SSTR亚型在活动性溃疡性结肠炎中的表达及临床意义

目的 探讨生长抑素受体(SSTR)2、5亚型在溃疡性结肠炎(UC)活动期中的表达,为临床应用生长抑素(SS)及其类似物诊断治疗UC提供依据.方法 采用免疫组化法检测30例活动期UC患者(结肠炎组)结肠黏膜标本及26例体检者(对照组)结肠黏膜标本的SSTR2、SSTR5亚型蛋白的表达.结果 SSTR2、SSTR5亚型表达主要定位于结肠黏膜的上皮细胞、纤维细胞、淋巴细胞和小血管内皮细胞的细胞质中,二者在结肠炎组表达阳性率分别为93%、90%,对照组分别为69.2%、61.3%.便血明显组SSTR2、SSTR5表达阳性率均为100%,便血不明显组表达阳性率均为83.3%.活动期UC患者结肠黏膜SSTR2、SSTR5表达均上调.结论 结肠黏膜SSTR改变提示SS在UC发生发展中可能起重要作用.     

感染后肠易激综合征患者结肠黏膜P物质与白细胞介素、干扰素表达的相关性研究

目的探讨肠道感染对肠易激综合征（IBS）患者结肠黏膜P物质（SP）、Th1细胞因子表达的影响。方法经结肠镜钳取77例IBS（20例感染后）患者及30例对照者的降结肠和直肠黏膜标本，采用免疫组化染色法检测肠黏膜SP与白细胞介素（IL）-2、干扰素（IFN）-γ的表达情况。结果IBS伴腹泻型患者结肠黏膜SP、IFN-γ和IL-2表达与对照组间差异有统计学意义（P〈0．05），感染后IFN-γ和IL-2阳性的IBS伴腹泻型患者结肠黏膜SP表达与对照组间差异亦有统计学意义（P〈0．05），而非感染后IBS患者结肠黏膜IFN-γ和IL-2阳性SP表达与对照组间差异无统计学意义（P〉0．05），但有增加趋势。结论感染可促进SP表达增加，进而促使Th1细胞因子表达上调。感染可通过黏膜免疫／肠神经系统改变参与IBS发病。     

肠易激综合征患者肠黏膜中褪黑素受体的表达及其临床意义

目的探讨肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）患者结肠黏膜中褪黑素受体（melatonin receptor，MR）的表达情况及其与肠易激综合征临床症状的相关性。方法用免疫组化法，检测正常对照20例、腹泻型肠易激综合征（diarrhea-predominant IBS，D-IBS）23例、便秘型肠易激综合征（constipation-predominant IBS，C-IBS）20例结肠黏膜中MR的表达情况。使用JEDA801D形态学图像分析系统，测量阳性表达面积及光密度（opacity density，OD）。结果MR在黏膜层含量较多，黏膜下层含量较少。回盲部和乙状结肠MR阳性面积及OD值表现为：D-IBS明显高于正常对照组（P〈0．05），正常对照组明显高于C-IBS（P〈0．05）。与同组IBS乙状结肠相比，回盲部阳性面积增高（P〈0．05）；OD值无明显差异。结论MR在D-IBS中高表达，在C-IBS中低表达，说明MR对IBS患者胃肠道运动有一定影响。     

腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜5-羟色胺和5-羟色胺3受体的研究

背景：肠易激综合衙（IBS）是一种功能性胃肠道疾病，其病因和发病机制迄今尚未完全阐明。目的：探讨5-羟色胺（5-HT）和5-HT3受体（5-HT3R）在腹泻型IBS（D—IBS）患者结肠黏膜中的变化及其临床意义。方法：对18名正常人和28例D—IBS患者行结肠镜检查并分别取升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠黏膜标本各两块。以免疫组化方法检测5-HT阳性细胞；以蛋白质印迹分析半定量检测5-HT3R的表达。结果：D—IBS组4个部位结肠黏膜的5-HT阳性细胞数和5-HT3R的表达均较正常对照组显著增多（P〈0．05），但4个部位之间相互比较均无显著差异。结论：D—IBS患者结肠黏膜5-HT合成和分泌增多，5-HT3R表达上调，提示5-HT和5-HT3R可能为D—IBS的分子生物学基础之一，为D—IBS的治疗提供了分子靶点。     

