医用几丁糖对角膜碱烧伤后新生血管的抑制作用

目的观察医用几丁糖对角膜碱烧伤后新生血管的抑制作用。方法NaOH烧伤兔角膜制作角膜碱烧伤模型,随机分为碱烧伤组（碱烧伤）和几丁糖组（碱烧伤＋2％医用几丁糖滴眼）。分别于1、4．7、14d观察两组兔角膜新生血管生长情况,HE染色计算多形核粒细胞（PMN）数量,兔疫组化染色测定血管内皮生长因子（VEGF）的活性。结果几丁糖组新生血管较碱烧伤组生长缓慢,PMN计数及VEGF表达较碱烧伤组均明显减少。结论医用几丁糖可抑制碱烧伤后角膜新生血管的形成。     

化学伤后睑球粘连动物模型的建立

目的 建立标准的化学伤后睑球粘连动物模型，观察睑球粘连发生的规律和病理特点。方法 12只新西兰大白兔随机分为A组：1mol／L氢氧化钠溶液结膜囊滴入烧伤组；B组：2mol／L氢氧化钠溶液结膜囊滴入烧伤组；C组：2mol／L氢氧化钠浸泡滤纸角结膜贴附烧伤组；D组：2mol／L氢氧化钠浸泡滤纸结膜贴附烧伤组共4组，观察睑球粘连发生效率。另外14只新西兰大白兔采用滤纸结膜烧伤方法建立睑球粘连动物模型，观察烧伤后眼表组织的变化规律和病理改变。结果 A、B、c3组模型中9眼均出现角膜穿孔、眼球萎缩。滤纸结膜烧伤17眼中仅1眼出现角膜穿孔。烧伤后4周时8睑球粘连模型中5眼为中度，3眼为重度。烧伤后1周成纤维细胞量、炎性细胞、增生细胞核抗原阳性表达细胞与第2、3、4周差异有统计学意义（P〈0．05）。烧伤后3、4周大量新生胶原纤维量生成，且胶原纤维较粗致密。结论 滤纸结膜烧伤方法是一种有效的睑球粘连动物模型的制作方法。睑球粘连的预防性治疗应在烧伤后第1周内开始。     

羊膜联合自体穹隆结膜移植治疗睑球粘连的实验研究

目的 通过动物实验研究羊膜移植联合对侧健眼穹隆部结膜移植治疗单眼重症化学烧伤所致睑球粘连的疗效。方法 将两组实验动物家兔单眼制成重度碱烧伤模型。实验组患眼施行角膜缘自体移植，羊膜移植联合对侧健眼穹隆部结膜移植，对照组患眼仅施行角膜缘自体移植，羊膜移植，于术前，碱烧伤后1个月，术后3个月分别行眼表面印痕细胞学检查和病理学检查。结果 实验组睑球粘连缓解明显优于对照组，睑球粘连缓解病例术后3个月羊膜表面皆有上皮细胞长入。结论 羊膜移植联合对侧健眼穹隆部结膜移植对睑球粘连及大面积结膜缺损有效。且优于单纯羊膜移植。     

维生素C溶液治疗石灰角结膜烧伤的疗效探讨

石灰烧伤除具有碱烧伤的一般特点外,还具有热烧伤的特点,其角结膜烧伤的主要表现是局部组织的坏死病,治疗原则主要是促进胶原合成,加速组织修复和防止角膜溃疡及穿孔的发生。维生素C在胶原合成中起重要作用,局部及全身应用,可以防止角膜溃疡和穿孔以及睑球粘连的发生。     

羊膜移植治疗早期严重角结膜烧伤疗效观察

目的 观察羊膜移植治疗早期严重角结膜烧伤的效果。方法 采用西安市眼库提供的新鲜人羊膜材料，对43例(58只眼)严重的角结膜烧伤患者在伤后7天内行羊膜移植。结果 58只眼中41只眼无睑球粘连，占70％，17只眼留有部分轻度粘连。9只眼角膜旁中央留有薄翳，49只眼角膜不规则混浊，瘢痕愈合，眼表稳定。结论 羊膜具有抗蛋白酶的活性，消除炎症细胞的入侵和炎性介质的释放，且羊膜具有抗粘连的能力，烧伤早期行羊膜移植可明显减少睑球粘连并达到早期眼表稳定。     

