应用自旋标记——顺磁共振研究严重烧伤大鼠早期心肌细 …

目的 利用自旋标记－顺磁共振技术研究严重烧伤大鼠早期心肌细胞膜的变化。方法 用５－氮氧自由基硬脂酸和１６－氮氧自由基硬酯酸分别主到不同深度的膜类脂区,观察严重烧伤地大鼠心肌细胞不同深度的类脂区流动性的影响,同时用３－甲基马来酰亚胺氮氧自由基标记膜蛋白巯基,观察膜蛋白旋转相关时间及强固定化与弱固定化组分谱线高度比值的变化。结果 严重烧伤大鼠早期心肌细胞脂浅层的序参数（Ｓ）值无明显变化,而膜脂深层Ｓ值     

应用自旋标记—顺磁共振研究严重烧伤大鼠早期心肌细胞膜变化

目的利用自旋标记—顺磁共振技术研究严重烧伤大鼠早期心肌细胞膜的变化。方法用5-氮氧自由基硬脂酸(5-doxylstearic acid,5NS)和16-氮氧自由基硬酯酸((16-doxylstearic acid,16NS)分别掺入到不同深度的膜类脂区,观察严重烧伤对大鼠心肌细胞不同深度的膜类脂区流动性的影响,同时用3-甲基马来酰亚胺氮氧自由基(3-maleidoproxy1,3MP)标记膜蛋白巯基,观察膜蛋白旋转相关时间(τ_c)及强固定化与弱固定化组分谱线高度比值(h_s/h_w)的变化。结果严重烧伤大鼠早期心肌细胞膜脂浅层的序参数(S)值无明显变化,而膜脂深层 S 值增大,膜蛋白 h_s/h_w 显著增大,膜蛋白旋转相关时间τ。也显著增大。结论严重烧伤后早期即出现心肌细胞膜的损伤,表现为膜脂质深层流动性下降,膜蛋白构象改变,膜蛋白运动受限。这些变化可以直接影响细胞膜蛋白的功能,从而导致心肌细胞功能的变化。     

大鼠附睾精子成熟过程中膜流动性变化的研究

精子在附睾内的运行过程中，结构和功能发生变化，最终达到成熟，并贮存于附睾尾部。本文用５－Ｄｏｘｙｌ－ｓｔｅａｒｉｃａｃｉｄ（５ＤＳＡ）和１６－Ｄｏｘｙｌ－ｓｔｅａｒｉｃａｃｉｄ（１６ＤＳＡ）为标记，在电子自旋共振（ＥＳＲ）波谱仪上研究成年ＳＤ雄鼠附睾头、体、尾各段的精子膜流动性的变化，并用低渗膨胀（ＨＯＳ）试验测定精子膜对渗透压的反应能力。结果表明，从附睾头部到尾部，精子膜膜脂的流动性逐步降低，特别是从体部到尾部更为明显（Ｐ＜０．０１），而精子膜对渗透压的反应能力也逐渐降低，主要表现在从头部移行到体部的精子（Ｐ＜０．０１）。精子成熟过程中的脂质过氧化反应，可能是降低膜脂流动性的原因之一。     

大鼠附睾精子成熟过程中膜流动性变化的研究

精子在附睾内的运行过程中，结构和功能发生变化，最终达到成熟，并贮存于附睾尾部。本文用５－Ｄｏｘｙｌ－ｓｔｅａｒｉｃ ａｃｉｄ和１６－Ｄｏｘｙｌ－ｓｔｅａｒｉｃ ａｃｉｄ为标记，在电子自旋共振波谱仪上研究成年ＳＤ雄鼠附睾头，体，尾各段的精子膜流动性的变化，并用低渗膨胀试验测定精子膜对渗透压的反应能力。     

