搜风祛痰法对ApoE基因敲除小鼠主动脉易损斑块炎症反应及PPARγ基因表达的影响

目的 观察搜风祛痰中药复方稳斑汤对动脉粥样硬化（AS）ApoE基因敲除小鼠不稳定斑块炎症反应及动脉组织过氧化物酶增殖体激活型受体γ（PPAR-γ）基因表达的影响.方法 建立ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块模型,并设立空白组、模型组、西药组、稳斑汤低、中、高剂量组.实验周期1个月,麻醉处死小鼠取主动脉组织HE染色后在光学显微镜下进行病理学观察,然后采用半定量RT-PCR技术检测PPAR-γ基因表达的变化.结果 与空白组相比,模型组PPAR-γ基因表达量明显增加（P＜0.01）;与模型组相比,西药组及稳斑汤各剂量组均能增加PPAR-γ基因表达量（P＜0.01）;与西药组相比,稳斑汤高剂量组增加PPAR-γ基因表达量无差异（P＞0.05）.光镜下观察中药各剂量组和西药组炎症反应均明显弱于模型组.结论 ApoE基因敲除小鼠AS不稳定斑块的形成与发展和炎症因子密切相关,搜风祛痰中药复方稳斑汤能够抑制斑块内的炎症反应并上调实验性AS不稳定斑块ApoE基因敲除小鼠PPAR-γ基因表达.     

搜风祛痰中药复方对AopE基因敲除小鼠动脉粥样硬化易损斑块Beclin-1和Bcl-2基因表达的影响

目的:观察搜风祛痰中药复方稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化易损斑块Beclin-1和Bcl-2基因表达的影响。方法:建立ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块模型,并设立空白组、模型组、西药组、稳斑汤低、中、高剂量组。13周后将小鼠麻醉处死,取经HE染色的主动脉组织在光学显微镜下进行病理学观察,并采用半定量RT-PCR技术检测Beclin-1和Bcl-2基因表达的变化。结果:与空白组相比,模型组Beclin-1mRNA表达水平明显下降(P0.01);与模型组相比,西药组和稳斑汤各剂量组均能提高Beclin-1mRNA表达水平(P0.01);与西药组相比,中药高剂量组Beclin1mRNA表达水平无明显差异(P0.05)。与空白组对比,模型组Bcl-2mRNA表达水平显著降低(P0.05);与模型组相比,西药组和稳斑汤各剂量组均能提高Bcl-2mRNA表达水平(P0.01);与西药组相比,稳斑汤高剂量组Bcl-2mRNA表达水平无明显差异(P0.05)。光镜下观察西药组和稳斑汤各剂量组炎症反应均明显弱于模型组。结论:搜风祛痰中药复方稳斑汤可能通过上调ApoE基因敲除小鼠AS易损斑块中Beclin-1和Bcl-2的基因表达而干预AS不稳定斑块的形成及破裂,具有良好的心血管保护作用。     

稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠AS不稳定斑块凋亡相关基因Caspase-3表达的影响

目的观察稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块凋亡相关基因半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法利用6～8周龄ApoE基因敲除小鼠建立动脉粥样硬化不稳定斑块模型,并随机分为空白对照组,模型组,稳斑汤低、中、高剂量组,他汀组。空白对照组及模型组均给予0.9%氯化钠溶液灌胃,稳斑汤低、中、高剂量组及他汀组分别给予不同剂量稳斑汤及阿托伐他汀钙片干预。采用HE染色进行主动脉组织病理学观察,利用反转录PCR法检测Caspase-3 m RNA水平。结果与空白对照组比较,模型组Caspase-3 mRNA表达水平均升高(P 0.05);与模型组比较,稳斑汤中、高剂量组Caspase-3 m RNA表达水平均降低(P 0.05);与他汀组比较,稳斑汤中、高剂量组Caspase-3 m RNA表达水平无明显差异(P 0.05)。镜下观察斑块面积,模型组小于稳斑汤各剂量组和他汀组。结论稳斑汤可能通过下调ApoE基因敲除小鼠AS不稳定斑块凋亡相关基因Caspase-3的表达来干预动脉粥样硬化不稳定斑块的形成及破裂。     

稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响

目的:观察稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响。方法:选取6～8周ApoE基因敲除小鼠建立动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块模型,随机分为空白对照组,模型组,他汀组,稳斑汤低、中、高剂量组。空白对照组和模型组分别予以生理盐水灌胃,西药组及稳斑汤低、中、高剂量组分别予以阿托伐他汀及不同剂量稳斑汤干预。取小鼠主动脉组织HE染色进行病理学观察,并采用蛋白质印迹法(免疫印迹试验)检测Bax、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组的Bcl-2蛋白表达水平均降低(P0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达水平均升高(P0.05);与模型组比较,稳斑汤不同剂量组Bcl-2的蛋白表达水平均升高(P0.05),Caspase-3、Bax的蛋白表达水平均降低(P0.05);与他汀组比较,稳斑汤高剂量组Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达水平无明显差异(P0.05)。光镜下观察稳斑汤各剂量组和他汀组斑块面积均小于模型组。结论:稳斑汤可能通过下调ApoE基因敲除小鼠AS不稳定斑块凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达,上调其Bcl-2的表达来干预AS不稳定斑块的形成及破裂。     

稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化不稳定斑块HSP70表达的影响

目的 观察搜风祛痰法中药复方稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化（AS）不稳定斑块HSP70表达的影响.方法 ApoE基因敲除小鼠高质饮食喂养13周后,待其形成成熟的AS斑块,随机分为模型组、稳斑汤低剂量组、稳斑汤中剂量组、稳斑汤高剂量组、西药组、空白对照组.各组相应处理13周后,取主动脉组织HE染色后在光学显微镜下进行病理学观察,然后采用免疫组化和RT-PCR技术检测HSP70的表达水平.结果 治疗组主动脉组织中HSP70表达水平高于对照组（P＜ 0.05或P＜0.01）,稳斑汤高剂量组HSP70表达水平与西药组无明显差异（P＞0.05）.结论 搜风祛痰中药复方稳斑汤可通过影响HSP70以稳定易损斑块,其机制可能与HSP70对心血管系统的保护作用相关.     

黄连提取物对ApoE基因敲除小鼠主动脉易损斑块Perilipin和PPAR-γ基因表达的影响

目的 观察黄连提取物对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化（AS）易损斑块内周脂素（perilipin）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）基因表达的影响,探讨黄连提取物稳定AS斑块的作用及可能机制。方法 33只6～8周龄ApoE基因敲除小鼠予高脂饮食喂养13周,待其形成成熟的AS斑块后,随机分为3组：模型组、黄连提取物组、辛伐他汀组（阳性对照组）,每组11只。继续高脂喂养,并按体重比折算给予小鼠临床推荐剂量的相应药物治疗13周,处死动物,每只小鼠分别取主动脉根部的4个切面,分别行HE染色和Movat染色,观察并计算各组小鼠主AS斑块内埋藏纤维帽的平均数目,实时荧光定量PCR法检测主动脉内perilipin和PPAR-γmRNA的表达。结果 给药13周后,黄连提取物组斑块内埋藏纤维帽的数目与模型组比较明显减少（P<0.05）,并且斑块内perilipin mRNA的表达与模型组比较显著降低（P<0.05）,而PPAR-γmRNA的表达较模型组显著增加（P<0.01）。结论 在临床推荐剂量上,黄连提取物可显著减少ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样斑块破裂次数,有助于稳定易损斑块,其机制可能与促进小鼠AS斑块内PPAR-γmRNA表达,抑制perilipin mRNA表达有关。     

稳斑汤对AopE基因敲除动脉粥样硬化小鼠不稳定斑块TLR4的影响

目的研究稳斑汤防治动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块形成和破裂的可能作用机制。方法采用高脂饲料喂养Apo E基因敲除小鼠建立AS模型,将造模成功的60只小鼠随机分为模型对照组、西药组和稳斑汤低、中、高剂量组,每组12只;另将C57BL/6J小鼠12只设为空白对照组。空白对照组不予处理,模型对照组给予每天0.3 ml的生理盐水;稳斑汤低、中、高剂量组分别给予稳斑汤6.175、12.35、24.7 g/(kg·d),西药组给予阿托伐他汀钙片27.3 mg/(kg·d),均每日灌胃1次,给药13周。取腹主动脉,进行HE染色病理观察,检测各组Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达水平。结果模型对照组血管腔内可见明显的粥样硬化斑块出现,斑块内可见大量泡沫细胞,偶见炎性细胞浸润;稳斑汤中、高剂量组及西药组动脉内膜大部分较为光滑,偶见内膜不全。模型对照组腹主动脉组织中TLR4 mRNA的表达水平明显高于空白对照组(P0.01);稳斑汤低、中、高剂量组及西药组TLR4 mRNA的表达水平明显低于模型对照组(P0.01)。稳斑汤低、中剂量组TLR4 mRNA水平明显高于西药组(P0.01),而稳斑汤高剂量组与西药组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论稳斑汤降低AS小鼠腹主动脉组织中TLR4 mRNA的表达可能是其防治AS斑块的形成和破裂机制之一。     

