2型糖尿病患者外周血单核细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1的变化及其意义

目的初步分析2型糖尿病患者血脂及外周血单核细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的变化,以及2型糖尿病患者ABCA1的变化与血脂、糖代谢的相关性。方法分别取2型糖尿病组及对照组(各40例)外周血中的单核细胞,利用抗原、特异性一抗及PE荧光标记的二抗间的相互反应,在流式细胞仪上检测氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激前后ABCA1的表达变化,同时在空腹情况下检测血脂及空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1C)。分析2型糖尿病患者ABCA1表达变化与年龄、血脂水平和糖代谢的相关性。结果与对照组相比,2型糖尿病组甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)[即非高密度脂蛋白胆固醇(NHDL-C)]水平显著升高(P<0.01),血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(apoA1)的水平及外周血单核细胞ABCA1的表达显著降低(P<0.01)。ox-LDL刺激24h后,2型糖尿病组ABCA1的变化量(刺激后表达量/初始表达量)明显高于对照组ABCA1的变化量(P<0.01),但最终表达量仍显著低于对照组(P<0.01);ox-LDL刺激后2型糖尿病组AB-CA1的改变量与HDL-C呈正相关。结论2型糖尿病患者体内存在受损的胆固醇逆转运及血脂谱,具有诱发动脉粥样硬化(AS)和冠心病的基础。     

烟酸对动脉粥样硬化兔逆胆固醇转运的促进作用观察

目的 探讨烟酸促进动脉粥样硬化(AS)兔逆胆同醇转运(RCT)的作用及其可能机制.方法 健康雄性新两兰白兔12只,随机均分为对照组(给予单纯高脂饮食建立AS模型)及烟酸组[在高脂饮食基础上,每日给予口服烟酸400mg/(kg·d)3.6周后,取两组动物外周血单核细胞、腹腔巨噬细胞、腹部皮下脂肪细胞、肝细胞,流式细胞仪检测ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达量,液相闪烁计数法检测[~3H]胆固醇转出率;酶法和免疫方法检测兔血脂及主动脉组织、脂肪组织、肝组织的总胆固醇(TC)、非高密度脂蛋白胆同醇(NHDL-C)、高密度脂蛋白胆同醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(apoA1)含量变化;Image-Pro Plus Version 6.0图像分析软件对比测定两组AS斑块面积.结果 与对照组相比,烟酸组TC、NHDL-C明显下降,HDL-C、apoA1明显上升(P<0.01),单核细胞、巨噬细胞、脂肪细胞的ABCA1表达量及胆同醇转出率均明显上升,而肝细胞ABCA1表达量、胆固醇转出率则明显下降(P<0.01),主动脉、脂肪组织、肝组织中胆固醇含量明显减少(P<0.01),AS斑块面积显著减小(P<0.05).结论 烟酸能明显改善血脂谱,增加外周细胞ABCA1表达量及胆固醇转出率,降低主动脉AS面积及组织中胆同醇含量.巨噬细胞ABCA1表达量可作为反映体内RCT水半的间接指标.     

罗格列酮对动脉粥样硬化兔逆胆固醇转运的促进作用观察

目的 探讨在兔动脉粥样硬化(AS)形成过程中,罗格列酮对ATP结合盒转运子A1(ABCA1)及逆胆固醇转运(RCT)的影响及其抗AS的机制.方法 12只新西兰兔随机均分为对照组(单纯喂食高胆同醇饮食6周)、罗格列酮组[在单纯高胆固醇饮食的基础上,予以灌服罗格列酮0.5mg/(kg·d)6周].分别利用流式细胞术及液相闪烁计数法检测外周血单核细胞、腹腔巨噬细胞、皮下脂肪细胞、肝细胞的ABCA1表达量及[~3H]胆固醇转出率,应用酶法测定血脂及肝组织、脂肪组织、升主动脉的胆固醇含量,并利用专业图像分析软件分析兔主动脉AS面积.结果 实验6周后,罗格列酮组及对照组血浆非高密度脂蛋白胆固醇(NHDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(apoA1)水平均较0周时显著升高(P<0.01),且罗格列酮组血浆HDL-C、apoA1水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),但NFIDL-C水平两组无明显差异(P>0.05).6周时与对照组比较,罗格列酮组单核细胞、腹腔巨噬细胞、皮下脂肪细胞、肝细胞的ABCA1表达量增加(P<0.01),腹腔巨噬细胞、皮下脂肪细胞、肝细胞的[~6H]胆固醇转出率增加(P<0.01或P<0.05),主动脉、脂肪组织、肝组织的胆同醇含量及主动脉AS面积明显减少(P<0.01或P<0.05).结论 ABC2A1是RCT的一个止性调节剂;罗格列酮可通过上调单核/巨噬细胞、脂肪细胞及肝细胞ABCA1的表达促进体内RCT,从而发挥抗AS作用.     

