抑制酰基-辅酶A去饱和酶1表达对食管鳞癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制探讨

目的:检测酰基-辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase-1,SCD-1)在食管鳞癌组织和细胞中的表达,分析其表达下调对食管鳞癌EC1细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关的分子机制.方法:采用免疫组织化学和原位杂交法检测60例食管鳞癌组织及其相应癌旁正常食管黏膜组织中SCD-1 mRNA和蛋白的表达,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测正常食管组织(作为阴性对照)和食管鳞癌细胞株中SCD-1 mRNA和蛋白的表达.不同浓度SCD-1小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)转染食管鳞癌EC1细胞后,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测SCD-1 mRNA和蛋白的表达,应用CCK-8法检测转染前后EC1细胞增殖的变化,FCM检测转染前后EC1细胞凋亡的改变,蛋白质印迹法检测总Akt、p-Akt、bcl-2和bax蛋白的表达.结果:食管鳞癌组织中SCD-1 mRNA和蛋白表达的阳性率显著高于正常食管黏膜组织(P＜0.05),其表达上调与肿瘤组织分级、TNM分期和淋巴结转移密切相关(P＜0.05).此外,与正常食管组织相比,食管鳞癌EC9706、Eca109和EC1细胞中SCD-1 mRNA和蛋白表达均显著上调(P＜0.05),其中EC1细胞中SCD-1的表达水平最高.50 nmol/L SCD-1 siRNA能显著下调EC1细胞中SCD-1 mRNA和蛋白的表达.SCD-1表达下调可显著抑制EC1细胞的增殖,诱导细胞凋亡;同时,显著上调bax蛋白的表达,并下调p-Akt和bcl-2蛋白的表达,但不改变总Akt的表达水平.结论:SCD-1可能在食管鳞癌的发生和发展中具有重要作用,抑制SCD-1的表达有望成为食管鳞癌重要的分子治疗策略之一.     

Survivin在食管鳞癌中的表达及其与Smac的相关性研究

目的 探讨凋亡抑制因子Survivin及凋亡促进因子Smac在食管鳞癌中的表达及临床意义,并分析二者的相关性.方法 RT-PER法检测20例食管鳞癌及20例癌旁正常组织中Survivin及Smac基因的表达情况;免疫组化S-P法检测53例食管鳞癌及53例癌旁正常组织中Survivin及Smac蛋白的表达情况,分析其与食管鳞癌患者各临床病理指标的关系及两者表达的相关性.结果 食管鳞癌组织中Survivin基因表达水平(70.0%)明显高于癌旁正常组织(0%),Survivin蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为62.3%,而在正常食管组织无表达,免疫组化结果与RT-PCR结果一致;Survivin蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率与浸润深度、分化程度及淋巴结转移均无相关性(P>0.05).RT-PCR结果显示,Smac基因在食管鳞癌组织巾的阳性表达率为40%(8/20),明显低于正常食管组织100%(20/20),此结果得到免疫组化的证实,Smac蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为41.5%,明显低于正常食管组织100%,而且Smac蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率与组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05).Survivin蛋白与Smac在食管鳞癌组织中的表达呈明显负相关(P<0.05).结论 抗凋亡蛋白Survivin和促凋亡蛋白Smac之间存在着相互拮抗,相互调节的关系,在食管鳞癌细胞凋亡过程中共同发挥作用.     

食管鳞癌组织中锌α2糖蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨食管鳞癌组织中ZAG蛋白的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化法检测85例食管鳞癌组织和对应的正常食管黏膜组织中ZAG蛋白的表达,并分析ZAG蛋白表达与食管鳞癌患者预后之间的关系.结果 ZAG蛋白表达主要定位于细胞质中,其在食管鳞癌组织中表达的阳性率为38.8%(33/85),显著低于正常食管黏膜组织的90.6%(77/85),差异有统计学意义(χ2=49.867,P<0.001).ZAG蛋白表达与食管鳞癌患者的组织学分级、TNM分期和淋巴结转移关系密切(P<0.05),但与患者的性别、年龄无关(P>0.05).ZAG蛋白高表达的食管鳞癌患者生存时间显著长于ZAG低表达的食管鳞癌患者(P<0.05).结论 ZAG在食管鳞癌发生、发展中发挥极其重要的作用,并可能与食管鳞癌患者的预后密切相关,因而可能成为食管鳞癌预后的分子标记.     

