荧光引导下恶性胶质瘤切除的临床研究进展

由于恶性胶质瘤弥漫浸润性的生长方式,最大程度安全切除肿瘤,对神经外科医生具有挑战性。荧光引导手术利用荧光药物实时标识肿瘤,提高肿瘤边界可视性,增加肿瘤切除程度。本文对荧光引导手术中常用的吲哚菁绿(ICG)、荧光素钠(FLS)和5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)三种荧光药物,在恶性胶质瘤切除中的临床研究进展进行综述。     

5-氨基酮戊酸荧光判定恶性胶质瘤边界的实验研究

目的建立5-氨基酮戊酸(5-ALA)荧光判定恶性胶质瘤边界的实验模型。方法采集存活率为99%的U87Δ胶质瘤细胞,采用立体定向仪将U87Δ胶质瘤细胞移植到裸鼠脑部。饲养观察3周,在荷瘤鼠腹腔内注射5-ALA4h后开颅,分别在白光及荧光系统下观察肿瘤与正常脑组织,在肿瘤最大冠状面不同荧光强度处取活检行苏木精-伊红染色。结果实验鼠成瘤率为100%。白光下肿瘤呈淡黄色,荧光系统下肿瘤整体边界呈现荧光。肿瘤冠状面边界亦显示荧光,正常脑组织无荧光。染色结果显示:新生物为恶性胶质瘤,而荧光处为胶质瘤边界。结论 5-ALA荧光引导下的胶质瘤模型能可靠区分恶性胶质瘤与正常脑组织边界,为此类研究提供较理想的实验基础。     

5-ALA的光动力学治疗在脑胶质瘤中的应用进展

人脑胶质瘤是一种侵袭性的恶性肿瘤,其边界不清,手术难以全切,术后的放、化疗效果差,不尽人意。5-氨基乙酰丙酸（5-aminolevulimic acid,5-ALA）是人体合成卟啉和血红素的前体。外源性的5-ALA诱导产生的血红素合成前体原卟啉IX,能够选择性地聚集于人脑胶质瘤细胞内,在一定波长的光辐射下,发生荧光反应和光促氧化反应。利用这种荧光反应可以进行术中定位脑胶质瘤边界,辅助切除肿瘤残留组织并保护正常脑组织;并且进一步通过光促氧化反应产生活性氧物质杀伤肿瘤组织。近来大量临床研究表明,光动力学定位（Photodynamic diagnosis,PDD）及治疗（Photodynamic therapy,PDT）能够明显减少肿瘤复发的机会并延长患者生存时间。因此我们将就5-ALA在脑胶质瘤中的应用作一综述。     

荧光引导下脑胶质瘤边界的组织病理学研究

目的 5-氨基乙酰丙酸(ALA)引导的荧光手术已应用于临床恶性脑胶质瘤的治疗,本实验的目的是探讨ALA荧光引导切除脑胶质瘤的荧光边界与侵袭性的关系.方法 对11例胶质母细胞瘤患者麻醉诱导前3h给予口服ALA,术中使用荧光显微镜检测肿瘤荧光,根据有无荧光留取组织标本.利用免疫组化方法检测荧光组与非荧光组组织中侵袭性指标细胞粘附分子CD44(CD44-HCM)、基质蛋白酶-9(MMP-9)和肌腱蛋白(TN)的表达.结果 CD44-HCM、MMP-9和TN在荧光组织与无荧光组织中的阳性表达率有显著差异(P＜0.01),与无荧光的组织相比,荧光组中CD44-HCM、MMP-9和TN表达的阳性率明显增加.结论 ALA诱导的肿瘤荧光边界与脑胶质瘤组织病理学边界相符,进一步表明,荧光引导手术能够有效的切除脑胶质瘤,并且为手术提供客观边界.     

5-氨基乙酰丙酸介导的光动力对人脑胶质瘤细胞的治疗作用

目的探讨5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)介导的光动力学对人脑胶质瘤U251细胞的治疗作用方法使用荧光显微镜及共聚焦显微镜检测5-ALA所产生的光敏剂原卟啉(PpIX)在U251细胞中的定位。将5-ALA加入U251细胞中,随之以635nm的激光辐射,使用MTT法测定细胞生存率结果5-ALA与U251细胞共培养可以产生光敏剂原卟啉。原卟啉弥散地分布在U251细胞的胞浆中,胞核区未见分布。5-ALA介导的光动力对人脑胶质瘤U251细胞的杀伤作用随着5-ALA与U251细胞孵育时间的延长及5-ALA浓度的增加而增加,但在孵育6h、5-ALA浓度为2mmol/L时达饱和。而单用5-ALA或单纯激光辐射,对U251细胞无明显的杀伤作用。结论5-ALA介导的光动力治疗是很有前途的人脑胶质瘤治疗方法,5-ALA与U251细胞孵育的最佳时间为6h,最佳5-ALA药物浓度为2mmol/L     

