绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病大鼠肾皮质基因表达谱的影响

目的：探讨绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病大鼠肾皮质基因表达谱的影响及分析绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病在基因水平上的作用机制。方法：应用基因芯片技术比较绞股蓝总皂苷治疗组与糖尿病肾病模型组基因表达谱差异。结果：绞股蓝总皂苷治疗组与糖尿病肾病模型组间差异表达的基因有135条,上调基因31条,下调基因104条。结论：绞股蓝总皂苷能减少糖尿病肾病小鼠的蛋白尿、保护肾功能的机制可能与其抑制晚期糖基化终末产物的作用有关。     

大黄酸对2型糖尿病肾病大鼠疗效观察

目的：观察大黄酸防治2型糖尿病肾病的作用。方法：以高糖高脂饮食联合低剂量链脲佐菌素（STZ）注射方法诱导出2型糖尿病肾病大鼠模型后，分模型组、预防组和治疗组，后2组分别在STZ注射后1周和1个月后给予大黄酸100mg/kg剂量灌胃，每日1次，连续6个月，在不同时间进行形态学和有关生化指标的观察。结果：大黄酸预防给药和治疗后的观察结果显示，大黄酸明显降低糖尿病大鼠的24h尿蛋白排泄，改善肾重指数。肾脏组织病理学显示，大黄酸处理后的糖尿病大鼠肾小球和丝球体的面积明显减小，襻腔扩张减轻，系膜增生和细胞外基质减少。大鼠肾小球纤连蛋白沉积明显减弱。大黄酸也明显降低糖尿病大鼠的血脂水平。以上作用随着给药时间的延长，效果越来越明显。胰岛素抑制试验表明，在大黄酸预防给药和治疗6个月后，糖尿病大鼠的血浆稳态葡萄糖水平（SSPG）显著降低。以上结果比较，以预防组效果为佳。结论：大黄酸通过降低糖尿病大鼠的尿蛋白排泄、减轻肾脏肥大、改善胰岛素敏感性、降低血脂水平，有效地防治2型糖尿病肾病。     

缬沙坦对糖尿病大鼠肾皮质葡萄糖转运蛋白1作用的研究

我们利用糖尿病大鼠模型，观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ATRa)缬沙坦对肾皮质葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、TGF-β1mRNA表达及肾功能、组织结构的影响，从分子水平探讨GLUT1直接介导糖尿病肾病(DN)的机制及缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。     

大网膜包肾对肾小球硬化大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因表达的影响

目的 探讨大网膜包肾术对单侧肾切除加两次注射阿霉素肾小球硬化大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因表达的作用。方法 将实验大鼠分为3组：①正常对照组、②肾小球硬化大鼠大网膜包肾术组、③肾小球硬化大鼠模型组，于第12周留取尿标本。肾组织病理学检查、用Northern blot杂交检测皮质Ⅲ型胶原基因表达mRNA表达。结果 大网膜包肾术组肾病理损伤减轻，肾皮质Ⅲ型胶原mRNA表达下调。结论 大网膜包肾术可延缓肾小球硬化。     

缬沙坦对糖尿病大鼠肾皮质TGF—βl表达的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦(Valsartan)对实验性糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1表达的影响,为糖尿病肾病的防治提供实验性理论基础.方法选择健康雄性SD大鼠24只,任取其中16只腹腔注射链脲佐菌素制成糖尿病大鼠模型.将糖尿病大鼠随机分为糖尿病缬沙坦治疗组(A组,8只,缬沙坦10 mg*kg-1*d-1灌胃);糖尿病对照组(B组,8只);其余8只为正常对照组(C组).分别于实验第6周末测定各组大鼠血糖、血肌酐、尿白蛋白排泄率,对肾脏标本进行光镜观察,用图像分析仪测量各组大鼠平均肾小球面积、平均肾小球体积.并取各组大鼠肾皮质提取RNA,用逆转录-PCR(RT-PCR)方法对肾皮质TGF-β1 mRNA表达进行半定量分析.结果在糖尿病第6周末,B组上述指标较C组均有不同程度的升高(P＜0.01),而A组则显著低于同时期的B组.其中,A组、C组尿白蛋白排泄率始终无统计学差异,肾小球平均面积、平均体积A组显著低于B组(P＜0.01).RT-PCR半定量结果分析显示,B组TGF-β1 mRNA表达较A组、C组显著增高(P＜0.01),A组TGF-β1 mRNA表达较C组为高(P＜0.01),但仍较B组为低(P＜0.05).结论缬沙坦能够抑制肾组织TGF-β1 mRNA的表达,减少糖尿病大鼠的尿白蛋白,减轻及延缓肾小球硬化,发挥保护肾脏的作用.     