便秘型肠易激综合征与5-HT的相关性研究

目的探讨便秘型肠易激综合征（IBS—C）与5-羟色胺（5-HT）的相关性。方法IBS—C患者30例和对照组30例,均行电子结肠镜检查,在直肠和乙状结肠交界处活检,组织切片行免疫组化5-HT抗体染色。结果IBS—C结肠黏膜中5-HT阳性表达率为23．3％,免疫组化5-HT染色强度与对照组比较明显增强（P〈0．05）。结论IBS—C的发病与5-HT有一定的相关性。     

肠易激综合征患者结肠黏膜P物质、血管活性肠肽和肥大细胞的变化

背景：肠易激综合征（IBS）的发病机制尚不明确。目的：探讨IBS患者结肠黏膜P物质（SP）、血管活性肠肽（VIP）、肥大细胞（MC）的变化及其在IBS中的可能作用。方法：20例腹泻型IBS患者、22例便秘型IBS患者和18名正常对照者纳入本研究．取回盲部、乙状结肠黏膜行SP、VIP免疫组化染色和MC计数。结果：IBS患者回盲部、乙状结肠黏膜SP、VIP免疫阳性神经纤维较正常对照组增多、增粗，阳性增强（P〈0．05）。IBS患者乙状结肠黏膜SP、VIP免疫阳性神经纤维与回盲部相比无显著差异。IBS患者回盲部黏膜MC计数较正常对照组显著增高（P〈0．01），乙状结肠黏膜MC计数与正常对照组相比无显著差异。IBS患者乙状结肠黏膜MC计数与正常对照组相比，显著低于回盲部（P〈0．01）。结论：SP、VIP和MC在IBS的发病中起有一定作用。     

GFAP和COX-2在中重度活动期溃疡性结肠炎活检标本中的表达及其临床意义

背景：研究发现肠神经胶质细胞（EGC）和环氧合酶-2（COX-2）参与了肠道炎症的发生、发展过程。目的：探讨神经胶质细胞特异性标记物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和COX-2在中重度活动期溃疡性结肠炎（UC）病变部位活检标本中的表达及其临床意义。方法：中重度活动期UC、腹泻型肠易激综合征（IBS-D）和正常对照者各30例纳入研究,以免疫组化方法检测活检标本中的GFAP、COX-2表达。结果：UC组GFAP强阳性表达率和免疫组化评分均低于IBS-D组和正常对照组,其中中度UC显著高于重度UC（P〈0.05）;UC组COX-2强阳性表达率和免疫组化评分均高于IBS-D组和正常对照组,其中中度UC显著低于重度UC（P〈0.05）。UC病变累及广泛结肠者COX-2强阳性表达率显著高于病变仅累及部分肠段者（P〈0.05）,GFAP表达与UC病变范围无关。结论：活动期UC GFAP表达强度降低,COX-2表达强度增高,两者均与UC严重程度相关。     

MMP-1、TIMP-1和TNF-α在溃疡性结肠炎中表达的意义

目的研究基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及其抑制剂-1（TIMP-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在溃疡性结肠炎（UC）结肠黏膜不同区域以及不同病情中的表达,探讨它们在UC发生发展中的作用和I临床意义。方法收集UC不同区域的结肠黏膜组织,分为轻、中、重三组。采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）及免疫组化检测三种因子的表达。结果MMP—1、TIMP—1、TNF-α在溃疡区的表达高于非溃疡区（P〈0．05）。MMP-1、TNF-α及TIMP-1在重型中的表达高于轻型（P〈0．05）。MMP-1／TIMP-1、TNF-α与病情严重程度相关（P〈0．05）。结论结肠黏膜中TNF-α表达升高,引起黏膜组织免疫失调,可能引起MMP-1与TIMP-1表达失衡,在UC的发生发展中起重要作用。MMP-1／TIMP-1和TNF-α可作为评价UC病情的指标。     

