用高效液相色谱法测定冬虫夏草及虫草乌鸡胶丸中麦角甾醇的含量

本文将样品直接皂化,环己烷提取,用分配柱和吸附柱进行提取液的净化和浓缩,HPLC法测定了冬虫夏草及虫草乌鸡胶丸中麦角甾醇的含量,为虫草及其制剂中麦角甾醇的含量测定建立了简便可行的方法。     

虫草及北虫草对大鼠肝线粒体功能的影响

人工培养的北虫草提取液可以抑制Fe2+和维生素C产生的自由基反应所导致的大鼠肝线粒体肿胀（体外），其浓度在0．05～0.42mg／ml呈量效关系。虫草和北虫草可以防止丙二醛诱导的呼吸控制率下降。但北虫草的作用更明显，浓度在1．0mg／ml时，P＜0．05。     

虫草花与冬虫夏草腺苷成份的比较研究

目的 比较研究虫草花与冬虫夏草腺苷成份的含量.方法 采用高效液相色谱法测定腺苷的含量,色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS柱(200mm×4.6 mm,5μm);流动相为磷酸盐缓冲剂(pH=6.5)-甲醇(17:3);流速为1ml/min;检测波长为260nm.结果 腺苷的线性范围为0.078 35-0.399 88μg,呈现较好的线性关系,平均加样回收率为96.22%,RSD为0.21%(n=5).结论 虫草花的活性成份腺苷含量明显高于冬虫夏草腺苷含量,具有与冬虫夏草相似的滋补功效.     

冬虫夏草、亚香棒虫草中多糖的含量测定

目的测定青岛产冬虫夏草与山西产亚香棒虫草中多糖的含量。方法硫酸-蒽酮比色法于波长(624±1)nm处测定吸收度。结果冬虫夏草多糖含量为3.5%（n=5）,平均加样回收率为99.2%,RSD=2.3%;亚香棒虫草多糖含量为0.7%(n=5),平均加样回收率为101.3%,RSD=1.7%。结论硫酸-蒽酮法测定虫草中多糖,方法操作简便,准确,稳定性好;亚香棒虫草中多糖含量低于冬虫夏草中多糖含量,从此方面讲亚香棒虫草不能代替冬虫夏草。     

冬虫夏草与其非正品——戴氏虫草的生药学鉴别研究

目的:探讨冬虫夏草非正品戴氏虫草的鉴别特征,完善药材冬虫夏草的性状和显微鉴别特征。方法:在研究采集样品及大量冬虫夏草和戴氏虫草标本的基础上,对冬虫夏草与戴氏虫草进行性状和显微鉴别研究。结果:发现冬虫夏草与戴氏虫草在外观性状和显微特征方面均存在较大差异。结论:冬虫夏草与戴氏虫草可通过性状和显微特征比较进行鉴别。     

天然和人工冬虫夏草多糖组分的HPLC分析

目的:比较天然和人工冬虫夏草多糖各组分的分子量分布及其构成比。方法:高效液相色谱法,采用TSK-GelG3000SW_(XL)分析柱(5μm,7.8mm×30cm)和TSK-Gel G3000SW_(XL)预柱(7μm,6.0mm×4cm),流动相为含0.1mol·L~(-1)硫酸钠的10mmol·L~(-1)磷酸盐缓冲液(pH 6.8),流速1mL·min~(-1),柱温和检测器温度均为25℃,示差检测,进样量25μL,GPC软件分析。结果:天然虫草多糖各组分构成比相似,均以大分子量(>1.5×10~5)组分为主(>50％);人工虫草多糖各组分构 成则差异明显,其中华东产人工虫草多糖与天然虫草多糖构成最为相似。结论:天然和人工虫草多糖构成存在一定差异,多糖组分的构成比应作为虫草的质量控制指标。     

液质联用法对两种虫草中核苷类成分的研究

目的优化色谱条件,在最佳条件下对蒙山九州虫草和冬虫夏草子座中核苷类化合物进行定性和定量研究,并比较两种虫草的不同。方法用高效液相色谱(HPLC)法对供试品中核苷类成分进行初步定性和定量的研究,然后用质谱(MS)法进行成分验证。结果HPLC与MS法联用能准确地对各组分进行定性和定量分析;洗脱液的最佳配比为:先以99%水+1%乙腈梯度洗脱5 min后过渡为96%水+4%乙腈至洗脱完全。结论首次将此方法用于虫草中核苷类成分的研究,发现蒙山九州虫草含有比冬虫夏草种类更多的核苷类成分,有望替代价格昂贵的冬虫夏草应用于临床。     

