丙型肝炎病毒检测方法的应用评价

目的评价酶联免疫吸附法（ELISA法）检测丙型肝炎病毒核心抗原（HCV—cAg）和抗体（HCV—Ab）以及反转录多聚酶链反应（RT—PCR）检测丙肝RNA,了解三种方法对丙肝病毒检测的优点和缺点。方法采用HCV—cAgELISA试剂盒．HCV—AbELISA试剂盒和丙肝病毒PCR检测试剂盒对来自临床的225例样本进行HCV—cAg、HCV—Ab和HCV—RNA检测。结果225例样本中检出抗HCV阳性28例,其中HCV—cAg阳性14例,RT—PCR阳性16例,剩余的197例抗HCV阴性标本中,检出HCV—cAg阳性3例,其中RT—PCR阳性2例。结论RT—PCR技术检测HCV—RNA是判断丙肝感染的最有效方法。HCV核心抗原检出时间早于抗体,联合运用抗HCV和HCV—cAg或者抗HCV和HCV—RNA检测HCV,能有效降低HCV—Ab检测带来的漏检风险。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的临床评价

[目的]对研制的丙型肝炎病毒核心抗原（HCV—cAg）ELISA检测试剂进行临床特异性及敏感性评价。[方法]制备抗HCV-核心区（Core）抗原四株单克隆抗体，研制出双抗体夹心检测HCV～core抗原酶联免疫检测（ELISA）试剂。三家临床单位收集抗HCV阴性样品3040份，HBsAg阳性100份，抗HIV阳性40份，从10万份抗-HCV筛查出临界样品28人份。[结果]3040份阴性样品检测有3份HCV—cAg阳性，3份经HCVPCR检测有1份阳性，100份HBsAg阳性，40份抗HIV阳性样本检测均为阴性，在10万份抗HCV抗体筛查样品中，选择28份抗-HCV检测临界样品进行HCV—cAg检测，有4份阳性，4份HCV—cAg阳性样品中有3份HCV—RNA检测阳性。[结论]研制的双抗体夹心HCV-核心抗原ELISA试剂具有很好的特异性和灵敏度。     

HCV核心抗原酶联免疫检测与HCV—RNA定量检测敏感性的比较

[目的]比较ELISA法测定总HCV—cAg与荧光定量PCR法测定HCV—RNA两种检测方法对诊断HCV感染的敏感性,分析HCV—cAg ELISA法诊断试剂的重要意义。[方法]ELISA法测定血清样本中的HCV抗体,改进型ELISA法测定血清样本中的HCV—cAg,实时荧光定量PCR法测定血清样本中的HCV—RNA,阳性样本经重复实验确认。[结果]通过用HCV抗体检测试剂对门诊病人或献浆员进行筛查,获得HCV抗体阳性血清样本264例。对这些病例别进行ELISA法测定总HCV—cAg实验和荧光定量PCR法测定HCV—RNA实验,测到HCV—cAg阳性病例101例,HCV—RNA阳性病例115例。经统计学分析,两种检测方法的敏感性差别不太大（0．01〈P〈0．05）。[结论]HCV—cAgELISA法检测和HCV—RNA定量检测具有相近的敏感性,日存某种稗序上HCV—cAg ELISA法榆测可以作为HCV—RNA定量榆测的有效替代。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床应用价值

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法的临床应用价值。方法对20例HCV抗体(HCV-Ab)阳性标本和200例HCV-Ab阴性标本进行HCV-cAg测定,同时采用核酸扩增进行HCV-RNA对照测定。结果20例HCV-Ab检测阳性的标本中HCV-cAg阳性8例,200例HCV-Ab检测阴性的标本中HCV-cAg阳性3例;以HCV-RNA聚合酶链反应(PCR)检测为对照,HCV-cAg检测试剂盒的敏感性为88.3%,特异性为99.5%。结论HCV-cAg ELISA检测方法敏感性和特异性较好,HCV-Ab和HCV-cAg联合检测可起到互补作用,提高阳性检出率,有利于早期诊断。     

HCV核心抗原检测在血液筛查中的初步研究

目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV cAg)醇免检测试剂用于血液筛查的应用价值.方法 同时用抗HCV抗体和HCV cAg酶免检测试剂平行筛查血液,对HCV抗体阴性样本用Chiron Procleixa TMA系统检测HCV RNA.结果 1 762份无偿献血者样本中,抗HCV阳性12份(0.68％),HCV cAg阳性10份(0.57％),阳性检出率差异无统计学显著性意义(P＞0.05),抗HCV及HCV cAg同时阳性4份(0.23％).1 750份抗HCV阴性样本中,其中HCV cAg阳性样本6份,HCV RNA全为阴性.结论 在血液筛查中增加HCV cAg检测,对降低HCV的输血传播危险具有一定价值.     

