二肽基肽酶II在正常大鼠眼球各组织中的免疫表达

目的:探讨二肽基肽酶II(dipeptidyl peptidaseII,DPPII)在正常大鼠眼球各组织中的免疫表达。方法:应用抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合体法,检测DPPII在正常大鼠眼球各组织中的免疫表达。结果:发现DPPII在角膜上皮细胞、角膜基质层、角膜内皮细胞、睫状体无色素上皮细胞、虹膜色素上皮细胞、晶状体上皮细胞、晶状体纤维、视网膜神经纤维层、神经节细胞、视网膜色素上皮细胞中免疫染色均呈阳性。结论:DPPII存在于角膜上皮细胞、角膜基质层、角膜内皮细胞、睫状体无色素上皮细胞、虹膜色素上皮细胞、晶状体上皮细胞、晶状体纤维、视网膜神经纤维层、神经节细胞、视网膜色素上皮细胞。     

二肽基肽酶Ⅲ在正常大鼠眼球中的免疫表达

目的 探讨二肽基肽酶Ⅲ(dipeptidyl peptidase Ⅲ,DPP Ⅲ)在正常大鼠眼球各组织中的免疫表达.方法 选取正常的两性Wistar大鼠,应用抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合体法检测DPP Ⅲ在正常大鼠眼球各组织中的免疫表达.结果 DPP Ⅲ在角膜上皮细胞、角膜内皮细胞、睫状体无色素上皮细胞、虹膜色素上皮细胞、晶状体上皮细胞、晶状体纤维细胞、视网膜神经纤维层、视网膜神经节细胞、视网膜外丛状层、视网膜色素上皮细胞中免疫组织化学染色均呈阳性.结论 DPP Ⅲ主要存在于Wistar大鼠眼球的角膜上皮细胞、角膜内皮细胞、睫状体无色素上皮细胞、虹膜色素上皮细胞、晶状体上皮细胞、晶状体纤维细胞、视网膜神经纤维层、神经节细胞、视网膜外丛状层、视网膜色素上皮细胞.     

眼科细胞培养的特殊技术

目前已建立了完整的人类眼部组织细胞分离培养技术,生长良好的有视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)、虹膜色素上皮细胞、睫状体色素上皮细胞、葡萄膜黑紊细胞、各部位成纤维细胞(巩膜、眼球筋膜及角膜)、血管内皮细胞、小粱细胞和部分肌细胞等。已能培养、但生长不够满意的有角膜上皮细胞及内皮细胞、晶状体     

激光损伤对BN大鼠视网膜缝隙连接蛋白Cx43分布的影响

目的探讨细胞间隙连接蛋白(connexin 43，Cx43)在(Brown Norway，BN)大鼠视网膜中的分布特点以及氪激光损伤视网膜后Cx43分布的变化。方法应用雄性BN为研究对象，氪红激光眼底光凝(波长647nm，能量360mw，光斑直径50μm，曝光0．05s)?右眼视盘周围10个激光点。光凝后1周开始取材，应用免疫组化方法观察Cx43在BN大鼠视网膜中的分布特点。结果正常视网膜内界膜、视神经纤维层以及神经节细胞层明显表达，神经节细胞表达的主要位置是细胞浆和细胞膜，色素上皮细胞全层表达，内外颗粒层及内外丛状层无表达。激光损伤后的内界膜，视神经纤维层以及神经节细胞层Cx43表达明显减少，瘢痕区视网膜色素上皮细胞接近消失，而激光斑周边色素上皮细胞表达不受影响，激光斑部位增殖的成纤维样细胞部分表达。结论正常视网膜的Cx43主要分布在内界膜、神经纤维层、视网膜节细胞层和视网膜色素上皮层，激光损伤后内界膜、视神经纤维层以及神经节细胞层表达减弱，激光斑周围色素上皮细胞中表达无明显变化，激光损伤瘢痕中的成纤维细胞有少量表达。     

大鼠视网膜细胞间隙连接蛋白Cx43的表达

目的:探讨细胞间隙连接蛋白connexin43(Cx43)在BN大鼠视网膜中的分布特点.方法:以雄性挪威棕色大鼠(Brown Norway)为研究对象,应用免疫组化方法观察Cx43在BN大鼠视网膜中的分布特点.结果:正常视网膜内界膜,视神经纤维层以及神经节细胞层明显表达,神经节细胞表达的主要位置是细胞质和细胞膜,色素上皮细胞全层表达,内外颗粒层及内外层状层无表达.结论:正常视网膜的Cx43主要分布在内界膜,神经纤维层,视网膜节细胞层和视网膜色素上皮层.     

