丙型肝炎实验室诊断技术研究进展

丙型肝炎是一种由HCV感染引起的主要经血液传播的疾病,部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞肝癌（HCC）,目前尚无有效疫苗,亦无有效治愈方法,故早期、准确诊断HCV感染状况有重要意义.现将丙型肝炎实验室诊断技术的研究进展综述如下.     

临床实验室诊断丙型肝炎病毒感染的策略

临床实验室诊断HCV感染是以ELISA法检测血清中抗-HCV为依据的。在献血员中进行常规抗-HCV检测,以除外潜在感染者,避免输血后HCV感染的发生。另外,应在肠道外病毒感染或临床症状与HCV感染相关的病人中,常规进行抗-HCV检测。第一代抗-HCVELISA法敏感度低,抗体检出时间晚,并有非     

丙型肝炎的诊断和鉴别诊断

HCV感染是一种主要经血液传播的全球性疾病,全球约有1.23亿人感染丙型肝炎病毒,我国一般人群抗-HCV阳性率为3.2%.大部分丙型肝炎患者发现时就已经慢性化,而慢性丙型肝炎临床表现多样,除了有肝脏病变外,还会有多个肝外系统的损害,慢性丙型肝炎患者20年后发生肝硬化的几率是10%～15%,及时有效的诊断和治疗可以使50%～70%的患者治愈[1,2].因此本文将对丙型肝炎的诊断及鉴别诊断做一综述.     

丙型肝炎的病毒学、实验室诊断及流行病学研究现状

自1989年美国Choo等应用分子克隆技术获得丙型肝炎病毒(HCV)基因克隆,并建立抗HCV实验室检测方法以来,各国对丙型肝炎进行大量研究。本文就HCV的病毒学、实验室诊断及流行病学的研究现状综述如下。     

丙型肝炎和丙型肝炎相关肝细胞癌AFP和ALP的水平及其临床意义…

本文检测了８０例丙型肝炎（ＨＣ）和３０例丙型肝炎相关肝细胞（ＨＣＲＨＣＣ）的甲胎蛋白（ＡＦＰ）和碱性磷酸酶（ＡＬＰ）水平。ＡＦＰ的水平在慢性迁延性丙型肝炎、中型慢性活动性丙型肝炎、重型慢性活动性丙型肝炎、丙型肝炎后肝硬化和ＨＣＲＨＣＣ各组之间存在差异。ＡＦＰ和ＡＬＰ在不同分化和 ＨＣＲＨＣＣ中的差异无显著性。结果提示，ＡＦＰ不仅可作为协助ＨＣＲＨＣＣ诊断的指标，而且，根据临床资料推测ＨＣ的病理分型     

丙型肝炎的诊断

全球有超过1.7亿人感染丙型肝炎病毒(HCV),对高危人群的筛查有利于患者的早期诊断和疾病的预防.以临床表现结合抗HCV抗体和HCV RNA检测等作出HCV感染的临床诊断,肝组织病理学检查对急慢性丙型肝炎的诊断、病情判断和治疗疗效的评估有重要的价值.     

丙型肝炎和丙型肝炎相关肝细胞癌AFP和ALP的水平及其临床意义的研究

本文检测了80例丙型肝炎(HC)和30例丙型肝炎相关肝细胞癌(HCRHCC)的甲胎蛋白(AFP)和碱性磷酸酶(ALP)水平。AFP的水平在慢性迁延性丙型肝炎、中型慢性活动性丙型肝炎、重型慢性活动性丙型肝炎、丙型肝炎后肝硬化和HCRHCC各组之间存在差异。AFP和ALP在不同分化程度的HCRHCC中的差异无显著性。结果提示,AFP不仅可作为协助HCRHCC诊断的指标,而且,根据临床资料推测HC的病理分型,AFP的水平可作为一项比较灵敏的参考指标。未发现AFP和ALP的水平能反映HCRHCC的分化程度。     

确定实验室指标的临床意义与诊断试验

无数的实验室指标 (如各种因子、抗体、血清标记物等 ) ,均与风湿性疾病有关系。你测了某因子与类风湿关节炎有关 ,我就测它与红斑狼疮有关 ,如果各种风湿病都测完了 ,那么肺结核、肝炎、消化道出血也行。不论测哪个因子 ,也不论是哪个疾病 ,这类论文几乎是千篇一律的结果 ,病例组比对照组高 ,活动期比稳定期高 ,Ｐ <0 0 5 ,有统计学意义 ,有些再加个相关分析 ,示其浓度或表达程度与疾病活动度呈正相关关系。由于“掺”了实验室的内容 ,这类论文倍受期刊的青睐 ,却不被临床医生所喜欢。因为Ｐ <0 0 5 ,并不代表这个实验室指标具有临床应用…     

慢性丙型肝炎诊断和治疗现状

慢性丙型肝炎诊断和治疗现状陈士葆第二军医大学长征医院消化内科２００００３ＳｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｈｅｐａｔｉｔｉｓＣ／ｄｉａｇｎｏｓｉｓ；ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣ／ｔｈｅｒａｐｙ；ｇｅｎｏｍｅ，ｖｉｒａｌ主题词肝炎，丙型／诊断；肝炎，丙型／治...     