Claudin-1和Claudin-3在食管鳞癌中的表达

目的:检测Claudin-1和Claudin-3蛋白在食管鳞癌组织和癌旁黏膜中的表达.探讨claudin-1和Clau-din-3蛋白在食管鳞癌发生发展中的作用.方法:用组织芯片技术及免疫组化方法检测57例食管鳞癌及相应癌旁黏膜组织中Claudin-1和Claudin-3蛋白的表达情况,分析其表达与临床病理指标的关系.结果:Claudin-1蛋白阳性表达主要见于食管鳞癌细胞质和细胞膜,Claudin-3蛋白阳性表达主要见于食管鳞癌癌旁正常黏膜的细胞质和细胞膜,其食管鳞癌组织和癌旁组织中的表达均有差异,Claudin-1在食管鳞癌和癌旁正常黏膜中的表达率为76.4%和38_3%,Claudin-3在食管鳞癌和癌旁正常黏膜中的表达率为24.6%和79.2%.Claudin-1和Claudin-3蛋白在食管鳞癌组织的表达与患者年龄、性别、肿瘤的分化程度、分级分期及淋巴结转移情况无关.结论:食管鳞癌的发生可能与Claudin-1的表达上调及Claudin-3的表达下调有关.     

食管鳞癌淋巴管生成因子表达与淋巴结转移的关系

目的:探讨淋巴管生成因子(VEGF-C)的表达与食管鳞癌淋巴结转移的关系.方法:采用免疫组化法检测49例食管鳞癌组织及其周围正常食管组织中VEGF-C的表达,并结合食管鳞癌的淋巴结转移特征进行分析.结果: VEGF-C在食管鳞癌组织和对应正常组织中阳性表达率分别为71.4%和12.2%.有淋巴结转移组(N1)VEGF-C蛋白阳性表达率73.3%,明显高于无淋巴结转移组(N0)32.6% (P<0.05).结论: 食管鳞癌组织中存在VEGF-C的高表达,可能与食管癌的淋巴结转移有关.VEGF-C蛋白表达可能作为推断食管鳞癌淋巴结转移的参考指标.     

食管鳞癌组织Survivin mRNA和蛋白表达的临床意义

目的:研究食管鳞癌组织中SurvivinmRNA与蛋白表达的相互关系,探讨两者在食管鳞癌发生和发展中的作用.方法:采用原位杂交技术检测30例食管鳞癌及相应的癌旁组织中Survivin mRNA的表达,同时采用免疫组织化学SP法检测相应标本中Sur-vivin蛋白的表达.结果:在食管鳞癌和相应的癌旁组织中Survivin mRNA表达的阳性率分别为66.7%和10.0%,Survivin蛋白表达的阳性率分别为76.7%和16.0%.食管鳞癌组远高于癌旁组,差异有统计学意义,P<0.01.Survivin mRNA与蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达具有一致性(P>0.05),其阳性率高低与性别、年龄、肿瘤大小无关,而与组织学分级、淋巴结转移、TNM分期有关.结论:Sur-vivin基因的异常表达可能对食管鳞癌的发生和发展起重要作用.     

食管鳞癌组织垂体瘤转化基因表达及其临床意义的研究

目的:探讨食管鳞癌组织中垂体瘤转化基因(PTTG)mRNA及其蛋白的表达?与肿瘤临床病理特征的关系.方法:采用RT-PCR技术检测30例食管鳞癌及相应的30例癌旁组织中PTTG mRNA的表达,同时采用免疫组织化学SP法检测标本中PTTG蛋白的表达.结果:在食管鳞癌组织中PTTGmRNA的阳性表达率(93.3%)及平均表达水平(0.69±0.06)显著高于相应的癌旁正常组织(70.0%和0.32±0.06),两组比较差异有统计学意义,P<0.01.PTTG蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达(83.3%,25/30)明显高于在癌旁组织中的阳性表达(20.0%,6/30),P<0.01;并与淋巴结转移、TNM分期和分化程度有关.结论:PTTG基因异常表达可对食管鳞癌的发生和发展起重要作用,可能为食管鳞癌的早期诊断和基因治疗提供新的靶点.     