96例冠心病介入治疗患者ABCA1基因启动子区-477C/T单核苷酸多态性分析

目的研究ABCA1基因启动子区-477C／T单核苷酸多态性（SNP）与血浆高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和冠心病的关系。方法用聚合酶链反应、限制性酶切法（PCR-RFLP）检测96例冠心病患者和100例正常人的ABCA1基因启动子区-477位点基因型,比较基因型在冠心病组与正常人组间、冠心病组中不同病变亚组之间分布的差异性及3种基因型与冠心病相关临床指标的关系。结果冠心病组与正常人组比较,3种基因型CC、CT、TT分布频率差异具有显著性。TT基因型、T等位基因在冠心病组中的分布频率明显高于对照组（P〈0．05、P〈0．01）。冠心病组中,急性冠脉综合征组TT基因型、T等位基因明显高于稳定性心绞痛组（P〈0．05、P〈0．01）,多支病变组TT基因型明显高于单支病变组（P〈0．05）,TT基因型血浆I-IDL-C水平明显低于CC基因型（P〈0．01）。结论ABCAl基因启动子区-477C／TSNP可显著影响中国冠心病者血浆HDL-C水平,而且与冠心病严重程度相关。     

Ox-LDL对主动脉平滑肌细胞中ABCA1及炎性因子表达的影响

 目的 研究氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导作用下,ATP结合盒转运子A1(ABCA1)对人主动脉平滑肌中单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA和蛋白质及白介素-1β(IL-1β)表达的影响.方法 复苏培养人主动脉平滑肌细胞CC2571、Ox-LDL (30 μg/ml) 刺激3、6、12、24 h后,以荧光定量RT-PCR法检测ABCA1、ICAM-1、MCP-1mRNA表达,Western蛋白印迹法及ELISA法检测ABCA1、ICAM-1、MCP-1及IL-1β蛋白质表达;用ABCA1的反义寡核苷酸抑制ABCA1表达后,观察上述指标的变化.结果 予Ox-LDL刺激后, CC2571细胞中ABCA1、MCP-1、ICAM-1的mRNA和蛋白及IL-1β蛋白质表达均增加,反义寡核苷酸转染后3、6 h时上述指标的mRNA表达降低,12、24 h蛋白质表达降低.结论 Ox-LDL诱导主动脉平滑肌细胞炎性因子的表达,ABCA1可能通过增强上述炎性因子表达参与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生.     

ABCA1基因编码区SNP检测及R1587K与血脂和冠心病的关系

目的探讨三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因ABCA1R1587K单核苷酸多态性(SNP)在中国广东汉族人群中的发生情况及该多态性与脂代谢和冠心病易感性的关系。方法选择确诊的冠心病患者112例和同地区正常人108例,以引物引入限制性内切酶分析聚合酶链反应(PIRA-PCR)方法对ABCA1的R1587K多态性进行检测,并进行血脂水平检测。结果全部检测人群中RR型占49·1%,RK型占44·1%,KK型占6·8%。等位基因频率符合Hardy-Weinberg平衡,冠心病及正常人中R携带者HDL-C水平均明显高于非携带者(P<0·01)。在ABCA1的RR、RK和KK3种基因型中,HDL-C水平依次下降(分别1·35±0·29、1·24±0·27、0·77±0·21mmol/L,P<0·01)。多重回归分析提示,R1587K基因型与HDL-C水平有显著相关(P=0·000)。冠心病患者与正常人等位基因频率、基因型频率差异无显著性(P>0·05)。K基因型携带者与非携带者患冠心病的风险无显著性差异(OR=0·889,95%CI=0·49~1·61,P>0·05)。结论ABCA1基因编码区R1587K携带情况与人群血浆HDL-C水平密切相关,K携带者血浆HDL-C水平明显下降,但与冠心病患病风险无明显相关性。     

