星形细胞瘤中Livin的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的探讨一种新的凋亡抑止蛋白Livin在人脑星形细胞瘤中的表达及其对瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别采用免疫组织化学和原位细胞凋亡检测法检测人脑胶质瘤细胞中Livin、PCNA蛋白的表达和凋亡细胞,结合胶质瘤病理分级分析其相关关系。结果随着人脑胶质瘤WH0病理分级的增高,Livin、PCNA的表达强度明显升高（P〈0.05）,细胞凋亡率也明显升高（P〈0.05）,其中高度恶性组（WHO分级Ⅲ、Ⅳ级）均显著高于低度恶性组（WHO分级I、Ⅱ级）（P〈0.05）;随着Livin表达强度的增高,PCNA表达强度及细胞凋亡率均增高,但PCNA的表达比细胞的凋亡有更明显的增高趋势。结论人脑星形细胞瘤中Livin、PCNA的表达强度和细胞凋亡率异常升高;星形细胞瘤的发生和演变可能与Livin、PCNA及细胞凋亡的综合作用密切相关。     

人脑星形细胞肿瘤组织中凋亡细胞密度和bcl-2基因的表达

目的 :探讨人脑星形细胞肿瘤组织中bcl 2基因表达情况及其与肿瘤细胞凋亡的相关关系。方法 :采用免疫组织化学SABC法和原位末端标记的TUNEL技术分别检测了 6 0例星形细胞肿瘤组织中bcl 2基因的表达和凋亡细胞密度。结果 :6 0例患者的星形细胞肿瘤组织中bcl 2基因表达阳性率为 5 0 % ,不同恶性级别的肿瘤之间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但其表达强度在不同级别肿瘤之间差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,高度恶性肿瘤bcl 2基因表达较强 ;随着星形细胞肿瘤恶性程度的升高 ,凋亡细胞密度呈逐渐降低之趋势 ,其中星形细胞肿瘤组织中凋亡细胞密度显著高于胶质母细胞瘤 (P <0 .0 1) ,并且凋亡细胞密度与bcl 2基因表达强度呈显著负相关 (r=- 0 .992 ,P <0 .0 1)。结论 :星形细胞肿瘤组织中bcl 2基因高度表达可能是细胞凋亡受抑的重要原因 ,bcl 2基因表达上调可能对肿瘤的生长及进一步间变起着关键作用。     

人脑星形细胞肿瘤中细胞凋亡及bcl-2，Bax基因的表达

目的 :探讨人脑星形细胞肿瘤组织中的细胞凋亡 ,以及细胞凋亡与其相关基因bcl 2、Bax表达之间的关系。方法 :采用原位末端标记的TUNEL技术及免疫组织化学S P法对 30例星形细胞肿瘤手术标本进行检测 ,分别观察了肿瘤组织中凋亡细胞密度及bcl 2、Bax基因的表达。结果 :星形细胞肿瘤组织中普遍存在细胞凋亡现象 ,凋亡细胞密度随肿瘤恶性度的升高 ,呈逐渐降低的趋势 (t=2 .77,P <0 .0 1) ;bcl 2、Bax在星形细胞肿瘤组织中表达阳性率分别为 5 0 %和 10 0 % ,其中bcl 2表达强度与凋亡细胞密度呈显著负相关 (r=- 0 .92 2 ,P <0 .0 0 1)。结论 :细胞凋亡受抑在星形细胞肿瘤发生及间变过程中起重要作用 ;bcl 2基因表达对细胞凋亡的发生起抑制作用 ;Bax基因对细胞凋亡的调节可能存在更为复杂的机制。     

可溶性Fas对星形细胞瘤细胞凋亡的抑制作用

目的探讨可溶性Fas(sFas)对Fas系统介导的星形细胞瘤细胞凋亡的作用和与肿瘤分化程度的关系。方法采用双抗体夹心ELISA方法检测65例星形细胞瘤患者及25例对照组术前血清中sFas的表达水平,采用免疫成织化学方法检测其术后病理切片的Fas水平,运用TUNEL技术检测凋亡指数。结果星形细胞瘤患者中Fas的表达率为66.2％;sFas水平为(18.5±7.6)ng/L,显著高于对照组(6.2±2.3)ng/L(P<0.01);星形细胞瘤患者血清中sFas水平与Fas水平呈负相关;星形细胞瘤中sFas与肿瘤病理分级呈正相关;sFas与凋亡指数呈负相关(r=-0.896)。结论sFas可作为判断星形细胞瘤恶性程度的指标之一,sFas可以抑制Fas系统介导的星形细胞瘤细胞凋亡。     

