虎掌南星HPLC指纹图谱建立

目的建立虎掌南星HPLC指纹图谱。方法该药材60%乙醇提取物的分析采用Lichrospher C₁₈色谱柱(4.6 mm×200 mm, 5μm);流动相乙腈-水;体积流量1 mL/min,梯度洗脱;柱温30℃;检测波长270 nm。结果 10批样品指纹图谱中有15个共有峰,相似度大于0.9。同一产地的药材聚为一类,前3个主成分累积贡献率达97.31%。结论该方法准确稳定,重复性好,专属性强,可用于虎掌南星的质量控制。     

天南星(虎掌南星)炮制工艺改进研究

采用《药典》规定的天南星质量鉴别标准,并结合对小鼠的毒性反应为指标,优选出消除天南星毒副作用最佳辅料为白矾。通过比较提出了两种炮制合理的新工艺。中试证明新工艺用于大生产是可行的。     

虎掌南星加工炮制一体化工艺优化

目的 优化虎掌南星加工炮制一体化工艺.方法 以口尝麻辣感以及草酸钙针晶的含有量为指标,设计和建立虎掌南星产地加工炮制一体化的方法,在单因素考察的基础上,以温度、时间、白矾用量为考察因素,草酸钙针晶、水溶性浸出物及水麦冬酸含有量为响应值,采用BOX-Behnken响应面法优选制虎掌南星产地加工炮制一体化工艺.结果 最佳条件为白矾、生姜加水煮沸后,趁热投入鲜南星煮沸60 min,停火浸泡2d,再以原汁水蒸气加热,温度125℃,时间37 min,取出,洗净晾至七成干,切片.鲜虎掌南星-白矾-生姜用量比100∶ 12∶10.结论 该方法简便、稳定、可行,可用于虎掌南星的炮制.     

虎掌南星的本草考证

目的对中药虎掌南星名称、产地、原植物、加工炮制进行本草学考证。方法通过查阅历代本草文献进行考证。结果确定了虎掌南星的名称演变过程,明确了其原植物和道地产区。结论为虎掌南星资源的开发利用提供理论基础。     

天南星(虎掌南星)饮片质量研究

天南星(虎掌南星)饮片质量研究吴连英毛淑杰王孝涛程丽萍(中国中医研究院中药研究所北京100700)虎掌南星的饮片质量研究尚未见有报道。我们在虎掌南星的工艺、毒理、药效等研究的基础上,在安全有效的前题下,对其生、制品饮片性状、粉末特征、理化鉴别、已知成分及辅料白矾含量等,进行了比较研究,报道如下。1实验材料1.1原材料产自河南,购自河南禹县药材公司。经本所王孝涛研究员鉴定系天南星科植物掌叶半夏PineliapedatisectaSc....     

虎掌南星规范化种植技术△

目的：规范虎掌南星药材的种植技术,以提高虎掌南星药材质量。方法：在多年研究和田间试验的基础上,总结规范了虎掌南星种植技术。结果：初步制订了虎掌南星规范化种植的操作技术规程。结论：规范虎掌南星种植技术对提高其质量与产量具有重要作用。     

虎掌南星化学成分及其抑菌活性

目的研究虎掌南星Pinellia pedatisecta Schott的化学成分及其抑菌活性。方法虎掌南星氯仿提取物采用硅胶、ODS、MCI进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。平板法筛选最低抑菌浓度。结果从中分离得到10个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、邻苯二甲酸丁二酯(2)、胡萝卜苷(3)、(2S)-1-O-十六碳酰基-2-O-亚油酰基-3-O-β-D-半乳糖基甘油(4)、diacygalactolipidⅠ(5)、(2S)-1-O-十八碳酰基-2-O-亚油酰基-3-O-β-D-半乳糖基甘油(6)、(2S)-1,2-双-亚油酰基-3-O-β-D-半乳糖基甘油(7)、(2S)-1-O-十六碳酰基-2-O-十四碳酰基-3-O-β-D-半乳糖基甘油(8)、spongilipid(9)、丙三醇(10)。对于金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌、幽门螺旋杆菌,化合物4、7的最低抑菌浓度分别为20、30、50μg/mL,25、50、150μg/mL。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物4、7有较强的抑菌活性。     

虎掌南星药材产地加工方法的初步研究

目的：研究山东产虎掌南星的加工方法及质量。方法：采用《中国药典》2005年版附录中浸出物含量测定法、水分测定法和灰分测定法,检测去皮虎掌南星生晒品、烘干品、切片晒干品、切片烘干品、硫熏晒干品和未去皮晒干品的质量。结果：不同加工方法的虎掌南星药材质量有差异。结论：不同的产地加工方法对虎掌南星药材的质量有一定的影响。本研究为虎掌南星药材加工方法的制定积累了参考数据。     

天南星(虎掌南星)生、制品毒性比较研究

天南星(虎掌南星)生、制品毒性比较研究吴连英程丽萍毛淑杰王孝涛(中国中医研究院中药研究所北京100700)天南星原名虎掌,是天南星常用品种及现今出口药材主要品种之一,商品统称为天南星。因生品有强烈刺激性,国家药典规定供内服需用炮制品。现行的炮制工艺各地不统一,一药多法,缺乏统一的制品质量标准。我们在文献研究及炮制生产现况调查的基础上,对其炮制工艺做了改进试制,并通过了中试验证。为了进一步探讨新工艺制品是否达到....     

