苦瓜蛋白体外抗柯萨奇B3病毒感染

柯萨奇病毒B组(Coxsackievirus B group, CoxB)是病毒性心肌炎常见病原,目前尚无有效的治疗方法,近年来发现苦瓜核糖体失活蛋白(Ribosom e-inactivating protein, RIP)具有明显的抗病毒、抗肿瘤及调节免疫等多种生物活性[1],有很高的药用价值.笔者从苦瓜果肉中分离纯化苦瓜蛋白,并进行体外抗CoxB 3病毒感染作用的研究,旨在寻找高效抗CoxB3病毒感染作用的药物,现将结果报告如下.     

维生素C对柯萨奇B3病毒的心肌细胞的保护作用研究

观察维生素Ｃ对柯萨奇Ｂ３病毒的复制和对病毒感染心肌细胞的影响，结果表明：维生素Ｃ对ＣＶＢ３感染的心肌细胞具有保护作用，加ＶｉｔＣ培养２４ｈ后，随时间延长，保护作用越来越明显（Ｐ〈０．０５）；实验结果还表明，ＶｉｔＣ在细胞外并无直接灭活病毒作用，而是作用于细胞，影响病毒的复制，从而使心肌细胞得到保护。     

维生素C对柯萨奇B_3病毒感染的心肌细胞的保护作用研究

观察维生素Ｃ对柯萨奇Ｂ３（ＣＶＢ３）病毒的复制和对病毒感染心肌细胞的影响，结果表明：维生素Ｃ（ＶｉｔＣ）对ＣＶＢ３感染的心肌细胞具有保护作用，加ＶｉｔＣ培养２４ｈ后，随时间延长，保护作用越来越明显（Ｐ＜０．０５）；实验结果还表明：ＶｉｔＣ在细胞外并无直接灭活病毒作用，而是作用于细胞，影响病毒的复制，从而使心肌细胞得到保护。     

苦瓜素对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的治疗作用

病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)是常见的获得性心肌疾病之一，近年来发病率逐年上升，成为青少年猝死的重要原因，严重危害人类健康，但目前尚无有效的抗病毒药物治疗。苦瓜为葫芦科属植物苦瓜Mornordica charantia L.的果实，已有数百年的药食两用史。最近国内外学者从苦瓜果肉、种     

地塞米松对感染柯萨奇B—2病毒的人胚心肌细胞保护作用的实验 …

该研究拟从细胞水平观察地塞米松对感染ＣｏｘＢ－２病毒的人胚心肌细胞的作用效果。采用培养的人胚心肌细胞接种ＣｏｘＢ－２病毒，观察细胞生长、博动民政部及超微结构，测定心肌细胞释放的ＬＤＨ（乳酸脱氢酶）活性。发现地塞米松治疗组的心肌细胞搏动较感染组者维持时间长，民肌细胞病变发展亦较缓慢，且ＬＤＨ值明显低于感染组。说明地塞米松对感染ＣｏｘＢ－２病毒的人胚心肌细胞有明显的保护作物作用，提示临床上在重症病毒性     

牛磺酸对增减大鼠心肌细胞感染柯萨奇B3病毒的影响

目的 探讨牛磺酸对由柯萨奇Ｂ３病毒感染的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用,为该药的临床应用提供理论依据。方法 取新生ＳＤ大鼠的乳鼠心室肌肌制备博动心肌细胞,培养４８ｈ后接种１０＾３ＴＣＩＤ５０的柯萨奇Ｂ３病毒做为实验性病毒性心肌炎模型。结果牛磺酸明显减轻感染柯萨奇Ｂ３病毒心肌细胞的病变,使细胞博动增强;提高心肌细胞的琥珀酸脱氢酶活性,降低乳酸脱氢酶活性;抑制心肌细胞感染柯萨奇Ｂ３病毒后导致的乳酸脱     

牛磺酸对柯萨奇B3病毒感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流的影响

目的 观察牛磺酸对柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流的影响。方法 运用全细胞膜片钳技术记录了分离的大鼠心肌细胞外向钾电流，并观察牛磺酸的作用。结果 ＣＶＢ３感染可使正常大鼠心肌细胞Ｉｏｕｔ明显增加，牛磺酸对正常大鼠心肌细胞Ｉｏｕｔ无明显影响，但可使ＣＶＢ３感染的Ｉｏｕｔ趋于正常。结论 牛磺酸对ＣＶＢ３感染心肌细胞Ｋ＾＋通道电流的作用可能是其发挥抗心肌损伤作用的机制之一。     

