D3卵裂期胚胎玻璃化冷冻技术在IVF实验室中的应用

目的探讨玻璃化冷冻技术在人类卵裂期胚胎冻存中的应用价值。方法回顾性分析本中心261个冷冻胚胎复苏周期,比较2种冷冻方法的胚胎存活率、完好率、妊娠率和种植率等数据。结果玻璃化冷冻组的存活率(97.11%)、完好率(89.02%)和种植率(23.12%)显著高于程序化组(91.31%、63.73%、16.31%)(P<0.05),而妊娠率和平均年龄、平均移植胚胎数、平均内膜厚度两组间无统计学差异(40.26%vs40.22%、31.3±5.3vs32.2±5.5、2.25±0.55vs2.27±0.70、8.9±1.1vs9.1±1.6)(P>0.05)。结论玻璃化冷冻是卵裂期胚胎保存的优选方法。     

两组冷冻保护剂对卵裂期胚胎玻璃化冷冻效果的研究

目的：评价两组玻璃化冷冻保护剂对卵裂期胚胎的冷冻效果。方法以体外受精-胚胎移植周期患者受精后第3天废弃胚胎为实验对象,共102枚胚胎入选,随机分为乙二醇＋丙二醇（EG＋PROH）组52枚,乙二醇＋二甲基亚砜（EG＋DMSO）组50枚。比较观察两组玻璃化冷冻保护剂对卵裂期胚胎冷冻解冻后胚胎的复苏效果。结果玻璃化冻融后两组在复苏率上无显著差异,但在完整胚胎复苏率和卵裂球复苏率上EG＋PROH组显著高于EG＋DMSO组（P＜0.05）。结论对于卵裂期胚胎的玻璃化冷冻,选用EG＋PROH作为冷冻保护剂可取得较好的效果。     

卵裂期胚胎、囊胚的玻璃化冷冻解冻的妊娠结果分析

目的 比较卵裂期胚胎、囊胚行玻璃化冷冻解冻后的妊娠结果.方法 回顾性分析2010年6月～2010年9月在该院生殖中心行玻璃化冷冻解冻患者共185周期的妊娠情况;其中卵裂期胚胎冷冻解冻后移植者127周期,卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养后移植者42周期,囊胚冻融后移植16周期.结果 玻璃化冷冻解冻患者共185周期,移植176周期,获得妊娠75周期,妊娠率42.61%;卵裂期胚胎冻融后移植者,卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养者,囊胚冻融移植者复苏率分别为96.76%(299/309)、95.83%(161/168)、94.12%(32/34),着床率分别为22.37%(66/295)、23.44%(15/64)、50%(14/28).妊娠率分别为40.94%(52/127)、33.33%(11/33)、75%(12/16).卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养的患者共42人,其中有9人未形成可移植囊胚而取消移植.其他两组解冻后没有取消移植的例数.结论 3组的玻璃化冻融复苏率无统计学差异.囊胚冷冻解冻能获得较高的着床率和妊娠率.     

玻璃化冷冻方法三种冷冻载体冻存卵裂期胚胎效果的比较

目的应用冷冻环、冷冻膜和自制麦管片三种冷冻载体,采用玻璃化冷冻方法冻存昆明小鼠卵裂期胚胎,比较三种载体的冻存效果。方法采集通过体外受精在体外培养第2天得到的4-8细胞期的昆明小鼠胚胎247个,对其中177个按载体不同随机分为冷冻环组59个,冷冻膜组59个,自制麦管片组59个;剩余的新鲜胚胎70个作为对照组,比较冻融后鼠胚的复苏率和囊胚形成率。结果冷冻环组、冷冻膜组和自制麦管片组的胚胎复苏率分别为98.3%、98.3%和94.9%,三组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;冷冻环组、冷冻膜组和自制麦管片组的囊胚形成率分别是84.5%、86.2%和82.1%,三组比较无统计学差异（P〉0.05）;新鲜对照组囊胚形成率为94.3%,与冷冻环组、冷冻膜组分别比较无统计学差异（P均〉0.05）,与自制麦管片组有统计学差异（P〈0.05）。结论采用玻璃化冷冻方法冻存小鼠卵裂期胚胎,使用冷冻环和冷冻膜作为冷冻载体具有复苏率高、囊胚形成率高的优点,更适合应用于临床。     