丙型肝炎基因分型进展及其临床意义

随着乙型肝炎疫苗措施及治疗的发展, 丙型肝炎在慢性肝炎中的比例日益增加. 丙型肝炎慢性化率高, 肝硬化、肝癌发生率高. 由于丙型肝炎病毒的高度变异, 且丙型肝炎基因分型的研究报道提示其与传播途径、地域分布、临床分布、疾病进展转归有一定的关系, 故本文从以上几方面对丙型肝炎基因分型进展与临床意义作一综述.     

丙型肝炎病毒基因型分型及临床意义

全世界约有1.7亿人受到丙型肝炎病毒(HCV)感染,我国HCV感染率为3.2%,感染者约3 800万.HCV基因分型与病程发展和治疗应答有一定相关性,例行检测有助于对特定的感染做出判断和有效的临床干预.     

乙型肝炎的实验检查及其临床意义

自1965年Blumberg发现HBsAg以来,乙型病毒性肝炎(HBV)在分子病毒学、组织病理学、免疫学、流行病学及临床诊断治疗学等方面已取得了长足的发展,一些问题得到阐明达成了共识,但仍存在许多问题,我国是乙型肝炎的高流行区,全世界的慢性乙型肝炎患者我国占50％以上,而我国的乙型肝炎防治工作存在一些国外不曾有过的问题,这些问题需要我们自己来研究解决,可以说,在乙型肝炎临床与科研过程中充满了艰辛,我国的临床医师及基础科研工作者尽管在治疗中做了大量工作,遗憾的是至今尚未有重大性突破,这使我们喜忧参半、任重而道远。在临床研究中我国与欧美存在较大的差距,除外经济、政治和学风中的一些问题外,主要存在以下一些问题:(1)临床治疗试验不规范,难以严格的按照随机、双盲、对照和多中心原则实施临床科研方案;(2)临床科研与基础实验研究结合不够,重基础研究,轻临床科研;(3)存在多经验,少证据的现象;(4)肝活体组织检查较少,尤其是治疗前、后自身对照的肝活体组织标本甚少;(5)缺乏长期随访资料,医学资料保管不善,丢失现象较为普遍;(6)国内诊断试剂质量不稳定,缺乏统一标准,大多不能通过国际质检要求,实验数据难以得到国际权威性杂志的认可;(7)临床研究及经典流行病学调研难以获得基金资助等。慢性乙型肝炎已成为相关临床医生面临的重要问题,为了更好地解决这些临床问题,我们组织国内部分专家结合个人的临床经验及科研体会,对"慢性乙型病毒性肝炎的诊断与治疗"进行讨论,目的是引导临床医生科学、准确地处理这些问题,同时进一步深入开展慢性乙型肝炎的临床实用性研究,为提高我国慢性乙型肝炎诊治水平做出应有的贡献,造福于人类,这也是本期"焦点论坛"主办者的心愿。     

慢性HCV感染的实验室诊断

HCV是导致急性和慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌的主要原因之一。实验室诊断是确诊HCV感染的必要条件。HCV感染的实验室病原学诊断包括抗原、抗体检测和HCV RNA定量检测。血清HCV RNA定量检测是确定HCV现症感染的唯一实验室指标,在决定治疗时间和治疗方案选择,以及抗病毒疗效评价方面起非常重要的作用。阐述了慢性HCV感染实验室筛查的目标人群、检测方法及临床意义等,以便及时的诊断和有效的治疗慢性HCV感染。     

太原地区丙型肝炎病毒基因分型及其临床意义

目的了解本地区HCV基因型分布,探讨HCV基因分型的临床意义。方法用RT-nested-PCR方法扩增62例丙型肝炎患者血清HCV5’ UTR区,限制性内切酶HaeⅢ、Bsh1236Ⅰ进行双酶切得到不同长度基因片段,分析结果,确定基因型。结果62例丙型肝炎患者中,其中1b型43例,2a型9例,1b/2a混合型5例,1a型1例,3a型1例,未分型3例。基因1b型患者肝功能、肝脏脂肪变性均较非1b型严重。结论本地区丙型肝炎以基因1b型为主,且该型患者临床病情较其它型严重。     

Expression of hepatitis C virus hypervariable region 1 and its clinical significance

