大黄黄连泻心汤不同配伍浸渍剂中主要化学成分的HPLC-DAD分析和归属研究

目的:建立大黄黄连泻心汤中主要化学成分的HPLC-DAD分析方法,结合LC/MS/MS进行该复方不同药味配伍前后浸渍剂中化学成分的归属研究.方法:在HPLC分析的色谱条件中,采用Luna苯基柱(250mm×4.6mm,5μm),DAD检测器在紫外区200～400nm范围内扫描,流动相为乙腈-0.5%三乙胺(磷酸调节pH至3.5),梯度洗脱,流速为1mL·min-1;进样量为20μL.通过对大黄黄连泻心汤中各药味单独和不同药味配伍前后浸渍剂中各色谱峰的保留时间和吸收光谱与对照品进行比较,并结合LC/MS/MS进行相关色谱峰的鉴定和归属研究.结果:本研究建立的HPLC-DAD方法,可较好的进行大黄黄连泻心汤中主要色谱峰的分离和对应色谱峰光谱扫描;在HPLC图谱共标出了20个主要色谱峰,结合对照品对其中的黄连小檗碱等11个化学成分进行了鉴定和来源归属;此外,对某些化学成分进行HPLC分离和LC/MS/MS定性,推断出了黄连碱等4个成分,并判断了它们的归属.结论:本研究建立的HPLC-DAD方法准确、重复性好,可进行大黄黄连泻心汤浸渍剂中主要化学成分的定性分析;对15个色谱峰进行的定性和归属研究结果可对揭示该复方的物质基础、配伍规律和质量控制提供实验数据支持.     

大黄黄连泻心汤不同配伍浸渍剂中主要化学成分变化研究

目的：建立大黄黄连泻心汤浸渍剂中主要化学成分同时测定的HPLC方法,并分析在配伍黄芩前后这些主要化学成分的变化。方法：采用HPLC-UV法,色谱柱为苯基柱（250mm×4.6mm,5μm）,柱温为室温,流动相为乙腈-0.5％三乙胺（磷酸调节pH至3.5）,梯度洗脱,流速为1mL／min;紫外检测波长为254nm、270nm,进样量为20μL。结果：本研究建立的HPLC方法准确、可靠,可同时测定大黄黄连泻心汤的主要化学成分;在大黄和黄连配伍黄芩前后浸渍剂中的主要化学成分发生了明显变化,大黄蒽醌类成分明显增加,黄连生物碱中小檗碱含量明显减少。结论：大黄黄连泻心汤的组方中是否配伍有黄芩将对该方主要化学成分含量变化产生明显影响。     

大黄黄连泻心汤不同配伍浸渍剂中主要化学成分变化研究

目的：建立大黄黄连泻心汤浸渍剂中主要化学成分同时测定的HPLC方法,并分析在配伍黄芩前后这些主要化学成分的变化。方法：采用HPLC-UV法,色谱柱为苯基柱（250mm×4.6mm, 5μm）,柱温为室温,流动相为乙腈-0.5%三乙胺（磷酸调节pH至3.5）,梯度洗脱,流速为1mL/min;紫外检测波长为254nm、270nm,进样量为20?滋L。结果：本研究建立的HPLC方法准确、可靠,可同时测定大黄黄连泻心汤的主要化学成分;在大黄和黄连配伍黄芩前后浸渍剂中的主要化学成分发生了明显变化,大黄蒽醌类成分明显增加,黄连生物碱中小檗碱含量明显减少。结论：大黄黄连泻心汤的组方中是否配伍有黄芩将对该方主要化学成分含量变化产生明显影响。     