5-氨基乙酰丙酸荧光引导显微手术切除人脑胶质瘤

目的探讨临床应用荧光物质引导的显微手术切除人脑胶质瘤的要点,评估该技术的安全性及疗效。方法2006年4月至2006年10月术前经CT或MRI证实胶质瘤的11例病人接受了荧光引导胶质瘤手术。男5例,女6例。年龄35～66岁,平均48．5岁。术前应用5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）,术中根据所提供的荧光影像判定肿瘤边界并切除肿瘤。根据不同荧光强度取材进行HE染色以检测手术切除情况。术后行MRI检查以确定肿瘤的切除情况。结果胶质瘤在荧光光源的照射下被激发出红色荧光,而正常脑组织不发光。荧光强度高的肿瘤组织HE染色显示含有大量的肿瘤细胞,并可见血管内皮细胞增生,荧光强度较弱或者没有荧光的区域仅有少量的肿瘤细胞和血管内皮细胞增生。病人术后的MRI检查证实肿瘤切除比较完全。结论该方法能够有效的切除胶质瘤,并为手术者提供客观的肿瘤边界,提高了手术切除率。对该方法的确切评估尚需对手术病人进行长期随访。     

荧光显像技术在脑肿瘤切除术中的应用现状与展望

目前,恶性胶质瘤主要采用显微手术切除肿瘤为主,结合放疗、化疗等综合治疗。手术最大范围地切除肿瘤是影响颅内肿瘤病人无进展生存期和总生存期的重要且独立的影响指标之一[1]。新技术有助于最大范围地安全切除脑肿瘤。本文就荧光显像技术在脑肿瘤切除术中的应用现状与展望进行综述。1神经外科常用的荧光染料荧光素钠(fluorescein sodium,FLS)、δ-氨基-γ-酮戊酸(5-Aminolevulinic Acid,5-ALA)和吲哚青绿(Indocyanine green,ICG)为目前神经外科使用较多的荧光染料。     

荧光导航辅助下切除功能区恶性胶质瘤

目的探讨荧光导航技术在切除功能区恶性胶质瘤手术中的应用价值。方法对8例功能区恶性胶质瘤病人．术中利用荧光素钠将肿瘤染色，根据荧光影像判定肿瘤的边界并切除肿瘤。比较术中所见与病理组织检查结果。结果术后复查CT或MRI．肿瘤全切除7例〈87．5％），次全切除1例。术后神经功能未受明显影响，无手术并发症。结论荧光引导技术具有实时导航，客观、安全、可靠等特点，能提高功能区恶性胶质瘤全切除率及降低手术并发症。     

白藜芦醇增强5-氨基酮戊酸在人脑胶质瘤细胞中的光动力治疗作用

目的研究白藜芦醇不但具有直接治疗脑胶质瘤的作用,而且作为一种ABCG2抑制剂,可以通过抑制BCRP/ABCG2,影响原卟啉Ⅸ(PpⅨ)排出细胞。探讨白藜芦醇增强对于经5-氨基酮戊酸(5-ALA)处理过的人脑胶质瘤细胞的光治疗(PDT)效果。方法 4种恶性脑胶质瘤细胞系(U87MG,U251,A172和T98G)在和不同浓度(0. 01～1. 0μmol/L)的白藜芦醇作用之前,与5-ALA(1 mmol/L)相互作用。测定白藜芦醇对细胞内外的PpⅨ水平,BCRP/ABCG2 mRNA和ABCG2蛋白的表达,以及体外PDT的效果。结果0. 1μmol/L或更高浓度的白藜芦醇,可以提高恶性脑胶质瘤细胞内的PpⅨ水平,在所有4种细胞系均呈药物剂量依赖性。白藜芦醇不但可以降低BCRP/ABCG2 mRNA的表达水平,而且可以减少细胞膜上BCRP/ABCG2蛋白的表达;并且有效地提高恶性脑胶质瘤细胞PDT的效果。结论白藜芦醇不但可以抑制BCRP/ABCG2介导的恶性脑胶质瘤细胞内PpⅨ的外流,并且可以增加细胞内的PpⅨ的含量,从而达到提高PDT的效果。     

5-ALA介导的光动力治疗鼠C6胶质瘤的实验研究

目的研究以5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）作为光敏剂的光动力治疗（PDT）对大鼠C6胶质瘤移植瘤的效果。方法通过皮下接种C6胶质瘤细胞建立大鼠移植胶质瘤模型。将24只荷瘤大鼠平均随机分成3组：A组按剂量20mg／kg在瘤内注射5-ALA，2h后在肿瘤局部行激光照射；B组行单纯激光照射，不予任何光敏剂；C组为荷瘤空白对照组，不给任何治疗。PDT后不同时间，测量肿瘤体积并观察其组织学变化。结果治疗后第4、8和14天A组肿瘤体积与B、C组相比明显缩小（P〈0．05），组织学上可见大量肿瘤细胞坏死。结论5-ALA作为光敏剂介导的PDT能使大鼠C6胶质瘤移植瘤组织坏死，生长速度明显减慢，有望成为胶质瘤治疗的新途径。