脾酪氨酸激酶与食管鳞状细胞癌的关系

目的：探讨脾酪氨酸激酶（spleen tyrosine kinase,Syk）在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测30例食管鳞癌组织、27例食管鳞癌癌旁组织及30例相对正常食管黏膜组织中Syk mRNA的表达;应用免疫组化技术检测39例食管鳞癌组织、27例食管鳞癌癌旁组织及38例相对正常食管黏膜组织中Syk蛋白的表达并分析其与临床病理学指标间的关系。结果：食管鳞癌组织中Syk mRNA表达高于癌旁组织和正常食管黏膜组织,但差异无统计学意义（P〉0.05）。Syk蛋白在食管鳞癌组织中的阳性率（34/39,87.2%）明显高于食管鳞癌癌旁组织（18/27,66.7%）和正常食管黏膜组织（26/38,68.4%）（P〈0.05）。Syk蛋白表达与食管鳞癌患者年龄、性别、肿瘤大小、临床分期均无明显相关关系（P均〉0.05）。结论：Syk mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中表达增高,但Syk蛋白表达与临床病理学指标无相关关系。     

食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达及意义

目的:探讨食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法:应用RT-PCR和免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管粘膜组织中mRNA和蛋白的表达.结果:在食管鳞癌癌变过程中RECK在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常粘膜组织中mRNA的含量依次增高,分别为1.052±0.078、1.274±0.235、1.306±0.121,组间比较有明显差异(F=49.936,P＜0.05):不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECK mRNA相对含量差异均有统计学意义(F=5.081,F=26.084,U=24.011,P均＜0.05).食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中RECK蛋白表达均低于正常粘膜组织,表达量分别为59.7%(37/62)、71.0%(22/31)、85.5%(53/62),组间比较有明显差异(x2=10.331,P＜0.01);食管鳞癌组织中RECK蛋白表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论:食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白表达均降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.检测RECK mRNA及蛋白的表达可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达及意义

目的探讨食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法应用RT-PCR和免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管粘膜组织中mRNA和蛋白的表达.结果在食管鳞癌癌变过程中RECK在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常粘膜组织中mRNA的含量依次增高,分别为1.052±0.078、1.274±0.235、1.306±0.121,组间比较有明显差异(F=49.936,P＜0.05);不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECK mRNA相对含量差异均有统计学意义(F=5.081,F=26.084,U=24.011,P均＜0.05).食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中RECK蛋白表达均低于正常粘膜组织,表达量分别为59.7%(37/62)、71.0%(22/31)、85.5%(53/62),组间比较有明显差异(X2=10.331,P＜0.01);食管鳞癌组织中RECK蛋白表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白表达均降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.检测RECK mRNA及蛋白的表达可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

梅州市客家人食管癌与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的 探讨梅州市客家人地区食管癌的发病与人乳头状瘤病毒(HPV)感染的关系.方法 采用PCR/导流杂交法检测56例新鲜客家人食管癌组织、癌旁组织及正常食管黏膜组织HPV的表达.结果 食管癌组织HPV阳性率为19.6%,癌旁组织HPV阳性率为23.2%,正常食管黏膜组织HPV阳性率为3.6%.结论 梅州市客家人食管癌组织中存在HPV感染,HPV感染可能与食管癌的发生、发展有关.     