大黄黄连泻心汤不同配伍浸渍剂中蒽醌类成分变化研究

目的：建立大黄黄连泻心汤中君药大黄的主要蒽醌类成分（芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚）的HPLC含量测定方法，并探索在不同配伍情况下浸渍剂中5个成分的含量变化。方法：采用HPLC—UV法，色谱柱为苯基柱（250min×4．6mm，5μm），柱温为室温，流动相为甲醇～0．1％磷酸水，梯度洗脱，流速为为1mL／min；紫外检测波长为254nm，进样量为20μL。结果：大黄的5个主要蒽醌类成分中的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚在3．15～64．00μg／mL范围内、大黄素甲醚在1．70～33．92μg／mL范围内，其峰面积与浓度呈良好线性关系，5个成分的精密度RSD均小于2％，5个成分的平均回收率为102．1％，RSD均小于5％；大黄与黄连或黄芩配伍时可导致蒽醌类成分含量变化明显。结论：本研究建立的HPLC方法准确，重现性好，可用于大黄黄连泻心汤配伍研究时大黄蒽醌类成分的定量分析；大黄与黄连或黄芩配伍时蒽醌类成分变化明显，有无配伍黄芩对蒽醌类成分含量有显著影响。     

HPLC研究川芎-赤芍配伍的化学成分变化

中药复方配伍理论是中药方剂的精华。中药配伍后多化学成分的变化研究尚未见报道。本文首次应用HPLC—DAD研究川芎-赤芍配伍的多化学成分变化。由于中药成分复杂，需要建立稳定、重复、可靠的液相色谱分析方法；然后用液相色谱的统一方法分离样品和数据处理；通过比较合煎液和单煎液中各成分的保留时间和紫外光谱确定合煎液中各峰的归属；并可研究配伍后化学成分含量的变化。实验结果表明，川芎-赤芍配伍后少数化学成分含量发生变化，但没有发现新峰的产生。     

大黄黄连泻心汤浸渍剂与煎煮剂的药效学比较

目的:采用胃热型胃溃疡动物模型探讨大黄黄连泻心汤浸渍剂和煎煮剂的药效学差别.方法:40只大鼠随机分为5组(空白对照组、模型组、大黄黄连泻心汤浸渍剂组、大黄黄连泻心汤煎煮剂组、三联疗法组),每组8只.除空白对照组外的其它4组制作胃热型胃溃疡大鼠模型.空白对照组和模型组给予生理盐水灌胃,其它治疗组予相P受试药物,连续给药7d.7d后处死大鼠,检测血清中肿瘤坏死因子-α(TN-α)、白介素-8(IL-8)水平,测量溃疡指数,测定胃组织中表皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF-α)水平.结果:与模型组比较,大黄黄连泻心汤浸渍剂组、大黄黄连泻心汤煎煮剂组、三联疗法组血清TNF-α、IL-8水平均有下降,溃疡指数均降低,胃组织中EGF、TGF-α水平均有升高,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).与大黄黄连泻心汤煎煮剂组比较,大黄黄连泻心汤浸渍剂组、三联疗法组血清TNF-α、IL-8水平下降不明显,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);但大黄黄连泻心汤煎煮剂组溃疡指数、胃组织中EGF、TGF-α与大黄黄连泻心汤浸渍剂组、三联疗法组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),而大黄黄连泻心汤浸渍剂组与三联疗法组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:大黄黄连泻心汤浸渍剂及三联疗法对胃热型胃溃疡大鼠具有明显的抗炎和促进胃黏膜修复作用;大黄黄连泻心汤煎煮剂与浸渍剂具有相似的抗炎效果,但其促进胃黏膜修复作用较浸渍剂及三联疗法差;大黄黄连泻心汤浸渍剂与西药三联疗法有相似的药效学表现.     

