丁酸钠对体外培养的卵巢癌细胞生长影响及其机制探讨

目的：观察丁酸钠(sodilium butyrate，NaB)对体外培养的卵巢癌细胞3AO生长的影响，初步探讨其作用机制。方法：以人卵巢上皮癌细胞株3AO为肿瘤模型。采用不同浓度的NaB对其进行干预。MTT比色法测定NaB对3AO细胞增殖活性的影响，进一步通过光镜、电镜观察3AO细胞的形态学改变，进行DNA降解分析，并采用流式细胞技术分析细胞周期动力学变化。结果：NaB作用下3AO细胞的增殖呈时间剂量依赖模式受到抑制。一定浓度的NaB作用一定时间，可诱导3AO细胞发生凋亡。光镜和电镜下可见典型的凋亡细胞形态学改变。DNA降解分析中出现典型的梯形条带。流式细胞技术分析发现NaB作用首先引起细胞周期分布的改变，随剂量的加大和用药时间的延长。凋亡率逐渐升高。结论：NaB通过诱导凋亡而抑制体外培养的3AO细胞生长，其机制可能与细胞G1期阻滞有关。     

三氧化二砷对人肝癌细胞作用的研究

目的：应用体外培养的肝癌细胞株(SMMC-7721)观察砷剂(As2O3)的凋亡诱导作用。方法：采用MTT法检测As2O3对肝癌细胞增殖的影响，DNA电泳及流式细胞仪检测不同浓度As2O3作用不同时间对肝癌细胞的凋亡诱导作用及细胞周期的影响。结果：As2O3抑制肝癌细胞的增殖并具有剂量-时效关系；As2O3可使肝癌细胞周期改变，与浓度有关，与作用时间未见明显关系；As2O3诱导肝癌细胞发生凋亡，并与浓度、时间有关。结论：As2O3能抑制肝癌细胞增殖，改变肝癌细胞周期，诱导肝癌细胞凋亡。     

三氧化二砷对人白血病细胞株NB4和K562及MOLt4的增殖、周期及凋亡的影响

目的：观察三氧化二砷(As2O3)对人白血病细胞株NB4、K562、MOLt4的增殖，周期及凋亡的影响。方法：采用台盼蓝拒染法计数活细胞数．并计算细胞生长率；细胞涂片经Wright-Giemsa染色，光镜下观察细胞的形态；流式细胞仪解析细胞周期。结果：1)As2O3能够抑制NB4、K562、MOLt4细胞的增殖。2)4μmol/L As2O3能够使K562细胞发生M期阻滞。但NB4、MOLt4细胞未见明显改变。3)2、4μmol/L的As2O3处理NB4、MOLt4和K562细胞48h．NB4、MOLt4细胞株的凋亡细胞明显增多。但是．K561细胞未见明显改变。结论：As2O3不但对NB4细胞具有抑制增殖．诱导细胞凋亡的作用．而且对非，t(15：17)的K562、MOLt4细胞也具有抑制增殖的作用．同时诱导MOLt4细胞凋亡．使K562细胞发生M期阻滞。     

六亚甲基二乙酰胺对K562细胞作用的实验研究

目的：研究六亚甲基二乙酰胺（HMBA）体外对K562细胞的抑制增殖、诱导凋亡和促进分化的作用。方法：MTT法检测不同浓度HMBA对于K562细胞的增殖抑制率；流式细胞仪（FCM）检测HMBA对于K562细胞周期分布的影响；Annexin V／PI染色方法检测HM—BA诱导K562细胞凋亡的作用；通过瑞氏染色、联苯胺染色和FCM检测分化抗原研究K562细胞分化情况。结果：HMBA可以抑制K562细胞增殖，1、2、3和4mmol／L对K562细胞增殖抑制率分别为21．97％、36．05％、41．56％和47．59％；HMBA可以阻滞K562细胞周期，主要表现为G0／G1期的阻滞；HMBA诱导K562细胞凋亡的作用不明显，4mmol／L的HMBA对K562细胞诱导凋亡率〈5％；HMBA处理后，瑞氏染色显示K562细胞有一定程度的成熟表现，联苯胺染色基本为阴性；K562细胞膜表面CD11b、CD14、CD68和胞质内溶茵酶抗原的表达在HMBA处理前后均为阴性。结论：HM—BA可以抑制K562细胞的增殖，提示具有一定的治疗作用；HMBA对K562的作用机制和阻滞细胞周期有关，诱导凋亡不是主要作用机制；HMBA有促进K562细胞分化的迹象，但分化方向和机制有待进一步研究。     