树状DNA杂交技术在HCV检测中的应用

目的：建立一种敏感性,特异性,重复性较好的,适同原体群体筛查的检验方法。方法：通过RT－PCR－DDH,RT－nested-PCR和HCV RNA－DDH3种方法检测HCV核酸,推断RT－PCR－DDH技术检测病毒核酸的特异性,敏感性和稳定性。结果：47份ELISA检测HCV抗体阳性血清标本,RT－nested-PCR检出阳性标本33例（70．21％）,RT－PCR－DDH检出阳性标本39例（82．98％）,结论：RT－PCR－DDH技术在逆转录病毒核酸检测的应用中具有较好的特异性,敏感性和稳定性,而且成本较低,操作安全简便,适于中小实验室和基层医院病原微生物的检测。     

用酶联免疫夹心法测定肝炎患者血清丙型肝炎抗原

目的建立血清中丙肝病毒NS3抗原（HCAg-NS3）的酶免检测方法。方法以特异性强、敏感度高、识别不同HCAg-NS3抗原表位的HCAg-NS3单克隆抗体和高效价的纯化抗-HCV分别作为包被抗体和酶标记抗体，采用夹心ELISA法测定血清中HCAg-NS3抗原。结果优化了酶免疫反应条件；该方法对HCAg-NS3的最低检测限为1—2ng／ml；批内（n=13）及批间（n=3）变异系数（CV）分别为4．51％和5．64％；对52例抗-HCV阳性血清测定HCAg-NS3抗原的检出率为21．2％，对15例HCAg-NS3阳性标本测定HCV RNA的检出率为60％，1350例抗-HCV阴性的其他类型肝炎患者血清标本中，HCAg-NS3检出率为1．7％，50例正常人血清标本的HCAg-NS3抗原测定结果均为阴性。结论该方法敏感性较高，特异性、重复性和稳定性均良好，可以作为早期诊断HCV感染的有效方法。     

丙型肝炎抗原检测

目的探讨在HCV感染早期,HCV Ab为阴性时用酶联免疫法检测HCV核心抗原的试验方法的可行性。方法用重组HCV核心抗原,免疫小鼠制备单克隆抗体,对HCV核心抗原进行酶联免疫法检测。结果HCV核心抗原检测灵敏度高可达5ng/ml,用酶联法对11份HCV Ab阴性,HCV RNA阳性标本检测9份阳性。结论酶联免疫法检测HCV核心抗原可作为HCV感染早期的抗原检测方法,较HCV RNA检测法简便、快速,可以作为核酸检测法的一种简易替代方法。     

丙型肝炎病毒抗体联合核酸定量检测对丙型肝炎患者的早期诊断价值研究

目的：探讨在丙型肝炎患者早期诊断中丙型肝炎病毒抗体联合丙型肝炎病毒核酸（HCV RNA）检测的临床价值。方法对116例鼓楼医院住院及门诊丙型肝炎患者采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定HCV RNA、酶联免疫吸附试验（ELISA）和金标法测 HCV抗体、速率法测丙氨酸氨基转移酶（ALT ）。结果116例丙型肝炎患者中,ELISA HCV抗体阳性97例（占83．6％）,HCV RNA阳性85例（占73．3％）,HCV 金标阳性77例（占66．4％）,ALT阳性69例（占59．5％）,HCV抗体和 HCV RNA联合检测总阳性率（指任-指标阳性即为阳性）为100．0％。结论 HCV抗体和HCV RNA联合检测扩大了丙型肝炎检测范围,降低了丙型肝炎的漏诊率,有利于丙型肝炎的早期诊断。     