烧伤焦痂毒性物质D1 对大鼠肝线粒体H＋－ATP酶活性及能量偶联的影响

目的观察烧伤焦痂Ｄ１成分对肝线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶活性及ＡＴＰ生成的影响,以探讨Ｄ１对线粒体呼吸抑制的作用机制。方法制备大鼠肝亚线粒体成分并从烧伤焦痂中提取Ｄ１成分,在含线粒体的反应体系中加入Ｄ１成分,测Ｈ＋－ＡＴＰ酶活性及ＡＴＰ生成量,并检测ＡＮＳ荧光强度以反映线粒体氧化磷酸化偶联状态。结果亚线粒体颗粒ＡＴＰ酶水解活力的正常值为（７．１８±０．０６）μｍｏｌ·ｍｇ１·ｍｉｎ１,与Ｄ１作用后,Ｈ＋－ＡＴＰ酶活力有明显下降,其下降程度和Ｄ１的剂量呈负相关,并且本实验直接观察到在新鲜制备ＳＭＰ中Ｄ１成分,直接抑制了ＡＴＰ的生成。ＡＮＳ荧光强度下降,亦与Ｄ１剂量呈负相关。结论Ｈ＋－ＡＴＰ酶活力下降可能是Ｄ１对线粒体呼吸抑制机制之一,Ｈ＋－ＡＴＰ酶活力下降导致ＡＴＰ生成减少。荧光强度下降反映线粒体氧化磷酸化功能下降。     

AHSG对胰岛素刺激下的HL-7702细胞中FAS、SREBP-1基因表达的影响

目的研究纯化后的人胎球蛋白A(AHSG)对HL-7702细胞胰岛素信号通路下游基因FAS、SREBP-1表达的影响。方法通过硫酸铵沉淀、PEG沉淀、DEAE离子交换和鱼精蛋白(protamine)亲和层析方法纯化血浆中的AHSG蛋白;单用胰岛素或胰岛素与AHSG共同处理HL-7702细胞后,提取细胞的RNA并且逆转录成cDNA,通过实时PCR(real-time PCR)方法分析细胞中FAS、SREBP-1基因mRNA的含量。结果 100 nmol/L胰岛素在1、2、3、4、5、6 h都可刺激HL-7702细胞中FAS、SREBP-1的基因表达量增加;在胰岛素刺激HL-7702细胞5 h时,FAS、SREBP-1基因表达量随胰岛素浓度的增加而升高;当HL-7702细胞用20 nmol/L胰岛素与100、300和600μg/ml的AHSG蛋白分别共同处理时,AHSG能抑制FAS、SREBP-1基因的表达,并且在600μg/ml时抑制作用较强。结论胰岛素能刺激HL-7702细胞中FAS、SREBP-1基因表达量的增加,但AHSG蛋白抑制由胰岛素刺激引起的FAS、SREBP-1基因表达量的增加。     

AHSG对胰岛素刺激下的HL-7702细胞中FAS、SREBP-1基因表达的影响

目的研究纯化后的人胎球蛋白A（AHSG）对HL-7702细胞胰岛素信号通路下游基因FAS、SREBP-1表达的影响。方法通过硫酸铵沉淀、PEG沉淀、DEAE离子交换和鱼精蛋白（protamine）亲和层析方法纯化血浆中的AHSG蛋白;单用胰岛素或胰岛素与AHSG共同处理HL-7702细胞后,提取细胞的RNA并且逆转录成cDNA,通过实时PCR（real-time PCR）方法分析细胞中FAS、SREBP-1基因mRNA的含量。结果 100 nmol/L胰岛素在1、2、3、4、5、6 h都可刺激HL-7702细胞中FAS、SREBP-1的基因表达量增加;在胰岛素刺激HL-7702细胞5 h时,FAS、SREBP-1基因表达量随胰岛素浓度的增加而升高;当HL-7702细胞用20 nmol/L胰岛素与100、300和600μg/ml的AHSG蛋白分别共同处理时,AHSG能抑制FAS、SREBP-1基因的表达,并且在600μg/ml时抑制作用较强。结论胰岛素能刺激HL-7702细胞中FAS、SREBP-1基因表达量的增加,但AHSG蛋白抑制由胰岛素刺激引起的FAS、SREBP-1基因表达量的增加。     