搜风祛痰中药复方对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块HO-1和PPARγ表达的影响

目的观察搜风祛痰中药复方对Aop E基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块血红素氧化酶(HO-1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的影响。方法将造模成功的Apo E基因敲除小鼠,分别给予阿托伐他汀以及低剂量、中剂量、高剂量稳斑汤干预,模型对照组采用生理盐水灌胃。给药13周后,取腹主动脉脉,取小鼠主动脉组织HE染色进行病理学观察,并采用免疫组化和RT-PCR技术检测HO-1和PPARγ的表达水平。结果各组小鼠腹主动脉组织中HO-1和PPARγ的表达水平治疗组明显高于模型对照组(P0.01)。结论搜风祛痰中药复方稳斑汤可能通过影响HO-1和PPARγ的表达而干预AS斑块形成及破裂。     

搜风祛痰中药复方对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块HO-1和HSP70表达的影响

目的观察搜风祛痰中药复方对Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块HO-1和HSP70的影响。方法将造模成功的Apo E基因敲除小鼠,分别给予阿托伐他汀钙以及低剂量、中剂量、高剂量稳斑汤干预,模型组和空白对照组采用生理盐水灌胃。给药13周后,采用免疫组化和RT-PCR技术检测HO-1和HSP70的表达水平。结果与空白对照组相比,模型组HO-1和HSP70阳性表达量明显减小(P0.01);与模型组相比,西药组及稳斑汤各剂量组均能增加HO-1和HSP70阳性表达量(P0.05或P0.01);与西药组相比,中药高剂量组增加HO-1和HSP70阳性表达量无差异(P0.05)。结论搜风祛痰中药复方稳斑汤可能通过影响HO-1和HSP70的表达而干预AS斑块形成及破裂。     

解毒活血法对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块PPAR-γ和炎性因子的影响

目的:研究解毒活血法对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块PPAR-γ(过氧化物酶体增殖物激活受体)和血清炎性因子的影响。方法:将ApoE-/-小鼠分为模型组、辛伐他汀组、罗格列酮组、黄连解毒汤组、血府逐瘀组、黄连解毒汤加血府逐瘀汤组、四妙勇安汤大剂量组、四妙勇安汤小剂量组共8组,采用免疫组化技术和原位杂交技术法分别检测小鼠动脉粥样硬化斑块内PPAR-γ蛋白和mRNA表达;血清Hs-CRP、IL-1测定采用酶联免疫吸附(双抗体夹心)法。结果:四妙勇安汤与模型组比较,可以显著提高动脉粥样硬化斑块内PPAR-γ的mRNA表达,其作用强度约为罗格列酮的96%,PPAR-γ蛋白表达阳性面积与模型组比较无显著性差异,但有明显增加趋势,与辛伐他汀作用强度类似;四妙勇安汤可以显著降低ApoE-/-小鼠血清hsCRP水平,但对血清IL-1水平无明显影响。结论:四妙勇安汤具有抗动脉粥样硬化作用,其机制可能是通过提高ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块PPAR-γ的mRNA表达、降低血清HsCRP水平而抑制炎症反应,从而抑制动脉粥样硬化斑块的炎症反应,达到稳定斑块、防治动脉粥样硬化疾病的作用。     