大鼠烧伤后心肌局部肾素-血管紧张素系统的改变

目的观察烧伤早期心肌局部肾素血管紧张素系统（ＲＡＳ）变化及其对心肌肌浆网（ＳＲ）钙运转功能的影响,探讨烧伤早期心功能障碍的发病机制。方法大鼠随机分为对照组（８只,不予致伤）,烧伤组（４０只,致３０％Ⅲ度烧伤）,治疗组（４０只,Ｌｉｓｉｎｏｐｒｉｌ灌胃３天后致３０％Ⅲ度烧伤）,测定烧伤前（对照组）及烧伤后３,８,２４ｈ左心功能变化,心肌组织血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性,血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）及钙离子（Ｃａ２＋）含量变化,测定心肌ＳＲＣａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性,及ＳＲＣａ２＋运转功能的变化。结果烧伤组大鼠左心室内压变化最大速率（±ｄｐ／ｄｔｍａｘ）明显降低,心肌组织ＡＣＥ活性、ＡⅡ及Ｃａ２＋含量显著增加,心肌ＳＲＣａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性降低,ＳＲＣａ２＋摄取减少。治疗组预防性给予ＡＣＥ抑制剂Ｌｉｓｉｎｏｐｒｉｌ可显著降低烧伤后心肌组织ＡＣＥ活性,减少ＡⅡ产生,Ｃａ２＋含量降低,增加ＳＲＣａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性,ＳＲＣａ２＋摄取增加,左心室功能明显改善。结论烧伤早期心肌局部ＲＡＳ迅速激活,抑制ＳＲＣａ２＋运转,可能是心肌ＲＡＳ促进烧伤早期心功能障碍的作用机制之一。     

烧伤休克延迟复苏对红细胞膜蛋白结构、功能和运动的影响

我们采用２５％ＴＢＳＡⅢ度烧伤大鼠模型，考察了烧伤休克延迟复苏后红细胞膜蛋白结构、功能和运动等特性的改变。结果显示：烧伤休克延迟复苏后红细胞膜蛋白组份中出现高分子量交联蛋白（ＨＭＰ），膜带３蛋白功能受损，膜蛋白侧向运动显著减弱，马来酰亚胺标记的大鼠红细胞膜在延迟复苏后其电子自旋共振波谱中强弱固定化作用谱的峰值比增大，旋转相关时间延长，膜蛋白的构象变化。实验证明：烧伤休克延迟复苏所造成的非典型的缺血──再灌注损伤通过膜蛋白表层巯基的氧化以及膜脂质过氧化作用引起了膜蛋白的交联，既改变了膜蛋白的构象，又削弱了膜蛋白的分子运动，进而可导致膜功能的异常。     

顺行灌注冷晶体停搏液及温血停搏液对心肌的保护作用

目的研究冷晶体及温血停搏液对心肌的保护作用。方法将９６只猫随机分为体外循环（ＣＰＢ）组（Ⅰ）、损伤组（Ⅱ）、冷晶保护组（Ⅲ）及温血保护组（Ⅳ）。观测各组心功能、膜ＡＴＰ酶活性和膜蛋白颗粒的变化。结果组Ⅰ各时间点各项指标无变化。缺血期间,组ⅡⅣＮａＫＡＴＰａｓｅ活性下降（Ｐ＜０．０１）;组Ⅱ、ⅢＣａＭｇＡＴＰａｓｅ活性下降,膜蛋白颗粒数减少（Ｐ＜０．０５）,组Ⅳ无减少（Ｐ＞０．０５）。复灌后,组Ⅳ心功能、ＣａＭｇＡＴＰａｓｅ活性恢复正常,ＮａＫＡＴＰａｓｅ活性和膜蛋白颗粒数恢复稍差。结论单纯ＣＰＢ对心功能、膜蛋白无损伤作用;温血停搏液心肌保护作用较好,但仍需完善。     