羊膜移植重建静止期眼结膜表面的远期疗效分析

目的研究羊膜移植重建睑球粘连分离后缺损结膜表面的远期疗效,探讨其相关的影响因素.方法对51例(55只眼)因陈旧性化学伤、热烧伤或Stevens-Johnson综合征而发生睑球粘连的患者进行睑球粘连分离联合羊膜移植手术.陈旧性化学伤33只眼中,10只眼为烧伤后5.0～11.0个月接受手术,23只眼为烧伤后1.0～8.0年接受手术.结果 51例患者术后随访26.0～30.0个月,平均(27.4±2.6)个月 .术后早期所有移植在眼结膜表面的羊膜植片均未见溃烂和溶解,周边对合良好.31只眼(56.4%)形成了足够深的穹窿部且恢复了眼球运动功能.9只眼(16.4%)发生部分睑球粘连,眼球运动轻度受限,但其面积远较术前为小.15只眼(27.3%)术后发生中度以上的睑球粘连,其中8只眼因睑闭锁而行全结膜囊成形的患眼术后1个月内结膜囊再次发生重度的睑球粘连.因Stevens-Johnson综合征而发生中度睑球粘连的4只眼术后均彻底解除了粘连.不同程度睑球粘连的患者于羊膜移植术后的效果不同,粘连程度越重,效果越差(P=0.000).眼表化学烧伤后(7.2±1.4)个月所行的手术与烧伤后1年以上行羊膜移植术的预后效果比较,差异有显著意义(P=0.039).不同泪液分泌组间预后效果比较,差异有显著意义(P=0.000),干眼症越严重,效果越差.结论羊膜可有效重建睑球粘连分离后缺损的结膜表面,部分患眼可能需要多次手术才能获得较好效果.患眼术前睑球粘连和干眼程度以及是否残存部分结膜上皮等移植微环境将影响羊膜移植重建眼结膜表面的远期疗效.     

新鲜和保存羊膜移植重建结膜眼表的临床对比研究

目的：比较新鲜羊膜和保存羊膜治疗睑球粘连的疗效差异，分析影响疗效的因素。方法：共51例55只眼因陈旧性化学伤、热烧伤或Stevens—Johnson综合征而发生睑球粘连的临床连续病例接受睑球粘连分离联合新鲜羊膜移植（22只眼）或保存羊膜移植（33只眼）。其中男30例32只眼．女21例23只眼。年龄4～51岁．平均（34．2±4.3）岁。其中11只眼在烧伤后5～11个月，平均（7．4±1．6）个月时接受手术，40只眼在烧伤后1～8年，平均（2．0±0．7）年进行手术。结果：术后随访12-32个月，平均（19．3±4．1）个月。所有移植存结膜眼表面的羊膜（包括新鲜羊膜）植片在术后早期均未见溃烂和溶解，周边对合良好。31／55（56．4％）只眼形成了足够深的穹窿部且恢复了眼球运动功能。9／55（16．4％）只眼发生部分睑球粘连，眼球运动轻度受限，但其面积远较术前为小。15／55（27.3％）眼术后发生中度以上的睑球粘连。新鲜羊膜和保存羊膜重建眼结膜表面的效果相似（X2=0．466，P=0．797）；不同程度睑球粘连的患者其羊膜移植术后的效果不同（新鲜羊膜．X2=27．995，P=0．000；保存羊膜，X2=33．610，P=0．000）；在眼表烧伤后1年内手术比1年以上进行羊膜移植的效果也不同（X2=4、243，P=0．039）。结论：新鲜羊膜和保存羊膜一样可以有效地用于重建睑球粘连解除后的结膜眼表。患眼术前睑球粘连程度以及烧伤后其眼表炎症是否处于安静状态等因素都会直接影响羊膜移植重建眼结膜表面的远期疗效。     

结膜瓣覆盖治疗角膜碱烧伤中MMP-9和TIMP-1的表达

目的：研究结膜瓣覆盖术治疗兔角膜碱烧伤中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的表达机制。方法：将50只兔随机分成实验组及对照组,每组分别25只,建立兔角膜烧伤模型。实验组在角膜烧伤后当天行结膜瓣覆盖术。采用免疫组化法测定两组角膜碱烧伤后不同时间点MMP-9和TIMP-1的表达。结果：MMP-9在角膜碱烧伤后的3d开始升高,14d达到最高,之后逐渐下降;而TIMP-1在伤后即有表达,7d有所下降,于14d达到最低,21d达到峰值。实验组MMP-9的表达均明显低于对照组,且角膜碱烧伤后的3,14,21d和28d差异有统计学意义（P〈0.05）;而TIMP-1则明显高于对照组,且角膜碱烧伤后3,14d和21d差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：角膜碱烧伤的病理损伤及修复过程中,MMP-9及TIMP-1的表达密切相关。结膜瓣覆盖治疗重度角膜碱烧伤的疗效确切。     