蛋白酶激活受体2、NF-kB在溃疡性结肠炎肠黏膜的表达及其与肥大细胞相关性研究

目的探讨溃疡性结肠炎（UC）病人肠黏膜蛋白酶激活受体2（PAR-2）、核转录因子-kB（NF—kB）表达和肥大细胞的变化,以及三者在UC发病机制中的作用。方法32个黏膜标本取自行结肠镜检查的UC病人,并对UC的病理组织学炎症进行分级,Ⅰ、Ⅱ级12例,Ⅲ、Ⅳ级20例;对照组肠黏膜取白15名健康成人。半定量RT—PCR检测两组肠黏膜PAR-2的mRNA表达,免疫组化方法检测PAR-2、NF—KBp65蛋白表达和肥大细胞数量。结果与对照组相比,UC组肠黏膜中PAR-2mRNA和蛋白过度表达,PAR-2mRNA表达与疾病严重程度正相关（P〈0．01）。免疫组化结果显示,UC组肠黏膜肥大细胞数显著高于对照组（P〈0．01）正常对照组肠黏膜无或微弱阳性PAR-2、NF—KBp65表达。病理分级Ⅲ、Ⅳ级肠黏膜PAR-2、NF—KBp65蛋白表达及肥大细胞数均较病理分级Ⅰ、Ⅱ级组明显增加（P〈0．05）。PAR-2与肥大细胞数量之间呈正相关（r=0．78,P〈0．01）,PAR-2与NF—kBp65之间也呈正相关（r=0．56,P〈0．01）。结论UC的发生发展与PAR-2、NF—KBp65的过度表达及肥大细胞数量变化密切相关。     

溃疡性结肠炎患者结肠黏膜中IL-10、IL-13表达变化及意义

目的探讨溃疡性结肠炎（UC）患者结肠黏膜中IL-10、IL-13表达及与病情的相关性。方法采用免疫组化法检测30例活动性UC患者（轻度13例,中重度17例）及15例结肠息肉患者（正常对照）结肠黏膜中的IL-10、IL-13水平。结果中重度uc患者结肠黏膜中IL-10及IL-13阳性细胞数均明显低于轻度UC患者和结肠息肉患者,P均〈0．01;轻度UC患者明显低于结肠息肉患者,P〈0．01。结论活动期UC患者结肠黏膜中IL-10、IL-13的表达降低,且与病情的严重程度有关。     

肠易激综合征患者结肠黏膜辣椒素受体、P物质和肥大细胞变化的研究

背景:腹痛是一般人群中最常见的肠道症状,肠易激综合征(IBS)患者的腹痛症状更为严重、频繁,然而其发生机制尚不明确。目的:分析IBS患者结肠黏膜中与痛觉和内脏高敏感相关的辣椒素受体VR1、P物质(SP)和肥大细胞(MC)的变化,探讨IBS患者内脏高敏感和腹痛的发生机制。方法:39例IBS患者[腹泻型IBS(IBS-D)21例,便秘型IBS(IBS-C)18例]和18名健康人纳入研究。受检者于结肠镜检查时在回盲部和乙状结肠取活检,行VR1、SP免疫组化染色和MC改良甲苯胺蓝染色。结肠镜检查前采用视觉模拟评分法行疼痛评分。结果:IBS患者乙状结肠VR1、回盲部和乙状结肠SP免疫反应阳性细胞以及回盲部MC数量显著多于正常对照组(P0.01),IBS-D与IBS-C组间则无明显差异。IBS-D和IBS-C患者的腹痛评分均与VR1呈正相关(r=0.553,P=0.009;r=0.592,P=0.010)。结论:IBS患者结肠黏膜中VR1、SP免疫反应阳性细胞和MC数量显著增多,VR1与腹痛评分呈正相关,三者可能参与了IBS患者内脏高敏感和腹痛的发生机制。     

