急性脊髓损伤后运动诱发电位与MRI表现相关性研究

目的：研究实验性脊髓急性创伤后动态MR表现和运动诱发电位评分间的相关性。材料和方法：23只家兔建立脊髓液压损伤模型，其中对照组5只，脊髓按不同损伤程度分A、B两纽，各9只．于伤后24h、72h、7d行MRI与运动诱发电位评分。结果：脊髓损伤A组创后24h出现高低混杂信号．MEP未引出且随时间延睫未见恢复；72h出现血肿信号特征．7d创区大部分坏死信号．其功能未见恢复。损伤B组24h见点状水肿信号．MEP潜伏期明显延长．72h-7d范围扩大，MEP表现山脊髓功能部分恢复。结论：脊髓功能的MEP评判准确地提供了量化标准。高场MRI发现72h表现出脊髓血肿的信号提示脊髓功能缺失严重，而72h的点状高信号提示脊髓不完全损伤．并可有恢复。     

脊髓损伤动物模型的制备及神经功能评价

脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）是医学界面临的难题和研究热点之一。脊髓损伤动物模型的制备对脊髓损伤相关基础研究具有重要意义。笔者现就目前国内外常用的脊髓损伤动物模型的制备及神经功能评价的方法综述如下。     

急性脊髓损伤后脊髓组织内皮素-1mRNA表达的实验研究

探讨内皮素－１在急性脊髓损伤中的表达及其作用机制。方法应用３ｇ负荷压迫大鼠胸段脊髓（Ｔ８－９）５ｍｉｎ,造成大鼠胸段脊髓急性中度损伤;借助原位杂交组织化学方法,定位,定量研究大鼠急性脊髓损伤后早期ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达的时间和空间分布特征。结果脊髓压迫伤后３０ｍｉｎＥＴ－１ｍＲＮＡ表达明显增多,４ｈ达最高峰,一直持续至７２ｈ恢复至正常水平。ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达阳性细胞主要是神经细胞,高表达区在脊髓前     

啮齿类动物脊髓损伤模型的研究现状

目前已经成功建立了多种脊髓损伤（SCI）动物模型,可从不同角度模拟临床脊髓损伤。脊髓损伤模型主要有脊髓挫伤模型、压迫损伤模型、横断损伤模型、缺血再灌注损伤模型和光化学损伤模型等几种。笔者对啮齿类动物几种脊髓损伤模型的原理、制作方法及其特点分别进行了介绍。     

机械性脊髓损伤动物模型及动物术后护理

机械性脊髓损伤动物模型主要有重物坠击伤模型,切割或吸除伤模型,夹伤、压迫伤模型。重物坠击伤模型由于在损伤的生理学反应和继发损伤的病理生理学方面更接近于人的脊髓损伤,加上大量的已发表经验使其成为现在评估急性脊髓损伤处理策略时最常用的动物模型之一。脊髓切割伤主要用于观察轴突切断后的出芽及再生。夹伤和压迫伤模型操作简单,可以精确反映损伤的程度和压迫的关系,是用于研究压迫效果和减压时间窗理想的动物模型。脊髓损伤动物术后护理主要包括术后单笼喂养、使用抗生素、挤压膀胱排尿、避免肢体水肿等。     

脊髓前动脉损伤致脊髓缺血性损伤模型的MRI评价

目的：研究经脊髓前动脉损伤，致脊髓缺血性损伤模型的高场强MRI信号表现特征。方法：选用12只家犬经颈前手术入路，切断脊髓前动脉，经高场强MRI扫描，对照病理分析脊髓前动脉损伤后脊髓的MRI信号变化特征。结果：脊髓前动脉损伤后脊髓MRI表现出异常T2WI高信号，且出现在脊髓前动脉损伤节段的前2／3，多表现为一例受累及或偏向一例。结论：MRI能确定脊髓缺血性损伤的部位及信号特征。     

实验性急性脊髓损伤MRI特点及与病理相关研究

目的 研究轻、重两组急性脊髓损伤（ＳＣＩ）的ＭＲＩ特点及ＭＲＩ信号类型与病理的关系。材料与方法 采用改良Ａｌｌｅｎ’ｓＷＤ法制成轻、重两组急性ＳＣＩ模型各８例,对照组６例,在损伤后第１２小时在０．５Ｔ ＭＲ仪扫描结束后处死取病理标本,光镜下观察病理变化。在ＭＲＩ矢状位最清晰层面上测定Ｔ１ＷＩ、Ｔ２ＷＩ、ＰＤＷＩ损伤区相对信号强度,上下径、前后径及损伤区面积并测定犬急性ＳＣＩ后的神经功能。结果 （１     