玻璃化冷冻技术在全胚胎冷冻中的应用价值

目的：观察采用玻璃化冷冻技术行全胚胎冷冻后解冻移植患者的临床结局,并与同期新鲜周期移植患者相比较,探讨玻璃化冷冻技术在全胚胎冷冻并行复苏移植中的应用价值。方法：全胚胎冷冻组为体外受精(IVF)未移植患者40个周期,新鲜周期组为同期体外受精及胚胎移植（IVF-ET）患者300例,对2组的平均移植胚胎数、优质胚胎数、子宫内膜厚度、雌二醇（E2）水平、临床妊娠率进行比较。结果：2组之间在平均移植胚胎数、优质胚胎数、子宫内膜厚度方面的差异均无统计学意义（P＞0.05）;新鲜周期组的E2水平明显高于全胚胎冷冻组（P<0.05）, 临床妊娠率明显低于全胚胎冷冻组（P<0.05）。结论：玻璃化冷冻技术是一种简便、可靠、高效的胚胎冷冻技术;对于符合要求的患者,全胚胎冷冻并适时行冻胚移植是可行的胚胎移植策略,值得临床深入研究和推广。     

程序化与玻璃化冷冻保存人D2和D3胚胎的临床结局比较

目的比较程序化和玻璃化冷冻保存人D2和D3胚胎的临床结局,分析探讨不同冷冻方法对人D2和D3胚胎冷冻的影响。方法回顾性分析了本中心170个D2和D3胚胎复苏周期,比较程序化和玻璃化冷冻复苏后的存活率、卵裂球存活指数、完胚率、≥1完胚移植率、种植率、临床妊娠率、流产率等指标。结果程序化解冻移植周期47个,存活率73.60%,卵裂球存活指数65.88%,完胚率31.46%,≥1完胚移植率80.85%,胚胎种植率14.17%,临床妊娠率36.17%,流产率11.76%。玻璃化解冻移植周期120个,存活率92.96%,卵裂球存活指数86.49%,完胚率68.04%,≥1完胚移植率90.83%,胚胎种植率18.84%,临床妊娠率35.83%,流产率9.30%。玻璃化冷冻比程序冷冻能显著提高胚胎存活率、卵裂球存活指数和完胚率(P<0.05),但在≥1完胚移植率、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率上无显著性差异。无论采用哪种冷冻方法,D2和D3胚胎在所有统计指标上差异均没有显著意义。结论玻璃化冷冻是一种有效的冷冻方法,其复苏存活率、卵裂球存活指数和完胚率均明显高于程序化冷冻,可作为传统程序化冷冻的替代方法。D3胚胎冷冻没有比D2胚胎更有优势,对于工作量较大的IVF实验室可选择D2胚胎冷冻移植。     

玻璃化冷冻技术在辅助生殖中的应用

目的:探讨玻璃化冷冻技术在人类辅助生殖技术中的有效性。方法:对进行IVF治疗的不育症患者通过超促排卵后,在肌注HCG 36 h后进行取卵,并进行体外受精,将D3移植后的剩余胚胎进行玻璃化冷冻保存,若患者新鲜周期妊娠失败,则将其解冻并移植。结果:在2011年4月至2012年3月,共解冻经玻璃化冷冻的胚胎560枚,存活531枚,存活率为94.8%;将存活的531枚胚胎移植给243例患者,共计有76例患者成功妊娠,其植入率为19.4%,妊娠率为31.3%。结论:玻璃化冷冻技术在人类辅助生殖技术中是一项有效的、实用的IVF衍生技术。     

胚胎玻璃化冷冻技术在辅助生殖治疗中的应用

目的探讨人类卵裂期胚胎玻璃化冷冻在临床治疗中的应用效果。方法经患者知情同意后,将实施体外受精一胚胎移植术患者第3天移植后剩余的符合冷冻标准的胚胎进行玻璃化冷冻保存。如果新鲜周期妊娠失败,根据患者情况解冻胚胎,观察胚胎复苏后的临床妊娠效果。结果玻璃化冷冻84个周期,解冻胚胎207枚,解冻后存活胚胎198枚,存活率为95．7％;完整存活胚胎187枚,完整存活胚胎率为90．3％;种植胚胎41枚,种植率为19．8％;临床妊娠28倒,临床妊娠率为33．3％。早期流产3例,足月分娩5例,20例继续妊娠。结论玻璃化冷冻法适于人类早期胚胎的冷冻保存,获得了理想的复苏率、种植率和妊娠率。     

