有27个点存在明显的表达差异，在比目鱼肌中高表达的点有12个，在趾长伸肌中高表达的点有15个。结论：建立了骨骼肌蛋白分离的双向电泳技术体系，发现成年大鼠趾长伸肌和比目鱼肌的双向电泳图谱相似，但是有部分蛋白质点存在表达差异．这些差异表达的蛋白，可能与快慢肌本身的生理特性相关。     

人肝癌胞浆蛋白质双向电泳的研究

用高分辨率的蛋白质双向电泳对人肝癌及正常肝组织的胞浆蛋白质进行检测。结果表明肝细胞癌变后,胞浆蛋白质双向电泳图谱发生了显著改变,总点数增加,蛋白质点的分布向低分子量低等电点偏移,出现了一些新的蛋白质点,有些蛋白质点密度增加,有些蛋白质点密度减少或消失。     

血清蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立

目的：建立血清蛋白质组双向凝胶电泳（2-DE）技术。方法：对血清蛋白质2-DE的各种条件进行调整、优化。结果：建立了稳定的2-DE技术。结论：已建立的血清蛋白质2-DE技术，将为进一步开展疾病的血清蛋白质组学研究奠定基础。     

HepG2细胞蛋白质组双向电泳条件的优化与图谱的建立

目的：优化双向电泳的样品处理方法,建立HepG2细胞蛋白质双向电泳图谱。方法：用含10%胎牛血清的RPM11640培养液培养HepG2细胞,胰酶消化后收集细胞,加入细胞裂解液使细胞充分裂解,冰浴超声离心后取上清液进行双向凝胶电泳,电泳图谱经考马斯亮蓝染色及图像扫描与分析。结果：通过对HepG2细胞蛋白提取液进行双向电泳,在13 cm pH 3~10（L）IPG胶条上可分离到（297±23）个重复性及分辨率均较好的蛋白质点,蛋白斑点的匹配率为83%。结论：HepG2细胞蛋白质组双向电泳条件的优化及图谱的建立,为进一步研究肝癌蛋白质组学奠定了基础。     

In Vitro Protein Expression Profile of Campylobacter jejuni Strain NCTC11168 by Two-dimensional Gel Electrophoresis and Mass Spectrometry

Objective To investigate the protein expression profiles of the major food‐borne pathogen Campylobacter jejuni NCTC11168.Methods Membrane and soluble cellular proteins were extracted from the genome‐sequenced C.jejuni strain NCTC11168.Protein expression profiles were determined using two‐dimensional gel electrophoresis(2‐DE).All the detected spots on the 2‐DE map were subjected to matrix‐assisted laser desorption/ionization time‐of‐flight mass spectrometry(MALDI‐TOF/TOF) analysis.Results A total of 537 and 333 spots were detected from the whole cell and membrane‐associated proteins of C.jejuni NCTC11168 cultured on Columbia agar medium at 42 ℃ by 2‐DE and Coomassie Brilliant Blue staining,respectively.Analyses of whole cell and membrane‐associated proteins included 399 and 133 spots,respectively,which included 182 and 53 functional proteins identified by MALDI‐TOF/TOF analysis.Conclusion The comprehensive expression protein profiles of C.jeuni NCTC11168 obtained in this study will be useful for elucidating the roles of these proteins in further pathogenesis investigation.     

金钱白花蛇可溶性蛋白凝胶电泳图谱的研究

对金钱白花蛇进行几种凝胶电泳研究,根据聚丙烯酰胺胶电泳（ＰＡＧＥ）谱带的位置和数目进行品种鉴别;用改进的十二烷酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）测定其主要蛋白质成分分子量;用等电聚焦电泳（ＩＦＥ）测定其主要蛋白质成分的等电点（ＰＩ）。清晰的电泳谱带及相应数据为商品蛇真伪鉴别提供了科学依据。     

