小鼠胸腺上皮细胞株MTECB与胸腺细胞结合的形态学观察

用本室建立的小鼠胸腺上皮细胞株ＭＴＥＣＢ，分别在１．无钙镁Ｈａｎｋ液中（４℃）；２．无钙镁Ｈａｎｋ液中（３７℃）；３．含钙镁Ｈａｎｋ液中（４℃）下；４．含钙镁Ｈａｎｋ液中（３７℃）与胸腺细胞共育（基质细胞：胸腺细胞＝１：１０），光镜和扫描电镜下观察它们之间的结合特点。发现在各种实验条件下，９０％的ＭＴＥＣＢ能与胸腺细胞结合，这种结合从形态上分为两种形式，其一为胸腺细胞均匀结合于ＭＴＥＣＢ周围，呈花     

胚胎胸腺细胞在体外胚胎胸腺器官培养中的发育研究

体外可调控的Ｔ细胞培养系统的建立 ,为研究Ｔ细胞发育及Ｔ细胞和基质细胞的作用提供了很好的实验模型 ,如胸腺或基质细胞的分离培养和胚胎胸腺器官培养 (ＦＴＯＣ) 〔1〕。近年来研究表明 ,长期体外培养的胸腺基质细胞 ,由于表型的变化如ＭＨＣⅡ类分子丢失 ,而失去了支持Ｔ细胞发育的能力 ,其应用受到限制。而ＦＴＯＣ保持了体内胸腺的三维空间结构、恒定的细胞表型、适宜的细胞 细胞间的相互作用、基质细胞分泌的多种细胞因子 ,为研究Ｔ细胞的发育提供了更符合生理的胸腺微环境。研究表明 ,ＦＴＯＣ是目前唯一的能支持前体Ｔ细胞完成整…     

163体外培养的人胸原上皮细胞与胸腺细胞的相互作用

人胸腺上皮细胞（ＴＥＣ）的体外培养和传代。使研究人ＴＥＣ的特性和功能成为可能。人ＴＥＣ体外培养成功的关键是抑制成纤维细胞的生长。体外培养的ＴＥＣ除表达角蛋外，还表达ＨＬＡ－Ｉ类抗原，ＬＦＡ－３，ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４０等表面抗原；可分泌ＩＬ－１，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＧＭ＿ＣＳＦ，Ｇ＿ＣＳＦ和Ｍ＿ＣＳＦ等多种细胞因子和胸腺素；静息的胸腺细胞与ＴＥＣ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３介导，激活的胸腺细胞与ＴＥＣ     

胸腺细胞对胸腺上皮细胞分泌IL—6的促进作用

为分析胸腺细胞对胸腺基质细胞功能的调节作用，将胸腺细胞与小鼠胸腺上皮细胞系（ＭＴＥＣ１）共育，分析胸腺细胞对ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６的影响。结果表明，胸腺细胞能明显促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其促进程度与两种细胞的数量及共育时间有关。胸腺细胞（４×１０＾６／孔）与ＭＴＥＣ１（１×１０＾５／孔）共育４８小时，ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６达高峰。去除胸腺细胞后９６小时，ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６的量仍比单独培养的     

ICAM-1抗体诱导小鼠胸腺上皮细胞分泌IL-6

目的研究胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体对胸腺上皮细胞分泌ＩＬ－６的作用。方法用促ＩＬ－６依赖株增殖法检测ＩＬ－６活性，用原位杂交法检测ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达。结果不同的胸腺细胞亚群均能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，而且作用无明显差异。ＩＣＡＭ－１抗体能够促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其促进作用呈剂量依赖关系。放线菌酮预处理ＭＴＥＣ１以后，ＩＣＡＭ－１抗体和胸腺细胞均不再能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６。原位杂交证实，经胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体活化后，ＭＴＥＣ１表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ明显增多，并且表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ的ＭＴＥＣ１数量也增多。提示胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体能促进ＭＴＥＣ１合成新的蛋白和ｍＲ－ＮＡ。结论胸腺微环境内，胸腺细胞可以通过粘附分子与胸腺上皮细胞相互作用，并可促进胸腺上皮细胞分泌ＩＬ－６。     

胸腺细胞分化发育的凋亡调控

胸腺细胞在胸腺内的发育过程经历了TCR基因重排与表达、阳性选择和阴性选择三个主要过程。凋亡,又称程序性细胞死亡,在胸腺细胞发育过程贯穿始终,因此研究胸腺内T细胞发育过程中的凋亡对揭示胸腺选择作用和中枢耐受形成机制有重要意义。本文就胸腺细胞在胸腺内发育过程中凋亡的发生及其调控作一综述。     