冻融卵裂期胚胎复苏移植和冻融囊胚复苏移植的临床结局比较

目的 :比较Cryotop玻璃化冷冻的人类卵裂期胚胎、囊胚复苏移植的临床结局。方法 :回顾性分析2009年1月~2012年12月南京医科大学附属南京妇幼保健院生殖医学中心完成的1 307例玻璃化冷冻解冻移植周期,其中卵裂期胚胎复苏移植周期(A组)337例,冻融囊胚复苏移植周期(B组)970例。比较两组临床妊娠率、种植率、妊娠结局及新生儿情况等各项指标。结果:1 A组复苏率为86.42%,B组复苏率为83.71%,无显著统计学差异;2A组平均移植胚胎数(2.07±0.47)个显著高于B组(1.68±0.37)个;A组临床妊娠率及种植率(45.99%、27.32%)显著低于B组(54.95%、42.64%);3A组和B组的流产率、早产率、单胎率及多胎率分别为16.77%、25.24%、64.08%、35.92%和15.01%、25.34%、72.21%、27.29%,两组孕龄为(265.41±15.45)d和(264.46±16.12)d,两组均无明显统计学差异。A组异位妊娠率显著高于B组(3.23%vs 0.75%);4A组和B组巨大儿、生长受限及新生儿出生缺陷发生率分别为4.85%、1.94%、0.97%和7.36%、3.81%、1.36%,两组间无统计学差异。结论:卵裂期胚胎和囊胚行Cryotop玻璃化冷冻后冻融复苏率无统计学差异,冻融囊胚复苏移植周期具有更高的种植率、临床妊娠率和较低的异位妊娠率,而两组新生儿的流产率、早产率及出生缺陷率无明显差异。     

HBV转基因小鼠胚胎玻璃化冷冻保存研究

目的研究OPS法对不同基因型的HBV转基因小鼠胚胎玻璃化冷冻的效果，为建立转基因小鼠胚胎库奠定基础。方法采用乙二醇作为冷冻保护剂，以野生型P21^ / 小鼠为对照，用OPS法对P21^HBsAg／HBsAg及P21^HBx/HBx两种HBV转基因小鼠3．5d的胚胎进行玻璃化冷冻，并比较不同基因型小鼠的超数排卵数，胚胎的复苏率及发育率。结果P21^ / 、P21^HBsAg／HBsAg及P21^HBx/HBx小鼠平均超排数分别为27．89、15．56、9．14枚；复苏率分别为88．7％、81．1％、80．3％；发育率分别为82．6％、79．4％、56．6％。结果表明HBV转基因小鼠的超排数明显低于野生型小鼠的超排数，解冻后三种小鼠的胚胎复苏率之间无显著差别，而解冻后发育率，P21^HBx／HBx小鼠要明显低于其它两种小鼠。结论超排数、胚胎复苏率及解冻后发育率受小鼠的基因型影响。     

玻璃化冷冻法保存人类胚胎干细胞

[目的]探讨玻璃化冷冻方法保存人类胚胎干细胞的效率.[方法]冷冻保存人类胚胎干细胞,按冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组和慢速冷冻组,比较两组解冻后人类胚胎干细胞的细胞复苏率、克隆生长与分化情况,并比较分析解冻后的与未经冷冻的胚胎干细胞的生长、分化情况,鉴定解冻后人类胚胎干细胞的全能性.[结果]玻璃化冷冻组与慢速冷冻组解冻后的细胞复苏率分别为81.9%和22.8%(P＜0.001).慢速冷冻组解冻后克隆生长较玻璃化冷冻组缓慢且更易分化.两组未分化的胚胎干细胞继续培养的生长与分化情况一致.玻璃化冷冻组解冻后第6代人类胚胎干细胞染色体核型正常,SSEA-4、SSEA-3阳性,表达OCT-4基因.人类胚胎干细胞来源的畸胎瘤包含了来源于3个胚层的组织细胞.[结论]玻璃化冷冻是保存人类胚胎干细胞的有效方法,解冻后的干细胞在继续培养过程中仍可保持其正常核型和全能性.     

玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎中的应用

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一,在保存未成熟卵细胞、成熟卵细胞、原核期胚胎、卵裂早期胚胎及囊胚方面均取得成功,并相继有临床妊娠分娩的报道。本文总结了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎方面的应用。     

单胚胎玻璃化冷冻对小鼠胚胎体外发育的影响

目的:比较单胚胎玻璃化冷冻与慢速冷冻对小鼠分裂期胚胎损伤和体外发育的影响,探讨使用玻璃化冷冻保存大量胚胎的可行性。方法:选择8-细胞胚胎随机进行改良的玻璃化和慢速冷冻,复苏后培养至囊胚孵出,计数胚胎复苏率、卵裂球死亡率、囊胚形成率、细胞团数、孵出率,并进行组间比较分析。结果:玻璃化冷冻组复苏率、卵裂球死亡率、囊胚形成率、孵出率、细胞团数分别为100%、12.7%、75.7%、66.4%、112,慢速冷冻组分别为87.1%、31.0%、35.5%、58.7%、78,除囊胚孵出率其余各指标两组间差异均具有统计学意义。结论:单胚胎玻璃化法冻存小鼠分裂期胚胎复苏后细胞成活率高,结构完整,更好的保持了胚胎的发育潜能。     