脂多糖联合三磷酸腺苷对肺上皮细胞来源A549细胞IL-1β分泌的影响及其机制研究

目的 探讨白细胞介素1β(IL-1β)在脂多糖(LPS)联合三磷酸腺苷(ATP)诱导的人肺上皮细胞来源A549细胞中的表达变化及其机制.方法 以肺上皮细胞来源的A549细胞作为研究对象,采用Western blotting法确认A549细胞中是否存在NLRP3炎症体各组件蛋白(NLRP3、ASC、caspase-1)的表达.检测不同浓度LPS(0、1、5、10、50、100μg/ml)对A549细胞NLRP3炎症体通路蛋白表达(Western blotting检测)及IL-1β分泌(ELISA法)的影响,选择最佳LPS浓度.采用LPS联合ATP(LPS+ATP)刺激A549细胞,并检测其对NLRP3炎症体通路蛋白表达和IL-1β分泌的影响.采用siRNA干扰A549细胞NLRP3基因,观察LPS+ATP诱导的A549细胞中IL-1β的分泌情况.结果 Western blotting检测结果显示,A549细胞中存在NLRP3炎症体组件蛋白NLRP3、ASC、caspase-1的表达.与对照组比较,LPS单独处理细胞后,NLRP3、pro-IL-1β、caspase-lp45蛋白表达增加(P＜0.05),且呈剂量依赖关系,但未检测到活化形式caspase-lp20蛋白的表达及细胞因子IL-1β的分泌.与LPS单独刺激组相比,LPS+ATP刺激组可检测到活化形式的caspase-lp20蛋白表达及细胞因子IL-lβ分泌(P＜0.05).采用siRNA干扰NLRP3基因表达可显著抑制LPS+ATP诱导的IL-1β表达(P＜0.05).结论 A549细胞中存在NLRP3炎症体通路,LPS+ATP诱导A549细胞分泌的细胞因子IL-lβ在下调NLRP3基因后显著减少,初步提示IL-1β的释放受NLRP3炎症体途径调控.     

血胆固醇水平对多发性骨髓瘤患者生存状况的影响

 目的 探索血胆固醇水平对多发性骨髓瘤患者生存状况的影响。方法 选取2014-06至2017-09医院接受治疗的136例多发性骨髓瘤患者为观察组,另选取同期82例接受体检的健康者为对照组,收集患者一般资料并进行回顾性分析。结果 观察组的血清总胆固醇[(2.67±1.12)mmol/L]、低密度脂蛋白[(1.62±0.98)mmol/L]、载脂蛋白B[(0.45±0.28)mmol/L]及高密度脂蛋白水平[(0.81±0.28)mmol/L],与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ期患者生存率显著低于Ⅰ期和Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05)。IgA型多发性骨髓瘤患者的低密度脂蛋白水平[(1.38±0.56)mmol/L]最低,轻链型多发性骨髓瘤患者的低密度脂蛋白水平[(2.25±0.43)mmol/L]最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 多发性骨髓瘤的疾病发展状况和生存状况与血胆固醇水平有密切关系,血胆固醇水平过低导致患者病情恶化,产生较高耐药性,从而降低生存率及生存质量。     

血清胆红素、尿酸、低密度脂蛋白与冠心病的关系

目的探讨血清胆红素、尿酸(UA)、低密度脂蛋白(LDL-C)在冠心病(CHD)发生发展中的意义。方法选择我院心内科进行冠状动脉造影检查确诊的32例冠心病患者作为观察组,32例健康体检成人作为对照组。测定血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、UA、LDL-C指标并分析与冠心病的关系。结果与健康对照组相比,CHD组UA、LDL-C水平均显著升高(P<0.01),而TBIL、DBIL水平均显著下降(P<0.01),IBIL虽有下降但差异无统计学意义(P>0.05)。结论胆红素、UA、LDL-C可能相互影响参与冠心病的发生与发展,早期干预有可能预防心血管事件的发生。     