STGC3基因表达上调对CNE2细胞系蛋白质表达谱的影响

目的　采用蛋白质组学方法,分析STGC3基因高表达对CNE2细胞系蛋白质表达谱的影响。方法　应用脂质体转染技术,将pcDNA3.1 ( + ) STGC3的表达质粒导入鼻咽癌细胞系CNE2 ,经G41 8筛选、RT -PCR技术鉴定阳性克隆,建立稳定高表达STGC3的细胞系;采用双向凝胶电泳分离CNE2、pcDNA3.1 ( + ) CNE2和pcDNA3.1 ( + ) STGC3 CNE2细胞的总蛋白质,图像扫描后用ImageMaster软件进行比较分析,识别差异表达的蛋白质点。结果　CNE2、pcDNA3.1 ( + ) CNE2和pcDNA3.1 ( + ) STGC3 CNE2细胞的蛋白质点分别为675±2 7、660±2 3和662±1 8个,蛋白质点主要分布在等电点为3.5～8.5、分子量为2 2～80kD的范围内。去除空白载体所致的蛋白质的差异后,在pcDNA3.1 ( + ) STGC3 CNE2细胞系中,确立了1 5个上调的蛋白质点和8个下调的蛋白质点。结论　STGC3基因高表达能引起鼻咽癌细胞系CNE2的蛋白质表达谱改变,此结果为进一步研究STGC3基因的抑瘤分子机制提供了很好的实验资料。     

血清蛋白质组学研究中高丰度蛋白去除方法的建立

目的 建立血清蛋白质组学研究中高丰度蛋白的去除方法并评价其去除效果.方法 应用Sigma公司2006年最新推出的血清白蛋白和IgG去除试剂盒(ProteoPrep Immunoaffinity Albumin and IgG Depletion Kit)去除血清中高丰度的白蛋白和IgG等,再用双向凝胶电泳(2-DE)分析去除的效果.结果 本实验建立的血清中高丰度蛋白的去除方法,约95%的白蛋白和IgG能够被去除,2-DE图谱中蛋白质点更加清楚,部分低丰度蛋白得以显现.结论 成功建立血清中高丰度蛋白的去除方法.可为今后的血清蛋白质组学研究奠定基础.     

双向凝胶电泳分析脾脏蛋白组学的方法研究

目的优化双向凝胶电泳的实验步骤,总结一套适用脾脏组织的双向凝胶电泳技术。方法对双向电泳实验中的关键环节：蛋白沉淀方法;胶条PH的选择;聚焦条件等进行研究与优化,考马斯亮蓝染色后进行凝胶图像比较。结果Cleaningup沉淀蛋白,聚焦电压达到11000伏小时（110kvhs）,可以得到多达1000个蛋白点的2Dgel（two—dimensionalpolyacrylamidegel）。结论建立了脾脏双向电泳的具体方法,得到分辨率高重复性好的2Dgel,为脾脏的蛋白质组学研究奠定了基础。     

结核病患者和正常人血清蛋白质双向凝胶电泳差异比较

目的 初步探讨结核病患者与正常人之间血清蛋白质的差异,以期筛选出新的结核病实验诊断标志物。 方法 对10例菌阳肺结核（+组）、10例菌阴肺结核（－组）、10例肺外结核（肺外组）及10例正常人（正常组）分组混合血清应用17cm pH4-7 IPG胶条进行双向凝胶电泳（two-dimensional electrophoresis, 2-DE）,每组平行电泳3块胶条。电泳结束后对2-DE胶条进行考马斯亮蓝染色,染色后用Umax powerlook2000扫描仪以投射方式、300dpi分辨率扫描获取2-DE图谱,然后用2-DE分析软件ImageMaster 2D Platium5.0进行分析。 结果 在正常组、＋组、-组、肺外组中,分别平均可以检测到310±64、307±33、296±54、267±23个清晰可见的蛋白质点。正常组与＋组、-组、肺外组的匹配率分别为(74±2)%、(76±2)%和(68±5)%。通过对4组2-DE图谱比较,＋组与正常组间有21个差异蛋白质点（其中9个上调）,-组与正常组间有18个差异蛋白质点（其中8个上调）,肺外组与正常组间有24个差异蛋白质点（其中7个上调）。将＋组、-组、肺外组合并为结核组与正常组比较有3个差异蛋白质点（其中2个上调）。 结论 结核病患者和正常人血清蛋白质存在差异,有望从血清中筛选出新的结核病实验诊断标志物。本研究建立了两者间血清蛋白质组差异蛋白质的初步模型,但有待进一步验证并进行差异蛋白质鉴定。