AIM, To explore the properties of hypervariable region 1(HVR1) in the envelope 2 gene of hepatitis C virus by analyzing the reactivity of HVR1 fusion proteins from different Chinese HCV strains with sera of patients with chronic hepatitis C and by comparing their reactivity between interferon therapy responders and non-responders.METHODS: Gene fragments of HVR1 of four HCV strains(three genotype 1b and one genotype 2a) were amplified from pGEMT-E2 plasmids and sub-cloned into pQE40 vectors respectively to construct recombinant expression plasmids which expressed HVR1 fused downstream to DHFR in Escherichia coli strain TG1. The purified DHFR-HVR1 proteins were then used to detect the anti-HVR1 antibodies in 70 serum samples of patients with chronic hepatitis C.RESULTS: Four DHFR-HVR1 fusion proteins were successfully expressed in E.coli (320-800ug fusion proteinsper 100ml culture). Each fusion protein (SH1b, BJ1b,SD1b and SD2a) reacted with 72.8% (51/70), 60% (42/70), 48.6% (34/70), and 58.6% (41/70) of the anti-HCV positive patients‘ sera respectively by ELISA. 57.1% (4/7) of non responders reacted with all four HVR1 fusion proteins, while only 15.3% (2/13) of responders reacted with all of them. The O.D. values of sera from IFN therapy responders were significantly higher than those of nonresponders (P&lt;0.05).CONCLUSION: The selected HVR1 fusion proteins expressed in E. coil can broadly react with HCV-infected patients‘ sera. The intensity and/or quality of the immune response against HCV may be a critical factor determining the response to interferon treatment. With the evolution of virus strains, anti-HVR1 antibodies can not neutralize all the quasispecies. A polyvalent and high immunogenic vaccine comprising a mixture of several HVR1 sequences that cover the reactivity of most HCV isolates may be useful.     

Laboratory approaches to the diagnosis of hepatitis C virus infection

Hepatitis C virus (HCV) infection is a major and growing health problem worldwide. Laboratory testing plays an important role in the response to the HCV epidemic. Serologic tests for antibody to HCV are useful for screening purposes. The mainstays of laboratory testing for HCV, however, are the molecular approaches. Qualitative molecular tests are useful for confirmation of positive screening tests. Quantitative molecular tests provide prognostic information regarding the likelihood of response to therapy, and allow the monitoring of treatment efficacy. Similarly, genotyping assays predict response to therapy, and allow rational decisions regarding duration of treatment. The combination of continually improving laboratory testing, together with new drugs targeting distinct molecular determinants that are either essential or important in the viral replication cycle, is likely to lead to dramatic improvements in the management of HCV disease.     

乙型肝炎的自身抗体检测分析及临床意义

目的：检测乙型肝炎自身抗体的阳性率,探讨乙型肝炎自身抗体存在的临床意义。方法：分别采用间接免疫荧光法（IIF）和免疫印迹法（Western-blot）检测453例乙型肝炎、162例自身免疫性肝炎（AIH）和96例正常人抗核抗体（ANA）的阳性率、ANA阳性滴度、核型和抗双链DNA抗体（dsDNA）的阳性率以及肝炎相关自身抗体：抗平滑肌抗体（SMA）、抗肝肾微粒体抗体（LKM）的阳性率。应用酶法检测患者的ALT和AST,实时荧光定量PCR技术检测HBV DNA。结果：①乙肝组ANA的阳性率为22．7％,ANA以低滴度（1：100）为主,仅3例乙肝后肝硬化的滴度为1：320;ANA核型以均质型为主,仅5例为斑点型,显著低于AIH组（P〈0．01）。其中急性乙肝、慢性乙肝、重症乙肝和乙肝后肝硬化ANA的阳性率分别为5．2％、22．8％、24．2％和37．9％,慢性乙肝、重症乙肝和乙肝后肝硬化患者ANA的阳性率显著高于急性乙肝（P〈0．05或P〈0．01）,乙肝后肝硬化组明显高于乙肝炎组（P〈0．05或P〈0．01）。②ANA阳性乙肝患者伴有dsDNA抗体,用Western-blot法检测dsDNA的阳性率为10．34％,显著高于ANA阴性的乙肝患者（P〈0．05）,乙肝组如DNA的阳性率为2．42％与AIH组差异无统计学意义（P〉0．05）。③乙型肝炎存在SMA和LKM,但仅有较低的阳性率分别为4．63％和3．31％,显著低于AIH组（P〈0．01）。④乙型肝炎ANA阳性组的ALT、AST水平和HBVDNA阳性率显著高于ANA阴性组（P〈0．05）;乙肝组ALT、AST水平和HBVDNA阳性率显著高于AIH组（P〈0．01）。结论：HBV感染不仅引起肝组织损害,还诱导产生多种以低滴度为主的自身抗体。自身抗体的产生与肝损伤程度有一定相关性,并与HBV复制水平相关;其在探讨乙肝发生、发展机制和病因研究中有一定的意义。