神经生长因子受体TrkA在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓表达差异的研究

为了探讨神经生长因子 ( NGF)受体 Trk A在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓的分布状况、进而分析 NGF的作用机制 ,用免疫组化技术检测了新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓 NGF受体 Trk A的表达。结果显示 ,新生鼠脊髓前角运动神经元只有胞核 Trk A表达明显 ,胞浆及胞膜无表达 ,中间带、背角均无表达。幼鼠前角运动神经元胞浆 Trk A表达明显 ,胞核少量表达 ,胞膜无表达 ;部分中间带、背角神经元胞浆有表达。成鼠前角运动神经元胞浆及部分胞膜都有 Trk A表达 ,胞核无表达 ,中间带、背角神经元胞浆以及胶质细胞也明显表达。推论 ,新生鼠时胞核中 Trk A可与配体结合引起神经元的生物效应 ;成鼠 Trk A则主要作为一种膜受体与配体结合而发挥生物效应     

c-jun原癌基因及其表达产物的研究进展

c- jun原癌基因属于 b ZIP家族核内转录因成员子之一 ,可以结合在许多基因的启动子上参与基因转录的调控。其蛋白编码产物能通过亮氨酸拉链形成同源二聚体或与 AP- 1家族其他成员形成异源二聚体 ,与某些基因的 DNA区域特异结合以调控下游基因的转录活性。c- jun可与其他家族转录因子 ,如 :TNF- α,PU.1、Sp1、fas、ras,C/EBP、ATF/CREB等相互作用 ,发挥协同效应。 c- jun的调控范围十分广泛 ,能被各组织中的多种化学物质激活并受其影响。本文综述了近年来有关 c- jun与其他转录因子相互作用及其参与各组织发生、病理变化等方面的最新研究进展     

神经生长因子受体在垂体腺瘤中的表达

目的：探讨两种神经生长因子（ＮＧＦ）受体（ＴｒＫＡ和ｇｐ７５）在各类垂体腺瘤中的表达。方法：采用免疫细胞化学ＳＡＢＣ法,检测了４４例经病理证实的垂体腺瘤中两种ＮＧＦ受体的表达情况。结果：ＴｒＫＡ在垂体ＰＲＬ分沁腺瘤中的过度表达率６９．２％,而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率为１９．４％,两者比较差异有非常显著性（Ｐ〈０．００５）。ｇｐ７５在垂体ＰＲＬ分泌腺瘤中的过度表达率在４６．２％,而在其它类型     

神经生长因子及其受体在前列腺癌中的表达

目的探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其受体TrkA、p75在前列腺增生和前列腺癌中的表达。方法采用免疫组织化学SABC法检测前列腺良性增生10例、高分化8例、中分化14例和低分化23例石蜡包埋组织中NGF和TrkA、p75的表达。结果NGF和TrkA在前列腺增生、高分化癌、中分化癌、低分化癌中的均有表达;而p75在前列腺增生全部表达、高分化癌(8/4)、中分化癌(14/6)、低分化癌(23/3)中的表达呈逐渐降低趋势,其差异有显著性(p<0.05),前列腺增生与高分化癌、中分化癌、低分化癌相比差异均有显著性(p<0.05)。结论NGF和TrkA的表达与前列腺增生和前列腺癌进展无关。p75与前列腺癌恶性进展有关,p75表达减少在前列腺癌过程中起着重要的作用。     