大鼠肾皮质淋巴管内皮微通道

目的 探查大鼠肾皮质淋巴管内皮微通道及其超微结构。方法 获取6只大鼠的12个肾脏,对其中8个肾脏进行组织切片、苏木精-伊红（HE）和免疫组织化学（IHC）染色检查。另4个经处理后作扫描电镜检测。结果 大鼠肾脏的HE染色切片很难发现具特征性的淋巴管管壁,但通过LYVE-1的IHC染色可见其呈散在分布,外形不规则,管壁菲薄,并以不同的形状及大小存在,有些细胞核突入管腔中。扫描电镜观察,大鼠肾皮质中淋巴管外表可见散在分布的内皮微通道入口,其包含半圆形的“穹隆顶部”和平坦的“底部”,代谢产物散布在其周围或聚集在入口处。结论 初步介绍了大鼠肾皮质淋巴管内皮微通道的形态结构,其结果可为进一步的基础研究、组织工程和3D组织打印以及临床应用提供实验动物的形态学理论基础。     

转化生长因子β1在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达。方法 将Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成单侧肾切除Ａ组和单侧肾切除糖尿病Ｂ组，观察ＳＴＺ注射一、四周后血糖、血胰岛素水平、体重、肾重、肾重／体重及肾组织蛋白含量变化。利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测肾皮质ＴＧＦβ１、１α（ＩＶ）前胶原及纤维连接蛋白（ＰＮ）ｍＲＮＡ表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测ＴＧＦβ１蛋白水平。另外，使用荧光分光度法测     

肾康注射液对糖尿病肾病大鼠肾组织NF-κB的实验研究

糖尿病肾病的发病机制目前不完全清楚，研究认为炎症因子的表达增加与糖尿病肾病发生的关系密切。本研究通过观察核因子NF～κB在糖尿病大鼠肾小球的表达及肾康注射液干预后的情况，初步探讨肾康注射液对糖尿病’肾病的炎症发病及治疗机制。     

缬沙坦联合大黄治疗糖尿病肾病的临床研究

目的探讨缬沙坦联合大黄治疗糖尿病肾病的疗效。方法将128例糖尿病肾病（DN）患者随机分为缬沙坦对照组和缬沙坦联合大黄治疗组,疗程均为6个月。结果①与治疗前比较,治疗组治疗后血清总胆固醇（TC）、血清甘油三酯（TG）明显下降（P〈0．05,P〈0．01）,血清高密度脂蛋白（HDL-C）明显上升（P〈0．05）,对照组上述指标变化不明显（P〉0．05）;②治疗组与对照组均能显著改善早期DN患者尿白蛋白（MA）、尿α1微球蛋白（α1,MG）、尿β2微球蛋白（β2-MG）（P〈0．05）,而治疗组较对照组疗效显著（P〈0．05）。③对临床DN患者的尿蛋白定量、尿α1-MG、尿β2-MG、血白蛋白（ALB）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）,治疗组均改善显著,而对照组除尿蛋白定量、尿α1,MG、尿β2-MG改善显著外,其余指标改善均不明显。结论缬沙坦联合大黄治疗糖尿病肾病疗效确切。     

大黄及其提取物治疗糖尿病肾病的实验研究进展

近年来大黄及其活性成分对肾脏的保护作用越来越多地被人们所认识.尤其对于其提取物大黄素(emodin)、大黄酸(rhein)进行了大量的实验研究,并证明其治疗作用是多靶点、多层次的.现将有关研究成果综述如下.     

