酶联免疫吸附试验检测麻疹IgG抗体的研究

自60年代初期麻疹疫苗问世以来,麻疹发病率与病死率大为降低,但要在一个国家和地区达到消灭麻疹的目的,必须研制更加安全有效的疫苗,此外,还需要切实可行的血清学检测手段,以供调察人群免疫水平,了解疫苗免疫效果,选择适宜的接种年令。本试验对酶联免疫吸附试验（ELISA）检测麻疹特异性IgG抗体进行了探讨,并与常规的血凝抑制试验（HI）及微量中和试验（NT）进行比较,以寻求一种敏感、特异、快速、简易、微量、准确的血清学检测方法。     

定量酶联免疫吸附试验在检测麻疹IgG抗体中的应用与比较

目的对定量酶联免疫吸附试验(ELISA)在麻疹病毒IgG抗体检测中的应用进行评价,并与传统的半定量ELISA方法做比较。方法收集2003年的92份山西省和内蒙古自治区健康成人血清,用德国维润公司定量ELISA试剂盒测定麻疹IgG抗体滴度。这些血清已经用半定量方法将抗体滴度分为阴性和1∶200、1∶800、1∶3200、1∶12800四个组。将两种方法测定的结果进行比较。结果定性测定结果分析发现,92份血清标本中,5份阴性,1份可疑,86份阳性,与传统半定量ELISA方法的一致率为96·74%,统计分析两实验结果差异无显著的统计学意义。定量测定结果分析发现,随着抗体滴度的增高,该组血清抗体国际单位(IU)也随之上升,均数也随之增高,抗体滴度分组与抗体IU呈明显的正相关,相关系数(rs)为0·963,P<0·000。可重复性检验证明该试剂的可重复性较好。结论定量ELISA方法在麻疹以及其它病毒血清学研究中的应用具有优势。     

应用酶联免疫吸附试验测定麻疹抗体

<正> 我们取12份麻疹血清,应用 ELISA 方法检测其抗体,并与通常使用的血凝抑制试验(HI)作对比测定,结果报告如下:一、材料:新制备麻疹抗原,对照细胞抗原,系病毒所供给,稀释度均为1:20.待测血清12份.酶标记马抗入 IgG,系病毒所制备,效价为1     

麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验试剂的比较和评价

目的对目前中国市场上已有的两种麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）试剂（德国Virion／Serion试剂和德国IBL试剂）进行比较和评价,筛选适用于2006年全国人群麻疹血清流行病学调查的试剂。方法以蚀斑减少中和试验（Plague Reduction Neutralization Test,PRNT）的检测结果为“金标准”,分别用两种ELISA试剂检测52份麻疹IgG抗体组合血清,然后对试剂的定性和定量能力进行全面分析和评价。结果两种ELISA试剂均能正确的将13份PRNT结果为阴性的血清判定为阴性,特异度均为100％。两种试剂中,Virion／Serion试剂的敏感度为94．9％,与PRNT结果的相关性Kappa值为0．902,相关系数为0．878（P〈0．01）;IBL试剂敏感性为58．8％,与PRNT结果的相关性Kappa值为0．441,相关性系数为0．850（P〈0．01）。结论Virion／Serion试剂的特异性、敏感性较好,有单孔IgG抗体定量能力,价格适中,适于在自动化工作平台工作站中开展大规模血清样本的检测。     

定量酶联免疫吸附试验在检测风疹IgG抗体中的应用

1995—2005年,上海市每年报告风疹病例100例左右,发病率控制在1/10万以下。上海市最近一次大流行在1993年,全市共报告病例58 104例,报告发病率达451.57/10万。实验室风疹检测是风疹监测工作的重要组成部分,疑似病例的最后实验室确诊对风疹疫情的预警发挥重要作用。酶联免疫吸附试验(ELISA)是检测风疹IgG抗体最常用的实验室血清学检测方法,传统的ELISA通过血清稀释将阳性血清标本的抗体含量划分为<1∶20、1∶20、1∶80、1∶20、1∶1 280 5个滴度,是一种半定量检测方法。近年来,定量酶联免疫吸附试验得到广泛的应用[1,2],能获得准确的抗…     

应用间接过氧化物酶试验和酶联免疫吸附试验检测轮状病毒特异性抗体IgG

作者报告了一种简单的方法——间接过氧化物酶试验(IPA)检测血中轮状病毒抗体,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)作对照试验。 IPA的方法是:用轮状病毒SA-11株感染MA-104细胞,待细胞呈中度病变后,用胰酶消化下细胞层,经PBS洗涤2次,然后把含有10~6细胞/ml悬液滴加于玻片上,室温干燥,丙酮固定;滴加被检血清,至湿盒37℃45分钟,洗涤并干燥;加入抗人IgG     