大黄黄连泻心汤不同配伍下黄芩苷和汉黄芩苷在大鼠体内的药动学比较研究

目的:比较大黄黄连泻心汤不同配伍情况下黄芩有效成分黄芩苷和汉黄芩苷在大鼠血浆中的药动学差异。方法:大鼠灌服以黄芩、大黄黄芩、黄连黄芩、大黄黄连黄芩的不同配伍浸渍提取液,于不同时间点采血,经处理后测定血浆中黄芩苷和汉黄芩苷的含量,计算在不同配伍情况下的药动学参数并进行比较分析。结果:在大黄黄连泻心汤的不同配伍中,黄芩配伍大黄后,黄芩主要成分原有的药时曲线双峰现象消失,Cmax及AUC均明显下降,消除过程加快;在配伍黄连后,黄芩主要成分的体内过程与单味黄芩相似,只是第2吸收峰有增高的趋势;大黄、黄连和黄芩3味药配伍时,黄芩主要成分的达峰浓度Cmax及AUC均明显下降,消除减慢。结论:在大黄黄连泻心汤的不同配伍中,大黄、黄连的加入使得黄芩中的主要成分黄芩苷和汉黄芩苷的药动学特征发生显著改变,大黄可减少黄芩苷、汉黄芩苷的吸收,加快其消除,而黄连则削弱了大黄的作用。     

大黄黄连泻心汤配伍争议的研究现状

主治"心下痞"症的大黄黄连泻心汤是张仲景《伤寒论》中的经典方剂,其组方中除大黄和黄连之外是否还配伍有黄芩一直存有争议。有关大黄黄连泻心汤配伍争议的现代实验研究,主要从成分分析和药效学等层面上进行探讨,结果表明不同配伍浸渍液中的主要化学成分会产生明显变化,主要化学成分之间相互作用复杂,有可能对药物吸收和体内过程及最终疗效产生影响;配伍黄芩后可增强抗炎、抗菌等活性;目前关于该复方主要活性成分在生物体内过程的相关研究仍很有限,要确证是否配伍有黄芩还需更系统的相关研究。     

提取方法对大黄黄连泻心汤HPLC指纹图谱的影响

目的:研究不同提取方法对大黄黄连泻心汤化学成分的影响.方法:分别取大黄、黄连两味药材各3份,用水分别煎煮15 min、30 min、60 min,冷冻干燥后用甲醇溶解.另取大黄黄连泻心汤处方量4份分别用沸水浸渍提取、煎煮15min、30 min、60 min,冷冻干燥后用甲醇溶解.将所得样品进行高效液相色谱分析,比较化学成分的变化情况.结果:结合指纹图谱、紫外光谱分析,发现不同提取方法对大黄、黄连以及大黄黄连泻心汤的成分有很大的影响.结论:中药煎煮方法对其化学成分影响很大,应充分尊重经典著作中对煎煮方法的特别要求.     

三黄泻心汤HPLC指纹图谱研究

目的 建立三黄泻心汤的HPLC指纹图谱分析方法,为研究三黄泻心汤的药效物质基础和不同配伍的有效成分变化提供可行手段.方法 采用HPLC法建立指纹图谱,选用Shimadzu ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(含0.01 mol/L磷酸二氢钾,pH 2.8)梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长260 nm.通过对全方与各组成药味的阳性和阴性对照组指纹图谱中各峰相对保留时间的比较分析,进行主要色谱峰的组成药味归属;利用色谱峰保留时间的对比及向全方样品中加入对照品的方法,鉴定相关色谱峰.结果 建立了三黄泻心汤的HPLC指纹图谱,10批样品相似度均大于0.92,以黄芩苷为参照峰,标示出32个共有峰,确认了其中11个活性成分峰,并说明了其药材归属.结论 该实验方法简便、准确,重复性好,具有良好的精密度和较好的分离效果,为三黄泻心汤及相关制剂的质量控制提供科学依据.     

HPL C-ESI-MS／MS法鉴定通关丸的主要化学成分

目的：应用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱法鉴定复方通关丸中的化学成分。方法：实验采用Diamonsil^TM C18色谱柱，实验条件Ⅰ：水（A）／乙腈（B）梯度色谱分离，负离子模式下采集数据；实验条件Ⅱ：013％冰醋酸水溶液（A）／甲醇（B）梯度色谱分离，正离子模式下采集数据。结果：根据正、负离子模式下的准分子离子峰和二级质谱，通过与文献数据或部分标准品对照，鉴定了12个化合物，分别是新芒果苷、芒果苷、知母皂苷B-Ⅱ、知母皂苷E、知母皂苷B-Ⅲ、知母皂苷A-Ⅲ、黄柏碱、木兰花碱、蝙蝠葛任碱、小檗碱、药根碱和巴马汀。结论：HPLC-MS／MS为中药复方中化学成分的鉴定提供了一种快速准确的方法。     