过氧化物酶体增生物激活受体γ在鼠眼球中的分布

背景过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPAR-γ）是一类由配体激活的核转录因子,是潜在的抗炎、抗纤维增生、抗新生血管形成及神经保护因子,其在动物和人体组织中的生理病理功能是目前的研究热点之一,PPARγ与眼科疾病的研究受到关注。目的研究PPARγ在眼部不同组织细胞中的表达,为PPARγ激动剂在眼科疾病治疗中的应用提供参考依据。方法取SPF级C57BL／6J小鼠6只及SD大鼠1只,用质量分数3％水合氯醛麻醉处死后立即摘除眼球,采用Western blot法检测小鼠角膜、晶状体和视网膜组织中PPARγ蛋白的表达;采用免疫组织化学和免疫荧光化学法检测PPARγ在小鼠角膜、晶状体、视网膜、睫状体及视神经组织中的表达及定位。结果Western blot法检测表明,PPARγ在小鼠角膜、晶状体、视网膜中均呈阳性表达。免疫组织化学和免疫荧光化学法检测显示,PPARγ在角膜组织中主要表达于上皮层,以基底细胞染色最强,而角膜内皮及基质细胞上仅有弱表达。PPARγ在晶状体中主要表达于上皮细胞和浅皮质层;在视网膜组织中,PPARγ主要表达于视网膜节细胞层、内丛状层、外丛状层和内核层,此外PPARγ在SD大鼠睫状体组织中主要表达于无色素上皮。免疫荧光化学法检测显示,其在视网膜中与Muller细胞标志物谷氨酰胺合成酶（GS）共定位表达明显;PPARγ在视神经组织中的表达与星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）共定位表达明显。结论PPARγ广泛分布于眼不同组织中并呈特异性表达,该结果为相关眼科疾病的靶向治疗提供了依据。     

热休克蛋白A12B在大鼠角膜、晶状体和视网膜组织中的表达

目的　观察大鼠角膜、晶状体、视网膜中热休克蛋白Ａ１２Ｂ（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎＡ１２Ｂ,ＨＳＰＡ１２Ｂ）的表达。方法　取ＳＰＦ级ＳＤ大鼠９只,用水合氯醛处死后立即摘取眼球,采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＲＴ-ＰＣＲ分别检测大鼠角膜、晶状体和视网膜组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ蛋白和ｍＲＮＡ的表达情况;免疫荧光化学法观察ＨＳＰＡ１２Ｂ在角膜、晶状体和视网膜组织中的表达及定位。结果　Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＲＴ-ＰＣＲ检测结果显示:ＨＳＰＡ１２Ｂ在大鼠角膜、晶状体、视网膜均有少量表达,其中角膜组织（０．２８０±０.０３４、０．３７４±０.０３１）中表达强度相对最低,晶状体（０．３３１±０．０３６、０．４５３±０．０４０）次之,视网膜组织（０．４５３±０．０２９、０．６８０±０．０４５）中表达强度最高。免疫荧光化学法结果表明,在角膜组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ主要表达于上皮层,其中基底细胞染色最强,而角膜基质细胞上仅有弱表达;在晶状体组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ主要表达于上皮细胞和皮质;在视网膜组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ主要表达于视网膜神经纤维层、神经节细胞层和内核层,并与ＮｅｕＮ标记的神经元及ＧＳ标记的Ｍüｌｌｅｒ细胞存在共定位。结论　ＨＳＰＡ１２Ｂ在大鼠角膜、晶状体、视网膜组织中均有表达,且呈特异性表达。     

鸵鸟眼球组织学的研究

目的 探讨最大的陆柄鸟类鸵鸟眼球的正常组织学结构，为日后的开发研究提供参考。方法3只鸵鸟6只眼，光镜及透射电镜下观察。结果鸵鸟眼的角膜由上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层和内皮细胞层构成。虹膜组织分为内皮细胞层、前界膜层、基质层、肌肉层、色素上皮层5层。视网膜组织分为外层的色素上皮层和内层的9层神经感觉层，共10层。鸵鸟眼球的组织学结构与人类基本接近。结论鸵鸟可以作为眼科界实验动物的模型。     