肠易激综合征患者小肠黏膜5-HT信号系统的研究

目的探讨肠易激综合征（IBS）患者不同部位小肠黏膜5-羟色胺（5-HT）水平及肠嗜铬细胞（EC细胞）数量是否改变。方法选取24例便秘型IBS（IBS-C）、26例腹泻型IBS（IBS-D）患者和26名健康人,行小肠镜及结肠镜检查并取十二指肠降段、近端空肠和回肠末段黏膜,用高压液相色谱-电化学法和免疫组织化学检测5-HT含量和EC细胞。结果IBSC患者近端空肠黏膜的5-HT含量与健康人相比有统计学意义（122±54ng／mg蛋白比188±91ng／mg蛋白,P〈0．05）,而十二指肠降段和回肠末段黏膜5-HT含量（182±90ng／mg蛋白、61±35ng／mg蛋白）与健康人相比（256±84ng／mg蛋白、93±45ng／mg蛋白）无统计学意义（P〉0．05）。IBS-D患者不同部位小肠黏膜5-HT含量与健康人相比均无统计学意义（P〉0．05）。IBS-C和IBSD患者不同部位小肠黏膜EC细胞数量与健康人相比均无统计学意义（P〉0．05）。结论上述结果提示1BS患者小肠黏膜5HT信号系统异常是其发病机制之-,但是在IBS-C和IBS-D之间有差异。     

肠易激综合征患者肠黏膜CGRP、SP水平的变化与临床症状的关系

[目的]探讨肠易激综合征(IBS)患者结肠黏膜降钙素基因相肽(CGRP)和P物质(SP)表达水平及与IBS临床症状的相关性。[方法]对腹泻型IBS(IBS-D组)20例、便秘型IBS(IBS-C组)8例和正常对照组5例各取乙状结肠黏膜标本,应用免疫组织化学染色法分别检测CGRP和SP;同时以评分法评价消化道症状;分析各组CGRP、SP表达水平与消化道症状的相关性。[结果]IBS-D组CGRP表达水平显著高于IBS-C组、正常对照组(0.27±0.08∶0.21±0.06、0.19±0.04,P0.05),IBS-C组与正常对照组比较差异无统计学意义。IBS-D组SP表达水平显著高于IBS-C组、正常对照组(0.27±0.11∶0.19±0.04、0.17±0.04,P0.05),IBS-C组与正常对照组比较差异无统计学意义。肠黏膜SP表达水平与IBS患者腹痛(r=0.495,P=0.007)、排便变稀(r=0.382,P=0.045)呈正相关,与排便困难(r=-0.485,P=0.009)、排便干结(r=-0.382,P=0.045)负相关;CGRP与排便变稀(r=0.401,P=0.034)正相关,与排便干结(r=-0.401,P=0.034)负相关。[结论]CGRP、SP可能参与IBS的病理生理过程并与临床症状密切相关。     

溃疡性结肠炎患者结肠黏膜转化生长因子-β1及其受体表达与临床病理因素的相关性

背景：转化生长因子（TGF）-β1是溃疡性结肠炎（UC）的一种重要抗炎因子,目前TGF-β1及其Ⅰ型受体（TGFβRⅠ）在UC中表达状况的研究仍较少。目的：探讨TGF-β1、TGFβRⅠ在UC结肠黏膜中的表达及其与临床病理因素的关系。方法：以免疫组化SABC法检测60例UC患者结肠黏膜中TGF-β1、TGFβRⅠ的表达,设16例正常结肠组织作为对照。分析TGF-β1、TGFβRⅠ的表达与病变范围和组织病理学分级的关系。结果：TGF-β1、TGFβRⅠ在UC中的表达显著强于正常对照组（P〈0.05）,且活动期显著强于缓解期（P〈0.05）。TGF-β1、TGFβRⅠ与组织病理学分级均呈正相关（rs分别为0.421和0.553,P〈0.05）,与病变范围均不相关（rs分别为-0.031和-0.037,P〉0.05）。结论：UC结肠黏膜中TGF-β1和TGFβRⅠ表达增强,与UC的发病机制密切相关,有可能成为反映UC疾病活动度的生物学指标。     

