复发及多源发大肠癌多药耐药基因检测

大肠癌是目前死亡率较高的恶性肿瘤，肿瘤耐药直接影响其化疗效果及复发率。多药耐药基因(Mdr-1)在肿瘤多药耐药中的作用已由基因转染实验所证明。本研究之目的为研究Mdr-1与复发及多源发大肠癌的关系，采用逆转录．多聚酶链式反应(RT-PCR)技术对81例复发或多源发大肠癌Mdr-1基因进行了检测，并结合疗结果，现报告如下：     

复发及多源发大肠癌多药耐药基因检测

目的 :研究多药耐药基因 (Mdr- 1)与复发及多源发大肠癌的关系。方法 :采用逆转录 -多聚酶链式反应 (RT- PCR)技术对81例复发和多源发大肠癌 Mdr- 1基因进行了检测。结果 :复发大肠癌 Mdr- 1基因表达率 6 1.5 % ,多源发大肠癌 Mdr- 1基因表达 5 5 .1% (P >0 .0 5 )。结论 :复发大肠癌 Mdr- 1基因表达的阳性和阴性与耐药与否的总符合率达 (2 8+17) /5 2 (P <0 .0 5 )。     

大肠癌患者多药耐药性基因研究新进展

综述近年来国内外关于大肠癌多药耐药基因的研究进展,认为与P-糖蛋白,多药耐药相关蛋白的过量表达有关,而P53基因突变与大肠的多药耐药性有关。目前研究对大肠癌多药耐药的防治有增加药物在细胞内聚集及单克隆抗体技术等方法,取得了一定的疗效。     

胃癌与大肠癌原代细胞培养化疗药物敏感性的对比

对消化道肿瘤多药耐药性(MDR)的研究证实,胃癌与大肠癌中多种耐药因子均可高表达,但后者对化疗药物敏感性较差[1-3].本研究旨在对比研究胃癌和大肠癌对化疗药物敏感性的差异,以及肿瘤分化程度及耐药相关因子P-gp、GST-π、p53表达对这种变化的影响.     

葡萄糖神经酰胺合成酶在肝癌细胞多药耐药中的作用机制

近年来葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)在肿瘤多药耐药(MDR)中的作用逐渐受到重视.我们在构建GCS基因真核表达质粒pEGFP-GCS的基础上,应用基因转染技术使GCS基因在肝癌细胞HepG2内高表达,观察HepG2细胞内多药耐药基因MDR1的表达,以及细胞耐药性的变化,探讨GCS基因参与肝癌细胞HepG2多药耐药的机制.     

裸鼠原位肝细胞癌多药耐药模型的建立

目的建立裸鼠原位肝癌多药耐药模型。方法分别在开腹直视下将人肝癌细胞系 HepG2和多药耐药细胞系HepG2／ADM两种细胞种植于裸鼠的肝包膜下建立原位肝细胞癌多药耐药动物模型。用B超、剖腹探查检测两组肝脏肿瘤生长情况。利用长链PCR技术对耐药细胞系 HepG2／ADM和相应种植瘤组织MDR1基因全长进行扩增并测序,再分别用RT—PCR、免疫组化、 Western blotting方法检测两组肿瘤耐药基因MDR1mRNA和P—gp蛋白的表达。结果原位肝脏种植肿瘤成瘤率均为100％(30／30),耐药诱导成功率为95％(19／20);用长链PCR技术对耐药细胞系 HepG2／ADM和相应种植瘤组织进行MDR1基因扩增,均能扩增出全长为3．8 Kb的基因条带,双向 DNA测序结果均与Genebank报道一致。耐药组MDR1mRNA和P-gp蛋白的表达均明显高于对照组 (t1=3．72,t2=2．98,P<0．01)。耐药组P-gp蛋白表达为(42．6±1．7)％远高于对照组(2．6± 0．1)％,差异有统计学意义(t=6．43,P<0．01)。结论成功建立肝癌多药耐药动物模型并且为研究肝癌多药耐药逆转提供基础。     