神经生长因子及其受体在宫颈原位癌中的表达

目的　探讨神经生长因子 (nervegrowthfactor ,NGF)及其受体 p75在宫颈原位癌中的表达及意义。 方法　采用免疫组织化学S P法检测宫颈鳞状上皮原位癌 30例、正常上皮组织 13例、中～重度不典型增生 13例和浸润癌 14例石蜡包埋组织中NGF和 p75的表达。 结果　NGF在宫颈鳞状上皮正常组、不典型增生组、原位癌组中的表达呈逐渐增高趋势 ,而浸润癌组的表达却下降 ,差异有显著性 (χ2 =9 90 6 ,P <0 0 5 ) ,正常组与不典型增生组、原位癌组相比差异均有显著性 (t =2 0 0 7,P<0 0 5 ;t=2 0 0 8,P <0 0 5 ) ,浸润癌组与不典型增生组、原位癌组相比差异均有显著性 (t =2 37,P <0 0 5 ;t =2 4 4 ,P <0 0 5 )。p75在宫颈鳞状上皮正常组、不典型增生组、原位癌组、浸润癌组中的表达呈逐渐降低趋势 ,其差异有显著性 (χ2 =18 5 6 8,P <0 0 1) ,浸润癌组与正常组、不典型增生组、原位癌组相比差异均有显著性 (t =2 5 6 ,P <0 0 5 ;t =2 5 6 ,P <0 0 5 ;t=2 6 5 ,P <0 0 5 )。结论　NGF的高表达是宫颈瘤变过程中的早期事件。p75与宫颈癌的恶性进展有关 ,p75表达减少在原位癌是维持现状还是进展为浸润癌过程中起着重要的作用     

原癌基因产物Ras及c-erbB2在着床前小鼠胚胎中的表达

目的　观察小鼠着床前的胚胎细胞中原癌基因ras编码的蛋白产物 p2 1Ras及c erbB2的表达 ,并了解其对着床前的胚胎发育的可能作用。方法　采用免疫组织化学ABC法 ,检测着床前小鼠胚胎中p2 1Ras及c erbB2蛋白的表达。结果　小鼠着床前的胚胎细胞中 p2 1Ras的免疫反应呈阳性 ,阳性物质分布于胞质中 ,胚胎外透明带呈阴性反应 ;而在各期着床前的胚胎中均未检测到c erbB2蛋白的表达。结论　小鼠着床前的胚胎中 ,有原癌基因ras编码蛋白的表达 ,p2 1Ras是增殖和分化受体介导的信号传导途径中的重要组成部分 ,可能在小鼠着床前的胚胎发育过程中起重要的调节作用。C erbB2基因对于围着床期子宫的生长发育具有重要的作用 ;而在小鼠着床前的胚胎发育过程中似乎不起重要作用     

TrkA siRNA表达载体构建及对TrkA基因表达的抑制

目的　构建具有特异阻断TrkA基因功能的siRNA表达系统 ,为前列腺癌基因治疗提供新的方法。方法　根据Genbank提供的TrkA基因mRNA序列 ,应用设计软件设计特异性的短链寡核苷酸 ,化学合成后经退火形成双链DNA片段 ,克隆到pSlincerTM2 1 U6载体中 ,用BamHⅠ和HindⅢ双酶切和序列测定对重组体进行鉴定 ,最后将构建的表达载体转染前列腺癌细胞株 ,观察对TrkA基因表达的影响。结果　酶切和序列测定表明 ,成功构建了siRNA表达载体 ,能够抑制细胞内TrkA基因表达。结论　本研究构建的siRNA表达载体 ,具有阻断TrkA基因的表达的功能 ,为前列腺癌基因治疗提供新的有效的方法。     

神经生长因子受体在人脊髓创伤后的再表达

为了了解神经生长因子受体（NGFR）在受损脊髓内的表达情况，用免疫细胞化学方法，在18例脊髓创伤后存活2小时至28个月患者死后脊髓石蜡切片上进行了研究。结果表明：最早于创伤后第4天起，前角运动神经元再表达NGFR。创伤30天后，NGFR阳性运动神经元逐渐减少，但直至伤后28个月仍可见到。创伤后7小时至9周，后索内轴突也表达了NGFR，可能是脊神经节细胞NGFR的轴浆运输效应。此外，受损脊髓内微血管壁外层也呈NGFR阳性。创伤后运动神经元再表达NGFR，反映神经细胞对神经生长因子的需求增加，以维持创伤后神经生长因子依赖性神经元的生存。     