肾脏局部醛固酮对糖尿病肾病大鼠肾小管间质转分化的作用

目的 探讨醛固酮对糖尿病肾病（DN）大鼠肾小管间质转分化的影响。 方法 采用Wistar大鼠腹腔注射链脲菌素（STZ,60 mg/kg）制备糖尿病模型,4周后尿蛋白>30 mg/d为DN模型成功（n=16）,随机分为DN组（n=8）和螺内酯组（SP组,n=8）,以另8只正常大鼠作为对照组（N组）。SP组给予螺内酯40 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1,N组、DN组每日以等量清水灌胃。8周后处死大鼠,收集尿、血浆、肾组织检测24 h尿蛋白定量、血肌酐和肾脏病理变化;用放射免疫法检测血浆、肾组织醛固酮浓度;用免疫组化、Western印迹方法检测E钙黏蛋白（E-cadherin）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白的表达;用RT-PCR的方法检测E-cadherin、α-SMA mRNA的表达。 结果 与对照组比较,DN组尿蛋白排泄量、血肌酐均显著增加（均 P < 0.01）,肾组织E-cadherin蛋白和mRNA表达显著下调（均P < 0.01）,α-SMA蛋白和mRNA表达均显著上调（均P < 0.01）。DN组大鼠肾组织醛固酮显著升高[（24.71±5.30） ng/g比（16.38±2.85） ng/g,P < 0.01],与尿蛋白排泄量、血肌酐、α-SMA蛋白表达呈正相关（r = 0.737、0.574、0.688,均P < 0.05）,与E-cadherin蛋白表达呈负相关（r = －0.659,P < 0.01）。各组间血清醛固酮含量差异无统计学意义。与DN组比较,SP组大鼠尿蛋白排泄和血肌酐显著下降（均P < 0.01）,E-cadherin蛋白和mRNA表达上调（均P < 0.05）,而α-SMA蛋白和mRNA表达显著下调(均P < 0.01)。 结论 DN大鼠肾组织局部醛固酮参与了糖尿病肾病肾间质转分化,螺内酯可以阻断醛固酮与其受体结合,抑制肾小管间质转分化,从而起到肾脏保护作用。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织TLR4表达的影响

目的观察氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织TOLL样受体4（TLR4）表达的影响。方法采用链脲佐菌素（STZ,65mg·kg^-1）腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,将其分为对照组、模型组、治疗组。治疗组在造模成功后1周给予氯沙坦20mg·kg^-1灌胃。12周后测3组24h尿蛋白、血肌酐、肾重／体重、血CRP及TNF-α水平;观察肾脏病理形态学变化;应用免疫组化法检测肾组织TLR4、核因子-κB（NF-κB）的蛋白表达。结果模型组24h尿蛋白、血肌酐、尿素氮、肾重／体重明显升高,肾小球肥大、细胞增生,PAS阳性物质沉积增多。血CRP、TNF-α含量及肾组织TLR4、NF-κB的蛋白表达上调。经氯沙坦治疗后,血CRP、TNF-α含量下降,TLR4、NF-κB的表达下调。结论氯沙坦对糖尿病肾病具有保护作用,其作用机制可能是通过下调NF-κB、TLR4的表达,降低血浆CRP、TNF-α含量来实现的。     

4-苯基丁酸对糖尿病肾病大鼠的作用

目的 探讨化学分子伴侣4-苯基丁酸（4-PBA）对糖尿病肾病（DN）大鼠的治疗作用及其机制。 方法 54只大鼠随机分为正常对照组（NC）、糖尿病肾病组（DN）和4-PBA治疗组（4-PBA）,每组各18只。在治疗第4、8及12周末分别检测各组大鼠肾质量指数（KI）、24 h尿蛋白排泄率（UAER）、血肌酐（Scr）、尿素氮(BUN)、尿丙二醛（MDA）含量和超氧化物岐化酶（SOD）活性;观察肾脏病理改变;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织p47phox mRNA的表达变化;Western印迹检测p47phox和硝基酪氨酸（NT）的蛋白表达变化。 结果 与NC组大鼠比较,在4、8和12周时,DN大鼠的KI显著增高（P < 0.05）,UAER（mg/24 h）也显著增高（4.92±0.70 比 0.26±0.07、 5.29±0.83 比0.28±0.08、5.54±0.81比0.29±0.04,均P < 0.05）。12周时病理显示DN大鼠肾小球系膜细胞增生,系膜基质积聚;而与DN组大鼠比较,4-PBA治疗组大鼠KI显著降低（P < 0.05）,UAER（mg/24 h）亦显著降低（4、8和12周分别为3.71±0.37、3.47±0.36和3.28±0.40,P < 0.05）,4-PBA能显著减轻肾脏的病理变化。在4、8和12周,与NC组大鼠比较,DN大鼠肾组织p47phox mRNA表达分别升高了154.72%、148.60%和91.95%（均P < 0.05）;p47phox蛋白表达分别升高了118.00%、140.10%和177.82%（均P < 0.05）;硝基酪氨酸蛋白表达分别升高了45.29%、59.13%和89.28%（均P < 0.05）;尿MDA含量分别增加了2.05倍、2.26倍和2.43倍;尿SOD活性分别下降了64.78%、71.29%和79.32%。与DN组比较,在8和12周时,4-PBA治疗组DN大鼠肾组织p47phox mRNA和蛋白表达均显著减少（均P < 0.05）;硝基酪氨酸蛋白表达显著减少（P < 0.05）,且与NC组差异已无统计学意义。另外,在4~12周,4-PBA治疗可显著减少DN大鼠尿中MDA含量,增加尿SOD活性（均P < 0.05）。 结论 4-PBA能显著抑制糖尿病大鼠肾脏病理变化,其机制可能与抑制肾组织氧化应激有关。     