低剂量替格瑞洛对稳定性冠心病患者冠脉微循环及外周血MHR、NLR的影响

目的 探讨低剂量替格瑞洛对稳定性冠心病(stable coronary heart disease,SCAD)患者冠脉微循环及外周血单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值（monocyte/high-density lipoprotein cholesterol ratio,MHR）、中性粒细胞/淋巴细胞比值（neutrophil/lymphocyte ratio,NLR）的影响。方法 将2019年1月-2021年2月在南京脑科医院（胸科院区）就诊的SCAD患者138例,按照随机数表法分成A、B、C三组,每组46例,三组患者采取不同抗血小板策略,A组单纯采用阿司匹林治疗,B组采用阿司匹林联合标准剂量替格瑞洛治疗,C组采用阿司匹林联合低剂量替格瑞洛治疗,连续治疗6个月。对比三组患者治疗前后冠脉微循环阻力指数（microcirculatory resistance, IMR）、血小板微颗粒（platelet microparticles, PMPs）及MHR、NLR水平变化情况,三组患者均随访1年,对比三组患者出血情况。结果 治疗后,三组IMR及PMPs水平均较同组治疗前改善,差异有统计学意义（P<0.05）,三组治疗后IMR及PMPs水平比较,差异有统计学意义（P<0.05）,A组IMR及PMPs水平改善程度优于B、C组,差异有统计学意义（P<0.05）,B、C两组治疗后IMR及PMPs改善程度比较差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后,三组MHR及NLR水平均较同组治疗前改善,差异有统计学意义（P<0.05）,三组治疗后MHR及NLR水平比较,差异有统计学意义（P<0.05）,B、C组MHR及NLR水平改善程度优于A组,差异有统计学意义（P<0.05）,B、C两组治疗后MHR及NLR改善程度比较差异无统计学意义（P>0.05）;随访1年期间,三组患者大出血发生率比较无统计学差异（P>0.05）,小出血发生率存在明显差异（P<0.05）,进一步进行组间两两比较,A组和C组患者小出血发生率低于B组（P<0.05）,但A组和C组患者小出血发生率比较无统计学差异（P>0.05）。结论 综上所述,SCAD患者采用低剂量替格瑞洛,能帮助改善患者冠脉微循环、降低血栓形成风险及炎症状态,与标准剂量达到的效果相似,同时还可降低出血风险。     

心血管疾病患者高密度脂蛋白心脏保护功能的改变

高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）水平是心血管疾病风险的独立预测因素,与心血管事件发生风险呈负相关。但是单纯增加HDL-C的浓度并不能减少心血管疾病的发生率,过高浓度的HDL-C可能促进心血管疾病发生,所以HDL-C与心血管疾病发生和进展是否有因果关系仍不明确。在某些疾病内环境下,组成HDL的蛋白或脂类和参与HDL代谢的酶等成分发生改变,这些因素将导致HDL心血管保护功能下降。所以,在研究HDL与心血管疾病关系时,评估它的功能和质量,可能比评估它的数量更重要。     

超声评价冠心病患者颈动脉粥样硬化与冠状动脉粥样硬化的相关性

目的探讨冠心病患者颈动脉粥样硬化与冠状动脉粥样硬化的相关性。方法将150例临床上确诊为冠心病的患者依据冠状动脉造影检查结果分为三组:单支病变组58例,双支病变组50例,三支病变组42例,对三组患者进行颈动脉超声检查,观测颈动脉内一中膜厚度(IMT)、颈动脉斑块、颈总动脉内径等指标,并进行比较。分析它们与,冠状动脉病变支数之间的关联性。结果 150例冠心病患者中,双支病变组及三支病变组与单支病变组比较均有IMT增厚、Crouse积分较高及颈总动脉内径增宽(P<0.01)。结论颈动脉粥样硬化与冠状动脉粥样硬化有紧密的相关性,随着颈动脉硬化程度的增高,冠脉病变程度随之加重。     

阿托伐他汀对冠心病心力衰竭患者血管内皮功能的影响

目的 研究阿托伐他汀(立普妥)对冠心病(CHD)合并充血性心力衰竭(CHF)患者血浆中一氧化氮(NO)、降钙素基因相关肽(CGRP)和内皮素(ET)的影响.方法 将68例CHD并CHF患者分为2组,常规用药对照组(地高辛、氢氧噻嗪、硝酸异山梨酯)34例,常规用药加阿托伐他汀联用组34例,并设正常人组34例.N0测定用Greiss法,放射性免疫法测定治疗前后血中CGRP和ET的水平.结果 CHD并CHF患者中NO和CGRP水平明显低于正常人组(P<0.01),ET显著高于正常人组(P<0.01),治疗后均显著改善(P<0.01),且以常规用药加阿托伐他汀组改善更为显著,与常规组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 常规用药加阿托伐他汀能显著改善CHD合并CHF患者的NO、CGRP和ET的代谢失衡.