中空隔离眼片对眼外伤后睑球粘连的预防作用

目的　观察自行改制的中空隔离眼片对眼外伤后睑球粘连的预防作用。方法　睑结膜及球结膜热烧伤或化学伤后的患眼 ,冲洗后于结膜囊内置入中空隔离眼片 ,防止睑球粘连的发生。结果　 9例中只有 1例发生轻度睑球粘连。结论　睑结膜及球结膜外伤后结膜囊内置入中空隔离眼片可有效地防止睑球粘连的发生。     

羊膜移植在眼表疾病的临床应用

目的 探讨和评估新鲜羊膜移植治疗眼表疾病的疗效.方法 对结膜肿物,睑球粘连,碱烧伤,酸烧伤,热灼伤共24例(28眼)施行新鲜羊膜移植术,术后观察眼表重建情况,羊膜植片情况,术后视力情况,随访4-18个月.结果 24例(28眼)均未发生新鲜羊膜植片的排斥反应.2 5眼一次羊膜移植术后结膜、角膜上皮化痊愈,眼表重建成功.睑球粘连的患者第三眼位复视消失.1眼发生睑球粘连,2眼角膜部分上皮缺损,再次行羊膜覆盖术,术后随访完成上皮化,术后视力不同程度提高.结论 新鲜羊膜移植能有效的促进上皮细胞的分化移行、抑制局部的炎症反应、阻止新生血管和瘢痕的形成、阻止烧伤的病理发展,是治疗眼表疾病的一种积极有效的治疗方法.     

羊膜移植修复碱烧伤后结膜缺损的实验研究

目的 对羊膜移植修复碱烧伤后结膜缺损的作用机制进行研究。方法 建立碱烧伤结膜缺损动物模型。对实验组进行羊膜移植，观察羊膜生长情况，并于术后3、5、7、14、21d取活体组织进行组织学检查，结果 术后1周羊膜植片颜色接近正常结膜，组织学检查证实羊膜与创伤处结缔组织紧密结合，结膜上皮沿缝合处爬行至羊膜表面，羊膜上仅有轻微的纤维增生，无瘢痕组织形成。结论 保存人羊膜移植能有效地促进碱烧伤后结膜上皮化的进行，减少瘢痕形成，最终减少并发症的产生。     

促红细胞生成素小干扰RNA对兔角膜新生血管的抑制作用

目的：评估促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)在兔角膜新生血管发病机制中的作用,并观察促红细胞生成素小干扰RNA(siRNA)对角膜新生血管的抑制作用。

方法：健康新西兰白兔22只,随机分为实验组及正常对照组,实验组兔双眼行碱烧伤法建立角膜新生血管模型,造模后每日裂隙灯检查角膜形态学改变并计算新生血管面积,同时自造模当日起右眼每日结膜下注射siRNA 1U组成siRNA治疗组,左眼以control siRNA为实验对照组,分别于术后3、7、14、21d取角膜组织行免疫组化染色,观察EPO的表达情况。

结果：实验组最早于碱烧伤后3d可见CNV长入,7～14d生长最为旺盛,免疫组织化学染色见随碱烧伤时间延长,角膜EPO的表达逐渐增加; siRNA治疗后CNV延迟长入,面积较实验对照组明显减小,炎性细胞浸润减轻,且角膜中EPO的表达较前者明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：EPO可能在CNV的发生发展中发挥重要作用,碱烧伤后siRNA的早期干预可能通过影响EPO的表达而抑制CNV的生长。     