血管内皮生长因子基因多态性与糖尿病肾病的相关性研究

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)-634G／C基因多态性与糖尿病肾病(DN)的关系。方法 运用PCR-限制性多态性片段长度(RFLP)技术检测98例健康对照者和216例2型糖尿病患者[其中DN患者104例，单纯2型糖尿病(DM)患者112例]的基因型，比较各组的基因型和等位基因频率。结果 (1)CC基因型者血清VEGFT水平高于CG及GG型者；(2)DN组CC基因型和C等位基因频率显著高于DM组和正常对照组；(3)与GG型和CG型组相比，CC型组DN的发生率明显上升；(4)Logistic回归分析显示VEGF、VEGF基因多态性、收缩压(SBP)、HbA1c、LDL-C、体重指数(BMI)是DN的危险因素。结论 VEGF-63gG／C多态性与2型DM伴发肾病的发生有关，C等位基因可能是DN的易感基因。     

乙酰肝素酶在糖尿病肾病大鼠蛋白尿发生中的作用

目的 观察糖尿病肾病大鼠肾组织乙酰肝素酶（HPA）的表达，探讨其在糖尿病肾病大鼠蛋白尿发生中的作用。 方法 SD健康大鼠被随机分为健康对照组（n = 6）、糖尿病6周组(DM6w, n = 10)和糖尿病12周组(DM12w, n = 10)，采用一次性腹腔注射链脲菌素（STZ）的方法建立糖尿病大鼠模型。分别于造模后6周和12周末测定各组大鼠相对肾质量、血糖、尿素氮、血肌酐、24 h尿量及尿蛋白量(24 h)等指标，并观察肾脏病理改变。RT-PCR和免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织HPA mRNA和蛋白表达变化，并分析其与蛋白尿发生的相关性。 结果 （1）DM6w和DM12w组大鼠的相对肾质量、血糖、尿素氮、24 h尿量及尿蛋白量(24 h)与健康对照组相比明显升高, 差异均有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)。（2）DM6w和DM12w组大鼠HPA mRNA和蛋白表达比健康对照组均显著增高(P < 0.01)。（3）大鼠肾组织HPA mRNA和蛋白表达与尿蛋白量(24 h)之间均呈正相关 (r = 0.783，P < 0.01；r = 0.793，P < 0.01)。 结论 HPA在糖尿病肾病中的表达升高可能参与了糖尿病肾病蛋白尿的发生。     

糖尿病肾病疾病进展相关基因的基因组学研究

目的 研究与糖尿病肾病(DN)进展相关的肾小球基因表达谱及其可能的致病机制。 方法 将DN患者根据蛋白尿、肾小球组织病理学改变和Scr水平分为不同的临床表型组。5例正常对照来自供肾。留取少许肾活检组织，显微镜下分离肾小球，RNA体外线性扩增。采用Affymetrix基因芯片建立DN患者肾小球基因表达谱，以生物信息学方法分析。用实时PCR技术验证基因芯片结果。 结果 不同临床表型的DN患者表现出不同的肾小球基因表达谱。整合3组不同临床表型基因表达谱中共有的变化规律，筛选出与DN疾病进展相关的139个基因。其中表达改变涉及最多的是与糖、脂质代谢相关的基因，其表达水平呈现一致性的下调；表达改变最为显著的是与炎症相关的分子。 结论 大量蛋白尿、肾小球节段硬化和Scr升高等与DN疾病进展相关的临床表型伴有肾小球基因表达谱的改变。在DN进展中，糖代谢和脂质代谢同时发生紊乱，相关基因表达水平一致下调。细胞能量代谢紊乱及继发的局部炎症反应也发挥了重要作用。     