胶质瘤多药耐药机制的研究

多药耐药（multdrug resistance,MDR)的产生是肿瘤化疗失败的重要原因,其中MDR1基因及其编码产物P－gp表达增加是MDR的主要机理,最近发现多药耐药相关蛋白（multidrug resistance-associated protein,MRP),肺阻蛋白（lung resistanceprotein,LRP)及某些靶酶GST－n,ToPo,IIa等改变也与MDR有关。我们采用C6／adr耐药细胞株,以C6为对照,研究了MDR1基因及其蛋白表达,并对耐药蛋白表达及靶酶的含量进行了分析,探讨了脑胶质瘤多耐药机制。     

前列腺癌肿瘤干细胞与多药耐药研究进展

前列腺癌是男性常见的恶性肿瘤之一,前列腺癌的多药耐药对其治疗提出了更严峻的考验.近年来的研究发现肿瘤干细胞与肿瘤的发生、发展、转移、复发以及多药耐药有着密切的关系,同时也为治疗肿瘤多要耐药提出了新的方向.本文对前列腺癌干细胞及其与多药耐药的关系作一综述.     

人肝癌HepG2多药耐药细胞系的部分生物学性状研究

目的　研究人肝癌多药耐药 (MDR)的机制 ,建立HepG2多药耐药细胞系并研究其部分生物学性状。方法　应用HepG2细胞系 ,通过培养液中阿霉素 (ADM )的浓度梯度增加法 ,得到肝癌多药耐药株HepG2 /ADM。Westernblot增强化学发光法 (ECL)检测细胞株表面多药耐药基因(MDR1)的表达产物P 糖蛋白 (P 170 )、多药耐药相关蛋白 (MRP)及肺耐药蛋白 (LRP)的表达水平。结果　耐药细胞的倍增时间延长 2 .0 5倍。该耐药模型的P 170表达水平较亲本细胞升高3 .90倍 (P <0 .0 1) ,但MRP及LRP无明显变化。结论　HepG2 /ADM同其亲本细胞相比 ,其耐药性、倍增时间有明显改变 ;多药耐药性主要与MDR1的高表达有关。     

核酶对人肝癌细胞多药耐药性的逆转

目的 利用核酶技术切割肿瘤多药耐药基因(MDR1),逆转肿瘤抗药性。方法按照“锤头结构”模型设计、合成了核酶196MDR1(196 RZ),并定向克隆入包含RNA多聚酶Ⅲ启动子的逆转录病毒载体中。通过脂质体介导,将抗mdrl核酶表达质粒(N2A tRNA1^(met)-iMDRl-Rz)导入人肝癌耐药细胞株HepG2。分别采用RT-PCR、荧光PCR、蛋白质印迹分析(western blot)、流式细胞仪检测术、罗丹明聚集及MTT、方法,观察细胞的．RZ、mdrl mRNA、P糖蛋白(Pgp)表达和对化疗药物敏感性的变化。结果经抗MDR1核酶处理的耐药HepG2细胞,RZ稳定表达,MDRl mRNA、Pgp明显降低,细胞内罗丹明聚集,对阿霉素的敏感性提高200倍。结论针对多药耐药基因mdrl的核酶可明显降解mdrl mRNA,抑制Pgp的表达,具有强大的逆转肝癌耐药细胞HepG2多药耐药的作用。     

黄芪甲苷对耐药肝癌细胞株HepG2/GCS逆转作用的研究

近年来,葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)在肿瘤多药耐药中的作用逐渐受到重视.我们前期实验已证实GCS基因参与了肝癌细胞HepG2多药耐药的发生,通过基因转染使细胞内GCS基因高表达的肝癌细胞株HepG2/GCS具有多药耐药性[1].本实验观察黄芪甲苷(astragalosideⅣ)对肝癌耐药细胞株HepG2/GCS耐药性的影响,进一步探讨其逆转肿瘤多药耐药的作用机制.     