p38丝裂原活化蛋白激酶途径在大鼠严重烧伤后早期心肌膜磷降解中的作用

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）途径在严重烧伤后早期心肌胞质型磷脂酶A2（cPLA2）表达及膜磷脂降解中的作用。方法将Wistar大鼠分为：正常组（8只）、单纯烧伤组（40只）、烧伤＋SB203580组（16只）和烧伤＋等渗盐水组（16只）。后3组大鼠制成40％TBSAⅢ度烧伤模型,后2组按实验设计分别注射p38MAPK抑制剂SB203580或等渗盐水。单纯烧伤组设5个时相点,其余烧伤组设2个时相点,每时相点8只。检测各组大鼠心肌cPLA2 mRNA表达和膜磷脂含量变化。缺氧复合烧伤血清处理体外培养的大鼠心肌细胞,观察SB203580对其cPLA2 mRNA表达的影响。结果单纯烧伤组大鼠伤后各时相点cPLA2 mRNA表达显著高于正常组的0．280±0．020,伤后3h达峰值;单纯烧伤组大鼠心肌膜磷脂含量伤后即降低,6h达最低值[（0．052±0．017）mg磷／mg蛋白]。烧伤后心肌cPLA2 mRNA表达与膜磷脂含量呈显著负相关（r=-0．53,P＜0．05）。与烧伤＋等渗盐水组比较,伤后6、12h烧伤＋SB203580组大鼠心肌磷酸化p38MAPK水平显著降低,cPLA2 mRNA表达仅为该组的72％、51％（P＜0．01）,心肌膜磷脂含量也显著高于该组。此外,SB203580也显著降低了缺氧复合烧伤血清处理的离体大鼠心肌细胞cPLA2 mRNA的表达水平。结论p38MAPK途径在大鼠严重烧伤后早期心肌膜磷脂降解中起重要作用,其机制可能与磷酸化p38MAPK上调心肌cPLA2 mRNA表达水平有关。     

严重烧伤早期心肌收缩性与钙转运功能变化

目的研究烧伤早期心肌肌浆网（ＳＲ）钙转运功能变化，探讨其在烧伤后心肌收缩功能下降发病中的作用。方法采用３０％ＴＢＳＡⅢ度烧伤大鼠模型，离体心脏灌流，测定伤前及伤后心肌室内压最大变化速率（±ｄｐ／ｄｔｍａｘ）变化，制备心肌肌浆网，应用微孔滤膜过滤技术测定心肌ＳＲ４５Ｃａ２＋转运功能改变。结果与对照组相比，烧伤组左心室±ｄｐ／ｄｔｍａｘ明显降低（Ｐ＜０．０１），心肌ＳＲＣａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性及ＳＲ４５Ｃａ２＋摄取初速度、摄取容量均明显降低（Ｐ＜０．０１），偶联率比对照值大幅度下降。结论烧伤后早期心肌肌浆网Ｃａ２＋转运功能严重障碍，其是烧伤后心肌收缩功能降低的重要因素之一。     

烧伤休克延迟复苏对红细胞膜蛋白结构,功能和运动的影响

我们采用２５％ＴＢＳＡＩＩＩ度烧伤大鼠模型，考察了烧伤休克延迟复苏后红细胞膜蛋白结构，功能和运动等特性的改变。结果显示：烧伤休克延迟复苏后红细胞膜蛋白组份中出现高分子量交联蛋白（ＨＭＰ），膜带３蛋白功能受损，膜蛋白侧向运动显著减弱，马来酰亚胺标大工细胞膜在延迟苏后其电子自旋共振波谱中强弱固定化作用谱的峰值比增大，旋转相关时间延长，膜蛋白的构象变化。实验证明：烧伤休克延迟复苏所造成的非典型的缺血－再     