定量与半定量酶联免疫吸附试验在麻疹IgG抗体检测中的比较

[目的]通过对麻疹病毒IgG抗体定量酶联免疫吸附试验(ELISA)与传统半定量酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较,评价传统半定量ELISA法的实用价值.[方法]随机抽取2008年的180份云南省保山市两所边远小学小学生血清,用德国维润公司定量ELISA试剂盒测定麻疹IgG抗体.这180血清已经用半定量方法将抗体滴度测出,之后将两种方法测定的结果进行比较.[结果]定性结果分析发现,180份血清标本中,8份阴性,3份可疑,162份阳性,与传统半定量ELISA方法的一致率为96.05%,统计分析两实验结果差异无统计学意义(P>0.05),Kappa检验得两法存在高度一致性(Kappa值=0.677,P<0.001).同时得出传统半定量法的灵敏度为95.86%,特异度为100%,阴性似然比为0.04,正确指数为95.86%,阳性预测值为98.18%,阴性预测值为53.33%.定量测定方面,随着抗体滴度的增高,该组血清抗体国际单位(IU)也随之上升,抗体滴度分组与抗体IU明显的正相关,相关系数(rs)为0.41,P<0.001.[结论]通过本次定量与半定量EHSA法在麻疹IgG抗体检测中的比较发现,半定量法的定性、定量结果一定程度上已经能够较好反映人群麻疹抗体水平,对麻疹的监测仍具有重要的实用意义.     

酶联免疫吸附试验检测森林脑炎IgG抗体的研究

本文报告了用ELISA技术检测森脑病毒IgG抗体的实验条件和方法，并与HIT和CFT作了比较。抗原由感染鼠脑经鱼精蛋白处理-聚乙二醇浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化制备。共检测了109份血清，结果发现ELISA与HIT的检出符合率为93.6%，与CFT的检出符合率为86.2%；ELISA与HIT和CFT的相应检出滴度相关非常显著（rHIT=0.9550，rCFT=0.8912，P<0.001），且比HIT和CFT分别敏感10~80倍及50~200倍，未发现与乙脑免疫血清存在交叉反应。ELISA技术特异性和重复性均好，所需标本量少且不需预先处理，可代替常规方法用于森脑的临床诊断、血清流行病学调查等研究。     

酶联免疫吸附试验用于脊髓灰质炎IgG抗体测定

脊髓灰质炎中和抗体测定,是了解人群中抗体水平与婴幼儿免疫成功率的主要指标。现应用的微量细胞中和抗体测定,其方法繁琐、周期较长,给基层单位常年开展polio监测带来一定困难。为简化polio抗体检测方法,我们于1989年8～10月采用酶联免疫吸附法(ELISA),对本市正常人及疫苗免疫前、后双份血清做IgG抗体测定,同时用微量细胞中和试验(NT)法作比较,实验结果如下。     

酶联免疫吸附试验与中和抗体试验检测麻疹抗体比较研究

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)和中和抗体试验(NT)在麻疹抗体检测中的应用价值。方法以NT为"金标准",同时用德国Virion/Serion的定量ELISA试剂盒检测364份麻疹抗体滴度,将两种方法测定的结果进行比较。结果 NT的阳性率为57.69%,几何平均滴度(GMT)为1∶5.48,ELISA的阳性率为42.86%,平均抗体活性值为48.57IU/L。定性结果发现,ELISA特异度为99.35%,其敏感度即阳性符合率为73.81%,且阳性符合率随着滴度增加呈现增高的趋势(z=-5.99,P<0.001)。Fisher精确概率法发现,滴度1∶2组、滴度1∶4组与其他各组阳性符合率差异均有统计学意义(P<0.05),滴度1∶8组与滴度≥1∶64组阳性符合率差异有统计学意义(P<0.05),其余各组间阳性符合率差异均无统计学意义(P>0.05)。定量结果发现,ELISA抗体活性值与NT滴度呈明显正相关,相关系数r=0.884,P<0.001。结论德国Virion/Serion的定量ELISA试剂盒在检测低滴度麻疹抗体时易出现假阴性,检测高滴度麻疹抗体时,两种方法敏感性接近;滴度临界值为1∶8～1∶16。该试剂可推荐用于健康人群麻疹抗体水平监测。     

麻疹血凝抑制试验和酶联免疫吸附试验的应用比较

为了比较用于检测麻疹抗体的血凝抑制 (HI)试验和酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,1998年河北省采用这两种方法平行检测了麻疹疫苗 (MV)强化免疫前后 1～ 2 4岁人群的血清 1317份。结果显示 :MV强化免疫前HI抗体和ELISAIgG抗体阳性率分别为 99 78%和 95 2 2 % ,抗体几何平均滴度 (GMT)分别为 1∶36 15和 1∶812 15 ;强化免疫后 ,HI抗体和ELISAIgG抗体阳性率分别为 10 0 0 0 %和 99 88% ,抗体GMT分别为 1∶91 6 5和 1∶2 15 8 17,强化免疫前后分别比较 ,差别均有非常显著的统计学意义。两种方法阳性符合率为 98 33% ,ELISAIgG抗体的GMT比HI抗体的GMT高 2 3 5 5倍 ,两种方法具有较密切的相关关系 ,相关系数r=0 73,95 %可信区间为 (0 70 ,0 75 ) ;所建回归方程为 :Log^Y =- 0 32 10 0 6 +0 6 70 75 6LogX0 。两种方法平行检测 5 8份强化免疫前后双份血清抗体≥ 4倍增长情况 ,符合率为 82 76 %。结果表明 ,两种检测方法用于麻疹抗体检测相关性较好 ,符合率较高。     