猕猴眼球超微结构的研究

目的 探讨非人灵长类动物猕猴眼球的超微组织结构,为研究提供参考。方法 ３只猕猴６只眼,透射电镜下观察。结果 猕猴眼角膜分上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层和内皮层。虹膜组织由前后色素上皮层和基质层组成。睫状体由无色素上皮层、色素上皮层以及基质组成。视网膜组织分为外层的色素上皮层和由９层所组成内层的神经感觉视网膜。猕猴眼球的超微组织结构与人类基本相同。结论猕猴为最理想的实验动物。     

羊毛甾醇合酶及羊毛甾醇在大鼠角膜、晶状体和视网膜组织中的分布

背景 已有研究证实与羊毛甾醇结构相似的三萜类化合物对于全身多种疾病具有治疗作用,近年来发现羊毛甾醇合酶(LSS)及羊毛甾醇对白内障具有治疗作用,但羊毛甾醇及其抑制剂与其他眼病的关系尚不清楚.了解羊毛甾醇在眼组织中的分布有助于阐明其与眼病的关系. 目的 研究正常大鼠角膜、晶状体和视网膜中LSS及羊毛甾醇的表达及分布,为相关眼科疾病的靶向治疗提供依据.方法 取SPF级雄性SD大鼠15只,采用戊巴比妥钠过量麻醉法处死实验大鼠,立即摘取眼球,分别采用Western blot和逆转录(RT)-PCR法检测大鼠角膜、晶状体和视网膜组织中LSS蛋白及其mRNA的表达情况;采用免疫荧光化学法对LSS在角膜、晶状体和视网膜组织中的表达进行定位;采用液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)检测羊毛甾醇在正常大鼠角膜、晶状体和视网膜组织中的含量. 结果 Western blot法检测显示,大鼠视网膜中无LSS蛋白表达,LSS蛋白在晶状体组织的相对表达量为0.43±0.05,明显高于角膜组织中的0.25±0.03,差异有统计学意义(t =-5.35,P＜0.01).RT-PCR结果显示,正常大鼠视网膜中无LSS mRNA表达,大鼠角膜和晶状体组织中LSS mRNA的相对表达量为0.51±0.04,明显高于角膜组织中的0.29±0.02,差异有统计学意义(t=-8.34,P＜0.01).免疫荧光化学法结果表明,LSS主要表达于角膜上皮、基质和内皮层角膜细胞的细胞质以及晶状体上皮细胞和浅皮质层细胞,而视网膜组织中未检测到LSS表达,且视网膜中LSS与NeuN标记的神经元及谷氨酰胺合成酶(GS)标记的Müller细胞无共表达.LC-MS检测显示,正常大鼠视网膜中未检测到羊毛甾醇,大鼠晶状体中含羊毛甾醇为(24.37±2.91) ng/mg,明显高于角膜组织中的(5.31±0.58) ng/mg,差异有统计学意义(t=-11.13,P＜0.01).结论 LSS及羊毛甾醇分布于大鼠角膜各层组织以及晶状体组织中,在视网膜各层组织中均无LSS表达.     

大鼠眼球标本石蜡切片的改良制作方法

目的探讨改良固定液固定大鼠眼球的效果。方法将大鼠眼球投入到由多聚甲醛、冰醋酸和丙酮组成的改良固定液中固定后制成石蜡切片，经HE染色后在显微镜下观察。结果眼球不变形，外观收缩不明显。镜下视网膜无脱落，眼球全层结构完整．视网膜各层细胞排列整齐，染色鲜艳。虹膜、睫状体、巩膜静脉窦和角膜等组织结构清楚。结论此改良方法明显优于其他方法，是适合大鼠眼球固定的一种有效方法。     

兔眼球爆裂伤合并无菌海水浸泡后虹膜超微结构改变

目的 观察实验兔眼眼球爆裂伤后暴露于无菌海水所引起的虹膜超微结构改变,探讨眼球爆裂伤合并海水浸泡抢救的最佳时间.方法 24只(48眼)健康成年新西兰白兔,用鞭炮爆炸方法造成眼球爆裂伤,按随机方法决定每只兔右眼浸泡无菌海水(实验组),左眼暴露空气中为对照组,经10 min、0.5h、1h、2h、4h、8h后取脱出角膜裂伤伤口外及前房内的虹膜,每时间组各4只眼球用透射电子显微镜观察其超微形态学变化.结果 (1)脱出角膜伤口的虹膜组织超微结构改变:对照组虹膜前后表面的无色素上皮细胞都已脱失,但10 min组和0.5h组括约肌和基质纤维超微结构改变不大且可逆.实验组:除虹膜前后表面的无色素上皮细胞都已脱失外,括约肌超微结构改变较大,海水浸泡10 min,括约肌细胞发生坏死；海水浸泡至0.5h,虹膜组织基本坏死、自溶.(2)前房内的虹膜组织超微结构改变:对照组气空气中暴露10 min、0.5h、2h组虹膜括约肌细胞、无色素上皮细胞、基质细胞超微结构基本正常.实验组10 min组基质细胞线粒体肿胀、空泡化；0.5 h组虹膜组织中嗜中性粒细胞浸润,基质细胞大量坏死.结论 兔眼球爆裂伤后暴露于海水中,其虹膜超微结构的损伤较暴露于空气中的损伤出现较早,且损伤程度较重.推测海战中在眼球爆裂伤合并海水浸泡的情况下,眼球无保留价值,应尽早摘除眼球,以预防眶内感染及交感性眼炎的发生.     