高效液相色谱法测定天然冬虫夏草和蛹虫草及其人工培养物中3个核苷类化合物含量

目的:建立快速分析天然冬虫夏草、蛹虫草及其发酵制品中核苷类化合物成分的高效液相色谱法,比较天然冬虫夏草和蛹虫草及其发酵制品中核苷类化合物的含量。方法:采用超声提取的方法,制备供试品溶液。色谱柱为Hypersil C₁₈柱(200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为 pH 6.5磷酸盐缓冲液-甲醇(85:15),检测波长为260 nm。结果:天然冬虫夏草和蛹虫草及其人工培养物中的3种核苷类成分在25 min内达到基线分离;腺苷在5.0~80.0 μg·ml^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系,相关系数为0.999 3,样品回收率为99.4%;虫草素在4.37~70.0 μg·ml^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系,相关系数为0.999 7,样品回收率为98.3%;腺嘌呤在6.75~108.0 μg·ml^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系,相关系数为0.999 7, 样品回收率为98.9%。结论:天然虫草与人工虫草培养物有相似的核苷类化合物,但在含量上有较大差异。此方法简便、准确,重复性好,可作为判定天然虫草及其培养物质量的一种方法。     

TLC法定性比较冬虫夏草与固体发酵虫草

目的:比较冬虫夏草与固体发酵虫草在化学成分上的相似性。方法:采用薄层色谱法,从总体成分和不同提取部位比较冬虫夏草和固体发酵虫草。结果:固体发酵虫草斑点位置同冬虫夏草基本一致,只是大小有所差别。结论:固体发酵虫草与冬虫夏草有相似的化学成分,有待进一步研究。     

冬虫夏草人工繁育品与野生品基于甾醇特征图谱的比较研究

目的：对冬虫夏草人工繁育品与野生品进行比较研究,建立基于甾醇类成分的特征图谱,并比较麦角甾醇含量的差异,为该药材的质量监管提供参考。方法：以10批冬虫夏草人工繁育品、17批野生品以及5批凉山虫草为研究对象,采用超高效液相色谱法,以麦角甾醇为对照品,选用XBridgeC18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.6 μm）;流动相为甲醇-水（95：5）,检测波长282 nm,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,采用CHEMPATTERN化学计量学软件对野生品色谱图进行处理,生成特征图谱,并计算所有批次的相似度。结果：17批野生冬虫夏草、10批冬虫夏草人工繁育品与野生品对照图谱之间的相似度均大于0.9,相似度良好;而5批凉山虫草相似度均未超过0.8,相似度较低。10批人工繁育品的平均含量为0.121%±0.031%;17批野生品的平均含量为0.115%±0.045%;5批凉山虫草的平均含量为0.468%±0.038%。冬虫夏草人工繁育品和野生品基于甾醇的特征图谱以及麦角甾醇含量基本一致;与凉山虫草有显著性差异。结论：本研究有助于冬虫夏草的真伪鉴别,同时为冬虫夏草人工繁育资源开发以及合理使用提供科学依据。     

HPLC测定凉山虫草中的腺苷

目的 测定凉山虫草中腺苷的含量.方法 采用HPLC法,Diamonsil C_(18)色谱柱为(200 mm×4.6 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液(pH6.5)-甲醇(80:20)为流动相,流速0.6 mL·min~(-1),柱温30℃;检测波长260 nm.结果 腺苷1～40μg·mL~(-1)与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9994);平均回收率为101.89%,RSD=3.11%(n=9).测定了10批样品中腺苷的含量,含量范围为0.0367～0.0590 mg·g~(-1).结论 所建方法准确、快速、简便,适用于凉山虫草中腺苷的测定.     

分光光度法测定金蝉花中多糖的含量

目的建立金蝉花药材中多糖的含量测定方法.方法采用分光光度法测定多糖含量.结果金蝉花中多糖含量为24.16 mgg-1,平均回收率为97.37%,RSD＝2.34%,n＝5.结论本法简便、准确、灵敏、重现性好,为金蝉花药材的质量控制提供了依据.     