幕上星形细胞瘤细胞凋亡及bcl—2表达的临床意义

目的：探讨幕上星形细胞瘤的细胞凋亡以及凋亡抑制基因（bcl-2）表达的临床意义。方法：对56例幕上星形细胞瘤的病理标本采用免疫组化TUNEL法检测凋亡细胞、SP法检测bcl-2。结果：细胞凋亡指数（AI）随着肿瘤级别的增高而增加,各级别肿瘤间AI的差别均有显著性意义（均P＜0．01）,死亡组与存活组AI的差别有显著性意义（P＜0．01）,AI＞0．5％组与AI＜0．5％组术后1年生存率的差别有显著性意义（P＜0．05）。bcl-2阳性组与阴性组的AI、1年生存率的差别均无显著性意义（均P＞0．05）。结论：AI可以作为提示预后的独立性指标,并对判断幕上星形细胞瘤的生物学行为及肿瘤分级有指导意义;bcl-2在幕上星形细胞瘤凋亡中的作用有待于进一步探讨。     

磁共振弥散成像评价星形细胞瘤细胞密度的价值

目的 :运用磁共振弥散加权成像技术 (MRDWI)评估近似弥散系数 (ADC)在星形细胞瘤的细胞密度和病理分级中的作用。方法 :术前进行MRI和MRDWI检查且经手术病理证实的 3 4例星形细胞瘤患者 ,其中Ⅰ～Ⅱ级 (低级别 ) 2 6例 ,Ⅲ～Ⅳ级 (高级别 ) 8例。在MRI上计算瘤体的ADC值 ,运用AdobePhotoshop 7.0软件分析星形细胞瘤的细胞密度 ,用SPSS 10 .0软件对资料进行处理。结果 :高级别星形细胞瘤的ADC为 ( 7.3 4± 2 .95 )× 10 -4mm2 /s ,低级别星形细胞瘤的ADC ( 13 76± 3 3 1)× 10 -4mm2 /s ,两者之间差异有显著性 (t =4 913 ,P <0 .0 0 1) ;高级别星形细胞瘤的细胞密度为 ( 19 81± 9 73 ) % ,明显大于低级别星形细胞瘤的细胞密度( 4 74± 2 96) % (t =4 3 2 ,P <0 .0 0 3 ) ;星形细胞瘤的ADC值与细胞密度呈显著负相关 (r =-0 5 3 5 ,P =0 .0 0 1)。结论 :星形细胸瘤的细胞密度对磁共振弥散加权成像中的ADC值贡献很大 ;MRDWI对星形细胞瘤的细胞密度的预测和评价很有价值 ;MRDWI磁共振散加权成像具有对星形细胞瘤的良、恶性程度进行预测的潜能     

凋亡抑制蛋白Survivin在脑星形细胞肿瘤中的表达及与p53、bcl-2的相关性研究

目的 :探讨凋亡抑制蛋白 Survivin在人脑星形细胞肿瘤中的表达及其与 p5 3和 bcl- 2蛋白表达的相关性。方法 :应用免疫组织化学 SP法 ,检测 Survivin、p5 3、bcl- 2在 4 5例人脑星形细胞肿瘤中的表达。结果 :4 5例脑星形细胞肿瘤标本中 33例表达 Survivin蛋白 ,阳性率为 73.3% ,并随星形细胞肿瘤的恶性程度而增高 (P<0 .0 5 ) ;其中星形细胞瘤阳性率为 36 .4 % ,间变性星形细胞瘤为 81.2 % ,胶质母细胞瘤为 88.9%。而 p5 3蛋白表达阳性、阴性者中 ,Survivin蛋白表达阳性率分别为 5 8.3% (14 /2 4 )、90 .5 % (19/2 1)。两者比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;bcl- 2蛋白表达阳性、阴性者中 ,Survivin蛋白表达阳性率分别为 76 .5 % (13/17)、71.4 % (2 0 /2 8)。两者比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。Survivin蛋白表达阳性率与脑星形细胞肿瘤中 p5 3蛋白表达密切相关 ,与 bcl- 2蛋白表达无相关性。结论 :(1) Survivin蛋白的表达与脑星形细胞肿瘤的组织学分级相关 ,提示 Survivin蛋白表达与星形细胞肿瘤的恶性进展有关。 (2 ) Survivin蛋白的表达与脑星形细胞瘤中 p5 3蛋白异常表达密切相关。     