Molecular defects in mucosal serotonin content and decreased serotonin reuptake transporter in ulcerative colitis and irritable bowel syndrome

BACKGROUND & AIMS: Serotonin (5-HT) is a critical signaling molecule in the gut. 5-HT released from enterochromaffin cells initiates peristaltic, secretory, vasodilatory, vagal, and nociceptive reflexes. Despite being pathophysiologically divergent, ulcerative colitis (UC) and irritable bowel syndrome (IBS) are both associated with clinical symptoms that include alterations in the normal patterns of motility, secretion, and sensation. Our aim was to test whether enteric 5-HT signaling is defective in these disorders. METHODS: Rectal biopsy specimens were obtained from healthy controls and patients with UC, IBS with diarrhea (IBS-D), and IBS with constipation (IBS-C). Key elements of 5-HT signaling, including measures of 5-HT content, release, and reuptake, were analyzed with these samples. RESULTS: Mucosal 5-HT, tryptophan hydroxylase 1 messenger RNA, serotonin transporter messenger RNA, and serotonin transporter immunoreactivity were all significantly reduced in UC, IBS-C, and IBS-D. The enterochromaffin cell population was decreased in severe UC samples but was unchanged in IBS-C and IBS-D. When 5-HT release was investigated under basal and mechanical stimulation conditions, no changes were detected in any of the groups relative to controls. CONCLUSIONS: These data show that UC and IBS are associated with similar molecular changes in serotonergic signaling mechanisms. While UC and IBS have distinct pathophysiologic properties, these data suggest that shared defects in 5-HT signaling may underlie the altered motility, secretion, and sensation. These findings represent the first demonstration of significant molecular alterations specific to the gut in patients with IBS and support the assertion that disordered gastrointestinal function in IBS involves changes intrinsic to the bowel.     

钙卫蛋白、乳铁蛋白在溃疡性结肠炎患者中表达的临床研究

背景:溃疡性结肠炎(UC)是慢性反复发作的肠道炎性疾病,评估疾病活动度对其疗效判断非常重要,实验室标记物尤其是粪便标记物可很好地反映疾病活动度。目的:探讨钙卫蛋白(Cal)、乳铁蛋白(Lf)在UC患者结肠黏膜和粪便中表达的临床意义。方法:选取1998年1月～2008年1月安徽医科大学第一附属医院收治的具备完整结肠镜或手术病理检查结果的UC患者120例。以临床活动度指数(CAI)评分进行疾病分期,以免疫组化SP法检测结肠黏膜Cal、Lf表达,以ELISA法检测粪便Cal、Lf含量。结果:活动期UC患者结肠黏膜中均表达Cal、Lf,缓解期无或仅弱表达。活动期UC患者粪便Cal、Lf含量显著高于缓解期(P0.01)。UC患者结肠黏膜Cal和Lf表达以及粪便Cal和Lf含量均与CAI评分呈正相关(P=0.000)。粪便Cal和Lf含量与结肠黏膜Cal和Lf表达亦呈正相关(r=0.588,P=0.000;r=0.519,P=0.000),且判断UC活动性的敏感性和特异性均较高。结论:UC患者结肠黏膜Cal、Lf表达可反映临床严重度,粪便Cal、Lf含量与UC活动性显著相关。     