RP-HPLC测定天然与人工冬虫夏草中游离麦角甾醇的含量

目的：比较天然与人工冬虫牙草中游离麦角甾醇的含量,探讨麦角甾醇作为冬虫夏草质控指标的可行性。方法：采用HP1100高效液相色谱仪,Allsphere C18色谱柱,甲醇－水（95∶5）为流动相,检测波长为275nm,流速1ml/min。结果：不同来源的天然冬虫夏草游离麦角甾醇含量差异显著,但均明显高于人工虫草菌丝。结论：麦象甾醇可作为冬虫夏草质控指标之一。     

虫草多糖的分离纯化及含量测定

目的采用发酵法从冬虫夏草发酵液及菌丝体中提取、分离虫草多糖。方法采用乙醇沉淀法分离冬虫夏草发酵液和菌丝体中的多糖;采用苯酚硫酸法测定样品中多糖含量。结果采用此法进行制备、检测,方法简单快速,结果准确,适宜推广使用。结论此法无需多糖纯品,具有快速简单、精确度高、灵敏度高、重现性较好的优点,是检测虫草多糖含量的较优方法之一。     

反相高效液相色谱法同时测定冬虫夏草中腺苷、虫草素、肌苷含量方法的研究

目的建立同时测定冬虫夏草中腺苷、虫草素、肌苷的HPLC方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱：Agilent C18柱（250 nm×4.6 mm,5μm）,甲醇与水梯度洗脱,柱温：30℃,流速：1.0 mL.min-1,检测波长：260 nm。结果腺苷进样量在0.200 8~1.004μg与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=2 876X＋0.458 8,r=0.998 7,平均加样回收率为100.5%,RSD为2.33%;虫草素进样量在0.202 2~1.011μg与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=2 018X＋8.726,r=0.999 2,平均加样回收率为99.3%,RSD为2.03%;肌苷进样量在0.201 4~1.007μg与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=5 845X-5.685,r=0.999 4,平均加样回收率为100.2%,RSD为1.44%。结论本方法简便、准确,重复性好,可用于同时检测冬虫夏草中的腺苷、虫草素及肌苷的含量测定。     

人工蛹虫草子实体对小鼠免疫功能的影响

目的考察人工蛹虫草子实体对小鼠免疫功能的影响。方法采用蛹虫草子实体微粉(粒径17~20μm)水溶液给小鼠连续灌胃12 d,分别观察对小鼠脾淋巴细胞转化、血清溶血素水平和2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠迟发型变态反应的影响。结果小鼠灌胃给予蛹虫草子实体微粉水溶液10~90 mg.kg-1,可显著促进淋巴细胞的自然增殖作用(与阴性对照组比较,P<0.05),但对刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)活化后的细胞无协同作用,同时增加血清溶血素水平,能增强DNFB诱导的小鼠迟发型变态反应,但对小鼠胸腺指数和脾脏指数无明显影响。结论人工蛹虫草子实体的微粉具有免疫调节作用。     

冬虫夏草多糖脂质体口服液的质量标准

目的确定冬虫夏草多糖脂质体口服液质量标准。方法用蒽酮 硫酸比色法测定冬虫夏草多糖浓度;用透析法测定其包封率。结果平均加样回收率为98 73% ,RSD为1 4 8% ;冬虫夏草多糖浓度为6 4 4 8×10 -2 mol·L-1,包封率为31 77%。结论建立的方法可控制冬虫夏草多糖脂质体口服液的质量     

北冬虫夏草对皮肤细菌感染的体外抗菌活性观察

目的：探索北冬虫夏草（蛹虫草）对皮肤细菌感染的体外抗菌活性。方法：用纸片琼脂扩散法进行体外药敏试验。结果：北冬虫夏草的萃取液（1：10mg／mL）体外药物试验，对25株金黄色葡萄球菌敏感率为88．00％，19株化脓性链球菌敏感率为68．42％，8株绿浓杆菌敏感率为75．00％。结论：北冬虫夏草的萃取液对金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、绿杆菌都有不同程度的抗菌活性，并与其浓度呈线性关系。     

蒙山九州虫草中黄酮类化合物提取、鉴定和含量分析

目的比较蒙山九州虫草不同部位黄酮类化合物的含量及不同提取方法对黄酮类化合物得率的影响,探讨蒙山九州虫草中粗黄酮的最佳提取工艺,并对提取所得黄酮类化合物进行定性和定量分析。方法分别采用乙醇回流法、微波法、超声波法提取蒙山九州虫草中黄酮类化合物,以分光光度法测定总黄酮的含量。结果蒙山九州虫草子座中黄酮含量最高,微波法提取得率最高,最佳提取工艺为:功率为140 W,提取时间为1.5 min,料液比为1∶25,pH 10。结论微波提法具有工艺简单、耗费小、产物纯、提取得率较高等特点,适于实验室条件下使用。