胶原交联对兔角膜碱烧伤后基质融解的影响

目的研究角膜胶原交联治疗对兔角膜碱烧伤后基质融解的影响。方法选取25只新西兰大白兔随机分为正常对照组(5只10眼)、模型对照组(10只10眼)、胶原交联治疗组(10只10眼)。正常对照组不做处理,模型对照组和胶原交联治疗组右眼制备角膜中度碱烧伤模型。造模成功后,胶原交联治疗组采用胶原交联治疗后涂红霉素眼膏,模型对照组滴核黄素眼液30min后涂红霉素眼膏;三组均应用抗生素眼液滴眼。观察角膜融解及混浊等情况,28d后处死动物,对兔角膜进行组织病理学检查和免疫组织化学检测。结果正常对照组未发生变化,模型对照组6眼造模后(14±4)d角膜融解,2眼角膜穿孔;胶原交联治疗组1眼造模后23d角膜融解,无角膜穿孔发生;两组角膜融解发生率间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。病理检查结果显示胶原交联治疗组角膜水肿程度轻,角膜胶原纤维破坏轻,炎性细胞浸润明显少于模型对照组。免疫组织化学结果显示胶原交联治疗组角膜胶原纤维较模型对照组排列整齐,深层角膜组织影响小。结论胶原交联治疗可抑制和延迟兔角膜碱烧伤后角膜融解的发生和发展,减轻角膜胶原纤维的破坏及减少角膜组织中炎性细胞的浸润。     

羊膜为基底的小片状同种异体结膜移植治疗碱烧伤

目的 将羊膜移植与片状同种异体结膜移植相结合重建眼表。方法 新西兰白兔42只，右眼(实验组)、左眼(对照组)上方球结膜碱烧伤后24h分别行以羊膜为基底的小片状同种异体结膜移植和单纯小片状同种异体结膜移植，术后各周行印迹细胞的PAS染色、扫描电镜检查。结果 实验组植片成活率明显高于对照组(P＜0．05)。实验组术后第4周，对照组术后第5周结膜外观、杯状细胞形态数目功能均恢复正常。结论 大面积结膜碱烧伤早期应用羊膜改善异体植片的基底，有利于降低排斥反应，提高植片成活率，达到结膜结构与功能重建之目的。     

Experimental study on the treatment of rabbit corneal melting after alkali burn with Collagen cross-linking

AIM: To evaluate the effect of Collagen cross-linking on the prevention of melting in rabbit corneas after alkali burn. METHODS: Twenty New Zealand white rabbits were randomly divided into model control group and collagen cross-linking treatment group. The second group of rabbits received collagen cross linked treatment. Both groups were applied with antibiotic eye drops to prevent infection. The corneas were evaluated for melting, opacity, pathological and immunohistochemistry, record the changes when 28 days after the animals were killed. RESULTS: In the control group, 6 out of 8 rabbits showed corneal melting after injury (14±4) days, while two corneal perforated. In collagen cross-linking treatment group, one rabbit showed corneal melting after injury 23 days, without corneal perforation; corneal dissolution rate between the two groups was significantly different (P <0.05). Pathological examination suggested that in the treatment group, mild corneal edema, mild damage to collagen fibers, inflammatory cell infiltration was significantly less than the control group. Immunohistochemistry showed that corneal collagen fibers arranged in neat rows in the control group. CONCLUSION: Collagen cross-linking treatment not only can prevent and delay the corneal melting after alkali burn, but also can reduce the destruction of corneal collagen fibers and infiltration of inflammatory cells in the corneal tissue.     

羊膜移植术在碱烧伤急性期重建结膜表面的实验研究

目的:(1)研究羊膜移植在治疗兔眼大面积结膜碱烧伤,重建健康结膜表面中的作用.(2)探讨碱烧伤急性期施行羊膜移植术的可行性.方法:选用30只家兔,制作角膜缘上方球结膜至穹隆部的碱烧伤的动物模型.实验组于碱烧伤后1wk时(急性期)行保存的人羊膜移植术及穹隆成形术.术后1,2,3,4,8,12wk时做光镜观察移植部位的结膜上皮生长情况,并于术后1,4,8wk时取移植区结膜做电镜观察其超微结构,同时与碱烧伤后行结膜下注射维生素C及应用抗生素眼药水点眼治疗的对照组结膜作对照观察.并在上述相应时期摄眼外观像、做上角膜缘至上方穹隆部宽度的测量.结果:(1)羊膜移植术后1wk时,光镜、电镜可见羊膜上有结膜上皮细胞长入,4wk时,含有杯状细胞的结膜上皮完全覆盖羊膜,接近于正常的结膜组织,12wk时,羊膜上结膜上皮细胞排列整齐,穹隆部结膜上皮下纤维结缔组织较为疏松,无增生.而对照组1wk时见结膜上皮细胞坏死脱落,未见有含杯状细胞的结膜上皮长入,4～8 wk时所见为大量纤维结缔组织增生,伴炎性细胞浸润.12wk时,穹隆部纤维结缔组织增生明显,未见有正常结膜上皮覆盖.(2)外观眼表可见,12wk时实验组移植区结膜光滑无瘢痕,上穹隆形成良好,穹隆深达7.6～8.2 mm,接近正常穹隆深度8.0～8.5 mm.而对照组结膜表面不光滑,有结膜肉芽肿形成,瘢痕增生明显,上方穹隆明显变浅,穹隆深度为1.0～4.5 mm.结论:以甘油保存的羊膜可作为一种底物载体,提供健康的基底膜,有利于周围正常结膜上皮的粘附、移行和分化,进而重建正常结膜表面.结膜碱烧伤后早期行羊膜移植可重建正常结膜表面,有效地防止睑球粘连的发生.     