大肠癌多药耐药逆转的研究进展

大肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,其多药耐药的发生是多因素、多阶段、多步骤共同作用的结果,针对其多药耐药逆转的研究对于提高患者的远期疗效极其重要.目前针对其多药耐药逆转机制的研究主要有针对P-糖蛋白的逆转、基因治疗、中医中药治疗等.在上述领域的研究已经取得了一定的进展,如何进一步深入研究大肠癌多药耐药的发生、发展机制,并实现多药耐药的逆转,将有助于预测和改善化疗疗效、提高消化道恶性肿瘤的综合疗效,并最终克服多药耐药这一难题.     

多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因在食管、贲门癌中的表达

目的　探讨多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白基因(MRP)在食管癌、贲门癌中表达的临床意义。　方法　采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR),对29例食管癌、贲门癌癌组织及癌旁组织中MDR1和MRP的表达进行检测。　结果　癌组织中MDR1阳性率为65.5%,高于癌旁组织中MDR1的阳性率,为37.9%(P<0.05),癌组织MDR1信使核糖核酸(mRNA)表达水平也显著高于癌旁组织(P<0.01);癌组织的MRP阳性率为48.3%,高于癌旁组织(27.6%),但无差异(P>0.05),而癌组织MRPmRNA表达水平与癌旁组织比较则有差异(P<0.05);中、低分化肿瘤的MDR1和MRP表达阳性率增高,两基因的mRNA表达水平显著高于高分化肿瘤(P<0.05)。　结论食管、贲门癌具有内源性多药耐药性;MDR1和MRP表达与食管、贲门癌的组织学类型及TNM分期无关,但可反映其肿瘤组织分化不良的生物学特征     

应用蛋白质组学方法筛选人骨肉瘤多药耐药蛋白

多药耐药(MDR)是导致肿瘤化疗失败的一个重要原因[1].大量研究表明[2,3],骨肉瘤多药耐药与P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽转移酶(GST)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(Topo Ⅱ)等异常表达有关,我们应用蛋白质组学方法筛选耐药细胞与亲本细胞中差异表达的蛋白.     

多药耐药膀胱癌细胞株构建的研究现状及展望

多药耐药(multidrug resiatance,MDR)是最重要、最常见的肿瘤耐药现象,是近年来肿瘤临床和基础研究中的热点,多药耐药细胞株是研究MDR现象的主要工具之一,但建立合适的耐药细胞模型却很困难.目前主要采用两类方法来构建多药耐药细胞株:即药物诱导法及转基因法.本文就目前多药耐药膀胱癌细胞株如何构建的研究现状作一综述,并讨论目前多药耐药膀胱癌细胞株构建的利弊、展望未来将如何以更优越的方法构建一高效、稳定的膀胱癌多药耐药模型.     

缺氧诱导因子1α依赖性缺氧诱导人肝癌细胞多药耐药相关基因的表达及意义

目的探讨缺氧环境下人肝癌细胞中多药耐药相关基因和缺氧诱导因子1α(HIF1α)的表达和意义,从而部分阐明肝细胞癌发生多药耐药的机制,为逆转肝癌耐药提供新的分子靶点。方法将人肝癌细胞系HepG2细胞分别行不同时间低氧培养和转染HIF1α/PCDNA3质粒;应用荧光定量聚合酶链反应技术和蛋白免疫印迹技术分别检测每组HepG2细胞中多药耐药相关基因(mdr1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药相关蛋白(LRP)在mRNA和蛋白水平的表达。结果在缺氧组,随着缺氧时间的延长HepG2细胞中多药耐药相关基因mdr1、MRP1和LRP的表达均逐渐增高,且以MRP1变化更为显著;而且这些多药耐药相关基因的表达升高与缺氧诱导因子1α的表达呈同步化改变。在HIF1α/PCDNA3质粒转染细胞中这些多药耐药相关基因的表达亦明显升高。结论缺氧可通过核转录因子HIF1α上调肝癌细胞内mdr1,LRP、MRP1等多药耐药相关基因的表达,从而使肝细胞癌获得多药耐药性。生长局部微环境的缺氧是诱导肝癌产生多药耐药性的重要原因之一。核转录因子HIF1α和这些多药耐药相关基因将可能成为逆转肝癌耐药的新的分子靶点。     

