抑癌基因KAI1对大肠癌细胞生物学特性的影响

目的 研究抑癌基因KAI1对大肠癌细胞生物学特性的影响。方法 用KAI1 cDNA质粒转染低表达KAI1基因的人大肠癌LoVo细胞。免疫组化和原位杂交检测转染后mRNA和蛋白的表达，利用体外肿瘤同质性粘附、异质性粘附实验和肿瘤侵袭模型等方法，检测KAI1／CD82对大肠癌粘附与侵袭的影响；以空白质粒转染组为对照组。结果 体外实验发现转染KAI1质粒的。LoVo细胞同质性粘附能力高于对照组．异质性粘附及侵袭能力明显低于对照组。抑癌基因KAI1对肿瘤的增殖能力没有影响。结论 KAI1基因表达的减少可以导致大肠癌细胞同质性粘附降低，对基底膜粘附及侵袭转移的能力增加。因此，KAI1基因可以作为大肠癌的一种转移抑制基因。     

KAI1基因与肿瘤转移

转移是恶性肿瘤的主要特征,又是恶性肿瘤治疗失败和患者死亡的主要原因.随着分子生物学的深入研究,人们对肿瘤的发生基础有了明确的认识.目前已知,肿瘤转移与肿瘤发生一样,不仅有促进基因的激活,还有抑制基因的失活.肿瘤转移抑制基因的存在是在细胞融合实验中证实的.1995年,Dong等自转移到AT6.1细胞系中的人第11号染色体中分离到特异性抑制肿瘤转移的基因命名为KAI1[1].     

KAI1基因与妇科肿瘤

KAI1基因是定位于人染色体11p11．2的转移抑制基因,主要参与调节细胞间的粘附,通过封闭肿瘤细胞表面的粘附受体,使肿瘤细胞不易脱离原发灶而抑制转移。KAI1蛋白已被证实对多种肿瘤的转移有抑制作用。本文对KAI1基因的结构、功能及其与妇科肿瘤的关系作一综述。     

肿瘤转移抑制基因KAI1的研究现状

分子生物学研究已经证实,肿瘤是一种基因病.肿瘤的侵袭、转移是一个极其复杂的多基因调控和多步骤发展的过程,不仅涉及到肿瘤细胞与宿主环境的相互影响和作用,还涉及到一系列肿瘤侵袭转移相关基因的结构和/或功能的异常,如一些转移促进基因的激活,一些转移抑制基因的失活或表达下调.肿瘤转移抑制基因功能的丧失是肿瘤细胞由非转移表型向转移表型发展过程的重要事件.KAI1基因是新近发现的一种肿瘤转移抑制基因,因它首先发现于前列腺癌细胞,所以被称为前列腺癌转移抑制基因,但其抑制肿瘤转移的作用在人体其它肿瘤中随后得到了广泛证实.本文就KAI1基因目前的研究状况作一综述.     

KAI1基因转染肝癌MHCC97-H细胞及鉴定

原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,转移与复发是影响预后的主要因素.KAI1基因是近年新发现的肿瘤转移抑制基因[1].为深入研究KAI1基因在肝癌侵袭、转移中的作用,我们构建了KAI1正、反义基因真核表达质粒,并将其成功地分别转染入高转移潜能的肝癌MHCC97-H细胞株中,现报告如下.     

KAI1mRNA表达对大肠癌转移的影响

目的探讨KAI1基因在人大肠癌中的表达及其与大肠癌转移的关系。方法用RT-PCR法检测45例大肠癌组织及转移灶并以正常大肠粘膜组织作为正常对照组,进行KAI1mRNA半定量分析。结果本组中40例大肠癌组织KAI1mRNA表达水平比相应的正常大肠粘膜高(P<0.01)。大肠癌组织KAI1mRNA表达水平与临床Dukes'分期呈负相关(r=-0.474,P<0.01),与有无淋巴结转移呈负相关(r=-0.566,P<0.01)。伴淋巴结转移的大肠癌KAI1mRNA表达水平比不伴淋巴结转移的低(F=20.228,P<0.01)。转移淋巴结的KAI1mRNA表达比相应的原发灶表达降低(P<0.05)。结论KAI1mRNA表达降低与大肠癌的淋巴结转移密切相关。KAI1基因在人大肠癌中起转移抑制作用。     