肝细胞生长因子在眼部的研究进展

肝细胞生长因子(HGF)是一种问质来源的多效生长因子，具有强大的促分裂、组织形成、诱发上皮细胞迁移、侵袭以及诱发血管生成的作用。其受体c—Met在多种组织和细胞中表达。HGF通过与其特异性受体c-Met结合引起一系列信号转导蛋白的酶促反应，促发相应生物学效应。HGF在多种组织器官的发生、发展、损伤修复、保护和调节内皮细胞功能、诱发血管生成以及恶性肿瘤的发展、转移中起着不可忽视的作用。在眼部，HGF是一种重要的细胞生长和分化的调节剂，它可刺激角膜上皮细胞和内皮细胞、虹膜和视网膜色素上皮细胞、晶状体上皮细胞、小梁细胞的生长和移行。房水中的HGF在角膜损伤修复、维持角膜内皮完整性、调节晶状体上皮细胞功能等方面起着重要作用。HGF及其受体在维持小梁网正常功能中起着决定性作用且可能与原发性开角型青光眼(POAG)的发病机制有关，在某些病理条件下，HGF可能诱发视网膜、虹膜血管生成对增生性视网膜病变的发生、发展起着重要作用。     

肝细胞生长因子在眼部的研究进展

肝细胞生长因子 (HGF)是一种间质来源的多效生长因子 ,具有强大的促分裂、组织形成、诱发上皮细胞迁移、侵袭以及诱发血管生成的作用。其受体c Met在多种组织和细胞中表达。HGF通过与其特异性受体c Met结合引起一系列信号转导蛋白的酶促反应 ,促发相应生物学效应。HGF在多种组织器官的发生、发展、损伤修复、保护和调节内皮细胞功能、诱发血管生成以及恶性肿瘤的发展、转移中起着不可忽视的作用。在眼部 ,HGF是一种重要的细胞生长和分化的调节剂 ,它可刺激角膜上皮细胞和内皮细胞、虹膜和视网膜色素上皮细胞、晶状体上皮细胞、小梁细胞的生长和移行。房水中的HGF在角膜损伤修复、维持角膜内皮完整性、调节晶状体上皮细胞功能等方面起着重要作用。HGF及其受体在维持小梁网正常功能中起着决定性作用且可能与原发性开角型青光眼 (POAG)的发病机制有关 ,在某些病理条件下 ,HGF可能诱发视网膜、虹膜血管生成对增生性视网膜病变的发生、发展起着重要作用     

MMP-2和PEDF在氧诱导小鼠视网膜新生血管中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)在氧诱导小鼠视网膜新生血管中的表达和意义。方法随机选取80只健康C57BL/6J小鼠进行分组,取对照组(40只)和高氧组(40只)小鼠眼球作ADP酶视网膜铺片、病理切片及免疫组织化学法检测,观察视网膜血管的改变,计算视网膜新生血管突破内界膜的内皮细胞核数及检测MMP-2、PEDF蛋白的表达。结果高氧组视网膜大量新生血管形成;新生血管突破内界膜的内皮细胞核数为(32.45±1.34)个,与对照组(1.27±0.20)个相比差异有统计学意义(t=10.345,P<0.05)。高氧组与对照组相比,MMP-2蛋白在神经节细胞层、内丛状层、内核层和突破视网膜内界膜的新生血管中高表达(P<0.05);PEDF蛋白在神经纤维层、神经节细胞层、内丛状层、感光细胞层及视网膜色素上皮细胞层低表达(P<0.05)。两者表达呈显著负相关(r=-0.785,P<0.05)。结论 MMP-2和PEDF共同维持视网膜新生血管的形成。     