胸腺上皮细胞的发育分化及其分子调控

T细胞在胸腺中发育成熟依赖特殊的微环境,而胸腺上皮细胞(TECs)是微环境中最重要的成分之一.TECs主要分为皮质上皮细胞(cTECs)和髓质上皮细胞(mTECs),分别介导胸腺细胞的阳性选择和阴性选择过程.cTECs和mTECs来源于共同的胸腺上皮干细胞(TEPCs),经过一系列发育过程,最终分化为功能及表型成熟的TECs.TECs发育分化过程除受到自身内在基因如转录因子Foxn1和Aire的调控以外,还需要与间质细胞、胸腺细胞相互作用,接受外源信号如TNFR家族成员RANK、CD40和LTβR信号的调节,这些信号尤其对mTECs的发育至关重要.而成纤维细胞生长因子(FGFs)和Wnt通路则对TECs的扩增和功能维持非常重要.本文综述了TECs发育分化过程以及参与调控该过程的信号分子通路.     

胸腺上皮细胞的起源与分化

胸腺提供复杂的微环境来调节T细胞的存活、分化、选择和迁移,是T细胞发育、分化和成熟的场所也是自身免疫耐受的中心。胸腺上皮细胞包括胸腺皮质上皮细胞和髓质上皮细胞,其来源于内胚层,并由胸腺上皮祖细胞分化而来。胸腺上皮细胞的分化空间结构的建立有赖于转录因子和信号通路分子在胸腺上皮细胞不同时段复杂的分子调控。胸腺上皮细胞成熟过程也是胸腺上皮细胞一系列特异性表面标记分子的变化过程,对胸腺上皮细胞特异标记分子的研究是分析胸腺上皮细胞复杂分化过程的重要工具。本文重点探讨胸腺上皮细胞起源发展模型及分化过程中分子调控作用,以期更好的理解胸腺上皮细胞如何成为能够支持T细胞分化的特异哺育者。     

小鼠胸腺上皮细胞株 MTEC_1选择性促进 CD_4~ CD_8~-成熟胸腺细胞的增殖

小鼠胸腺上皮细胞株 MTEC_1细胞与考的松耐受胸腺细胞(CRT)共同培养,在无任何外源刺激剂条件下,MTEC_1细胞可维持 CRT 存活,促进 CRT 增殖,双荧光抗体染色 FACS 分析证明,MTEC_1细胞选择性地支持 CD_4~ CD_8~-细胞增殖。在 Con A 活化条件下,MTEC_1细胞仍以促进 CD_4~ CD_8~-细胞增殖为主.MTEC_1细胞培养上清液(MTEC_1—SN)不能直接促进 CRT 增殖,但可维持其存活;在 Con A 活化条件下,则可促进 CRT 增殖。表型分析发现,MTEC_1—SN 对 CD_4~ CD_8~-和 CD_4~-CD_8~ 细胞的存活和增殖无明显选择作用。说明 MTEC_1细胞对 CD_4~ CD_8~-细胞的选择作用是两种细胞直接作用的结果.     

两种小鼠胸腺基质细胞对胸腺细胞凋亡的不同作用

采用两种体外建系的小鼠胸腺基质细胞（ＴＳＣ）系，即上皮样ＴＳＣ（ＭＴＥＣ１）和树突状ＴＳＣ（ＭＴＳＣ４），观察其对胸腺细胞凋亡的影响。小鼠胸腺细胞在体外培养过程中，可自发地出现细胞凋亡的特征，表现为ＤＮＡ呈梯度断裂片段，细胞经ＦＡＣＳ分析出现亚二倍体ＤＮＡ波峰，以及Ｆｅｕｌｇｅｎ′ｓ染色镜检所见的ＤＮＡ凝聚和断裂。胸腺细胞在与ＴＳＣ共育后，在ＭＴＥＣ１组可见其凋亡过程受到抑制和存活率的增加；在ＭＴＳＣ４组，仅在共育１２至１８小时时，见到胸腺细胞凋亡加强，而其存活率不受影响。结果提示在胸腺细胞发育过程中，其阴性选择作用的主要机制之一的ＰＣＤ过程受不同来源的胸腺基质细胞的调节。     

α1胸腺肽对胸腺细胞发育和成熟的影响

目的:探讨α₁胸腺肽对胸腺细胞发育的影响。方法:测定CD4⁺CD8⁺胸腺细胞群的比例及 5-FU和胸腺肽处理组在CD4^-CD8^-胸腺细胞群上Hh信号的Smo分子(增生反应的潜在阴性调节者)的表达效果来估价胸腺肽对胸腺细胞成熟和发育的影响。结果:发现α₁胸腺肽在30μg/kg的低剂量下显示活性。流式细胞仪分析根据CD4^-CD8^-胸腺细胞上Hh信号的Smo分子的表达确定α₁胸腺肽在此剂量加快了胸腺细胞的成熟。结论:α₁胸腺肽能加快CD4^-CD8^-胸腺细胞向CD4⁺ CD8⁺阶段的发展。     