糖尿病肾病与糖尿病视网膜病变的相关性研究进展

糖尿病肾病(DN)和糖尿病视网膜病变(DR)均是糖尿病的微血管病变，是目前成人终末期肾病(ESRD)和致盲的重要原因，两者在发生、发展过程中具有一定平行性，又存在不平行性。DN和DR可预测彼此的发生、发展，但目前对于两者之间的关系尚未明确。因此，本文就DN与DR之间的相关性的研究进展作一综述，为临床诊断治疗提供帮助。     

糖尿病肾病研究进展

糖尿病肾病是糖尿病最严重的微血管并发症。近10年来,糖尿病肾病患者快速增长,已成为危害人类健康的公共卫生疾病。目前在欧美等发达国家,DN约占终末期肾病(ESRD)的50%,已成为尿毒症的首位原发病;在我国约占25%～40%,是患者血液透析的重要原因。因此,及时发现与防治DN,对于延缓病情进展、提高患者生活质量意义重大。     

组织型转谷氨酰胺酶在糖尿病大鼠肾组织中的表达及意义

目的 探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达及其意义。 方法 链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠制备DM模型，分别于第30、60、90和120天处死DM组大鼠6只、对照组(C组)3只。测定尿白蛋白量(AER)、肾重指数和血肌酐(Scr)。HE染色和PASM染色观察肾组织病理变化。免疫组织化学检测肾脏胶原Ⅳ(Col Ⅳ)和可溶性tTG表达。间接免疫荧光检测不溶性tTG分布。用RT-PCR检测总tTG mRNA表达。 结果 各个时间点DM组大鼠的AER、肾重指数和Scr均较C组明显升高(P < 0.05，P < 0.01)。DM组Col Ⅳ、可溶性tTG和不溶性tTG蛋白的表达均较C组明显增多(P < 0.05，P < 0.01)，且均随病程进展呈上升趋势。可溶性tTG和不溶性tTG蛋白水平都与AER呈正相关(r=0.937和0.809，P 均<0.01)。DM大鼠肾小球系膜区Col Ⅳ和不溶性tTG蛋白表达增加部位一致，且两者水平显著正相关(r=0.831，P < 0.05)。DM组总tTG mRNA的表达从第30天起开始上升、第90天达高峰，第120 天稍下降。 结论 tTG在DM大鼠肾组织的过度表达及不溶性tTG与Col Ⅳ表达的正相关，提示tTG可能参与了早期糖尿病肾病(DN)的发病过程。     

氯沙坦对糖尿病肾病患者尿足细胞排泄的影响

目的 观测糖尿病肾病(DN)患者尿足细胞排泄特征及氯沙坦对其的干预作用。方法 前瞻性研究入选30例2型DN患者，经6周洗脱期后给予氯沙坦50 mg/d×8周，继以氯沙坦100 mg/d×8周治疗。10例健康志愿者作为正常对照。采用间接免疫荧光镜检法检测单克隆抗体podocalyxin标记的尿足细胞。结果 DN患者组尿脱落足细胞明显多于对照组。氯沙坦可以显著减少糖尿病肾病患者尿足细胞脱落排泄，但未观测到大剂量氯沙坦比小剂量具有更好的保护作用。糖尿病肾病患者尿足细胞排泄计数与系统血压、尿蛋白量无显著相关。30例糖尿病肾病患者CKD2期组(21例)比CKD3期组(9例)尿足细胞排泄计数显著增多。经治疗后CKD2期组尿足细胞排泄明显减少；CKD3期组无明显变化。结论 尿脱落足细胞可能是预测糖尿病肾病进展的早期有效因子，氯沙坦对糖尿病肾病患者尿足细胞起重要的保护作用。