重组神经生长因子受体基因在受体缺乏的神经母细胞瘤细胞系中的表达

神经母细胞瘤是儿童期的常见恶性肿瘤之一。临床上,半数以上神经母细胞瘤有明显的N-myc癌基因扩增。神经生长因子(NGF)可使某些神经母细胞瘤细胞分化成神经元样的细胞。但对有N-myc扩增的神经母细胞瘤则可能因NGF受体缺乏而无明显促分化反应。本研究运用重组DNA技术将人NGF受体基因重组到有N-myc扩增,且NGF受体表达很低的神经母细胞瘤系(IMR-32)中,经克隆化培养、筛选,建立了稳定的细胞系—IMR-32/NGFR和对照细胞系IMR-32/NEO。经用抗NGFR的单克隆抗体检测用Flow cytometry技术证实IMR-32/NGFR系中有明显的NGF受体表达,而其母系IMR-32和空病毒对照系IMR-32/NEO则无表达迹象,说明NGF受体表达在IMR-32/NGFR系中是特异的,并能同抗NGFR单克隆抗体特异结合。用Northern B10ting技术亦测得IMR-32/NGFR中NGFR的mRN A明显表达。而其母系IMR-32和对照系IMR-32/NEO则无明显表达。这说明IMR-32/NGFR系中NGFR在mRNA水平上亦是特异的。N-myc和K-ras癌基因在IMR-32、IMR-32/NEO、IMR-32/NGFR三系中无明显变化。在NGF处理后,形态上三系均无明显的分化迹象。但IMR-32/NGFR在神经原纤维轻链的表达上轻度增高。c-fos癌基因的表达见于所有三个细胞系,IMR-32/NGFR略强些。这些说明,在恢复了NGFR基因和表达之后,对N-myc和K-ra     

大鼠脊髓损伤后NGF及其受体TrkA在运动神经元及神经胶质细胞表达的变化

为探讨脊髓损伤后运动神经元及神经胶质细胞内神经生长因子(NGF)及其高亲和力受体(TrkA)表达的变化,用改良Allen重击法损伤SCI组动物T12脊髓,按伤后存活时间再将动物分为脊髓损1 d组、2 d组和5 d组。各组动物的脊髓切片经ABC法免疫组织化学染色,用光镜观察TrkA及NGF在脊髓前角运动神经元表达的变化和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及NGF免疫反应阳性胶质细胞的反应性增生程度,并进行图像分析。结果显示:脊髓损伤后前角运动神经元TrkA及NGF的表达随脊髓损伤后动物存活时间的延长逐渐上调;脊髓白质和灰质内尤其是皮质脊髓束内GFAP及NGF阳性胶质细胞明显增生;与此同时,室管膜细胞内亦可见明显的NGF免疫反应产物。上述结果表明,脊髓损伤可刺激脊髓前角运动神经元表达TrkA及NGF,通过自分泌维持受损神经元的存活;损伤部位反应性增生的胶质细胞亦可产生NGF,通过旁分泌作用于脊髓前角运动神经元或皮质脊髓束的轴突末梢,以维持运动神经元的存活及促进皮质脊髓束的再生;适时补充外源性神经营养素或改变损伤局部的微环境将有利于受损脊髓的修复和再生。     