TRAIL协同多柔比星高效杀伤骨肉瘤细胞

目的：研究TRAIL与多柔比星联合应用对骨肉瘤细胞的杀伤作用，探寻骨肉瘤临床化疗的新方案。方法：将TRAIL与多柔比星单独及联合应用于体外培养的骨肉瘤OS-732细胞，采用MTT法检测细胞毒性作用，流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例，并镜下观察凋亡细胞超微结构改变。结果：50ng／mL的TRAIL与5μg／mL多柔比星合用于OS-732细胞24h时后，测细胞抑制率为85．47％，明显高于单用TRAIL（50ng/mL）时的9．68％及单用多柔比星（5μg／mL）时的18．41％，P〈0．01。细胞超微结构观察及凋亡率测定均显示。合用比单用有更多的骨肉瘤细胞凋亡。结论：TRAIL与多柔比星可协同、高效杀伤骨肉瘤细胞。这种杀伤效应是通过促进肿瘤细胞的凋亡来实现的。     

细胞凋亡与活性氧

随着对细胞凋亡机制研究深入，具有凋亡诱导作用的药物不断被发现，可以通过不同的手段在不同阶段进行干预细胞凋亡而治疗疾病。许多研究表明活性氧（reactive oxygen species，ROS），即氧自由基及其衍生物与细胞凋亡密切相关。ROS在多种抗肿瘤药物诱导凋亡过程中起着介导和调节作用。本文就近年来有关ROS及药物参与下诱导细胞凋亡研究进展作一综述。     

细胞凋亡与活性氧

随着对细胞凋亡机制研究深入，具有凋亡诱导作用的药物不断被发现，可以通过不同的手段在不同阶段进行干预细胞凋亡而治疗疾病。许多研究表明活性氧（reactive oxygen species，ROS），即氧自由基及其衍生物与细胞凋亡密切相关。ROS在多种抗肿瘤药物诱导凋亡过程中起着介导和调节作用。本文就近年来有关ROS及药物参与下诱导细胞凋亡研究进展作一综述。     

三氧化二砷诱导人鼻咽癌细胞凋亡的实验研究

目的：研究三氧化二砷(As2O3)体外抑制人鼻咽癌细胞株(CNEl)增殖及诱导凋亡的作用。方法：以不同浓度的As2O3处理CNEl，用四甲基噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况，细胞染色方法现察细胞凋亡的形态，原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞，流式细胞仪检测细胞的DNA含量。结果：As2O3明显抑制人鼻咽癌细胞株CNEl细胞的增殖，其抑瘸作用优于颇铂(DDP)和5-氟尿嘧啶(5-FU)。As2O3作用于细胞后，可见典型凋亡细胞的形态学改变：细胞核固缩，染色质凝集，核碎裂，凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA线条图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”。结论：As2O3可明显抑制人鼻咽癌细胞株CNEl的生长和促进细胞凋亡的作用。     

苯丙氨酸解氨酶诱导人白血病HL-60细胞凋亡的初步研究

目的：研究笨丙氨酸解氨酶(L-Dhenvlalanine ammonia—lvase，PAL)对白血病HL-60细胞生长的抑制作用，探讨其作用机制。方法：应用MTT比色法观察PAI．对HL-60细胞的生长抑制作用．应用倒置显微镜和DNA琼脂糖凝胶电泳技术分析细胞凋亡。结果：PAL与HL-60细胞共育时，能明显抑制细胞生长，半数抑制浓度(IC50)为3．02U／mL；细胞呈典型的凋亡形态学改变，细胞皱缩，染色质凝集，沿核膜内侧分布，可见新月形；细胞DNA裂解成180～200bp及其倍数的片段．电泳得到特有的梯形条带，凋亡率与PAL剂量和作用时间呈依赖关系。结论：PAL能抑制HL-60细胞的生长，诱导细胞凋亡是其抗肿瘤的作用机制之一。     