幕上星形细胞瘤的细胞凋亡及其与增殖的关系

目的 为揭示幕上星形细胞瘤的细胞凋亡及其增殖的关系。方法 采用ＴＵＮＥＬ法检测肿瘤凋亡细胞、ＨＥ染色检测分裂相肿瘤细胞。结果 肿瘤细胞凋亡指数随着肿瘤的恶性程度的增加而增大;ＡＩ值越大,预后越差;凋亡指数／分裂指数在高与低级别肿瘤间的差别有显著性意义;多因素分析年龄分组、ＡＩ、ＡＩ／ＭＩ、放疗与预后关系密切。结论 ＡＩ是提示幕上星形细胞瘤预后的重要指标,亦是肿瘤分级的重要辅助指标,但多个指标的结合     

人脑星形细胞肿瘤中细胞凋亡及bcl—2,Bax基因的表达

目的：探针人脑星形细胞肿瘤组织中的细胞凋亡，以及细胞凋亡与其相关基因bcl-2、Bax表达之间的关系。方法：采用原位末端标记的TUNEL技术及免疫组织化学S－P法对30例星形细胞肿瘤手术标本进行检测，分别观察了肿瘤组织中凋亡细胞密度及bcl-2、Bax基因的表达。结果：星形细胞肿瘤组织中普遍存在细胞凋亡现象，凋亡细胞密度随肿瘤恶性度的升高，呈逐渐降低的趋势（t=2.77,P＜0.01）；bcl-2、Bax在星形细胞肿瘤组织中表达阳性率分别为50％和100％，其中bcl-2表达强度与凋亡细胞密度呈显著负相关（r=-0.922,P＜0.001）。结论：细胞凋亡受抑在星形细胞肿瘤发生及间变过程中起重要作用；bcl-2基因表达对细胞凋亡的发生起抑制作用；Bax基因对细胞凋亡的调节可能存在更为复杂的机制。     

人脑星形细胞瘤瘤周水肿机制的探讨

目的 探讨人脑星形细胞瘤瘤周水肿产生的机制,指导临床医生对患者病情判断、预后估计和治疗。方法 透射电镜观察星形细胞瘤微血管超微结构改变;免疫组织化学方法检测33例人脑星形细胞瘤血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达,并研究其与肿瘤病理分级和瘤周水肿（peritumoral brain edema,PTBE）的关系。结果 星形细胞瘤微血管超微结构表现为：微血管形态不规则,结构不完整,内皮细胞缺氧退变,毛细血管通透性增强。星形细胞瘤VEGF表达与肿瘤病理分级和PTBE明显相关（P＜0．002和P＜0．02）。结论 人脑星形细胞瘤瘤内微血管超微结构的特征性改变是PTBE产生的形态学基础。星形细胞瘤VEGF表达与肿瘤病理分级和PTBE明显相关。肿瘤细胞分泌VEGF是星形细胞瘤PTBE产生的重要原因。临床上可把PTBE和VEGF表达程度作为参考因素进行星形细胞瘤分级,分期判断和预后估计。     

实验性汞中毒小脑变性的病理观察

目的: 探讨氯化甲基汞(MMC)中毒大鼠小脑变性的病理改变及机制.方法:本研究在大鼠服用MMC 4 mg/(kg·d)所致的亚急性汞中毒模型上,分别在服用MMC后第11、15、18和21天断头,采用组织和免疫病理技术动态观察小脑的病理演变,并采用TUNEL染色观察细胞凋亡改变,同时在电镜下观察了超微结构改变.结果:在服用MMC第18天,TUNEL染色显示小脑颗粒细胞有散在的凋亡细胞,主要位于脑回深部近白质区的颗粒层.第21天,凋亡细胞明显增加,颗粒细胞减少.MRF-1染色可见大量的小胶质细胞反应,GFAP示胶质细胞增生明显,而Purkinje细胞则保留完整.服用MMC第18天的超微结构观察表明,细胞核皱缩,体积缩小,形态不规则,电子密度增高,可见密集深染的染色质,部分细胞核破碎,呈现为均一深染的泪珠状染色质,符合凋亡改变.结论:本研究结果表明汞中毒的小脑变性的病理机制为细胞凋亡,其病理变化符合人类汞中毒表现.     