缺氧诱导因子1a依赖性缺氧诱导人肝癌细胞多药耐药相关基因的表达及意义

目的探讨缺氧环境下人肝癌细胞中多药耐药相关基因和缺氧诱导因子1a(HIF-1a)的表达和意义，从而部分阐明肝细胞癌发生多药耐药的机制，为逆转肝癌耐药提供新的分子靶点。方法将人肝癌细胞系HepG2细胞分别行不同时间低氧培养和转染HIF-1a/PCDNA3质粒；应用荧光定量聚合酶链反应技术和蛋白免疫印迹技术分别检测每组HepG2细胞中多药耐药相关基因(mdr1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药相关蛋白(LRP)在mRNA和蛋白水平的表达。结果在缺氧组，随着缺氧时间的延长HepG2细胞中多药耐药相关基因mdr1、MRP1和LRP的表达均逐渐增高，且以MRP1变化更为显著；而且这些多药耐药相关基因的表达升高与缺氧诱导因子-1a的表达呈同步化改变。在HIF-1a/PCDNA3质粒转染细胞中这些多药耐药相关基因的表达亦明显升高。结论缺氧可通过核转录因子HIF-1a上调肝癌细胞内mdr1，LRP、MRP1等多药耐药相关基因的表达，从而使肝细胞癌获得多药耐药性。生长局部微环境的缺氧是诱导肝癌产生多药耐药性的重要原因之一。核转录因子HIF-1a和这些多药耐药相关基因将可能成为逆转肝癌耐药的新的分子靶点。     

多药耐药基因mdr1在肝细胞性肝癌中的表达及其意义

目的　探讨肝细胞性肝癌 (HCC)中多药耐药基因mdr1的表达及其与肝癌临床病理特征、肿瘤多药耐药和患者预后的关系。方法　用免疫组化染色方法检测 5 6例HCC细胞中mdr1基因的表达 ,并结合临床病理指标进行统计分析。结果　 5 6例HCC病例中mdr1基因的表达 :癌旁组织中 19例阳性 (3 3 .9% ) ,癌组织中 3 0例阳性 (5 3 .6% ) ,两者比较差异有显著性 (χ2 =4.3 9,P<0 .0 5 )。 48例初治患者中 2 2例阳性 (4 5 .8% ) ,8例复发者均为阳性 (10 0 % )。按肿瘤大小、数目、包膜有无、癌栓有无、分化程度、HBsAg等分组 ,其间mdr1表达差异无统计学意义。mdr1表达阳性组与阴性组 1、2、3年生存率比较 ,其差异无统计学意义。结论　mdr1在HCC中表达阳性率为 5 3 .6% ,其表达与肿瘤大小、数目、包膜有无、癌栓有无、分化程度、HBsAg和肝硬变情况无关 ;HCC具有原发性耐药。     

膀胱肿瘤多药耐药机制的研究

肿瘤细胞对化疗药物产生耐药是肿瘤难以治愈的主要原因。本文概述了膀胱肿瘤多药耐药的几种可能机制,包括P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽(GSH)、拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)等,同时对近年来多药耐药的逆转机制作了简要的介绍。     

胃癌组织中多药耐药和多药耐药相关蛋白基因的表达及其意义

我们通过检测胃癌组织中多药耐药(multidrug resistance，MDR1)和多药耐药相关蛋白(multidrug resistanceassociated protein，MRP)基因表达，探讨其与肿瘤临床病理特征及其预后的关系。