虎掌南星总有机酸含量测定

目的：研究专属、灵敏的总有机酸含量测定方法。方法：利用羧基在N,N-二环己基碳酰亚胺（DDC）体系中与高氯酸羟胺（HAP）形成羟肟酸,产物在酸性条件下与高氯酸铁显色的原理,以虎掌南星为载体,柠檬酸为指标,采用分光光度法测定。结果：经显色条件优化,建立了测定方法。方法学考察结果显示,符合含量测定要求。对照品柠檬酸在0.078~0.390 g·L^-1,吸光度值与浓度呈现良好的线性关系（r=0.999 8）,平均加样回收率为99.91%（RSD 1.32%,n=9）。结论：该方法简便灵敏,具有可操作性,可用于测定药材中总有机酸的含量。     

利用等位基因特异PCR鉴别虎掌南星及其部分混淆品

目的:建立中药材虎掌南星的分子鉴定方法,为天南星药材质量控制提供依据。方法:GenBank中下载半夏属、天南星属、犁头尖属物种的叶绿体rpl20基因序列,利用DNAMAN进行比对分析,发现半夏属和虎掌南星的SNP位点,并设计鉴别引物Ptrpl94F,Ptrpl708R和Pprpl148F,Pprpl484R,采用等位基因特异PCR方法对虎掌南星、半夏、水半夏3个物种的10个样品进行扩增。结果:引物Pprpl148F和Pprpl484R仅对虎掌南星扩增333 bp条带,半夏、水半夏均无扩增,能准确鉴别虎掌南星。引物Ptrpl94F和Ptrpl708R对半夏、虎掌南星均扩增611 bp条带,水半夏无扩增。结论:本实验建立的等位基因特异PCR方法能准确区别出虎掌南星和半夏、水半夏,为虎掌南星及半夏的正确用药提供了保障。     

色谱指纹图谱在制南星饮片质量标准研究的应用

目的 :通过虎掌南星饮片研究 ,探讨指纹图谱在中药质量标准建立的定量应用。方法 :HPLC指纹图谱检测和化学计量分析 (window preprocessing ,principal componentanalysis)。结果 :建立虎掌南星饮片指纹图谱的定量表述及定量范围 ;并以此表征饮片产地和批之间物质基础变异。结论 :用window preprocessing ,principal componentanalysis分析和标识饮片HPLC指纹图谱 ,并以此作为饮片质量控制指标是可行的。     

掌叶半夏脂溶性成分GC-MS研究

目的:分析掌叶半夏脂溶性成分的化学成分。方法:对乙醇提取后氯仿萃取得到的脂溶性成分进行了GC-MS分析。HP-5MS色谱柱(0.25 mm×0.25 mm×30 m);程序升温,进样口温度280℃,进样量1.0μL,分流比10∶1。结果:共分离鉴定出三氯乙酸1.86%,顺式-1,2-环己二醇3.56%,庚基氢过氧化物1.66%,Z型-2-十一碳烯5.54%,1-丁氧基-2-乙基己烯4.13%,吡咯并[1,2-A]吡嗪-1,4-二酮6.36%,棕榈酸23.32%,10-十一碳炔酸33.81%,环戊烷十一酸1.11%,2,5-哌嗪,3-苄基-6-异丙基2.95%,2-溴(正)壬烷1.04%,吡咯并[1,2-A]吡嗪-1,4-二酮,六氢-3(苯)5.73%,4-乙基四氢-2H-噻喃1.77%,1,2,2溴二十二烷1.26%,1,1-二氯-2,2,3,3-四甲基环丙烷2.31%,(Z,Z,Z)-6,9,12-十八三烯苯基甲基酯等19种成分。结论:进一步确定了掌叶半夏脂溶性部分的化学成分,为掌叶半夏的抗肿瘤作用深入研究提供参考。     