新活络效灵丹对ApoE基因敲除早期动脉粥样硬化小鼠Cav-1、SR-BI的影响

目的:观察新活络效灵丹对ApoE基因敲除小鼠早期动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块面积及对Cav-1、SR-BI表达的影响,探讨新活络效灵丹抗早期AS斑块的可能机制。方法:采用高脂饲料喂养ApoE基因敲除小鼠建立AS模型,将45只小鼠随机分为西药组、模型组、新活络效灵丹组,另将10只C57BL/6J小鼠设为空白组,连续给药13周后测量计算各组斑块面积及斑块/管腔面积比值(PA/ALA),检测各组主动脉Cav-1 mRNA、SR-BI mRNA表达水平。结果:与模型组比较,西药组斑块面积显著缩小,PA/ALA显著降低;中药组与模型组比较,斑块面积、PA/ALA均有显著改变;模型组小鼠主动脉组织中Cav-1 mRNA、SR-BI mRNA表达水平低于空白组;西药组表达水平高于模型组,中药组表达水平明显高于模型组,中西药组表达水平比较差异无统计学意义。结论:新活络效灵丹具有预防AS斑块形成的作用,是提高AS小鼠主动脉组织Cav-1 mRNA、SR-BI mRNA表达机制之一。     

消溶稳斑方对不稳定斑块及AMPK/SIRT1通路的影响

目的拟通过观察消溶稳斑方对AMPK/SIRT1通路的影响,进一步探索消溶稳斑方对ApoE~(-/-)小鼠主动脉弓不稳定斑块的作用机制。方法 ApoE~(-/-)小鼠经高脂饲料喂养8周,确定主动脉弓形成不稳定斑块后,随机分为ApoE+高脂+水组、ApoE+高脂+他汀组、ApoE+高脂+消溶稳斑方组,同时选用C57BL/6J小鼠经标准饲料喂养8周作为C57+标准+水组。各组分别进行灌胃,他汀组和消溶稳斑方组给予对应药物,余两组给予同等容量蒸馏水。4周后,通过电镜观察各组主动脉弓斑块特点,各组小鼠经提取主动脉弓蛋白和RNA后,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其AMPK磷酸化、SIRT1水平,利用RT-PCR技术检测其IKKβmRNA、MMP-9mRNA表达量。结果与C57+标准+水组相比,各组都存在不同程度的动脉粥样硬化斑块。与ApoE+高脂+水组比较,他汀组和消溶稳斑方组动脉粥样斑块明显减小,AMPK磷酸化水平均升高(P0.05),SIRT1值均升高(P0.05),IKKβmRNA、MMP-9mRNA表达量均降低(P0.05)。结论消溶稳斑方具有抑制斑块炎症基因,减少炎症反应,延缓形成并稳定斑块的作用,其机制与调节AMPK/SIRT1通路有关。     

新活络效灵丹对ApoE基因敲除早期动脉粥样硬化小鼠TGF-β的影响

目的:观察新活络效灵丹对ApoE基因敲除小鼠AS早期斑块的病理形态学改变及转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响,探讨新活络效灵丹抗AS早期斑块的可能机制。方法:采用高脂饲料喂养ApoE基因敲除小鼠建立AS模型,将45只小鼠随机分为模型组、西药组、中药组,另将C57BL/6J小鼠10只设为空白对照组。在造模的同时即给予药物干预,空白对照组不予处理,模型组予以生理盐水0.3 m L/d,中药组给予新活络效灵丹9.67 g/(kg·d),西药组给予阿托伐他汀钙片3.33 mg/(kg·d),均每日灌胃1次,连续给药13周。取主动脉根部,HE染色进行病理观察,采用RT-PCR技术检测各组TGF-βmRNA的表达水平。结果:模型组主动脉内形成明显的AS斑块,并出现脂质核心,泡沫细胞增多,大量的巨噬细胞的浸润;西药组管壁可见AS斑块,斑块面积明显小于模型组;中药组斑块面积显著减少,部分内膜较为光滑。模型组小鼠主动脉组织中TGF-βmRNA表达水平明显低于空白对照组(P0.01);西药组、中药组小鼠主动脉组织中TGF-βmRNA表达水平明显高于模型对照组(P0.05或P0.01),而中药组小鼠主动脉组织中TGF-βmRNA表达水平高于西药组,但2组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:新活络效灵丹在一定程度上可通过上调保护性因子TGF-β以抑制免疫炎性反应,发挥抗动脉粥样硬化的作用,可能是其防治AS早期斑块的形成机制之一。     