香菇多糖对肺癌化疗的辅助作用：40例配对分析

香菇多糖（ｌｅｎｔｉｎａｎ）是一种生物反应调节剂，本文用病例配对法对化疗同时应用香菇多糖及单化疗进行对照，各４０例，在一般条件相仿情况下，经治疗后观察到香菇多糖体对机体的一般状况（ＫＰＳ法），ＮＫ细胞活性，Ｔ细胞亚群中ＣＤ３，血红蛋白及血小板升高有一定作用，说明香菇多糖对患者化疗后的免疫功能有调节保护作用，且未发现不良副反应。     

三氧化二砷联合氟尿嘧啶抗人结肠癌Lovo细胞作用及其机制的研究

目的：探讨三氧化二砷(As2O3)与氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠腺癌细胞株Lovo的影响及其作用机制。方法：经不同浓度的As2O3和(或)5-FU处理Lovo细胞后，采用MTT法测定细胞的增殖抑制效应；AO／EB荧光染色、DNA电泳、电镜和流式细胞术观察细胞凋亡和形态学及细胞周期变化；免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达的变化。结果：与As2O3或5-FU单药作用相比，As2O3与5-Fu联合应用可显著增强人结肠癌细胞增殖抑制作用和诱导结肠癌细胞凋亡作用，联合用药后细胞周期分布发生改变，S期和G2／M期细胞比例下降，G0／G1。期细胞比例上升，癌细胞bcl-2基因表达明显下降，bax和Fas基因表达显著增强。结论：As2O3与5-FU联合应用具有显著协同抗大肠癌作用．其机制可能与增强诱导大肠癌细胞凋亡、细胞周期特异性药物与细胞周期调控剂联合增效以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

丁酸钠对体外培养的卵巢癌细胞生长影响及其机制探讨

目的 :观察丁酸钠 (sodiumbutyrate ,NaB)对体外培养的卵巢癌细胞 3AO生长的影响 ,初步探讨其作用机制。方法 :以人卵巢上皮癌细胞株3AO为肿瘤模型 ,采用不同浓度的NaB对其进行干预 ,MTT比色法测定NaB对 3AO细胞增殖活性的影响 ,进一步通过光镜、电镜观察 3AO细胞的形态学改变 ,进行DNA降解分析 ,并采用流式细胞技术分析细胞周期动力学变化。结果 :NaB作用下 3AO细胞的增殖呈时间剂量依赖模式受到抑制 ,一定浓度的NaB作用一定时间 ,可诱导 3AO细胞发生凋亡 ,光镜和电镜下可见典型的凋亡细胞形态学改变 ,DNA降解分析中出现典型的梯形条带 ,流式细胞技术分析发现NaB作用首先引起细胞周期分布的改变 ,随剂量的加大和用药时间的延长 ,凋亡率逐渐升高。结论 :NaB通过诱导凋亡而抑制体外培养的 3AO细胞生长 ,其机制可能与细胞G1期阻滞有关。     

p38MAPK抑制剂SB203580抑制人绒癌JAR细胞的体外侵袭作用

目的：研究p38MAPK通路在人绒癌JAR细胞体外侵袭中的作用。方法：用细胞ELISA法测定JAR细胞中p38MAPK的活性变化，用Transwell细胞侵入系统检测细胞的侵袭作用。结果：PMA呈浓度依赖性地激活JAR细胞中p38MAPK,PMA能促进人绒癌JAR细胞的体外侵袭作用，而p38特异性抑制剂SB203580抑制了JAR细胞的侵袭能力。结论：p38MAPK通路在人滋养细胞的侵袭行为以及人绒癌的形成中具有重要作用，P38抑制剂可能会为人绒癌的防治提供新的途径。     

