广州开角型青光眼家系致病基因定位与功能初步研究

目的 鉴定常染色体显性遗传家族性开角型青光眼家系（GZ.1）致病基因并探讨其致病机制。方法 应用全基因组扫描、连锁分析、核苷酸直接测序法筛查GZ.1家系的致病性基因突变,进一步利用体外基因转染技术,观察突变型基因在小梁细胞中的表达、分布及对细胞凋亡的作用。结果 GZ.1家系所有患者均存在myocilin基因第三外显子Pro370Leu杂合突变（16／16）,而家系正常人中均未检测到该突变（0／8）。小梁细胞体外转染野生型和突变型myocilin基因后,经免疫印迹法检测证实,培养上清液中突变型myocilin蛋白的细胞外分泌较野生型明显减少;荧光免疫组化检测结果证实野生型myocilin蛋白在小梁细胞内呈点状、弥漫分布;而Pro370Leu突变型myocilin蛋白以积聚体形式存在于胞质内;经流式细胞仪检测突变型转染组凋亡细胞百分比较野生型转染组及对照组轻度升高。结论 突变型（Pro370Leu）myocilin基因为GZ.1家系的致病基因,突变型（Pro370Leu）myocilin蛋白在小梁细胞内以积聚体形式存在,可能是由于蛋白质错误折叠所致,并可能诱导小梁细胞凋亡。     

Myocilin基因Gln368STOP位点突变与原发性开角型青光眼相关性的Meta分析

目的研究Myocilin（MYOC）基因Gln368STOP位点突变与原发性开角型青光眼（POAG）的相关性。方法以POAG患者和对照组基因型分布的优势比（OR）为统计量。电子检索和手工检索相关文献,剔除不符合要求的文献,应用RevMan 4．2软件对各纳入研究结果进行异质性检验,采用相应数学模型进行数据合并,并评价发表偏倚的影响。结果共检索到符合要求的文献11篇,均为病例-对照研究,POAG患者共3077例,对照组共2063例,数据合并结果显示POAG组与对照组发生Gln368STOP位点突变的OR值（95％C1）为6．01（2．57～14．04,P〈0．01）。结论MYOC基因Gln368STOP位点突变与POAG患病风险增加相关,是POAG发病的危险因素之一。     

原发性开角型青光眼MYOC- TIGR基因突变研究

目的 筛选并研究原发性开角型青光眼(POAG)小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白MYOC- TIGR基因突变情况。方法 病例对照研究。抽取2002年1至12月就诊并诊断为POAG患者118例和150例非POAG对照者的外周静脉血4～8ml,采用酚-氯仿抽提全基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增全基因组DNA,以单核苷酸构象多态性(SSCP)分析MYOC基因的3个外显子（7对引物）编码区域序列改变。对SSCP分析异常者,采用双向测序法进一步证实。应用Cfr13I、Hinfl及BsmA1等限制性内切酶检测对照者MYOC基因编码区序列改变。POAG与非POAG人群MYOC基因各位点突变率比较采用x2检验。结果 基因序列分析发现G12R、I288M及Y353I共3个基因序列改变。118例POAG患者中仅有5例(4.23％)发生G12R位点突变,150例对照者中未见G12R位点改变;两组G12R位点突变率比较差异有统计学意义(x2=4.37,P=0.037)。POAG组和对照组均有I288M和Y353I位点改变,但两组突变率比较差异无统计学意义(x2=0.07,P=0.791和x2=0.56,P=0.453)。POAG患者基因突变率4.23％。结论 MYOC基因突变可能与POAG发病有关,MYOC基因突变可能是POAG发病的分子机制之一。     

我国东北地区两家系原发性开角型青光眼的OPTN基因新突变研究

目的 研究我国东北地区两家系原发性开角型青光眼(POAG)的致病基因并确定其基因突变位点.方法 病例对照实验.对两家系POAG患者进行临床研究和系谱分析.采集L家系6例患者和6例健康成员与C家系4例患者和4例健康成员的静脉血,提取基因组DNA.通过连锁分析,确定致病基因的染色体位点后,应用聚合酶链反应(PCR)扩增OPTN基因外显子,直接测序确定致病的基因突变位点.结果 L家系POAG患者的OPTN基因第10外显子发生错义突变,1274 位点AAA变为GAA,对应的赖氨酸替换为谷氨酸(Lys322Glu).L家系中健康成员、C家系全部成员及87名正常人均未发现该位点突变.结论 OPTN基因新突变(Lys322Glu)是L家系POAG的致病基因.     