酶联免疫吸附试验和荧光定量PCR在麻疹检测中的应用比较分析

目的通过检测麻疹疑似病例,分析比较酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR法(RT-PCR),为检测方法的选择提供科学依据,以尽早确诊和控制疾病。方法应用ELISA法检测新余市2014年-2016年161例疑似麻疹血清标本中麻疹病毒Ig M抗体,RT-PCR检测其咽拭子样本中麻疹病毒RNA。结果 161例疑似病例中,ELISA法检测麻疹病毒Ig M抗体阳性29例,阳性率为18.01%;RT-PCR检测麻疹病毒RNA阳性44例,阳性率为27.33%;实验室确诊总阳性数45例,总阳性率为27.95%。2种方法的检测结果差异有统计学意义(χ~2=3.534,P0.05),ELISA法和RT-PCR法的灵敏度分别为64.44%、97.78%。在出疹后3 d内,ELISA法检测的阳性率显著低于RT-PCR法,差异有统计学意义(χ~2=3.899,P0.05)。结论 RT-PCR的检测阳性率和灵敏度显著高于ELISA法,RT-PCR法可用于麻疹早期的快速诊断;同时应规范完善麻疹疫苗的接种。     

酶联免疫吸附试验检测肉毒毒素

自Ermengen(1896)发现肉毒毒素引起肉毒中毒以来,普遍采用小鼠毒力测定和中和试验检测肉毒毒素。该法需耗费较多动物和时间,人们便致力于寻找比较快速、敏感和特异的检测方法,如琼脂扩散法、电免疫扩散、放射免疫测定、间接血凝和酶联免疫吸附试验(ELISA)等血清学方法。其中以间接血凝最为敏感和快速,可在60分钟内检出约1个小鼠LD_(50)/ml A型毒素,但影响因素多,结果不稳定。琼脂扩散不能定量。放射免疫测定的敏感高又能定量,但半衰期短,操作和设     

酶联免疫吸附试验和血球凝集抑制试验检测健康人群麻疹抗体比较

为了解上海市健康人群麻疹抗体状况,在上海市黄浦区和金山区对505名健康人采血,用血球疑集抑制（HI）试验和酶联免疫吸附试验（ELISA）平行检测。结果HI试验的阳性率为99.01％,几何平均滴度（GMT）为1∶26.00;ELISA试验则为93.66％和1∶1303.46。HI抗体滴度高者ELISA－IgG抗体滴度也高,两种方法的相关系数（r）为0.58（P＜0.0005）。但HI试验检测阴性5份,ELISA试验检测阴性32份,两种方法的阳性符合率为94.4％。两种方法的特点是HI试验检测的是麻疹血凝素抗体,包括IgM和IgG抗体;ELISA试验检测的是麻疹病毒全抗体,包括血凝素、血溶素的IgG和核蛋白等。分析了ELISA试验检测≥7岁5个年龄组抗体阳性率低于HI试验的影响因素,以及金山区各年龄组麻疹抗体高的原因。     

麻疹中和试验对酶联免疫吸附试验的质量控制探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)检测麻疹IgG抗体的质量控制方法。方法2003年对3个年龄组的294份ELISA法检测麻疹IgG抗体后的血清,用中和试验加以证实。结果两种方法相关,但差异较大,相关系数0.423~0.684,阳性符合率64.76%~98.24%。结论排除两种试验方法本身敏感性的差异,麻疹ELISA-IgG试剂盒质量的稳定性、操作方法的精确性等问题值得关注,必须确保血清学检测方法标准化。     

酶联免疫吸附试验间接法检测水痘带状疱疹病毒IgG抗体方法的建立及应用

以１号水痘带状疱疹病毒（ＶＺＶ１）为毒种,制备酶联免疫吸附试验特异抗原,并以Ｖｅｒｏ－Ｅ６基质细胞抗原作对照,用ＥＬＩＳＡ间接法测定ＶＺＶ ＩｇＧ抗体。方法特异性经中和试验、封闭性阻断试验,检测事实状疱疹病人双份血清抗体滴度比较证实;其敏感性比间接免疫荧光法（ＩＦＡ）高数十倍;重现性经４８份血清３次重复测定平均ＯＤ值无显著差异。与Ｂｉｏｓｅｅｄ抗ＶＺＶ抗体ＩｇＧ ＥＬＩＳＡ试剂盒测定结果比较阳性符     

酶联免疫吸附试验在微囊藻毒素检测中的应用进展

微囊藻毒素(MCs)是蓝绿藻属产生的一类密切相关的环状七肽毒素,其毒性主要表现在特异性抑制细胞内的蛋白磷酸酶(分别为PP1和PP2A)。目前有关微囊藻毒素分析检测的研究方法有高效液相色谱(HPLC)、质谱(LC-MS)、蛋白磷酸酶抑制试验(PPIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等,本文主要介绍了应用酶联免疫吸附法检测MCs的研究进展,并对ELISA在天然水中检测微囊藻毒素的应用前景进行了展望。