茱萸颗粒对大鼠心肌细胞抗柯萨奇病毒感染的实验研究

目的　观察茱萸颗粒对大鼠心肌细胞抗CVB3病毒感染的作用。方法　用CVB3病毒感染大鼠心肌细胞 ,观察正常心肌对照组、病毒感染组、茱萸颗粒给药组心肌细胞病理变化和心肌酶谱变化。结果　茱萸颗粒可明显降低CVB3病毒感染后心肌细胞的病理改变和心肌细胞酶的释放 ,茱萸颗粒浓度 4 .0mg/mL的给药组与病毒对照组有非常显著差别。结论　茱萸颗粒具有较强的保护心肌细胞和助心肌细胞抗CVB3病毒感染的作用      

肉桂油治疗小鼠CVB3m病毒性心肌炎的实验研究

目的:研究肉桂油(OC)对柯萨奇病毒B3m(CVB3m)诱发性小鼠病毒性心肌炎(VMC)的治疗作用.方法:0.1 mL CVB3m ip建立BALB/c小鼠VMC模型.正常对照组同法接种0.1 mL不含病毒的Eagle液,与感染病毒小鼠隔离饲养.于接种病毒72 h后给药,OC治疗组(49.1,36.7,26.5 mg/kg肉桂油,ig)、阳性药物组(50 mg/kg黄芪注射液,ip)、模型组与正常对照组(2500 mg/kg生理盐水,ig),连续给药1 wk.观察指标:累计死亡率与中位生存时间;接种病毒后10 d心肌组织光、电镜组织病理学检查;心肌匀浆MDA含量、SOD活性;血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量;21 d心肌组织光镜病理检查.结果:OC 49.1和36.7 mg/kg治疗组可降低小鼠死亡率,延长中位生存时间,降低急性期血清中CK,CK-MB含量以及心肌中MDA含量,提高SOD活性;减轻急性期、亚急性期小鼠心肌组织的坏死与钙化,与模型组比较差异显著(P<0.05).结论:OC具有治疗柯萨奇病毒B3m诱发性小鼠VMC的作用.     

白细胞介素18与黄芪注射液对病毒性心肌炎的疗效对比

目的 :比较白细胞介素 1 8(IL 1 8)与黄芪注射液对病毒性心肌炎 (VMC)的疗效。方法 :用柯萨奇病毒B3 m(CVB3 m)感染Balb/c小鼠制备VMC小鼠模型 ,然后分别给予IL 1 8及黄芪注射液治疗 8d ,观察小鼠发病情况 ,并在不同时段检测心肌组织病毒滴定度、心肌病理积分 ,并进行比较。结果 :IL 1 8治疗组及黄芪治疗组较心肌炎对照组症状减轻 ,生存率提高 (P <0 .0 5 ) ,病毒滴定度降低 ,病理改变减轻 ,具有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ;IL 1 8组与黄芪组比较 ,前者生存率较高 ,但无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,病毒滴定度和病理积分均低于后者 ,有显著性差异 (P <0 .0 1 )。结论 :IL 1 8与黄芪注射液对VMC均有治疗作用 ,前者疗效更优于后者     

褪黑素在病毒性心肌炎中的保护作用

目的 探讨褪黑素在柯萨奇病毒B3（Coxsackie virus B3,CVB3）感染的病毒性心肌炎小鼠中的保护作用,为病毒性心肌炎的治疗提供新的手段。方法 将64只5周龄的雄性BALB/c小鼠随机分为3 组：正常对照组、实验对照组、褪黑素组。以腹腔注射CVB3建立急性病毒性心肌炎模型,接种当天记为第0 天,24h后正常对照组、实验对照组每日分别经腹腔注射等量生理盐水,褪黑素组每日经腹腔注射溶于乙醇及生理盐水的褪黑素。分别于接种后第7天和第14天从各组随机抽取8只处死,留取心肌组织标本。用苏木素-伊红染色法观察心肌炎症病理改变,蛋白印迹法定量检测Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase 9的蛋白水平表达,用免疫组织化学法检测心肌组织中Cleaved-caspase 3的表达量。结果 与正常对照组比较,实验对照组心肌炎症病理评分较高,Bax、Cleaved-caspase 9凋亡蛋白表达水平和Cleaved-caspase 3表达量上调,Bcl-2蛋白水平表达下调,给予褪黑素干预后心肌炎症病理评分降低,并可明显下调Bax、Cleaved-caspase 9凋亡蛋白表达水平和Cleaved-caspase 3表达量,上调Bcl-2蛋白表达水平。结论 褪黑素能够减轻心肌损伤,下调病毒性心肌炎小鼠心肌组织中Bax、Cleaved-caspase 3、Cleaved-caspase 9的表达和上调Bcl-2的表达,从而对病毒性心肌炎小鼠起到保护作用。     