锌-金属硫蛋白对大鼠皮肤烫伤创面的影响

目的研究Ｗｉｓｔａｒ大鼠深Ⅱ度烧伤后皮肤活力的下降与脂质过氧化反应的关系。方法以氧耗量、琥珀酸脱氢酶、Ｓｃｈｉｆ’ｓ碱及创面愈合时间为指标,以金属硫蛋白作为保护剂外用于烫伤创面,分别采用空白对照及５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ,１×１０－５ｍｏｌ／Ｌ两种浓度,测定伤后８,２４,４８ｈ各项指标的变化。结果皮肤氧耗量、琥珀酸脱氢酶活性下降,Ｓｃｈｉｆｓ碱含量明显升高。应用金属硫蛋白保护后,皮肤活性（氧耗及琥珀酸脱氢酶含量）均显著高于对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）,同时Ｓｃｈｉｆ’ｓ碱含量下降（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）,创面愈合时间平均提前２天。结论烫伤组织损伤与脂质过氧化反应有一定的关系,而金属硫蛋白有一定保护作用。     

家兔烫伤早期中性粒细胞凋亡变化

目的 通过检测烧伤早期中性粒细胞（ＰＭＮ）凋亡,观察烧伤血清和创面水肿液对ＰＭＮ体外自发凋亡的影响。方法 应用全血荧光染色观察３０％家兔Ⅲ度烫伤早期ＰＭＮ凋亡;应用流式细胞分析等方法观察血清和痂下组织液培养ＰＭＮ的体外凋亡。结果 伤后４、８、１２、２４ｈ循环ＰＭＮ凋亡减少,约为伤前的１／６,且４个时相间差异无显著意义;烧伤血清和痂下组织液能抑制ＰＭＮ凋亡,使ＰＭＮ凋亡率下降,ＤＮＡ断裂百分率降低,     

高张氯化钠右旋糖酐液在犬烧伤休克延迟复苏中的作用

目的从血流动力学、心肌力学及代谢等方面探讨高张氯化钠右旋糖酐液（７．５％氯化钠＋６％右旋糖酐７０，ＨＳＤ）在烧伤休克延迟复苏中的作用。方法采用犬３５％ＴＢＳＡⅢ度烧伤模型，伤后６ｈ分别用乳酸林格液及ＨＳＤ进行复苏，并以每ｈ尿量为１０ｍｌ／ｋｇ及心输出量为伤前值的７０％～８０％来调整输液速度及输液量，观察ＨＳＤ在复苏中容量负荷、左心室等容收缩期最大压力变化速率及左心室舒张期压力下降最大变化速率（±ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、心脏指数（ＣＩ）、氧供给（ＤＯ２）及氧消耗（ＶＯ２）等的变化。结果ＨＳＤ在烧伤休克延迟复苏伤后第一个２４ｈ输液量比乳酸林格液复苏少３０５６％，其中复苏后４ｈ的输液量比乳酸林格液少５９５０％，在复苏后０５～２ｈ，＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、ＣＩ、ＤＯ２及ＶＯ２的增加幅度明显高于乳酸林格液复苏。结论ＨＳＤ在烧伤休克延迟复苏中具有容量负荷小、改善心肌功能及促进组织代谢等作用。     

Improvement of early postburn cardiac function by use of Panax notoginseng and immediate total eschar excision in one operation

Cardiac dysfunction development in the early stage postburn has been an important problem in burn treatment. However, no effective therapies are available for use in clinical practice. In this study, we sought to determine whether early total eschar excision (EEE) in one operation and the traditional Chinese herb Panax notoginseng (PNS) would be helpful in improving early postburn cardiac function. 160 Wistar rats were randomly divided into burn (burn group, n = 50), burn treated with EEE (EEE group, n = 50), burn treated with PNS (PNS group, n = 50) groups and normal controls (n = 10). All rats except the normal control were given a 30% TBSA full skin thickness burn and resuscitated with Ringer's lactate. EEE was performed immediately after the burn group received the first intraperitoneal injection of Ringer's lactate. The wound was covered with homoskin from normal rats. In the PNS group, two doses of PNS (200 mg/kg for each dose) were given intraperitoneally immediately and 4 h postburn. Cardiac contractile function and cardiac troponin T (TnT) were determined at 1, 3, 6, 12 and 24 h postburn. Results showed that cardiac contractile parameters including AOSP, AODP, LVSP and +dp/dt(max) all declined and were still significantly lower than the control values at 24 h postburn. Cardiac TnT was elevated markedly and reached a level 25 times higher than control at 12 h postburn. In EEE and PNS groups, the reduction of cardiac contractile function was limited as compared with that in the burn group. Levels of TnT in both EEE and PNS groups were significantly lower than in the burn group 6 h postburn later. The findings of this study demonstrated that both EEE and PNS were effective in improving early postburn cardiac function.     