降浊升清法对抗动脉粥样硬化炎症反应及干预NF-κB的动物实验研究

目的:探讨降浊升清汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样斑块炎症反应及NF-κB的影响.方法:ApoE基因敲除小鼠给予高脂饲料喂养,利用HE染色法确定造模成功后,小鼠随机分为3组中药组、西药组及空白组,分别给药后用HE染色观察小鼠斑块的形成,用原位杂交法检测NF-κB mRNA的表达,研究降浊升清法抗动脉粥样硬化及对炎症信号的抑制作用.结果:给药后,中药组与空白组对照NF-κB的阳性率的表达有统计学意义,中药组与西药组对照对动脉组织中NF-κB的阳性率的表达无统计学意义.结论:降浊升清汤与辛伐他汀均可抑制动脉组织中NG-κB的表达,通过改善斑块内部成分来稳定易损斑块,具有程度不同的调脂作用,其机制可能与调节脂质代谢和抑制炎症反应有关.说明降浊升清汤该方药对动脉硬化炎症反应有一定的改善和调节作用.     

活血、益气、化痰中药对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块炎症反应的影响

目的探讨活血、益气、化痰中药对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化（AS）斑块成分和炎症反应的影响及其稳定AS斑块作用可能机制。方法70只6～8周龄小鼠ApoE基因敲除小鼠予高脂饮食喂养13周后,待其形成成熟的AS斑块后,随机分为活血组（予丹参酮）、益气组（予西洋参茎叶总皂苷）、化痰组（予瓜蒌提取物）、模型组、阳性对照组（予辛伐他汀）、正常组,相应处理13周后,处死取主动脉根部染色、测量并计算脂质核心占斑块总面积的百分比以及斑块内脂质成分与胶原成分的比值,免疫组织化学染色法观察小鼠主动脉根部粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测主动脉内核转录因子κB（NF-κB）mRNA的表达。结果在斑块内脂质核心面积、斑块内脂质成分与胶原成分比值方面,益气、化痰组较模型组均有不同程度的降低;活血组斑块内脂质成分与胶原成分比值明显降低,而斑块内脂核面积与模型组相近。与模型组相比,益气、活血、化痰组小鼠主动脉根部斑块内GM-CSF表达明显减少,对小鼠主动脉斑块内TNF-α表达无明显影响。活血组小鼠主动脉斑块内NF-κBmRNA的表达较模型组降低。结论活血、益气、化痰中药可通过改善斑块内部成分以稳定易损斑块,其机制可能与抑制炎症反应有关。     

通心络胶囊干预载脂蛋白E基因敲除小鼠CEC、ET机理的研究

目的通过观察通心络胶囊对载脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠循环内皮细胞（CEC）、小鼠内皮素（ET）水平的干预变化,探究其对ApoE基因敲除小鼠冠状动脉粥样硬化（AS）的调节作用和机理。方法将40只ApoE基因敲除小鼠作为实验组,建立冠状AS模型,随机分为模型组等5组。结果通心络胶囊干预后,通心络胶囊高、中、低剂量组和辛伐他汀组、模型组相比,通心络胶囊高剂量组在造模后第4、8、12周血中CEC均明显低于模型组,中剂量组在造模后第4周和第12周时血中CEC与模型组相比显著降低。模型组小鼠血清ET含量高于正常组,通心络胶囊各剂量组小鼠血清ET含量均低于模型组。结论通心络胶囊能降低ApoE基因敲除小鼠CEC、ET水平,具有调节血管内皮细胞功能和抑制炎症因子的作用。     

搜风祛痰中药对动脉粥样硬化ApoE基因敲除小鼠IL-1β及IL-18的影响

目的 探究搜风祛痰中药对动脉粥样硬化的治疗机制。方法 将完成造模程序的ApoE基因敲除小鼠随机分为5大组别,包括模型组,中药低、中、高剂量组和西药组;空白对照组选用C57BL/6小鼠。对照组和模型组予生理盐水灌胃,中药组和西药组分别予不同剂量的搜风祛痰中药及阿托伐他汀干预。HE染色观察斑块面积,Western Blot法检测IL-1β及IL-18水平。结果 模型组较对照组斑块面积增大,且IL-1β以及IL-18指标均有一定的提高(P<0.05);中药各组及西药组较模型组斑块面积缩小,且IL-1β以及IL-18指标均有一定的降低(P<0.05);中药高剂量组与西药组IL-1β及IL-18指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论搜风祛痰中药可以实现IL-1β及IL-18的下调效果,缩小斑块面积,这或许为其治疗动脉粥样硬化的机制之一。     