β-榄香烯对兔VX2肾移植癌的放射增敏作用

目的观察β-榄香烯对兔VX2肾移植癌的放射增敏作用。方法建立兔VX2肾移植癌模型。将动物随机分为空白对照组、放疗组和放射增敏组(放射治疗结合β-榄香烯乳剂肾动脉灌注治疗)。予以各组相应干预措施后,采用螺旋CT及B超动态监测肿瘤体积的变化,比较各组肿瘤生长延缓时间,计算β-榄香烯乳剂的放射增敏比(sensitizationenhancementratio,SER)。同时,观察各组肿瘤组织的病理学改变。采用TdT介导的带生物素dUTP缺口末端标记法检测各组肿瘤细胞凋亡指数。结果采用6MevX线放射治疗(3Gy·Fx-1·d-1×5d)结合β-榄香烯乳剂肾动脉灌注治疗(10mg·kg-1·d-1×5d)的放射增敏组,其肿瘤的放射增敏效应最为显著。放射增敏组肿瘤生长延缓时间明显长于放疗组和空白对照组。β-榄香烯乳剂SER为1.89。透射电镜下放射增敏组肿瘤细胞凋亡较放疗组和空白对照组显著。放射增敏组肿瘤细胞凋亡指数明显高于放疗组和空白对照组。结论低剂量β-榄香烯乳剂对兔VX2肾移植癌具有放射增敏作用,可诱导肿瘤细胞凋亡。     

桂枝茯苓丸诱导荷瘤鼠肿瘤细胞凋亡相关检测

目的 探讨桂枝茯苓丸诱导肿瘤细胞凋亡机制,为桂枝茯苓丸(GFW)开发应用提供实验依据.方法 计算抑瘤率,应用二苯胺法检测各组肿瘤细胞DNA断裂率,透射电镜观察肿瘤细胞超微结构.结果 GFW抑瘤率为38.93%.与模型组比较,GFW组、CY组DNA断裂率升高,差异有统计学意义(P＜0.05).中药组电镜下可见瘤细胞以凋亡变化为主.内膜结构完好,核膜清晰,细胞核固缩,染色质团块状散布核内或边集核膜下,并可见凋亡小体.结论 GFW的抑瘤作用与其诱导肿瘤细胞凋亡有关.     

In vitro study on the morphology of human blood dendritic cells and LPAK cells inducing apoptosis of the hepatoma cell line

Objective To observe in vitro effects and morphological changes of human peripheral blood dendritic cells (DCs) on the ability of lymphokine and phytohaemagglutinin um (PHA) activated killer (LPAK) cells to induce apoptosis of the human hepa toma cell line (BEL-7402, B).Methods Experimental groups were divided into LD group （DCs+L+B）, L gro up （L+B）, D group （DCs+B） and B group. The methods of neutral red u ptake, ordinary light microscopy, electron microscopy, TDT mediated X-dUTP nick end labeling (TUNEL) were used.Results The difference between the D group and the B group was not distinct (P&gt;0.05 ). The difference between the LD group and the L group was distinct, with DCs+ LPAK &gt;LPAK (P&lt;0.01) in cytotoxity. Apoptotic cells were TUNEL positive in light microscopy, and apoptotic nuclei were stained yellow brown and dar k brown, with size and shape varying from cell to cell. Ultrastructural cha nge in apoptotic tumor cells comprised of compaction and condensation of nuclear chromatin, and condensation of cytoplasm and apoptotic bodies. At the sam e time, LPAK cells manifested the characteristics of autophagic apoptosis, and t here were some autophagic bodies in it. Conclusions The combination of human blood DCs and LPAK cells could induce apoptosis of BEL -7402 cells effectively, with some LPAK cells manifesting the characteristics o f autophagic apoptosis.     

兔窦房结组织急性损伤后细胞形态结构改变的动态观察

目的探讨用甲醛湿敷致兔窦房结组织急性损伤后窦房结细胞形态学的动态变化规律.方法将60只日本大耳白兔随机分组,用20%甲醛湿敷窦房结区建立窦房结急性受损术后2 h、1、2、3周及4周(每组10只)实验组模型,对照组与术后2 h组于湿敷后2 h、其余各组分别于相应时间点切取窦房结组织留取标本;观察用TUNEL法检测窦房结细胞凋亡情况.结果光镜下,各实验组均有不同程度的窦房结细胞损伤,主要表现为细胞明显肿胀、粒细胞浸润、细胞坏死及胶原纤维增生等病变.电镜下各实验组细胞超微结构病变亦明显,主要表现在线粒体肿胀及嵴变短、紊乱或断裂甚至消失;内质网则广泛解体、离断;核膜极不规整,核仁裂解,染色质边聚肌丝模糊,片状溶解或坏死.对照组兔窦房结均未见明显的细胞凋亡.实验组兔窦房结均可见不同程度的细胞凋亡,与对照组相比凋亡率均有显著性差异(P＜0.01),但实验组之间凋亡率无统计学意义(P＞0.05).结论用甲醛湿敷法损伤窦房结组织不仅导致窦房结细胞不可逆性损伤,而且可诱发窦房结细胞凋亡.     