两种荧光定量法检测HCV RNA结果的比较

目的建立双探针荧光定量HCV RNA检测方法，分析其定量检测HCV RNA的灵敏度和特异性以及HCV RNA含量与患者病情的相关性。方法选取100例抗HCV抗体阳性患者，包括慢性肝炎患者45例、肝硬化患者30例、肝癌患者25例的样本，用双探针荧光定量法和两种商品荧光定量试剂方法进行HCV RNA检测，另观察近期196例抗HCV抗体阳性和48例抗HCV抗体阴性样本荧光定量PCR HCV RNA含量与肝功能的相关关系。结果荧光定量双探针法阳性率为93％（93／100）；两种商品荧光定量试剂方法阳性率分别为84％（84／100）和79％（79／100），经卡方检验差异有统计学意义（P〈0．05）。196例中抗HCV与HCV RNA阳性一致率为57．1％（116／196），其中伴肝功能改变49．0％（96／196）。HCV RNA含量与AST和ALT异常程度无显著相关性（P〉0．05），相关系数分别为0．4293及0．3899。HCV RNA高拷贝数患者肝功能异常率为85．2％（69／81），低拷贝数者肝功能异常率为40．9％（47／115），经卡方检验，X^2=38．63，差异有统计学意义（P〈0．001）。结论双探针荧光定量提高了HCV RNA检测的灵敏度和特异性，HCV RNA含量与患者肝功能损伤程度无明显相关性。     

酶联免疫吸附测定法检测H CV抗原与抗体的结果分析

目的：探讨应用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测丙型肝炎病毒（HCV）抗原、抗体。方法将 HCV-RNA PCR法检测的50例标本分为阳性组（34例,HCV-RNA阳性）、阴性组（16例,HCV-RNA阴性）,对所有标本应用ELISA法进行HCV抗原与抗体检测,对结果进行统计分析。结果阳性组 HCV 抗体阳性率、抗原阳性率均显著高于阴性组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。阳性组中,HCV抗原及抗体联合检测与 HCV-RNA检测结果的符合率为94．12％（32/34）,与 HCV抗原、抗体单独检测比较,差异有统计学意义（χ2＝20．4424,P＝0．0000）。结论 ELISA法检测HCV抗原与抗体,有助于临床准确诊断丙型病毒性肝炎。     

对血液抗-HCV筛查结果的确认分析

目的 探讨对抗－HCV ELISA阳性血液进行确认分析的重要性。方法 用第三代免疫印迹法（RIBA 3．0）对抗HCV ELISA阳性血液进行确认，并对部分样品用荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）检测HCV－RNA。结果 80份抗HCV ELISA阳性血样经RIBA确认，其中阳性38份（47．5％），可疑20份（25％），阴性22份（27．5％），c22、c33c的检出率高于c-100和NS5，而且20份RIBA 3．0可疑血样的HCV－RNA为阴性。结论 对抗－HCV阳性血液确认尤为重要，能提高诊断HCV的准确性。     

丙肝患者血清抗-HCV和HCVRNA检测效果分析

目的比较ELISA法检测抗-HCV和荧光PCR法检测HCV RNA的效果,分析荧光PCR法在血站开展的必要性,为临床输血安全提供可靠依据。方法对2013年5月1日~2014年4月31日采集的149 200份无偿献血者标本进行HCV的检测。结果 ELISA法检测抗-HCV阳性标本610例,阴性标本148590例,610例阳性标本中用荧光PCR检测出HCV RNA阳性490例,占80.32%,148 590份抗-HCV阴性标本中HCV RNA阳性298例,占0.2%。结论用ELISA法检测抗-HCV,去除抗-HCV阳性血液,在此基础上对抗-HCV阴性血液加做HCV RNA核酸检测可以确保输血安全。     

丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法酶联免疫试剂的初步临床评价

目的对研制的丙型肝炎病毒抗体（双抗原夹心）酶联免疫检测试剂进行临床评价。方法以克隆表达的HCV多表位嵌合蛋白作为包被抗原,经多表位嵌合蛋白修饰后用于标记抗原,研制HCV双抗原夹心酶联免疫检测试剂;检测血液筛查阴性标本440份,乙肝表面抗原阳性标本90份,HIV抗体阳性标本10份,梅毒螺旋体抗体阳性标本90份及丙型肝炎病毒抗体阳性标本259份。结果对259份HCV抗体阳性标本进行检测时,有3份标本未检出,应用Chiron RIBA确认试剂检测后,结果为阳性。其余标本的检测结果均为阴性。结论采用HCV双抗原夹心酶联免疫检测试剂共检测889份标本,其中只有3份标本结果不一致,总符合率99．7％,敏感性和特异性较好。     