大鼠脊髓损伤后神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ结合配体mRNA的表达

目的 探讨大鼠脊髓损伤后神经型一氧化氮合酶（nNOS）羧基末端PDZ结合配体（carboxy-terminal PDZ ligand of nNOS，CAPON）mRNA的表达变化及其意义。方法采用脊髓横断模型，用实时荧光定量聚合酶链式反应（realtime-PCR）及原位杂交与免疫荧光技术结合的方法检测正常成年大鼠脊髓内以及脊髓损伤后不同时间点损伤段脊髓组织中CAPONmRNA的表达，采用cresylviolet染色计数脊髓组织内存活神经元。结果 CAPON mRNA在对照组大鼠脊髓内呈低水平表达于前角神经元，脊髓损伤后表达于灰质各部分神经元及白质。在损伤早期2h表达开始升高，于8h达到高峰，随后1d有下降趋势，3d时稍有上升，损伤后14d恢复至正常水平。而nNOSmRNA在损伤后2h迅速上调，于8h达高峰，随即下降至正常水平。在此过程中，有神经元凋亡现象的发生。损伤后2h存活神经元的数量即减少，随后稍有增多，但仍少于对照组，3d后存活神经元再度减少，持续至14d。结论 大鼠脊髓损伤后CAPONmRNA表达发生变化，提示CAPON可能通过调节nNOS的活性及亚细胞定位而影响神经元的凋亡，在脊髓损伤病理过程中发挥积极的调节作用。     

大鼠脊髓损伤后Caspase-3表达和神经细胞凋亡相关性研究

目的　研究大鼠脊髓损伤后半胱氨酸蛋白酶 3(Caspase 3)的表达变化 ,探讨与神经细胞凋亡发生的关系。方法　建立大鼠脊髓 (T8、T9)急性压迫损伤模型 ,损伤后 4、8小时和 1、2、3、7、1 4、2 1天免疫组化、半定量逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR) ,测定各时间点Caspase 3的表达变化 ;原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸 (dUTP)标记法 (TUNEL法 )检测神经细胞的凋亡水平。结果　免疫组化结果显示正常大鼠脊髓神经细胞中很少有Caspase 3表达 (2 .1± 0 .5 ) ;脊髓损伤后 8小时 ,Caspase 3表达阳性的神经细胞明显增加 ,3天达到高峰 (1 89± 1 2 .7,P <0 .0 1 ) ,Caspase 3表达的阳性细胞与凋亡细胞出现的时限相似 ,呈正相关 (r=0 .94 1 )。RT PCR检测到Caspase 3mRNA 4小时开始增高 ,4 8小时达到高峰 (0 .6 34±0 .0 2 8) ,7天后恢复正常 ,早于凋亡出现的时期 ,与神经细胞凋亡水平呈正相关 (r =0 .6 2 2 )。结论　脊髓损伤后Caspase 3表达增强 ,Caspase 3参与了脊髓损伤细胞凋亡的调节     

大鼠脊髓损伤后死亡原因分析

目的 探讨大鼠Allen脊髓损伤模型动物死亡的原因.方法 选用120只Wistar成年大鼠,采用Allen打击模型(25 g·cm),在T10段造成急性脊髓损伤,对损伤后死亡动物进行统计和解剖.结果 死亡25例,死亡率为21%,其中5只死于苏醒前,解剖未发现异常;12只死于损伤后3 d内,3只死于损伤后3～7 d,解剖发现肺部均有出血、水肿.部分动物有膀胱积血;3只死于8～14 d,1只死于损伤后15～21 d,解剖发现分别有肺部感染和泌尿系感染.3周后无死亡.结论大鼠Allen脊髓损伤模型动物早期死亡的主要原因是肺淤血和肺水肿,晚期死亡的主要原因是肺部和泌尿系感染.