一个X-连锁隐性遗传视网膜色素变性家系的RPGR基因新突变

目的 研究X-连锁隐性遗传视网膜色素变性(RP)家系RPGR基因突变男性患者和女性携带者的临床表型.方法 家系调查研究.收集RP先证者及其家系资料,完善眼科检查,抽取现存77名家系成员和80名正常对照者外周静脉血,提取DNA,进行聚合酶链反应(PCR),扩增RPGR基因外显子ORF15,扩增产物纯化后直接测序.结果 RP家系中,8例RP患者均为男性,呈隔代传递,不存在男性至男性的传递,患者的母亲及女儿都是致病基因携带者而不发病,符合X-连锁隐性遗传方式.在8例男性RP患者和14例女性致病基因携带者的RPGR基因外显子ORF15+577_578位点发现一个AG缺失突变,引起阅读框架的改变,该基因缺失突变在家系中共分离.AG缺失突变导致男性患者典型的RP改变,但发病时间和进展程度不一.携带有杂合型基因突变的14例女性携带者最具特征性的临床表型是中高度近视眼(-5.00～-22.00 D).结论 该RP家系患者由RPGR 基因外显子ORF15移码突变致g.ORF15+577_578delAG位点缺失.RPGR基因外显子ORF15的新突变可导致男性患者严重的RP表型,但女性致病基因携带者仅表现为中高度近视眼.(中华眼科杂志,2011,47:516-520)

Abstract：

Objective To screen the mutation in the RPGR gene in a large Chinese family with X-linked recessive retinitis pigmentosa (RP) and to describe the phenotype in affected males and female carriers. Methods Ophthalmic examinations were performed in 77 family members of a RP pedigree to identify affected individuals. Polymerase chain reaction (PCR) and direct sequencing were used for screening of mutations in RPGR gene exon ORF15. Results Mutation screening demonstrated a novel mutation, g.ORF15+577_ 578delAG, which caused an open reading frameshift and resulted in premature truncation of the RPGR protein. This mutation was detected in 8 affected male individuals and 14 obligate female carriers in this family and was found to segregate with the phenotype in this family. This mutation led to a severe RP phenotype in male affected individuals with some variability in the age of onset of night blindness and loss of visual acuity, but was recessive in female carriers without a RP phenotype. However the most striking phenotypic feature in female carriers in this pedigree was moderate to high myopia with refractive error ranging from -5.00 D to -22.00 D in 14 female carriers. Conclusions This novel mutation in RPGR ORF15 causes serious RP phenotype in males and no RP phenotype in female carriers. Moderate to high myopia was a particular feature for female carriers in this pedigree. Our finding expands the spectrum of RPGR mutations causing RP and phenotypic spectrum of the disease in Chinese family, which is useful for further genetic consultation and genetic diagnosis.     

原发性开角型青光眼相关致病基因研究

原发性开角型青光眼（POAG）的分子遗传学研究是当前的研究热点之一。近十年来，一些POAG的致病基因相继定位于相应的染色体上，并进行基因的克隆、测序、表达、调控及突变分析。本文重点对POAG相关致病基因MYOC、OPTN、WDR36以及与它有关的CYP1B1基因的发现、结构、表达、突变以及在POAG发病中可能的作用进行综述。     

一个X连锁遗传的先天性眼球震颤家系基因突变研究

目的 探讨一个X连锁遗传先天性特发性眼球震颤家系的致病基因.方法 为回顾性研究.通过询问病史、临床检查确定遗传表型;进行系谱分析确定遗传方式;通过连锁分析进行致病基因定位;通过基因序列分析发现致病基因突变.结果 经连锁分析,将致病基因定位于Xq25-Xq27 上微卫星位点DXS8044阳DXS1227之间;基因序列分析发现FRMD7基因第8外显子存在两个碱基的缺失.结论 FRMD7基因突变是导致该家系出现疾病的主要原因.     

原发性开角型青光眼的相关致病基因

原发性开角型青光眼是一种主要与病理性高眼压有关,威胁和损害视神经视觉功能的临床眼病.其发病机制至今尚未完全阐明.自人类基因组计划实施以来,许多学者对原发性开角型青光眼的致病基因进行了大量的深入研究.此文从分子结构,基因表达以及突变和突变在发病过程中可能所起的作用等方面,对原发性开角型青光眼的相关致病基因MYOC、OPIN、WDR36、CYP1B1进行综述.     