Effect of topical corticosteroids on goblet-cell density in an alkali-burn model.

Conjunctival alkali burns result in a loss of goblet cells in the acute postinjury period. A deficiency of goblet cells and their primary product, mucin, is associated with both short- and long-term ocular sequelas. We evaluated the effect of topical corticosteroids on goblet-cell density in a prospective, randomized, controlled trial using 24 eyes of 12 adult albino rabbits in which a standard conjunctival burn was made. The treatment group was found to have 97.38 goblet cells per unit area of conjunctiva; the control group had 65.81 goblet cells per unit area of conjunctiva. This was a statistically significant difference (P less than .02). These results suggest that topical steroids are beneficial in suppressing goblet-cell loss after a conjunctival alkali burn.     

Effect of amniotic membrane transplantation on rabbit conjunctival surface reconstruction at the recovering stage of alkali burn

AIM: To investigate the effect of amniotic membrane transplantation(AMT) on rabbit conjunctival surface recon- struction with severe alkali burns.(2) To evaluate the possibility of AMT treatment for ocular alkali burns during recovering stage. METHODS: Animal models were established on 30 eyes of rabbits by creating severe alkali burns on the conjunctiva from the upper corneal limbus to the upper conjunctival fornix. Preserved human amniotic membrane transplantations and reconstruction of conjunctival fornix were performed at one week after injury (recovering stage). Epithelium growth of burned area after transplantation was observed using light microscope at 1, 2, 3, 4, and 8 weeks. Conjunctival tissue in transplantation area was collected at 1, 4 and 8 weeks. The ultrastructure of the collected tissue was studied by electron microscope. The results were compared with control group, which received only vitamin C subconjunctival injection and antibiotic eye drops as treatment for alkali burn. Exterior eye pictures were also taken at the end of the observation, the width from upper corneal limbus to the edge of upper fornix was measured. Data were analyzed statistically. · RESULTS:(1) In the transplant group, conjunctival epithelium growth was observed in the area of AMT under both light and electron microscope 1 week after surgery. At the 4th week, conjunctival epithelium with goblet cells that resembled normal conjunctival tissues was observed in the whole amniotic membrane area. At the 12th week, the conjunctival epithelium on the amniotic membrane was well formed, and the connective tissue under the epithelium was loose at the fornix. No fibrosis was identified. In contrast, conjunctival epithelium necrosis was observed in the control group at 2 weeks after alkali burns. Reepithelization did not occur through the 12-week observation. Severe fibrosis with inflammatory cells infiltration was observed between 4 to 8 weeks. At the 12th week, fibrosis of the connective tissue at the fornix developed and there were no conjunctival epithelium covering the burned area.(2) In the transplant group, the conjunctiva in transplanted area had no scarring and appeared smooth at the 12th week. Upper fornix was reconstructed. The depth of fornix was 7.9±0.3mm (7.6- 8.2mm), which was approximate to the normal depth 8.2±0.2mm (8.0-8.4mm, P >0.05). While in the control group, the burned area appeared rough with granuloma formation and severe scarring. Upper fornix became shallow. The depth of fornix was 3.1±1.7mm (1.0 - 4.5mm.), and significant difference was found between control and transplant group (P <0.01). CONCLUSION: Human amniotic membrane preserved in glycerin can promote cell adhering, migrating and differenti- ating of normal conjunctival epithelium. Reconstruction of conjunctival surface in early stage of alkali burn can be achieved by AMT. AMT can effectively prevent symblepharon formation.