Abstract：

Objective To investigate the causes for death in rats after spinal cord injury.Methods A total of 120 adult Wister rats were selected for the study. The animal model with acute spinal injury at T10 was established by using Allen' s combat (25 g · cm). The dissection analysis was performed in death rats. Results Of all, 25 patients died, with mortality rate of 21%. Of death rats, five rats were died before awakening, with no abnormal anatomy; 12 rats died within three days after injury and three died of injuries 3-7days injury. Anatomy found pulmonary bleeding and edema, even hematocele bladder in some rats. There were three rats died within 1-2 weeks, one died of injury only after 2-3 weeks, with lung infection and urinary tract infection. There was no death after three weeks. Conclusions The early causes for death of rats with spinal cord injury is mainly due to lung congestion and pulmonary edema, whereas the leading cause of late death of rats is pulmonary and urinary tract infection.     

神经节苷脂对大鼠脊髓损伤后神经元的保护作用

目的 通过观察单唾液酸四己糖神经节苷脂( monosialotetrahexosyl gangliosides,GM-1)对大鼠脊髓损伤后微管相关蛋白-2（microtubule - associated protein 2,MAP -2）和胆碱乙酰转移酶( choline acetyhransterase,ChAT)的表达及运动功能的影响,探讨GM -1对大鼠脊髓损伤后神经元的保护作用及其机制。方法 Wistar雌性大鼠66只（体重260～ 300 g）,随机取6只作为正常对照组,余60只采用改良Allen打击法于Tt0节段制作大鼠急性脊髓损伤模型,并按随机数字表法分为GM -1组（A组）和等渗盐水对照组（B组）,每组30只大鼠。分别于术后1,3,7,14和28 d采用改良Tarlov评分法评价大鼠脊髓损伤后后肢运动功能恢复程度后处死取材,每组各时相点6只大鼠。以免疫荧光染色观察大鼠脊髓损伤后MAP -2和ChAT的表达情况。结果 术后7d起,Tarlov评分在A、B组间比较差异有统计学意义(P＜0.05),即A组大鼠运动功能恢复优于B组。免疫荧光染色发现,A组术后各时相点MAP -2及ChAT呈阳性表达的细胞数量较B组同时相点明显增多（P＜0.05）。结论 脊髓损伤后大鼠神经功能的恢复与MAP -2及ChAT的表达呈一定的相关性;GM -1可通过增强脊髓损伤后MAP -2及ChAT的表达来保护神经元。     

大鼠脊髓急性损伤后神经细胞的凋亡

目的 研究脊髓急性损伤后神经细胞的凋亡及其分布特点。方法 44只大鼠分为对照组（4只）和损伤组（40只）。损伤组脊髓（T8．9）经中度压迫致伤后,分别在伤后30min、2,4,8,24,48,72h和7,14,21d处死取材（每时相点鼠数＝4只）。应用HE、尼氏染色及凋亡细胞原位末端标记法对脊髓组织进行细胞检测。结果 伤后4h,损伤段及邻近段可见末端标记阳性神经细胞;伤后8h,损伤段灰质中阳性细胞数达高峰;伤后24h,白质中阳性胶质细胞数达高峰;伤后72h,相邻节段阳性细胞数达高峰。阳性细胞以白质中胶质细胞为主,主要分布于相邻手段。结论 脊髓损伤后神经细胞凋亡是继发损伤期的重要病理变化。     

脊髓损伤后下丘脑部分核团c-fos蛋白表达的实验研究

目的通过观察脊髓损伤后中枢下丘脑室旁核、视上核c-fos样蛋白免疫反应了解中枢与脊髓损伤之间的关系.方法成年大鼠56只,体重(270±20)g,分为脊髓损伤组(20只)、假手术组(20只)、正常对照组(16只).损伤模型为双后肢不全瘫.伤后1,6,12,24h对下丘脑室旁核、视上核组织进行冠状面切片,运用c-fos漂片免疫组化方式对阳性细胞计数.结果脊髓损伤后不同时间组的下丘脑室旁核、视上核均有明显的c-fos阳性表达.伤后1,6,12,24 h室旁核c-fos阳性表达细胞数与假手术组、正常对照组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01);伤后12,24h视上核c-fos阳性表达细胞与假手术组、正常对照组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论脊髓损伤影响正常神经信号在大脑中枢传导,下丘脑室旁核、视上核可产生明显反应.     