胚胎玻璃化冷冻技术治疗不孕症1例

<正>随着人工促排卵、胚胎培养技术的日益完善,胚胎冷冻技术也成为人们日益关注的焦点。玻璃化冷冻技术因其具有操作简单、迅速、快捷及复苏率高等优点[1]而成为新的、可行的胚胎冷冻方式。本文就应用玻璃化冷冻技术获得临床妊娠的病例报告如     

快冻和慢冻法对胚胎复苏结局的比较

目的:比较辅助生殖技术中快冻(玻璃化法)和慢冻(程序化法)两种冷冻方法对卵裂期胚胎的冻融效果.方法:将复苏后全部卵裂球存活的胚胎定义完整存活胚胎,同一病人由于有多余冻融胚胎而行2次及以上移植周期的称为重复周期.对577个快冻周期和276个慢冻周期的相关资料进行回顾性统计学分析,比较两组冻融胚胎的存活率、完整存活率、重复...     

玻璃化冷冻-复苏囊胚和卵裂期胚胎移植周期的临床结果比较

<正>在体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)过程中,胚胎冷冻保存技术是其中的重要环节之一,患者新鲜胚胎移植后剩余胚胎需冷冻保存;还有不适合做新鲜胚胎移植的患者需全胚冷冻保存,例如卵巢过度刺激综合征、宫腔积液、子宫内膜容受性不佳,以及需要进行放疗或化疗的患者等,必须延迟胚胎移植的时间。胚胎冷冻保存技术为这部分不孕患者提供了一种选择方案。目     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用

目的 探讨玻璃化冷冻技术在人类早期胚胎冻存中的临床应用价值.方法 回顾性分析本中心822个冷冻胚胎复苏周期,依据胚胎冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组(490个周期)和程序化冷冻组(332个周期),比较两组胚胎复苏率、复苏胚胎完整率、胚胎种植率、临床妊娠率等数据.结果 玻璃化冷冻复苏组与程序化冷冻复苏组胚胎复苏率分别为98.8％和82.9％,复苏胚胎完整率分别为96.8％和63.1％,胚胎种植率分别为32.0％和18.1％,临床妊娠率分别为53.9％和33.1％,两组数据比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适合于人类早期胚胎的冷冻保存.     

玻璃化冷冻研究进展

玻璃化冷冻是继程序化慢速冷冻之后发展起来的一种新的冷冻方法，它操作简单且不需要高精密的程序降温仪。玻璃化冷冻的效果与冷冻保护剂的种类和浓度、缓冲介质、冷冻方法、冷冻容器、冷冻速率等因素有关。本文叙述了近10余年玻璃化冷冻的研究进展。     

不同级别胚胎玻璃化冷冻时长对复苏周期临床结局的影响

目的 探讨不同级别胚胎玻璃化冷冻时长对复苏周期妊娠结局的影响。方法 回顾性分析2016年1月至2021年12月在中国人民解放军联勤保障部队第九〇四医院生殖中心行玻璃化冷冻胚胎复苏移植的2210个周期,按胚胎级别分为4类：卵裂期1级、2级、3级胚胎及囊胚期胚胎;按时间分为6组：第1组≤180d（1122个周期）,第2组180~<360d组（507个周期）,第3组360~<720d组（216个周期）,第4组720~<1080d（195个周期）,第5组≥1080d（170个周期）,比较各组患者的基本情况、临床结局。结果 解冻卵裂期1级胚胎妊娠率、种植率随冷冻时间延长降低,其中第1组最高,分别为68.3%和70.7%（P<0.05）;解冻卵裂期2级胚胎随冷冻时间延长妊娠率、种植率比较,差异有统计学意义（P<0.05）,其中1、4、5组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;解冻囊胚期胚胎妊娠率、种植率随冷冻时间延长降低,第1组最高,分别为66.7%和62.3%（P<0.05）;各组卵裂期及囊胚期胚胎活产率、流产率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 随着冷冻时间的延长,卵裂期优质胚胎及囊胚妊娠率、种植率有下降趋势;胚胎的短期冷冻（≤180d）可提高临床妊娠率;胚胎冷冻时间延长虽不影响活产率、流产率,但仍鼓励取卵后半年内择优移植。