半夏炮制解毒机制的研究I

目的：阐明半夏炮制时采用8%明矾水或pH>12碱水炮制的解毒机制。方法：以药典规定的明矾浓度和碱液浓度浸泡生半夏,并采用电子显微镜扫描观察、氧化还原滴定法测定草酸钙含量、家兔眼刺激性实验等。结果：生半夏经过药典规定的8%明矾水浸泡或以10%的Na₂CO₃浸泡后,刺激性成分草酸钙针晶被锈蚀溶解,不溶性草酸钙含量从1%以上急剧下降到0.5%以下,半夏的刺激性也随之下降；半夏炮制后草酸钙含量降低到0.5%以下几乎不引起刺激性。结论：8%明矾水或pH>12以上的碱水炮制可以使生半夏药材中具有强刺激性成分草酸钙针晶的针形晶体破坏,含量降低,刺激性毒性降低；茜草、山药等无刺激性药材中草酸钙针晶的晶形、质地和含量与半夏具有非常大的差异。     

虎掌南星超快速Real-time VPCR闭管检测方法的建立及应用

目的建立虎掌南星Pinellia pedatisecta特异性DNA的闭管式超快速检测方法,实现对虎掌南星样本的快速鉴别。方法针对虎掌南星特异性的DNA序列设计其特异性的引物和TaqMan探针,通过对扩增体系进行优化,建立虎掌南星的超快速实时荧光VPCR扩增体系,实现对虎掌南星特异性DNA的快速扩增和闭管式实时检测。同时对该方法的特异性、灵敏度和实用性进行考察。结果可以在24 min内完成对虎掌南星特异性DNA的闭管快速扩增检测;检测限低至pg级DNA;在同科属常见近缘品种中无交叉反应;对采集的7批56个"半夏"样本进行分析,检测出2个批次共16个样本为虎掌南星,且该结果与测序结果 100%符合。结论所建方法可以作为虎掌南星的特异性检测方法,具有灵敏、快速和不易污染等优点,可以为虎掌南星和半夏药材的质量控制提供参考。     

半夏化学成分的研究

目的:研究传统中药半夏的化学成分。方法:用各种色谱技术进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定结构。结果:从半夏乙醇提取物的石油醚萃取部分分离鉴定了6个化合物:豆甾4烯3酮(stigmast4en3one)(Ⅰ),环阿尔廷醇(cycloartenol)(Ⅱ),5α,8α桥二氧麦角甾6,22双烯3醇(5α,8αepidioxyergosta6,22dien3ol)(Ⅲ),β谷甾醇3OβD葡萄糖苷6′O二十烷酸酯(βsitosterol3OβD glucoside6′eicosanate)(Ⅳ),α棕榈精(αmonpalmitin)(Ⅴ),β谷甾醇(βsitosterol)(Ⅵ)。经MTT实验表明:化合物Ⅲ对人肿瘤细胞株HCT8,Bel7402,BGC823,A549,A2780具有一定抑制作用。结论:化合物Ⅰ～Ⅳ均为首次从该植物中分离得到,其中化合物Ⅱ为首次从该属植物中分离得到的三萜类化合物,化合物Ⅲ可能为半夏抗肿瘤作用的有效成分之一。     

掌叶半夏凝集素蛋白刺激巨噬细胞的致炎作用研究

为探索掌叶半夏凝集素蛋白(PPL)刺激巨噬细胞诱导炎症的作用与炎症小体NLRP3的相关性。采用凝胶色谱纯化掌叶半夏凝集素蛋白并采用SDS-PAGE凝胶电泳分析其纯度;采用ELISA法以IL-1β为指标考察PPL刺激巨噬细胞释放炎症因子的影响;采用荧光探针DCFH-DA荧光酶标仪检测PPL刺激巨噬细胞后活性氧ROS的水平变化;以ROS抑制剂NAC(N-乙酰半胱氨酸)预处理巨噬细胞,考察PPL刺激ROS的过量生成与炎症因子IL-1β大量释放的相关性;采用Western Blot方法检测PPL对炎症小体生成相关的Caspase-1 p20,NLRP3,TXNIP,ASC等蛋白的表达水平变化。结果显示分离纯化的PPL达到电泳纯;PPL刺激巨噬细胞后引起ROS过量释放,引起强烈的氧化应激反应,胞内炎症因子IL-1β含量显著升高;NAC可抑制PPL导致的ROS过量生成,且IL-1β释放也显著降低。同时PPL可诱导胞内Caspase-1 p20,NLRP3,ASC蛋白表达升高,TXNIP表达显著降低。研究结果表明,PPL刺激巨噬细胞可导致强烈的氧化应激反应,同时能够激活炎症小体NLRP3,导致IL-1β大量生成释放,即PPL能够通过ROS-TXNIP-NLRP3-IL-1β信号通路促进IL-1β的成熟和分泌,导致炎症级联反应。     

半夏综合栽培技术研究

目的:研究氮、磷、钾和播种量4因素对半夏产量影响。方法:采用4因子3水平正交组合试验与单因素试验进行研究。结果与结论:对产量作用效果依次为播种量>氮>钾>磷;其合理施肥水平为施N48.0-96.0kg·hm^-2,P₂O₅90kg·hm^-2K₂O 90.0kg·hm^-2,播种量为3000.0-3750.0kg·hm^-2。