药物诱导胰腺癌细胞凋亡研究进展

许多药物可以诱导胰腺癌细胞发生凋亡。诱导细胞凋亡可能是药物抑制胰腺癌细胞生长的机制之一。药物诱导胰腺癌细胞凋亡有一系列机制，随着对其机制的进一步阐明，诱导细胞凋亡有望成为治疗胰腺癌的重要手段，并将更好地指导胰腺癌药物治疗的研究与实践。     

水杨酸钠对HL—60／VCR细胞多药耐药的部分逆转

目的：研究水杨酸钠(Na-Sal对HL-60／VCR细胞多药耐药的部分逆转作用。方法：采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术等方法，观察非甾体抗炎药Na-Sal对HL-60／VCR细胞多药耐药的部分逆转作用。结果：Na-Sal对HL-60／VCR细胞的生长具有抑制作用并表现出剂量依赖性，1mmol/L的非细胞毒剂量的Na-Sal和化疗药物联合应用可以提高多种化疗药物的细胞毒性作用，逆转倍数为1．01-3．26，相对逆转效率为0．52％-73．62％。流式细胞仪测定细胞内柔红霉素(DNR)浓度发现，Na-Sal并不增加HL-60／VCR细胞内DNR浓度。结论：Na-Sal能有效地部分逆转HL-60／VCR细胞的多药耐药性。     

青蒿琥酯对K562细胞凋亡诱导作用及其与亚砷酸的协同作用

目的：研究青蒿琥酯体外诱导K562细胞凋亡的作用及其与亚砷酸的协同作用.方法： 采用MTT法、透射电镜技术、流式细胞术检测青蒿琥酯或（和）亚砷酸作用后K562细胞的凋亡发生情况.结果：青蒿琥酯抑制K562细胞的增殖,IC50值为12.41 μg/mL,其有时间、剂量-效应关系;12.50～50.00 μg/mL的青蒿琥酯可诱导K562细胞凋亡,并具有一定的时间剂量-效应关系;12.50μg/mL青蒿琥酯与1.00 μmol/L亚砷酸联合作用于K562细胞48 h后,凋亡率为21.07%,与阴性对照（1.87%）、单独应用青蒿琥酯（7.45%）、亚砷酸（2.57%）相比,差异有统计学意义,χ^2次为1 128.39、335.47和1 058.40,P值均为0.000.结论： 青蒿琥酯对K562细胞具有凋亡诱导作用,并且与亚砷酸具有协同作用.     

丙戊酸钠对Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖的影响及机制

目的 研究丙戊酸钠对Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖的影响及其机制.方法 细胞计数法检测不同浓度丙戊酸钠处理Raji细胞后细胞的增殖活性,制作生长抑制曲线.流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.Westernblot检测细胞周期蛋白cyclin D1和p21、凋亡抑制基因survivin的变化.结果 丙戊酸钠能明显抑制Raji细胞的增殖,其作用表现为剂量依赖性和时间依赖性(P＜0.01).流式细胞仪检测发现以3 mmol/L的丙戊酸钠处理Raji细胞后细胞阻滞于G0/G1期,其凋亡率呈时间依赖性上升(P＜0.01).Western blot检测发现3 mmol/L丙戊酸钠处理后Raji细胞cyclin D1表达明显下调而p21表达明显上调(均P＜0.05).survivin表达显著下降(P＜0.01).结论 丙戊酸钠对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞具有明显的增殖抑制作用,其作用机制与细胞周期和诱导凋亡有关.     