胸腺细胞对胸腺止皮细胞分泌IL-6的促进作用

为分析胸腺细胞对胸腺基质细胞功能的调节作用，将胸腺细胞与小鼠胸腺上皮细胞系（ＭＴＥＣ１）共育，分析胸腺细胞对ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６的影响。结果表明，胸腺细胞能明显促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其促进程度与两种细胞的数量及共育时间有关。胸腺细胞（４×１０~６／孔）与ＭＴＥＣ１（１×１０~５／孔）共育４８小时，ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６达高峰。去除胸腺细胞后９６小时，ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６的量仍比单独培养的ＭＴＥＣＩ多１．７倍。经丝裂霉素Ｃ处理的胞腺细胞仍能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其作用程度与末经处理的胸腺细胞相似。而胸腺细胞培养上清及裂解液则不影响ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，从而证实胸腺细胞能促进ＭＴＥＣＩ分泌ＩＬ－６，其作用机制可能与细胞-细胞直接相互作用有关。     

胸腺细胞对胸腺上皮细胞增殖的影响

为了分析胸腺细胞在胸腺上皮细胞发育中的作用，本文作者在体外分析了胸腺细胞对小鼠胸腺上皮细胞系（ＭＴＥＣ１）增殖的作用。结果表明，不同的胸腺细胞亚群以及胸腺细胞裂解液均能促进ＭＴＥＣ１增殖，考的松耐受性胸腺细胞和ＣＤ３－４－８－细胞具有同样的促进ＭＴＥＣ１增殖的作用，其促进程度与两种细胞的数量有关，胸腺细胞和ＭＴＥＣ１为２０１或４０１时，其促进作用最强。胸腺细胞裂解液在高浓度（１２稀释）时，能促进ＭＴＥＣ１增殖，在低浓度时则不影响ＭＴＥＣ１的增殖。本实验提示，胸腺细胞可以通过细胞－细胞相互作用以及分泌细胞因子影响ＭＴＥＣ１的增殖。     

用单克隆抗体显示小鼠胚胸腺上皮细胞的分化

以小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体ＭＴＳ６、５、２０、３３，用免疫酶法观察了小鼠胚（１２～１９ｄ）胸腺上皮细胞的不同亚类和分化。第１２天胚胸腺原基中有少数细胞开始显示ＭＴＳ６弱阳性反应。第１３ｄ胚胸腺皮质中有些胸腺上皮细胞显示ＭＴＳ５阳性。第１５ｄ胸腺皮质和髓质中有些胸腺上皮细胞开始呈ＭＴＳ２０阳性反应。第１７ｄ胚髓质中可见少数胸腺上皮细胞开始呈ＭＴＳ３３阳性反应。第１９ｄ胚ＭＴＳ５、６阳性反应的胸腺上皮细胞分布于皮质和髓质，并相连成网状，ＭＴＳ２０显示出皮质、髓质中一些散在的胸腺上皮细胞呈阳性反应，而ＭＴＳ３３仅在髓质中显示出少数体积较大的胸腺上皮细胞。第１２～１９ｄ胚ＭＴＳ６、５、２０阳性细胞反应逐渐增强，ＭＴＳ３３阳性细胞反应稍有增强。本研究显示，在鼠胚胸腺发育不同阶段，胸腺上皮细胞的不同亚类的分化有所差异，并提示胸腺上皮细胞的早期分化与Ｔ细胞的分化和发育有密切关系。     

性激素对大鼠胸腺上皮细胞分泌胸腺素α1的影响

胸腺产生胸腺素等肽类激素，控制胸腺依赖淋巴细胞的发育并参与免疫调节过程。本实验用原位杂交法和高效液相色谱分析法研究了性激素（雌二醇和双氢睾酮）对培养胸腺上皮细胞（ＴＥＣ）胸腺素α１（ＴＭＡ１）生成的影响。结果如下：（１）ＴＭＡ１－ｍＲＮＡ活性产物成群分布于ＴＥＣ胞浆中；（２）雌二醇浓度大于３×１０－９ｍｏｌ／Ｌ使ＴＭＡ１－ｍＲＮＡ活性细胞数目明显减少；（３）双氢睾酮处理不影响ＴＭＡ１－ｍＲＮＡ活性细胞的数量；（４）雌二醇或双氢睾酮均使ＴＥＣ生成ＴＭＡ１明显减少。结果表明：性激素特别是雌二醇通过影响胸腺素的生成而调节免疫功能。