褪黑素对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的抑制作用

目的:研究褪黑素时ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响.方法:选用ApoE基因敲除小鼠作为动脉粥样硬化的动物模型,给予褪黑素干预治疗6周后,检测褪黑素对ApoE基因敲除小鼠氧自由基代谢状态及动脉粥样硬化的影响.结果:与正常对照组小鼠相比,ApoE基因敲除小鼠血清及肝组织丙二醛(MDA)含量明显增加,而血清及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)的含量显著降低;褪黑素治疗后可明显增加SOD的活性,降低MDA的含量,并可以减少ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块的面积.结论:褪黑素能有效的抑制ApoE基因敲除小鼠体内氧化应激反应,增强其抗氧化能力,从而抑制动脉粥样硬化的形成及发展.     

温阳活血解毒方稳定ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块机制研究

【目的】 探讨温阳活血解毒方防治动脉粥样硬化（AS）不稳定斑块发生发展的可能作用机制。【方法】 以高脂饲料喂养 50 只 8 周龄雄性载脂蛋白 E 基因敲除（ApoE-/-）小鼠 13 周,复制动脉粥样硬化模型。将模型小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组（2.6 mg·kg-1·d-1）和中药低、中、高剂量组（14.08、28.16、56.32 g·kg-1·d-1）,每组9只。分组后次日起各给药组开始灌胃给药,每日1次,连续灌胃给药13周;模型组灌胃等体积生理盐水。采用苏木素-伊红（HE）染色观察主动脉组织病理学变化;用干化学法在全自动生化仪上检测血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平;分别采用蛋白免疫印迹（Western Blot）法和实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测主动脉组织中小凹蛋白1（Caveolin-1）和磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）的蛋白及mRNA表达水平。【结果】 与模型组比较,中药高剂量组及辛伐他汀组小鼠主动脉胆固醇结晶明显减少,斑块明显趋于稳定,血清中TC、TG、LDL-C水平明显降低,HDL-C水平明显升高（均P＜0.01）,主动脉组织中Caveolin-1蛋白的表达量明显增加,p-ERK1/2蛋白的表达量明显降低（均P＜0.05）。与模型组比较,各给药组主动脉组织Caveolin-1 mRNA、p-ERK1/2 mRNA表达水平均无明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）。且与辛伐他汀组比较,中药高剂量组在稳定斑块、调节血脂水平、Caveolin-1蛋白表达水平方面无明显差异（P＞0.05）。【结论】 温阳活血解毒方可调节血脂水平,增加动脉粥样硬化斑块稳定性,其机制可能与上调Caveolin-1蛋白表达抑制ERK1/2信号通路的激活有关。     

补肾祛痰化瘀法对载脂蛋白E基因敲除小鼠氧化应激水平的影响研究

目的评估不同周龄载脂蛋白E（ApolipoproteinE,ApoE）基因敲除小鼠的氧化应激水平,并探讨补肾祛痰化瘀法对ApoE基因敲除小鼠氧化应激水平的影响。方法将成年组及老年组ApoE基因敲除小鼠共32只随机分为中药组及对照组,并取相同遗传背景的C57BIV6J小鼠共16只随机分成成年正常组及老年正常组,连续给予补肾祛痰化瘀法组方灌胃12周,成年组至28周龄、老年组至44周龄时予检测脑组织超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathioneperoxidase,GSH．Px）活力,及丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平;并进行甲苯胺蓝染色观察海马CAl区神经细胞分布情况及尼氏体数量,免疫组化法检测8-羟基脱氧鸟苷（Oxo．2’-deox—yguanosine,8-OHDG）表达情况。结果氧化应激水平均符合正态分布,故采用单因素方差分析进行数据统计。ApoE基因敲除小鼠及C57小鼠28周龄时脑内氧化应激水平无明显差异;随着小鼠的周龄的增加,至44周时,老年ApoE基因敲除小鼠对照组其脑内MDA及8-OHDG表达水平明显增高,而SOD及GSH—Px表达水平明显降低,与老年正常组C57小鼠的脑内氧化应激水平具有明显差异（P〈0．05）;而老年中药组与老年正常组相比,无明显差异。结论老年ApoE基因敲除小鼠氧化应激水平较高,而补肾祛痰化瘀法具有一定的抗氧化作用,可抵抗部分机体氧化作用,并控制机体氧化应激水平。