紫杉醇对骨肉瘤细胞放射增敏作用的研究

目的观察体外环境下紫杉醇对骨肉瘤（osteosarcoma,OS）细胞的放射增敏效果及其与药物作用时间的关系。方法以MG-63细胞为实验对象,采用MTT法检测不同浓度紫杉醇（6、0.6、0.06、0.006和0.000 6μg/mL）对MG-63细胞的抑制作用,确定IC10作为后续实验的药物浓度;采用克隆形成分析法分别测定MG-63细胞在紫杉醇作用24h后照射以及单纯照射的存活分数（SF）,拟合细胞生存曲线并计算放射增敏比,分析紫杉醇对MG-63细胞的放射增敏作用;采用克隆形成分析法测定紫杉醇作用于MG-63细胞12、24和36h后细胞生存率的变化,确定最佳照射时间。组间比较采用单因素方差分析。结果 MTT实验结果显示,当紫杉醇浓度分别为0.000 6、0.006、0.06、0.6和6μg/mL时,其细胞抑制率分别为（3.25±2.58）%、（9.98±3.83）%、（20.35±3.91）%、（21.55±3.70）%和（55.36±4.67）%。提示,紫杉醇对MG-63细胞的生长抑制作用呈浓度依赖性,F=83.70,P〈0.01,IC10为0.01μg/mL;IC10浓度紫杉醇増敏比分别为1.14（D0比）、1.20（Dq比）和1.08（SF2比）;MG-63细胞α/β值为2.23,IC10浓度紫杉醇作用后α/β值为2.32。紫杉醇作用于MG-63细胞12、24和36h后再进行照射,细胞存活分数分别为（9.21±0.81）%、（5.39±0.75）%和（0.38±0.13）%,显著低于对照组的（12.86±1.07）%,差异有统计学意义,F=144.11,P〈0.01。结论紫杉醇对MG-63细胞有放射增敏作用,增敏作用呈时间依赖性,有一定的临床应用前景。     

吲哚美辛诱导肝癌HepG2细胞凋亡及其对cyclin E蛋白表达的影响

目的　观察吲哚美辛诱导肝癌 Hep G2细胞凋亡 ,及其对 cyclin E蛋白的影响。方法　采用 MTT比色法观察吲哚美辛对肝癌 Hep G2细胞增殖的影响 ;采用流式细胞仪检测吲哚美辛对 Hep G2细胞周期分布的影响 ,同时结合透射电子显微镜观察吲哚美辛诱导肝癌 Hep G2细胞凋亡的作用 ;免疫细胞化学方法观察吲哚美辛对Hep G2细胞周期调控蛋白 cyclin E的影响。结果　吲哚美辛可抑制肝癌 Hep G2细胞的增殖 ,诱导其凋亡 ,改变细胞周期分布 ,使 G0 /G1 期细胞比例增高 ,S期比例降低 ,同时还可使 cyclin E蛋白表达下降。上述作用具有剂量和时间依赖性 (P<0 .0 5 )。结论　吲哚美辛可诱导肝癌 Hep G2细胞凋亡 ,改变细胞周期分布 ,影响细胞周期调控蛋白表达 ,从而抑制细胞增殖。     

维生素E琥珀酸酯诱导耐药白血病K562／ADM细胞凋亡的研究

目的：研究维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate，VES)对多药耐药白血病K562／ADM细胞的诱导凋亡作用及分子机制。方法：以体外培养的K562／ADM细胞为研究对象，采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)比色法检测细胞增殖活性，Wright-Giemsa染色、DNA凝胶电泳和流式细胞术(flow cytometry，FCM)检测细胞凋亡；FCM测定细胞Fas、Bcl-2和p53蛋白表达水平。结果：VES可显著抑制K562／ADM细胞的生长及增殖，P=0．004。光镜下可见K562/ADM细胞呈典型凋亡的形态学改变。DNA凝胶电泳显示典型的凋亡DNA梯形条带。FCM细胞周期分析显示，G1期阻滞，亚G1期细胞比例增高，P=0．005；Fas蛋白表达明显上调，P=0．002；Bcl-2蛋白表达下调，P=0．00～0；p53蛋白表达无明显变化。结论：VES可诱导K562/ADM细胞凋亡，作用机制可能与其上调Fas表达和下调Bcl-2表达有关。