应用逆转录套式PCR检测血清丙型肝炎病毒RNA

应用逆转录套式PCR检测了经ELISA检测抗－HCV的86份血清，抗－HCV阳性血清66份，用PCR检测有37份是阳性，阳性符合率为56．1％，抗－HCV阴性血清20份，用PCR检测有8份是阳性，两种方法检测结果总符合率为57．0％。单项ALT升高、HB、HC和血液病患者HCV、RNA阳性率分别为37．5％，55．6％，62．5％和53．8％。用PCR检出HCV－RNA时间早于抗－HCV阳转时间，而且敏感性高于后者，是一种早期、灵敏及特异的HCV感染诊断方法。检测HCV－RNA有助于发现抗－HCV阴性的急、慢性丙型肝炎，根据HCV－RNA的连续检测，结合抗－HCV的消长状态，可用于丙型肝炎的预后判断和干扰素等药物疗效评价指标。     

探讨丙肝核心抗原检测在母婴传播中的应用价值

目的：探讨丙肝核心抗原检测在母婴传播中的应用价值。方法选取选取2014年1月～2015年1月在我院就诊的HCV‐Ab（ELISA）阳性产妇100例作为研究对象,产妇于生产前采集静脉血3～5 mL ,新生儿采集脐血2～3 mL 进行检测。首先使用HCV‐RNA 对100例HCV‐Ab（IGg）阳性产妇血清标本进行检测。使用HCV‐cAg、HCV‐Ab、HCVRNA三种方法对新生儿脐血标本进行检测,观察三种方法的阳性率。结果 HCVcAg阳性率与 HCV‐Ab（IgG）的阳性率比较差异具有统计学意义,P＜0．05。HCVcAg阳性率与HCV‐RNA阳性率比较,差异没有统计学意,P＞0．05。结论 HCVcAg检测在HCV母婴传播初期诊断中,可作为临床诊治的依据,值得基层医院推广。     

抗-HCV、HCV-RNA及ALT检测138例结果分析

目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）RNA与丙型肝炎抗体（抗-HCV）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）之间的关系。方法：采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定138例疑似HCV感染者血清HCV RNA,ELISA法检测抗-HCV,全自动生化分析仪测定ALT。结果：138例标本中HCV RNA和抗-HCV均阳性者108例,HCV RNA阳性而抗-HCV阴性者3例,HCV RNA阴性而抗-HCV阳性者27例。ALT水平与HCV RNA含量无显著相关性。结论：同时检测HCVRNA和抗-HCV可提高丙型肝炎患者的检出率;HCV RNA含量不能反映肝脏损伤的程度。     

维持性血液透析患者丙型肝炎病毒血清学及核酸的检测与评估

目的评估维持性血液透析患者丙型肝炎病毒感染状况，并对其相关影响因素进行初步分析。方法分别采用ELISA、实时荧光定量PCR检测122例维持性血液透析患者血清抗HCV抗体、HCV核心抗原及HCV—RNA，并且采用酶促动力法检测其转氨酶水平。结果维持性血液透析患者中，血清抗HCV抗体阳性率为29．5％（36／122），部分患者出现血清转氨酶升高；HCV核心抗原阳性率为8．2％（10／122）；HCV—RNA阳性率为27．0％（33／122）。其中，6例（4．9％）抗HCV抗体阴性者可检出HCV病毒血症，10例（8．2％）抗HCV抗体阴性者可检出HCV抗原。有输血史者和透析时间较长者的丙型肝炎病毒感染率明显增加。结论HcV感染在维持性血液透析患者中较为普遍，且感染率与输血、透析时间有关。同时检测抗HCV抗体、HCV核心抗原与HCV—RNA（或其中二项）有助于提高HCV感染诊断的敏感度。     

丙型肝炎患者血清HCV—RNA载量与抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶联合检测的意义

目的：探讨丙型肝炎患者血清HCV—RNA载量与抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶（ALT）浓度的关系。方法：采用实时荧光定量PCR法检测HCV—RNA载量,酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗-HCV,全自动生化分析仪连续监测法测定ALT活性浓度。结果：289例丙型肝炎患者的血清标本中,抗-HCV均为阳性,282份标本HCV—RNA均高于检测上限（1000IU／mL）,两种检测方法的符合率为97．6％。ALT异常率随着HCV—RNA载量的增高而升高。HCVRNA载量与ALT异常率呈正相关（r=0．968,P％0．05）。而ALT浓度变化与HCV—RNA载量并无相关性（r=0．028,P〉0．05）。结论：HCV—RNA载量与抗-HCV检测是诊断HCV感染的重要指标,HCV—RNA载量是反映HCV复制的可靠指标,结合丙氨酸氨基转移酶测定,可以帮助临床了解HCV在体内复制的状况及肝脏的损伤情况,为临床诊断HCV感染和评价抗HCV治疗效果提供可靠依据。