柠檬提取物对新城疫及柯萨奇病毒作用的实验研究

目的:测试并比较柠檬提取物0#及3#在不同的实验方法下对新城疫病毒和柯萨奇病毒B3的杀灭作用。方法:直接杀灭作用:将新城疫病毒和柯萨奇病毒B3分别与柠檬提取物0#和3#体外作用1h,然后加入到培养好的Vero细胞中,培养72h。预防作用:将不同浓度的柠檬提取物0#和3#分别加入培养好的Vero细胞中作用24h,然后分别加入新城疫病毒和柯萨奇病毒B3与柠檬提取物0#和3#的混合液,培养72h。治疗作用:将新城疫病毒和柯萨奇病毒B3分别加入培养好的Vero中,作用1h,然后分别加入0#及3#药品,培养72h。3种方法与未加柠檬提取物的病毒液对细胞的作用相比较,通过CPE法观察药品对病毒的作用。结果:在柠檬提取物0#对新城疫病毒的直接杀灭作用中,实验组较对照组有显著性差异(P<0.05);在柠檬提取物3#对柯萨奇病毒B3的预防作用中,实验组较对照组有显著性差异(P<0.05);在柠檬提取物0#及3#对新城疫病毒和柯萨奇病毒B3的治疗作用中,实验组较对照组无显著性差异(P>0.05)。结论:柠檬提取物0#对新城疫病毒具有杀灭作用;柠檬提取物3#对柯萨奇病毒具有预防作用;0#及3#对新城疫病毒和柯萨奇病毒B3均无治疗作用。     

Exploration of IRES Elements within the ORF of the Coxsackievirus B3 Genome

Objective This study aimed to identify internal ribosome entry sites(IRESs) in the open reading frame(ORF) of the Coxsackievirus B3(CVB3) genome.Methods The sequences of P1, P2, or P3 of the CVB3 genome or the truncated sequences from each antithymocyte globulin(ATG) to the end of the P1, P2, or P3 gene were inserted into the pEGFP-N1vector. After transfection, possible IRES-dependent green fluorescent protein(GFP)-fused proteins were detected by anti-GFP western blotting. The sequences of possi...     

芪红胶囊对病毒性心肌炎小鼠的保护作用

目的研究芪红胶囊对病毒性心肌炎动物模型的保护作用.方法以100LDso病毒悬液感染小鼠,造成病毒性心肌炎动物模型;分组为:正常对照组、药效观察组和病毒感染对照组.每天检测动物的体重、进食量和体温变化,共观察21d,最后统计各个分组的死亡率.同样分组后,分别于不同时间进行眼眶取血,测定血清心肌酶含量.结果正常对照组与药效观察组动物死亡率＜50%,病毒感染对照组死亡率71.0%,药效观察组与病毒感染对照组之间存在显著性差异(P＜0.01);在体重、体温和进食量指标上,病毒感染组与药效观察组之间均存在显著差异(P＜0.01).以上2组的心肌酶含量在第5天时出现明显差别.结论芪红胶囊对病毒性心肌炎动物模型存在明显保护作用.     

苦瓜蛋白的分离纯化及其体外抗CoxB3型病毒作用的研究

目的 探讨苦瓜蛋白的分离纯化方法。研究其体外抗病毒作用。为开发这一新型抗病毒药物打下前期工作基础。方法 离心、超滤，阳离子交换色谱，反相高效液相色谱等分离纯化方法，体外抗病毒实验方法。结果 得到了色谱纯的抗3型科萨奇病毒的苦瓜蛋白，其抗病毒作用有明显的剂量-效应关系，在浓度为215μg/mL时具有最大的抗病毒作用，与对照组相比，苦瓜蛋白对CoxB3感染的HepG2的保护作用十分明显。结论 体外抗病毒实验表明一定范围内的苦瓜蛋白对CoxB3感染的HepG2有明显的保护作用。     

用核酸杂交检测心肌炎小鼠心肌中柯萨奇B病毒RNA

作者报道了柯萨奇B_(3m)病毒感染BALB/c小鼠后,用常规病毒分离方法,于感染后第9天心肌内病毒分离开始转阴,而使用cDNA-RNA分子杂交方法,在感染后观察的整个36天内,小鼠心肌内病毒基因一直存在,提示病毒性心肌炎病变的持续存在可能与病毒在心肌中的继续作用有关。