KAI1基因对肝癌细胞侵袭、转移的影响及其分子机制

目的研究肿瘤转移抑制基因KAI1对肝癌细胞侵袭、转移的影响及其分子机制,为肝癌的基因治疗提供理论和实验依据.方法用亚克隆技术构建KAI1基因正、反义真核表达质粒,DOTAP脂质体法将其分别转入高转移潜能的人MHCC97-H肝癌细胞,以限制性酶切、PCR、Western blot及免疫组化鉴定基因重组及转染是否成功.电镜观察细胞超微形态变化,流式细胞仪检测细胞周期分布,细胞生长曲线和平板法集落形成试验观察细胞生长和集落形成能力,Boyden Chamber试验观察细胞侵袭能力,微管吸吮技术测定细胞的粘弹性和粘附力.BALB/CA 4～6周龄雄性裸鼠80只,随机分正义组、反义组、亲本细胞组及空载体组进行皮下(n=40)和原位肝(n=40)种植试验,观察体内的成瘤性、侵袭性及远处转移能力,免疫组化研究癌转移灶AFP和肿瘤组织细胞外基质(ECM)及粘附分子的表达状况.结果(1)成功构建了KAI1正、反义基因真核表达质粒,并将其分别转入MHCC97-H人肝癌细胞;(2)发现转入KAI1基因后可导致肝癌MHCC97-H细胞的一些细胞器数量和形态的变化;(3)KAI1基因对肝癌MHCC97-H细胞的体内外生长、细胞周期及体内成瘤性无明显影响;(4)反义KAI1基因可使MHCC97-H细胞的克隆形成能力增强、对体内外肝癌细胞的侵袭和转移有促进作用;(5)KAI1基因表达上调能使MHCC97-H细胞的体内外侵袭能力降低;(6)KAI1基因抑制肝癌侵袭和转移的机制可能与细胞粘弹性增加、ECM表达上调、粘附分子表达下调及粘附力下降等变化有关.结论KAI1基因在肝癌的侵袭转移过程中发挥着重要作用,上调KAI1基因表达能明显降低肝癌细胞的侵袭和转移能力.     

不同转移潜能人前列腺癌细胞中KAI1基因的表达

目的:探讨人前列腺癌细胞转移潜能与KAI1基因表达的关系.方法:运用Northern印迹杂交检测KAI1基因在不同转移潜能人前列腺癌细胞中的表达,以甲基化分析和聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)研究KAI1低表达的机制.结果:在转移性人前列腺癌细胞系PC3和PC3M中不论其转移潜能强弱,KAI1 mRNA表达均降低.甲基化分析未发现KAI1基因5'-启动子部位CCm5CGGG甲基化.PCR-SSCP分析显示:KAI1基因第7外显子在PC3和PC3M均显示异常带,PC3M较弱.结论:KAI1基因表达降低与人前列腺癌的转移有关,但其转移潜能的强弱可能不取决于KAI1的调控.KAI1基因的低表达与5'-启动子部位CCm5CGGG甲基化无关,可能与该基因的突变失活有关.     

KAI1基因与肿瘤转移

随着分子生物学技术的迅速发展，人们对恶性肿瘤的转移机理有了更深入的了解。目前已知，肿瘤的转移涉及到肿瘤细胞本身的生物学特性、宿主环境及基因变化等一系列复杂过程。对肿瘤转移相关基因的研究已日益受到重视。肿瘤转移相关基因按其作用机制可分为正向作用的肿瘤转移基因及反向作用的肿瘤转移抑制基因。KAI1基因(即中拼音抗癌kang ai的缩写)是新近发现的一种肿瘤转移抑制基因。本就对KAI1基因与肿瘤转移的相关关系的最新研究进展作一综述。     

大肠癌中抑癌基因p33/ING1 mRNA的表达及意义

目的：了解p33/ING1表达与大肠癌临床病理特征的关系及其可能作用机制。方法：采用逆转录PCR检测52例散发性大肠癌癌组织及正常大肠粘膜中ING1的表达。结果：在大肠癌组织中p33/ING1 mRNA表达较正常粘膜明显减弱（30／50,57.7%),p33/ING1的低表达与肿瘤的Duke‘s分期及淋巴结转移显著相关。结论：ING1 mRNA表达的减弱在大肠癌发展过程中起重要调节作用。     

食管癌组织中KAI1基因的表达

目的探讨KAI1基因的表达与食管癌浸润转移的关系.方法采用RT-PCR及免疫组化方法,检测35例食管癌组织及其正常黏膜中KAI1 mRNA及蛋白的表达.结果在食管癌组织及其正常黏膜中,KAI1 mRNA的表达差异无统计学意义(P＞0.05),而癌组织中KAI1蛋白的表达明显低于其正常黏膜(P＜0.05),但KAI mRNA及蛋白表达均与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移无关(P＞0.05).结论食管癌癌变可能与KAI1蛋白的低表达有关,但与KAI1 mRNA的表达无关,推测这可能是由于翻译后修饰所致.     