FK506促进异体神经匀浆激活的巨噬细胞凋亡的实验研究

目的研究FK506促进外周血来源的异体神经匀浆激活的巨噬细胞的凋亡。方法取1月龄SD幼鼠，腹腔抽取法培养异体神经匀浆激活的巨噬细胞。按不同浓度的FK506分组：A组空白对照组、B组0．25ng／ml、C组0．5ng／ml、D组1．0ng／ml。将4组处理因素分别加入长有巨噬细胞的96孔板中，用MTT法检测巨噬细胞的活力情况．用倒置显微镜和荧光显微镜及透射电镜对巨噬细胞的凋亡进行形态学上的观察与鉴定。流式细胞仪检测巨噬细胞凋亡情况。结果B组和C组均可见异体神经匀浆激活的巨噬细胞的活性减弱及细胞凋亡发生，D组可见巨噬细胞发生坏死性改变。透射电镜和荧光显微镜可观察到巨噬细胞的凋亡前期和凋亡小体出现。流式细胞仪检测B和C组凋亡率为24．6％和26．5％，均高于对照组，D组发生坏死。结论FK506可以在早期促进异体神经匀浆激活的巨噬细胞的凋亡．从而减少或抑制周围神经异体移植后巨噬细胞所介导的免疫排斥反应。     

超声辐射微泡治疗小鼠皮下H22肝癌移植瘤的疗效

目的：研究超声辐射微泡对小鼠皮下H22肝癌移植瘤的治疗作用。方法：建立小鼠H22肝癌腹水瘤皮下移植瘤模型，随机分对照组、单纯超声治疗组和超声微泡组。观察肿瘤生长情况，计算瘤重，对治疗后肿瘤组织进行病理学检查，了解肿瘤细胞坏死和凋亡情况，并进行定量分析。结果：相对于对照组，超声微泡组肿瘤生长延缓，肿瘤坏死面积显著增加，凋亡肿瘤细胞数明显增多（P〈0．05）。结论：超声辐射微泡可显著抑制H22肝癌移植瘤的生长，除杀灭肿瘤细胞外，还可诱导瘤细胞凋亡。     

姜黄素诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡以及对c-myc、caspase-3表达的影响

目的 探讨姜黄素诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡及其对C-myc、Caspase-3表达的影响。方法 姜黄素处理A375细胞，MTT法检测细胞的牛长活性，应用倒置显微镜和透射电镜进行形态学观察．采用Annexin V／PI双染法和DAN片段化分析检测细胞凋亡，SABC免疫组化法和原位杂交检测细胞内c-myc、Caspase-3表达水平：结果姜黄素能抑制A375细胞增殖，并呈剂量和时间依赖性：经30μmol／L姜黄素处理A375细胞48h，细胞旱现凋亡形态学改变。DAN片段化分析可见到明显的DNA梯带形成；流式细胞仪定量检测出20μmol／L以上浓度姜黄素诱导细胞凋亡的发生率较对照组有显著性差异。c-myc表达水平减少，而Caspase-3表达增加。结论 姜黄素能抑制A375细胞增殖和诱导其凋亡，c-myc和Caspase一3基因可能参与凋亡过程。     

新辅助化疗诱导大肠癌凋亡caspase—3活性的研究

OBJECTIVES: To study the change of caspase-3 activity on the neoadjuvant chemotherapy-induced apoptosis by hydroxycamptothecin (HCPT) with 5-fluorouracil (5-Fu)/leucovorin (CF) in large-intestinal carcinoma, and to explore its mechanism. METHODS: HCPT 100 mg/dt-5, 5-Fu 500 mg/dt-5 and CF 200 mg/dt-5 were administered intravenously to 20 pre-operation patients. Samples were obtained during the operation. The changes of apoptotic cells and caspase-3 activity in large-intestinal carcinoma were evaluated with the optical microscopy and the colorimeteric assay respectively and were compared with non-chemotherapy group and normal intestinal tissue group. RESULTS: 1. The obvious cell apoptotic change could be observed under the optical microscopy in the neo-adjuvant chemotherapy group; 2. The level of caspase-3 activity was significantly higher in the neo-adjuvant chemotherapy group than in the non-chemotherapy and normal intestinal tissue group(P < 0.05); 3. The change of caspase-3 activity was closely correlated with the tumor differentiation and Dukes stage after the induction of pre-operative chemotherapy. CONCLUSION: HCPT combined with 5-Fu/CF may induce the apoptosis of large-intestinal carcinoma cells and caspase-3 takes part in the apoptotic process. The change of caspase-3 activity was closely correlated with the degree of the tumor differentiation and Dukes stage.