过表达P75神经生长因子受体负向调控骨髓间充质干细胞的成骨分化

文题释义： P75神经生长因子受体：即P75^NTR,神经生长因子的受体之一,以三聚体和单体的形式镶嵌于细胞表面,主要包含胞外区、跨膜区以及胞内区3个结构区域。低聚状态决定了其对细胞的主要调节功能,与配体结合后通过改变构象来进行信号传导,进而发挥调节细胞的作用。 成骨分化：多向分化干细胞向单能成骨细胞转变,并最终向骨组织发展的一系列生理过程称为成骨分化,对调节骨形成和骨再生具有重要意义,其成骨分化过程中,碱性磷酸酶的活力逐渐增加,细胞内或者胞外基质的钙等矿物质沉积,形成钙结节,骨钙素及Ⅰ型胶原蛋白表达增加。背景：P75^NTR广泛表达于神经组织及细胞中,并发挥着促进或抑制分化的双重作用;同时在骨折不愈合局部组织中也发现了P75^NTR存在着过表达,因此研究P75^NTR对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用具有重要的意义,为临床上提高骨折不愈合修复的疗效提供重要靶点。 目的：观察P75^NTR过表达对大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导成骨分化的影响。 方法：选取SD大鼠双侧股骨,用全骨髓分离贴壁法提取大鼠骨髓间充质干细胞并进行体外传代培养;构建表达EGFP的P75^NTR过表达质粒GV358-P75^NTR,并用空慢病毒载体包装收集P75^NTR过表达慢病毒载体;选取体外培养至原代10 d的大鼠骨髓间充质干细胞,消化后种板,加入P75^NTR过表达慢病毒及相关感染试剂进行感染实验,感染7 d后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测P75^NTR蛋白的过表达情况;感染后用常规培养基培养7 d,更换成骨诱导分化培养基培养,诱导培养后第7,10,14天用酶标法定量检测碱性磷酸酶活力,诱导培养后第7,14天用茜素红染色观察矿化结节形成情况。 结果与结论：①P75^NTR过表达慢病毒感染骨髓间充质干细胞后能表达出绿色荧光蛋白(感染效率约90%),且P75^NTR蛋白表达量明显增多,与阴性病毒对照组比较差异有显著性意义(P < 0.05),过表达P75^NTR细胞模型构建成功;②与阴性病毒对照组及未转染组相比,P75^NTR过表达组细胞诱导分化后相应时间点的碱性磷酸酶活力明显降低,矿化结节形成减少,细胞聚集分布减弱,差异有显著性意义(P < 0.05);③结果表明,P75^NTR过表达负向调控了大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化。局部组织中P75^NTR过表达抑制周围骨髓间充质干细胞成骨分化可能是骨缺损或骨折不愈合的重要因素。 ORCID: 0000-0001-6923-3177(朱伦井) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

c—erbB—2原癌基因产物在软骨肉瘤中的增强表达

ｃ－ｅｒｂＢ－２原癌基因在细胞增殖和分化的调控中起重要作用。用ＡＢＣ酶标法观察４０例软骨肉瘤中ｃ－ｅｒｂＢ－２原癌基因产物的增强表达为９０％（３６／４０），而在良性软骨肿瘤为１１％（１／９），在１０例正常软骨中为阴性。这表达ｃ－ｅｒｂＢ－２原癌基因产物在软骨肉瘤诊断中具有重要实用价值。ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性分级与软骨肉瘤组织病理学分级呈显著性负相关（Ｐ＜０．０５），组织学分级高分化差的软骨肉瘤，阳性     

c－erbB－2原癌基因产物在软骨肉瘤中的增强表达

ｃ－ｅｒｂＢ－２原癌基因在细胞增殖和分化的调控中起重要作用。用ＡＢＣ酶标法观察４０例软骨肉瘤中ｃ－ｅｒｂＢ－２原癌基因产物（１９０ＫＤ）的增强表达为９０％（３６／４０），而在良性软骨肿瘤为１１％（１／９），在１０例正常软骨中为阴性。这表明ｃ－ｅｒｂＢ－２原癌基因产物在软骨肉瘤诊断中具有重要实用价值。ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性分级与软骨肉瘤组织病理学分级呈显著性负相关（Ｐ＜０．０５），组织学分级高分化差的软骨肉瘤，阳性级别低，可作为软骨肉瘤的分化性标志。     

胆囊腺癌中原癌基因c－erbB－2产物的表达及意义

胆囊腺癌中原癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２产物的表达及意义徐燕杰，肖荫琪，王政民，张玉芝我们应用抗ｃ－ｅｒｂＢ－２癌蛋白的抗体，以ＡＢＣ免疫组化技术对３７例胆囊癌标本进行研究，并与肿瘤转移情况对比分析，以探讨其表达的临床意义。１材料和方法收集我院及协作单位１...     