交感性眼炎眼组织中共刺激分子表达的变化

目的:探讨交感性眼炎眼组织(虹膜睫状体、脉络膜、视网膜)中共刺激分子B7-1,B7-2,CD28和CTLA-4的表达意义。方法:交感性眼炎眼球石蜡标本4例,行常规石蜡切片,免疫组织化学方法探讨交感性眼炎各部分眼组织中上述分子的表达,并与正常人眼组织中各分子的表达进行比较。结果:正常人眼组织虹膜睫状体中有B7-2分子,无B7-1,CTLA-4和CD28分子;脉络膜中有B7-1分子,但无B7-2,CTLA-4和CD28分子;视网膜内无B7-1,B7-2,CTLA-4和CD28分子。而交感性眼炎的虹膜睫状体和脉络膜中均有B7-1,B7-2,CTLA-4和CD28分子,视网膜的色素上皮细胞有B7-1和B7-2分子表达,而无CD28和CTLA-4分子表达,视网膜内可见少量B7-1,B7-2,CTLA-4和CD28分子表达。结论:眼组织中B7与CD28和CTLA-4分子之间的相互作用与交感性眼炎患者葡萄膜处于持续免疫激活状态密切相关。     

脑红蛋白在大鼠眼球中分布的免疫组织化学研究

目的 探讨脑红蛋白（NGB）在正常大鼠眼球中的分布。方法 用免疫组织化学ABC法研究了NGB在正常大鼠眼球中的分布和定位。结果 NGB主要存在于视网膜中，在虹膜、睫状体和视神经中亦有一定量的表达，在眼球内的其他组织中则没有表达。该蛋白在所有神经元中均有高强度的表达，但不存在于视网膜的色素细胞层中。其中，在视网膜的丛状层和光感受器的内节中分布最多，这与视网膜的耗氧部位线粒体的亚细胞定位基本一致。结论 NGB可能是一种与血红蛋白和肌红蛋白很相似的呼吸蛋白，在视网膜的氧供和氧消耗中起非常重要的作用，可能与许多视网膜缺血缺氧疾病的发生发展有关。     

CD81在正常大鼠视网膜色素上皮层的表达

目的:观察CD81在正常大鼠视网膜色素上皮层(retinal pigment epithelium,RPE)的表达。方法:用抗CD81抗体EAT2对正常大鼠RPE组织切片及体外培养RPE进行免疫组织化学染色,H121对RPE组织进行CD81蛋白的Western blot分析。结果:正常大鼠视网膜的色素上皮细胞膜表面呈CD81的阳性染色,体外培养的大鼠RPE也呈CD81阳性表达;Western blot分析RPE层蛋白出现CD81阳性条带。结论:正常大鼠的RPE层可以表达CD81。     

成人睫状体-视网膜区域神经巢蛋白阳性细胞的分布特征

目的探讨成人眼睫状体-视网膜区域神经巢蛋白nestin阳性细胞的分布特征。方法由广东省眼库提供8只新鲜瘁死的健康成人眼球和3只婴儿眼球,分别采用免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）等方法检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白nestin在睫状体、视网膜中的表达,通过透射电镜观察其超微结构和分布特点。结果睫状体、视网膜中均有少量nestin阳性细胞表达,其散在分布于睫状体色素上皮层和视网膜内核层靠近外核层的一侧;RT-PCR检测到睫状体、视网膜中均有nestin基因mRNA的表达,睫状体中的表达量高于视网膜区域;透射电镜观察可见睫状体和视网膜组织中均存在一些核大而圆、核仁明显、细胞器较幼稚的具有神经干细胞特征的细胞,位于睫状体色素上皮靠近基底膜的区域及视网膜内核层与外核层之间。结论成人睫状体-视网膜中存在一些具有神经干细胞特征的神经巢蛋白nestin阳性细胞,主要分布于睫状体色素上皮层和视网膜内核层。     

胰岛素样生长因子Ⅰ基因在正常及糖尿病鼠眼组织中的表达

用原位杂交技术对正常及糖尿病大鼠眼组织的胰岛素样生长因子Ⅰ基因（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－Ｉ，ＩＧＦ－Ｉ）进行了研究。ＩＧＦ－Ｉ基因在眼组织的表达呈区域性，视网膜内核层及神经节细腻表达最强；脉络膜、视网膜色素上皮细胞及外核层次之；巩膜最弱，角膜未见表达信号。糖尿病眼组织ＩＧＦ－湛因表达显著增强（Ｐ〈０．０５或Ｐ≤０．０１）。结果表明：整个眼球组织形成了一个ＩＧＦ－Ｉ旁分