HPLC-ELSD结合化学计量学研究银杏叶片中萜类内酯指纹图谱

目的：建立不同厂家银杏叶片中萜类内酯成分HPLC-ELSD指纹图谱。方法：色谱柱为Agi-lentExtend-C18（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为正丙醇-四氢呋喃-水（1：15：84）,柱温为30℃,流速为1mL·min-1,蒸发光散射检测器检测;采用LC／Q-TOFMS对指纹图谱中的共有峰进行指认。并利用化学计量学方法,包括主成分分析（PCA）、相似度分析（SA）、聚类分析（HCA）,对色谱数据进行分析。结果：该方法精密度、稳定性、重复性良好。同时采用LC／Q-TOFMS方法指认了5个共有峰,分别为银杏内酯J（M）、银杏内酯C、银杏内酯A、银杏内酯B及白果内酯。并采用该方法测定了市售14批银杏叶片,结合PCA、SA及HCA生成了银杏叶片中萜类内酯对照指纹图谱,并根据质量差异将样品分为4大类。结论：本方法可用于银杏叶片中萜类内酯成分的质量评价。     

中药复方“松友饮”及其组方药材提取物高效液相指纹图谱研究

目的：分析中药复方＂松友饮＂及组方药材提取物指纹图谱用于质量控制。方法：采用高效液相色谱法（high-performance liquid chromatography,HPLC）研究中药指纹图谱。包括低压四元泵,自动进样器和二极管阵列检测器（DAD）,Agilent Zorbax RX-C8色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,柱温25℃,流动相为水-乙腈,进行梯度洗脱（流速,0.5 mL/min;洗脱时间,60 min;检测波长,280nm）。结果：成功构建＂松友饮＂及组方提取物高效液相指纹图谱,色谱保留时间稳定,各主要色谱峰偏移小于0.1 min。通过比对发现＂松友饮＂HPLC色谱峰来自组方药材成分。重复HPLC色谱相似度（90%,精密度、稳定性、重复性实验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积RSD（3%。结论：HPLC方法可靠、可行,指纹图谱重复性良好,为＂松友饮＂质控提供参考。     

清咽滴丸极性成分的高效液相指纹图谱及其模式识别的研究

目的研究清咽滴丸的质量控制方法。方法采用高效液相色谱建立了清咽滴丸极性部分的HPLC的指纹图谱,收集了不同批次的12批产品进行测定,并使用主成分分析对指纹图谱进行了模式识别研究。采用HPLC-DAD技术进行了药材与制剂的相关性分析。结果通过主成分分析可知,甘草苷为其中比较重要的指标。相关性研究表明,所确定的共有峰中有6个色谱峰来自甘草,5个色谱峰来自诃子。结论此方法可较系统地用于清咽滴丸的质量控制。     

HPLC-DAD/ELSD-ESI-TOF/MS��������Ƭ�л�ѧ�ɷּ����ָ�궨��ָ��ͼ���о�

??OBJECTIVE To analyze and identify the compositions using HPLC-DAD/ELSD-ESI-TOF/MS for establishing the multi index quantatitive HPLC fingerprint of the Jinming Tablet, in order to providing scientific basis for its quality control.METHODS The Agilent SB C₁₈ column (4.6 mm??250 mm, 5 ??m) was used with a mobile phase of acetonitrile-0.2% acetic acid in gradient elution, the flow rate was 0.8 mL??min^-1, the sample voume was 30 ??L, the column temperature was maintaine at 25 ??, the detection wavelength was set at 280 nm. ESI-TOF/MS positive and negative ion mode scanning was used to qualitatively analyze the components in methanol water extract from Jinming Tablet.RESULTS Twenty compounds in Jinming Tablet extract could be primarily identified by HPLC-DAD on-line detection, in which five compounds were determined; based on the analysis of multiple batches of samples, the multi index chromatographic fingerprint was established, meanwhile combined with similarity analysis to achieve the quality evaluation of Jinming Tablet.CONCLUSION The HPLC-DAD/ELSD fingerprint film analysis method for Jinming Tablet is established, which could provide reference for the quality control of the material basis of other compound.     