神经生长因子家族及其受体在成年大鼠大脑皮质运动区的表达

目的探讨神经生长因子家族：NGF、BDNF、NT-3、NT-4及其受体TrkA、TrkB、TrkC在成年SD大鼠大脑皮质运动区的分布及表达情况。方法取成年SD大鼠大脑皮质运动区制成冰冻切片,行免疫组织化学ABC染色。光学显微镜下观察神经生长因子家族及其受体免疫阳性反应物在大脑皮质运动区的分布。结果神经生长因子家族及其受体均在大脑皮质运动区有分布,主要分布于锥体细胞层。结论大鼠大脑皮质运动区中存在神经生长因子家族及其受体表达,提示其在大脑皮质生理过程中发挥重要生物学作用。     

WIF-1在鼻咽未分化癌中表达的研究

目的 分析WIF-1在鼻咽慢性炎性组织、鼻咽癌中表达的特点,探寻其在鼻咽未分化癌中表达与相关临床资料的关系,以及在鼻咽癌发病机制中的作用.方法 应用免疫组化技术SP法检测65例鼻咽未分化癌鼻咽癌标本、20例鼻咽部慢性炎症中WIF-1的蛋白水平.结果 ① WIF-1在正常鼻咽上皮细胞中存在表达,在鼻咽假复层纤毛柱状上皮的纤毛柱状上皮细胞中呈强阳性表达.其表达呈周期性.② 鼻咽癌标本表达的平均百分数为(31.0±8.0)%,与非癌上皮组织中WIF-1在柱状细胞中全部呈强阳性相比,有显著差异.WIF-1在部分淋巴细胞中表达阳性.在鼻咽癌和淋巴细胞中表达两者无相关性.③ WIF-1在鼻咽未分化癌细胞中的表达与患者的年龄、性别、原发灶大小(T分期)、淋巴转移、远处转移均无关系.结论 WIF-1在正常鼻咽上皮细胞中呈阳性表达;WIF-1在鼻咽未分化癌细胞中出现表达缺少和(或)下调;WIF-1表达缺少和(或)下调的出现可能是鼻咽未分化癌发生的早期事件,WIF-1表达异常可能在鼻咽未分化癌的发病机制中发挥一定作用.     

TrkA、TrkB和TrkC受体在大鼠三叉神经本体觉中枢通路上的表达

目的 检查高亲和性的神经营养物质受体(TrkA、TrkB和TrkC)在大鼠三叉神经本体觉中枢四级通路上的分布。方法 采用免疫组织化学的抗生物素．生物素一过氧化物酶复合物(ABC)方法并以二氨基联苯胺(DAB)为呈色剂,检查免疫反应细胞。结果 3种受体在三叉神经本体觉中枢四级通路的三叉神经中脑核、二级和三级核团均有表达。同一核团内3种受体的免疫阳性细胞密度不同。在胞体和突起上均观察到TrkA和TrkB免疫反应染色,但TrkB标记的突起较长,TrkC染色多局限于细胞体部分。结论 在三叉神经本体觉中枢通路中,3种神经营养物质受体都可能在维持神经元存活和调节递质释放等方面发挥特定的作用。     

Napsin A在甲状腺未分化癌、低分化癌及微乳头状癌中的表达

Rebecca D,Chernock,M D,Samir K,et al.Napsin A expres-sion in anaplastic,poorly differentiated,and micropapillary pat-tern thyroid carcinomas.Am J Surg Pathol,2013[Epub aheadof print].Napsin A是一种天冬氨酸蛋白酶,主要表达于肺泡上皮、肺泡内巨噬细胞、肾小管及脾脏白髓中。