休克期切痂对血浆内皮素及NO水平的影响

目的观察烧伤休克期切痂和休克期后切痂对血浆内皮素及一氧化氮水平的影响。方法利用小型猪制成３５％Ⅲ度烧伤动物模型，分为两组，休克期切痂组（Ｓ组）于伤后２４小时切痂，对照组（Ｃ组）于伤后９６小时切痂，分别检测血浆内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ），并计算ＥＴ／ＮＯ。结果两组ＥＴ及ＮＯ均高于伤前，伤后９６小时开始Ｓ组ＥＴ明显低于Ｃ组；而ＮＯ水平Ｓ组明显高于Ｃ组；ＥＴ／ＮＯ亦显示伤后２４小时开始Ｓ组明显低于Ｃ组。结论休克期切痂可减轻内皮细胞损伤，减轻渗出与水肿，减少组织缺氧，改善微循环     

伤后即行切痂对烧伤大鼠心肌损伤的防治作用

目的探讨早期一次性切痂对烧伤后心肌损伤的防治作用。方法建立３０％ＴＢＳＡⅢ度烧伤大鼠立即切痂模型,动物随机分为正常对照组、未切痂组和切痂组,于伤后１,３,６,１２和２４ｈ检测血浆肌钙蛋白Ｔ（ＴｎＴ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）等指标。结果烧伤后３ｈ血浆ＴｎＴ即显著升高,伤后６ｈ血浆ＴＮＦ显著高于伤前,心肌组织中ＴＮＦ也在伤后１２ｈ显著升高。未切痂组与切痂组比较,伤后１～３ｈ未切痂组ＴｎＴ、ＴＮＦ略低于切痂组,烧伤６ｈ后,未切痂组ＴｎＴ显著高于切痂组,烧伤１２ｈ后,未切痂组ＴＮＦ显著高于切痂组。ＴＮＦ与ＴｎＴ存在显著正相关关系。结论ＴＮＦ是引起烧伤后心肌损伤的重要因素,且与心肌损伤程度密切相关。伤后即行一次性切痂可以减少炎症介质的生成和释放,这可能是其对烧伤后并发心肌损伤具有防治作用的机理之一。     

烫伤后心肌线粒体呼吸链变化对心肌收缩性的影响

目的观察重度烧伤对心肌细胞线粒体呼吸链的影响,探讨烧伤后心肌收缩功能下降及心输出量减少的机理。方法采用３０％Ⅲ度烫伤大鼠模型,用差速离心法分离心肌细胞线粒体,以氧电极技术和差光谱法测定琥珀酸呼吸链和还原型辅酶Ｉ（ＮＡＤＨ）呼吸链的电子传递活性,同时监测心肌力学的变化。结果烫伤后２ｈＮＡＤＨ细胞色素Ｃ还原酶及细胞色素氧化酶即低于对照组,烫伤后４ｈ琥珀酸Ｃｏ．Ｑ还原酶、ＮＡＤＨＣｏ．Ｑ还原酶、琥珀酸Ｃｙｔ．Ｃ还原酶也明显低于对照组。同时伴心肌收缩功能的下降。但随烫伤时间的延长（烫伤后６ｈ）呼吸链电子传递活性及心肌力学的变化无继续降低。结论重度烧伤后心肌细胞线粒体呼吸链电子传递活性受到全面损伤,致使心肌氧利用发生障碍,可能是心肌收缩功能下降、心输出量减少的原因之一。