PTPN22在溃疡性结肠炎中的表达及其临床意义

背景:溃疡性结肠炎(UC)的发生、发展与T细胞过度活化有关,蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(PTPN22)参与T细胞活化的负性调节。目的:探讨PTPN22在UC中的表达及其临床意义。方法:纳入2010年7月～2012年7月武汉市中心医院、武汉大学中南医院就诊的UC患者60例,同时纳入35例IBS患者作为对照组。采用实时定量PCR法检测患者肠黏膜PTPN22 mRNA表达水平。采用全自动红细胞沉降系统分析仪检测血清ESR水平。采用速率散射比浊法检测血清CRP水平。结果:活动期UC患者肠黏膜PTPN22 mRNA表达水平与缓解期UC患者和对照组相比显著升高(P=0.007;P=0.021)。UC患者肠黏膜PTPN22 mRNA表达水平与血清ESR和CRP水平呈正相关(r=0.63,P=0.005;r=0.58,P<0.01)。UC患者疾病严重程度和病变范围与肠黏膜PTPN22 mRNA表达水平呈正相关(r=0.51,P<0.01;r=0.44,P<0.01)。中重度UC患者肠黏膜PTPN22 mRNA表达水平与轻度UC患者相比显著升高(P=0.005),病变位于广泛结肠者肠黏膜PTPN22 mRNA表达水平与病变位于左半结肠和直肠者相比显著升高(P=0.029;P=0.008)。结论:PTPN22 mRNA表达水平与UC疾病活动性、严重程度和病变范围相关。PTPN22可能在UC发病机制中发挥重要作用。     

肠易激综合征模型大鼠5-羟色胺7受体的表达及作用

目的 观察5-羟色胺7受体在肠易激综合征(IBS)不同亚型模型大鼠大脑和消化道组织中表达和分布的差异,探讨其在IBS发病中的作用.方法 45只成年SD大鼠分均为对照组、腹泻型IBS(IBS-D)组和便秘型IBS(IB-C)组.乙酸加束缚应激法制备IBS-D模型,冰水灌胃法制备IBS-C模型.免疫组化法和实时定量PCR法检测各组大鼠大脑、空肠、回肠、近端结肠、远端结肠中5-HT7受体的分布及表达差异.放射免疫法测定以上各组织中环磷酸腺苷(cAMP)含量.结果 免疫组化结果 显示,IBS-C组和IBS-D组海马及下丘脑、IBS-C组回肠、近端结肠、远端结肠5-HT7受体表达强于对照组(P＜0.05).实时定量PCR结果 显示,IBS-C和IBS-D组海马和下丘脑、IBS-C组回肠、近端结肠及远端结肠5-HT7受体mRNA明显高于对照组(P＜0.05).IBS-C和IBS-D组海马和下丘脑、IBS-C组近端结肠和远端结肠cAMP含量显著高于对照组(P＜0.05).结论 两组大鼠脑组织及IBS-C大鼠结肠5-HT7受体表达及cAMP水平明显增高,可能与IBS-C胃肠动力障碍和内脏感觉异常有关.     

高迁移率族蛋白B1抗体对结肠炎小鼠结肠黏膜的保护作用

背景:我国溃疡性结肠炎(UC)发病率明显上升,但目前尚无满意的治疗方法,因此研究其发病机制并寻求新的治疗途径具有重要意义。目的:研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)抗体对结肠炎小鼠结肠黏膜的影响。方法:36只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、结肠炎模型组和HMGB1抗体治疗组,后两组以3%葡聚糖硫酸钠(DSS)制备小鼠结肠炎模型,HMGB1抗体治疗组小鼠腹腔注射HMGB1抗体。实验第7d,处死小鼠。行结肠组织学评分,测定结肠通透性,分别以RT-PCR和蛋白质印迹法检测结肠组织HMGB1 mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照组相比,结肠炎模型组小鼠结肠组织学评分、结肠通透性以及HMGB1 mRNA和蛋白表达显著增高(P0.05)。与结肠炎模型组相比,HMGB1抗体治疗组小鼠结肠组织学评分、结肠通透性和HMGB1蛋白表达显著降低(P0.05)。结论:HMGB1参与了结肠炎小鼠的炎症反应过程,HMGB1抗体可有效抑制结肠炎小鼠结肠组织HMGB1表达,改善肠黏膜屏障功能,从而对UC结肠黏膜损伤起有明显保护作用。