结直肠癌中抑癌基因ING1蛋白的表达及其意义

目的：了解大肠癌中ING1表达及其意义，方法：采用免疫组织化学方法检测52例大肠癌组织及正常大肠粘膜中ING1及p53蛋白表达。结果：在52例大肠癌组织中ING1蛋白表达正常粘膜明显减弱（＋＋：9．6％）；＋：38．5％），其表达减弱与Dukes分期及淋巴结转移情况有关，ING1蛋白表达与p53蛋白表达有关，结论：ING1蛋白表达下调在大肠癌发生，发展过程中起重要作用，表达情况与大肠癌的Dukes分期及转移，预后有一定关系。     

依托泊苷对卵巢癌细胞3AO肿瘤转移抑制基因KAI1表达的影响

目的 研究依托泊苷（VP16）对人卵巢上皮性癌细胞3AO的生长抑制作用及其对细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1表达的影响.方法 倒置显微镜下观察3AO细胞在不同浓度的药物作用下形态学变化;采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察药物对3AO细胞的生长抑制作用;运用RT-PCR、免疫细胞化学的方法 分别从转录和蛋白翻译水平检测不同药物浓度作用的3AO细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1的表达情况.结果 药物作用下,3AO细胞体积缩小,核固缩、深染及凋亡小体出现;MTT法结果 显示药物对3AO细胞的生长抑制率呈明显的剂量依赖性;免疫细胞化学染色显示VP16能显著上调肿瘤转移抑制基因KAI1的表达;RT-PCR检测结果 显示VP16能同样增强KAI1mRNA的表达.结论 VP16不仅能抑制卵巢上皮性癌细胞的生长,而且能增强癌细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1的表达,可能为临床上抑制肿瘤转移的药物治疗带来希望.     

Effect of tumor suppressor gene KAI1 on the biological behaviors of human colorectal carcinoma]

OBJECTIVE: To determine whether the expression of tumor suppressor gene KAI1 can suppress the invasive or metastatic ability of colorectal carcinoma cells. METHODS: KAI1 cDNA was transfected into highly malignant colorectal carcinoma cell line LoVo, which had low levels of endogenous KAI1 expression. The expressions of KAI1 mRNA and protein were determined by immunohistochemistry and in situ hybridization, and the biological behaviors of the KAI1-transfected LoVo cells were investigated by cell-cell adhesion, cell-matrix adhesion and invasion assays. RESULTS: KAI1 expression significantly suppressed the metastatic potential of KAI1-transfected LoVo cells, whose metastasis suppression was correlated with the increased adhesion to homotypic cells and reduced tumor adhesion to extracellular matrix components. KAI1 expression significantly suppressed the in vitro cell invasion in KAI1-transfected LoVo cells. CONCLUSION: KAI1 might function as inhibitor of colorectal carcinoma metastasis.     

KAI1/CD82在大肠肿瘤中的表达

目的探讨KAI1/CD82在大肠肿瘤的表达及意义。方法选取40例大肠癌、20例淋巴结转移癌、18例腺瘤与20例正常大肠粘膜标本,应用免疫组化检测KAI1的蛋白产物CD82的表达。结果正常大肠粘膜与腺瘤组织CD82表达较弱(阳性率分别为25.0%与5.6%),大肠癌组织中28例阳性,阳性率为70 %,淋巴结转移癌阳性率为5%,4组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。CD82在肿瘤组织中的表达与其组织学分级无关(P>0.05),而与是否伴有淋巴结转移有关(P<0.05)。结论KAI1/CD82与大肠癌转移及预后相关。     

不同转移潜能人肺癌细胞系KAI1基因的表达

目的:探讨KAI1基因与人肺癌细胞系转移潜能的关系.方法:利用逆转录-PCR和Northern blot杂交法分析不同转移潜能人肺癌细胞系中KAI1 mRNA的表达,并用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测与突变的关系.结果:在高转移潜能细胞系PG中KAI1 mRNA表达降低,在无转移潜能的PAa细胞中KAI1的表达量比PG细胞高10倍以上(积分光密度比值分别为0.7313和0.0549).PCR-SSCP结果显示在PG细胞KAI1基因第7外显子出现异常改变.结论:肺癌细胞的转移潜能可能与KAI1基因表达量有关,KAI1基因的低表达可能由基因突变所致.     

转移性和非转移性乳腺癌组织中KAI1基因的表达

目的 :探讨肿瘤转移抑制基因KAI1与乳腺癌转移的相关性。方法 :运用原位杂交法观察KAI1mRNA在转移性和非转移性乳腺癌组织中的表达。结果 :在无淋巴结转移的 12例乳腺癌病例中KAI1mRNA阳性表达为 9例 ,有淋巴结转移的 8例中阳性表达 1例。前者阳性率显著高于后者 (P <0 0 5 )。结论 :KAI1基因的低表达或不表达可能是某些高转移潜能乳腺癌的特征。     

KAI1和nm23与人黑色素瘤细胞转移潜能的相关性

目的:探讨肿瘤转移抑制基因KAI1和nm23与人黑色素瘤细胞转移潜能的关系.方法:应用Northern blot杂交检测不同转移潜能人黑色素瘤细胞中KAI1和nm23基因的表达.结果:4种不同转移潜能的人黑色素瘤细胞中(WM35,WM451,WM983a,WM1341b),KAI1 mRNA和nm23 mRNA均有表达且表达量基本一致,KAI1在4种细胞中的积分光密度值分别为0.1798,0.1800,0.1501,0.1582;nm23分别为1.0428,1.0607,1.0141,1.0754.结论:KAI1基因与nm23基因的表达降低与人黑色素瘤的浸润转移无关.