神经节苷脂对大鼠脊髓损伤诱导的自噬性神经元死亡的影响

目的 探讨神经节苷脂(monosialotetrahexosy-1 ganglioside,GM1)对脊髓损伤诱导的神经元自噬性死亡的影响. 方法 90只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、等渗盐水组和GM1组,每组30只.等渗盐水组和GM1组采用Allen法建立T10脊髓损伤动物模型,荧光显微镜下观察内源性细胞自噬相关蛋白(LC3)的表达;Western印迹法检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、细胞蛋白(Beclin-1)表达. 结果 与假手术组比较,等渗盐水组LC3表达水平明显上调(P＜0.05):与等渗盐水组比较,GM1组LC3表达水平明显下调,自噬体形成明显减少(P＜0.05).与假手术组比较,等渗盐水组LC3-Ⅱ、Beclin-1表达水平以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显上调(P＜0.05);与等渗盐水组比较,GM1组LC3-Ⅱ、Beclin-1表达水平以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显下调(P＜0.05). 结论 GM1通过抑制脊髓损伤后自噬性细胞死亡,起到保护神经元作用.     

黄芪多糖对大鼠急性颈脊髓损伤后肺水肿的影响

目的 探讨黄芪多糖对大鼠急性颈脊髓损伤后肺水肿的影响. 方法 成年Wistar大鼠200只,体重240～ 250 g,雌雄不限.大鼠按随机数字表法分为五组:黄芪多糖组、低浓度黄芪多糖组、等渗盐水组、空白对照组、假手术组,每组40只.采用C7段颈脊髓改良Allen打击法制作大鼠颈脊髓损伤模型,打击力度为10 ×2.5 g·cm;假手术组仅暴露C7段颈脊髓.各组按取材时间不同又分为造模后24h、3d、1周、2周共4个时相点,每个时相点10只大鼠.在不同时相点处死大鼠,通过光学显微镜观察肺组织的病理学变化,并测量各时相点每组大鼠肺湿重与干重(W/D)比值及血清和肺泡灌洗液蛋白浓度,计算肺W/D及肺通透性指数(LPI). 结果 同一时相点低浓度黄芪多糖组和黄芪多糖组肺W/D比值及LPI均较空白对照组及等渗盐水组低,黄芪多糖组伤后3d时最低(P＜0.05). 结论 大鼠急性颈脊髓损伤可造成肺组织水肿,伤后早期使用黄芪多糖可有效减轻颈脊髓损伤后肺水肿的程度.     

脊髓牵拉损伤后七叶皂苷钠对细胞凋亡的抑制作用

目的观察脊髓牵拉损伤后七叶皂苷钠对细胞凋亡的抑制作用。方法实验组大鼠脊髓损伤前尾静脉推注七叶皂苷钠6 mg/kg。将T10脊髓水平方向牵拉1.7 mm,持续5 m in。检测神经细胞bc l-2、bax表达;原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导dUTP标记技术观察凋亡细胞。结果(1)bc l-2:实验组7 d达高峰为(43.61±5.89)%;对照组7 d时为(26.85±4.61)%,差异具有统计学意义(P<0.01)。(2)bax:实验组3 d达高峰为(36.19±5.42)%;对照组3 d时为(44.15±6.81)%,差异具有统计学意义(P<0.01)。(3)各时间点实验组细胞凋亡指数较对照组低。结论脊髓损伤前应用七叶皂苷钠能抑制因脊髓牵拉损伤引起的神经细胞凋亡。     

高压氧对损伤脊髓GAP-43mRNA表达影响的实验研究

目的　研究高压氧 (HBO)治疗对脊髓损伤 (SCI)组织 GAP- 4 3m RNA表达水平的影响。方法　用 Allen氏 WD法制作鼠脊髓损伤模型。5 5只成年 Wistar鼠随机分为 11组 :正常对照组、SCI后第1,4 ,7,10 ,14 d组和 HBO(SCI后 HBO治疗 )第 1,4 ,7,10 ,14 d治疗组 ,每组各 5只。用半定量 RT- PCR法检测鼠损伤脊髓组织中 GAP- 4 3m RNA表达水平。结果　 GAP- 4 3m RNA在正常成年鼠脊髓中微量表达 ,SCI后表达增加 ,且 HBO治疗组较 SCI组表达更为显著 (P<0 .0 1)。术后 7d时 ,SCI组的GAP- 4 3m RNA表达达到高峰 ,14 d时降至接近初始水平 ,但 HBO治疗组 GAP- 4 3m RNA表达仍维持较高水平。结论　 HBO可增强损伤脊髓组织 GAP- 4 3m RNA表达水平 ,促进损伤脊髓神经元再生和修复 ,对脊髓损伤起保护作用。     