血塞通注射液HPLC数字化指纹图谱研究

目的:建立血塞通注射液HPLC数字化指纹图谱。方法:采用反相高效液相色谱法。大连江申CenturySILC18 BDS(250mm×4.6mm,5μm),流动相为水-乙腈梯度洗脱,流速0.9mL/min。紫外检测波长203nm,柱温(40.0±0.5)℃,进样量5μL。以"中药指纹图谱超信息特征数字化评价系统"软件进行评价。结果:以人参皂苷Rb1峰为参照物峰,确定14个共有峰,建立了血塞通注射液HPLC数字化指纹图谱。应用色谱指纹图谱指数F等参数对不同批次血塞通注射液HPLC指纹图谱的超信息特征进行了数字化评价,同时应用双定性双定量相似度法和系统指纹定量法评价血塞通注射液质量。结论:所建立HPLC数字化指纹图谱具有较好的精密度和重现性,适用于血塞通注射液药材的质量控制。     

LC／MS／MS法测定大鼠血浆中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯及药动学研究

目的：建立测定血浆中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的LC／MS／MS法,研究单体穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的药代动力学。方法：测定大鼠血浆中的穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯时,血浆样品经沉淀蛋白处理后,以甲醇-水（85：15）为流动相,采用Lichrospher C18柱分离。选用电喷雾离子源,选择反应监测方式扫描,负离子方式检测。结果：穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯在该条件下分离良好,保留时间分别为3．57min和4．51min。穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的线性范围均为0．02～10μg·mL^-1。定量下限均为0．02μg·mL^-1,最低检出量为0．003ng。结论：该方法简便、灵敏、专属性强,适合于穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯在大鼠体内的药代动力学研究。     

应用指纹图谱研究类方方剂配伍物质基础——二妙丸物质基础在配伍类方中的变化研究

为探索类方方剂配伍规律的科学内涵和研究途径,依据类方方剂的配伍特征,用一组抗湿热型痛风二妙丸类方（二妙丸、三妙丸、四妙丸、加味四妙丸）研究基本方效应物质基础在类方配伍中的作用及配伍变化。将二妙丸类方组方药有效部位正交组合,抗湿热型痛风效应评价,分析显示基本方二妙丸有效部位在配伍类方中起重要作用。建立二妙丸类方有效部位群GC、HPLC 四张指纹图谱,充分反映各类成分色谱峰信息,并进行组方药的归属分析,HPLC/MS/MS、GC/MS/MS 分析各共有峰成分种类及结构特征,分析比较二妙丸有效部位共有峰数目、相对峰面积比值配伍类方前后的变化。研究显示,基本方二妙丸是类方物质基础的主要来源,配伍前后相对含量的变化与其类方功效的变化密切相关。     

山楂中化学成分的UPLC/ESI-TOF/MS分析

目的建立山楂中化学成分的超高液相/电喷雾–飞行时间/质谱（UPLC/ESI-TOF/MS）的分析方法。方法 Acquity UPLC BEH C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相0.1%甲酸水溶液–乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min,柱温50℃,检测波长范围260~360 nm,进样量1μL。ESI离子源,飞行时间质谱检测器,对比对照品进行鉴别。结果共鉴定出13个化合物,分别为苹果酸（1）、枸橼酸（2）、绿原酸（3）、花青素B2（4）、表儿茶素（5）、花青素B3（6）、牡荆素葡萄糖苷（7）、芦丁（8）、金丝桃苷（9）、异槲皮苷（10）、槲皮素（11）、熊果酸（12）、熊果醇（13）。结论建立了一种简单、快速的UPLC/ESI-TOF/MS方法对山楂中化学成分进行了鉴定。