MRP和P—gp与食管鳞癌发生发展的关系研究

目的探讨MRP、P-gP在食管鳞癌中的表达情况及与食管鳞癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学sP法研究了49例食管鳞癌组织中MRP和P-gp的表达情况,探讨二者与肿瘤发生发展的关系。结果49例食管鳞癌癌组织、癌旁非典型增生组织、正常食管黏膜组织MRP阳性表达率分别为63．3％（31／49）、40．0％（12／30）和20．4％（10／49）。癌组织中MRP阳性表达率与相应的癌旁组织、正常食管黏膜组织比较,差异有显著性（P〈0．05）。49例食管鳞癌癌组织、癌旁非典型增生组织、正常食管黏膜组织中P-gP阳性表达率分别为61．2％（30／49）、36．7％（11／30）和18．4％（9／49）。癌组织中P-gp阳性表达率与相应的癌旁组织、正常食管黏膜组织比较,差异有显著性（P〈0．05）。结论食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中MRP和P—gP阳性表达率均依次降低,并且癌组织与癌旁不典型增生组织和正常黏膜组织中MRP和P—gP阳性表达间相比,差异有显著性,表明MRP和P-gP参与食管鳞癌的发生发展过程,可作为食管上皮细胞恶性转化的标志。     

RUNX3与OPN在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的研究RUNX3与OPN在食管鳞癌发生、发展、浸润和转移中的作用以及临床意义。方法免疫组化检测60例食管鳞癌病人的食管正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及鳞癌组织中RUNX3蛋白和OPN蛋白的表达情况。结果RUNX3在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为78．33％（47／60）、43．48％（10／23）、31．67％（19／60）。RUNX3的表达与食管鳞癌浸润深度和分期均明显相关（P〈0．05）。OPN在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为0％（0／60）、34．78％（8／23）及76．67％（46／60）,OPN的表达与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移和分期均明显相关（P〈0．05）。RUNX3和OPN在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中的表达呈明显的负相关（P〈0．05）。结论两者联合检测对探讨食管鳞癌的发生、发展、浸润、淋巴结转移及预后判断可能会有更大的意义。     

BRF2 基因在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测TFIIB相关因子2(TFIIB-related factor 2,BRF2)基因在人食管鳞状细胞组织、癌旁组织及正常食管组织中的表达,分析BRF2在食管鳞状细胞癌发生、发展及预后中的意义。方法:选取2007年1月至2008年1月在山东大学齐鲁医院胸外科行手术治疗的食管鳞状细胞患者74例,应用RT-PCR和免疫组化方法检测食管鳞状细胞组织、癌旁组织和正常食管组织中BRF2 mRNA和蛋白表达水平。结果:食管鳞状细胞癌及其癌旁组织中BRF2 mRNA表达水平明显高于正常食管组织。食管鳞状细胞组织、癌旁组织和正常食管组织中BRF2蛋白表达阳性率分别为54.5%、32.5%和7.5%,癌组织、癌旁组织中BRF2蛋白的阳性率均显著高于正常食管组织(P<0.05)。随着食管鳞状细胞分化程度升高,BRF2蛋白阳性率显著下降,Ⅲ期和Ⅳ期食管鳞状细胞组织中BRF2蛋白阳性率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期(72.7%,73.3%vs 35.7%,34.8%,P<0.05),且生存3年以下的食管鳞状细胞癌患者BRF2表达明显高于3年以上者(69.2%vs 38.2%,P<0.05),吸烟患者预后BRF2蛋白阳性率明显高于非吸烟患者(61.1%vs 30.4%,P<0.05)。结论:食管鳞状细胞癌组织高表达BRF2蛋白,BRF2 mRNA和蛋白与患者不良预后相关,可能作为食管鳞状细胞预后判断的参考指标之一。     

人食管鳞状细胞癌组织中GRP78的表达及其与肿瘤生物学行为的关系

目的：探讨葡萄糖调节蛋白78（glucoseregulated proteins 78,GRP78）在食管鳞状细胞癌组织及正常鳞状上皮组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。方法: 取自2007年10月至2008年11月在山东大学附属济南中心医院胸外科手术切除的新鲜食管鳞状细胞癌标本59例及距癌组织5 cm以上的手术远端切缘的正常食管鳞状上皮组织20例,RTPCR检测GRP78 mRNA的表达,应用Western blotting检测GRP78蛋白的表达,并从mRNA和蛋白水平分析GRP78的表达与患者性别、肿瘤长度、浸润深度、分化程度、病理分期及淋巴转移等临床病理特征之间的关系。结果：食管鳞状细胞癌组织中GRP78的表达在mRNA和蛋白水平均明显高于食管正常鳞状上皮组织（均P<0.01）。GRP78在食管鳞状细胞癌组织中的高表达与食管鳞状细胞癌的浸润深度（P<0.05或P<0.01）、分化程度（P<0.05或P<0.01）、病理分期（pTMN, P<0.01）及淋巴转移密切相关（P<0.01）,而与患者性别及肿瘤长径无关（P>0.05）。结论: GRP78参与了人类食管鳞状细胞癌的发生、发展,表达水平随着食管鳞状细胞癌组织恶性程度的增高而增高,其可作为衡量食管鳞状细胞癌恶性程度的一种有潜在价值的分子标志物。     