胸腰段骨折并脊髓损伤再手术疗效分析

目的 探讨胸腰段骨折合并脊髓损伤患者I期前路/后路手术后Ⅱ期再手术的疗效.方法 回顾性分析2005年1月-2009年3月胸腰段骨折合并脊髓损伤单纯前/后路手术后残存后凸畸形伴神经功能恢复不全或未做Ⅱ期手术疗效患者12例.男9例,女3例;年龄19～57岁,平均34.6岁.根据Dems分型,爆裂型5例,压缩型5例,骨折脱位2例.I期前路手术5例,I期后路手术7例.I期手术后均存在不同程度的神经症状,对I期前路手术5例患者行Ⅱ期后路手术.I期后路手术7例者行Ⅱ期前路手术.I期手术至Ⅱ期手术最长18个月,最短12个月,平均时间13.4个月.通过影像学、神经功能及社会功能综合评估疗效,包括测量Cobb角、Frankel分级和日本骨科学会(JOA)评分.结果 术后切口均I期愈合.所有患者均获得随访,随访时间12～48个月,平均25个月.伤椎前、后缘高度压缩率术前平均42.6%、70.5%,术后平均恢复至92.5%、95,7%,至末次随访时为87.3%、92.2%;脊髓不完全损伤的患者神经功能均有Frankel 2级以上的改善.所有患者Ⅱ期术后胸腰椎生理弧度良好.Cobb角术前平均36.3°,术后矫正至5.8.,末次随访时为5.9°.JOA评分标准术后改善率,本组优9例,良2例,可1例,差0例.结论 对胸腰段骨折合并脊髓损伤患者I期前路/后路手术1年后残存神经或马尾临床症状患者行Ⅱ期手术减压后取得理想疗效,可获得满意的后凸畸形矫正和神经减压,神经功能均有不同程度恢复.

Abstract：

Objective To evaluate the outcome of reoperation(after I stage anterior/posterior operation)for thoracolumbar fractures combined with kyphosis and spinal cord injury. Methods A retrospective study was done on the medical records of 12 patients who underwent two-stage decompression with kyphosis and neurologic deficit due to single-stage approach(anterior or posterior) operation of thoracolumbar fractures combined with spinal cord injury between January 2005 and April 2009.There were 9 males and 3 females,at mean age of 34.6 years(range,19-57 years).According to the Denis classification,there were five patients with burst fractures,five with compression fractures and two with fracture dislocation.All the patients had couns medullaris injury.Of all the patients,five underwent one stage anterior approach surgery and the others underwent posterior approach operation.All the patients had vailous degrees of neurological symptoms.The patients treated with one stage anterior surgery were treated with two stage posterior surgery and the patients treated with one stage posterior surgery were treated with the two stage anterior operation.The mean interval from one stage operation to two stage decompression was 13.4 months(range,12-18 months).The radiologic,neurologic and functional outcomes were assessed through observation of the Cobb angle,Frankel spinal cord injury grading and Japanese Orthopaedic Association Scores(JOA). Results AIl the patients were followed up for mean 25 months (12-48months),which showed primary healing of the incisions in all the patients.The average anterior and posterior heisht of the vertebrae wers corrected from preoperative 42.6%and 70.5%to postoperative 92.5%and 95.7%and to 87.3%and 92.2%at the final follow-up respectively.Neurologic status was improved at least one Frankel grade in the patients who had preoperative incomplete paraplegia.The Cobb angle was corrected from preoperative 36.3°to postoperative 5.8°and to 5.9°at the final follow-up(P<0.05).No patient had any notable loss of correction between discharge and final follow-up.According to JOA coring,the results were excellent in nine patients,good in two and fair in one,with excellence rate of 92%. Conclusions Two stage decompression for epiconus and cauda equina syndrome resulted from one stage approach(anterior or posterior)operation of thoracolumbar fractures combined with spinal cord injury call attain satisfactory correction of the kyphosis and nerve decompression as well as various degrees of nerve function recovery.     

脊髓缺血损伤模型及行为学的实验研究

制作一种新的家兔脊髓缺血损伤模型,观察其行为功能改变。方法以选择性阻断腰动脉制作腰髓缺血损伤模型,３２只家兔随机均分为对照组,缺血３０,６０及９０ｍｉｎ组。采用Ｊａｃｏｂｓ法对家兔后肢功能评级,Ｒｅｕｔｅｒ法对脊髓感觉运动反射功能评分。结果再灌注１ｄ时,缺血３０ｍｉｎ家兔轻瘫,缺血６０,９０家兔全部发生完全性截瘫。