先天性无虹膜症一家系PAX6基因Q310X突变的致病研究

目的 探讨先天性无虹膜症一家系的致病基因突变情况与发病机制.方法 采用病例对照研究方法.对该家系所有成员21人进行全面的眼科检查,同时进行家系调查并采集外周血样本,分离单个核细胞;用基因组DNA纯化试剂盒提取基因组DNA,以先证者DNA为模板聚合酶链反应法扩增转录因子PAX6基因全部14个外显子,用双脱氧末端终止法进行测序分析.结果 测序结果发现先证者Ⅲ2的PAX6基因在第11外显子上有Q310X(c.1378C>T)无义突变.它导致了第301位氨基酸密码子由CAA改变为TAX(Q301X),编码的谷氨酰胺突变为强终止密码子.对该家系中所有21名成员PAX6基因测序,结果发现所有10例患者都携带这一突变,而11名正常人则未检测到这一改变.结论 PAX6基因Q310X的无义突变所致PAX6蛋白翻译提前终止是此先天性无虹膜症家系的致病原因.     

重庆地区开角型青光眼患者及其亲属和正常人群中小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白基因突变的研究

目的 研究开角型青光眼患者及其亲属和正常人群中小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白(TIGR)基因突变的情况。方法 (1)应用聚合酶链反应(PCR)方法,对15例开角型青光眼患者及其10例一级亲属和20例正常对照者的TIGR基因的3个外显子、部分内含子及部分启动子(7对引物)的各个片段进行扩增,应用单链空间构象多态(SSCP)分析法,筛选可能存在突变的PCR产物。(2)将筛选出的PCR产物交上海基康公司测序。(3)对突变片段行生物信息学分析。结果 (1)在重庆地区15例原发性开角型青光眼患者中,共发现TGR基因突变者5例,其中青少年型青光眼4例;在10例青光眼患者亲属中发现TIGR基因突变者2例;正常对照者20例中未发现TIGR基因突变。(2)PCR产物测序共发现4个序列改变,其中编码区2个,非编码区2个。编码区的2个突变位点(Ser55Thl、Asp247Stop)及第二内含子区bp35c→t的突变,均未见文献报道;而在启动子区域bp-83c→t的突变有文献报道为1个多态位点。(3)生物信息学分析结果显示编码区的突变可导致氨基酸序列、蛋白质的二级结构及等电点、抗原结合位点等发生改变。结论 TIGR基因突变与青少年开角型青光眼的发生密切相关,由此可推测青光眼患者的亲属发病率较正常人高。TIGR基因突变可引起TIGR蛋白结构及理化特性的变化,这些改变可能是引发开角型青光眼的危险因素之一。     

正常眼压型青光眼与高眼压型原发性开角型青光眼是否为同一类型疾病

基于临床考虑,在《我国原发性青光眼诊断和治疗专家共识》中,将正常眼压型青光眼与高眼压型原发性开角型青光眼同归类为原发性开角型青光眼,归属于一类疾病的两个亚型,分界点在于眼压是在正常范围还是高于21 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。但是正常眼压型青光眼与高眼压型原发性开角型青光眼是否应属同一类型疾病,眼...     

原发性开角型青光眼进展的危险因素研究概况

原发性开角型青光眼(POAG)进展的危险因素包括全身性及眼部因素,眼部因素包括眼压及非眼压因素.在以往的多中心研究中,眼压对于由高眼压症发展为POAG及其在POAG进展中的作用已经明确,而目前降低眼压也是临床惟一有效地延缓、控制青光眼视神经损害进展的主要因素.制定目标眼压,进行降眼压治疗尤其是控制昼夜眼压波动对于阻止青光眼进展非常重要.非眼压危险因素包括高龄、中央角膜厚度增厚、视乳头出血、晶状体囊膜剥脱征、初始的青光眼严重程度及双眼罹患青光眼等.其他因素包括近视、青光眼家族史、眼部低灌注压、低血压、心血管疾病、高血压、高血脂等血管或血液性因素.POAG进展的危险因素研究在一定程度上揭示了POAG的发病机制及临床发病规律,对于指导临床医师决定随诊频率、选择治疗方案及提高治疗效率意义重大.