CAC1在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨CAC1在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测CAC1在食管鳞癌组织、癌旁组织及正常食管黏膜组织中的表达水平,对CAC1在食管鳞癌组织中的表达情况与肿瘤临床病理学特征相关性进行分析,对CAC1在食管鳞癌组织中的表达情况与增殖相关指标Ki67的表达情况进行分析。结果:CAC1在食管鳞癌组织中的表达水平显著高于其在癌旁组织及正常食管黏膜组织中的表达水平（P<0.05),CAC1表达水平与食管鳞癌的TNM分期及肿瘤分化程度显著相关（P<0.05),与食管鳞癌的发病年龄、性别及是否存在淋巴结转移无显著相关性（P>0.05),CAC1表达水平与增殖相关指标Ki67有显著相关性（P<0.05)。结论:CAC1表达与食管癌的恶性生物学特性相关,可能成为预测食管癌患者预后的指标和潜在的治疗靶点。     

MIM在食管鳞癌组织中的表达

目的：探讨肿瘤转移消失蛋白（ MIM）在食管鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化S-P法检测65例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生组织及65例正常食管黏膜组织中MIM表达。结果 MIM在食管鳞癌组织中的阳性表达率为75.4%、癌旁不典型增生组织中的阳性表达率为43.3%、正常食管黏膜组织中的阳性表达率为13.8%,三者两两相比差异均有有统计学意义（P〈0.05）。MIM在食管鳞癌组织中的表达与浸润程度、淋巴结转移有关（ P〈0.05）。结论食管鳞癌组织中MIM的异常表达可能是导致食管鳞癌发生、发展的原因之一。     

FGFR1和MMP3在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:观察成纤维细胞成长因子受体1(fibroblast growth factor receptor1,FGFR1)和基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP3)基因和蛋白在食管鳞癌、癌旁及正常食管组织中的表达情况,探讨它们与食管鳞癌患者临床病理特征之间的关系.方法:采用RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色检测78例食管鳞癌组织(鳞癌组)、35例食管鳞癌癌旁组织(癌旁组)及35例正常食管组织(正常组)中FGFR1和MMP3 mRNA及蛋白的表达,并分析其与肿瘤临床病理特征之间的关系.结果:FGFR1和MMP3 mRNA在食管鳞癌组表达水平显著高于癌旁组和正常组,差异具有统计学意义(P＜0.05).在癌旁组和正常组表达差异无统计学意义(P＞0.05).FGFR1和MMP3蛋白在食管鳞癌组中的表达率和表达水平明显高于癌旁组和正常组,差异具有统计学意义(P＜0.05).在癌旁组及正常组表达率及表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).FGFR1和MMP3蛋白在食管鳞癌中的表达与患者性别、年龄、肿瘤分化程度无关(P＞0.05),而与肿瘤浸润深度、淋巴结是否转移及TNM分期相关(P＜0.05).食管鳞癌中,FGFR1和MMP3的蛋白表达呈正相关(r=0.303,P＜0.05).结论:FGFR1和MMP3在食管鳞癌中均高表达,两者可能与食管癌的侵袭和转移有关.     

SMO蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的 探讨SMO蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义.方法 分别应用免疫组织化学及原位杂交方法检测68例食管鳞状细胞癌组织、35例癌旁不典型增生组织及68例正常食管黏膜组织中SMO蛋白及mRNA的表达,并分析其与食管鳞状细胞癌各临床病理特征的关系.结果 SMO蛋白的阳性表达率在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增...